导航:首页 > 方法技巧 > 快速增殖的方法和技巧

快速增殖的方法和技巧

发布时间:2023-03-09 17:54:33

⑴ 检测细胞增殖的方法有哪些

一、MTT比色:
MTT比色是一种目前被广泛采用的检测细胞生长和存活的方法,其原理是外源性MTT(四唑盐)可被活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原成难溶的蓝紫色结晶物并沉淀在细胞中,而死细胞无此功能,DMSO(二甲基亚砜)能溶解细胞中的紫色结晶物,用酶联检测仪在490nm波长处检测其光密度值,可间接反映活细胞数量。在一定范围内,MTT结晶物形成的量与细胞数成正比,此方法已广泛用于检测细胞活力、观察细胞生长等方面,具有灵敏度高、重复性好、操作简便、经济、快速、易自动化、无放射性污染等特点,与细胞计数有良好的相关性。
二、rdU标记法
1.细胞以1.5×105/ml细胞数接种于直径35ml培养皿中(内放置一盖玻片),培养1天,用含0.4% FCS培养液同步化3天,使绝大多数细胞处于G0期。
2.终止细胞培养前,加入BrdU(终浓度为30μg/L),37℃,孵育40min。
3.弃培养液,玻片用PBS洗涤3次。
4.甲醇/醋酸固定10min。
5.经固定的玻片空气干燥,0.3%H2O2-甲醇30min灭活内源性氧化酶。
6.5%正常兔血清封闭。
7.甲酰胺100℃,5min变性核酸。
8.冰浴冷却后PBS洗涤,加1抗即抗小鼠BrdU单抗(工作浓度1:50),阴性对照加PBS或血清。
9.按ABC法进行检测,苏木素或伊红衬染,在显微镜下随机计数10个高倍视野中细胞总数及BrdU阳性细胞数,计算标记指数(LI)。
三、结晶紫法
1.体外细胞培养结束后,去培养液,加入11%的戊二醛固定,置于振荡器上摇20min。
2.固定细胞用去离子水洗涤至戊二醛液洗净。
3.置空气或烘箱37℃彻底干燥。
4.加入0.1%的结晶紫液对细胞染色,振摇30min。
5.用蒸馏水洗涤,至多余的结晶紫液冲洗干净。
6.置空气或37℃烘箱中彻底干燥。
7.加入10%的乙酸对细胞吸收的结晶紫进行提取。
8.1h后在酶标仪上测定光吸收度,波长595nm。
四、酸性磷酸酶法
1.96孔细胞培养板中培养细胞,去培养液。用0.01mol/L PBS洗涤1次(如为悬浮细胞则用离心洗涤)。
2.去洗涤液后加入磷酸酶底物100μl/孔。
3.37℃,孵育1~4h。
4.加入0.1mol/L氢氧化钠10μl/孔。
5.在多孔酶标仪上405nm处测光吸收度,将细胞培养板其中不含细胞,同样处理过的一孔作为空白对照,所测的每孔光吸收度可间接反应每孔中的细胞数。如在同样条件下作一细胞数的系列标准对照,以细胞数为X轴,光吸收度为Y轴,可作直线回归,可推算出每孔中的细胞。

⑵ 蕙兰的养殖方法

目前国兰的快速繁殖技术主要以茎尖作为外植体,在春兰、建兰、蕙兰和墨兰上都获得了一定的成功。具体的快速繁殖程序为:选择生长旺盛的长为3-8厘米的新芽为外植体,经过0.1%HgCl2和10%次氯酸钠两次消毒后用无菌水冲洗干净。在解剖镜下无菌操作剥取茎尖和腋芽,若不以去毒为目的,切的茎尖应大些,以便提高成活率。
将切取的茎尖接种到诱导培养基上进行暗培养,1—2个月可以分化出1至数个乳白色的原球茎。然后转入散射光下培养,继代后原球茎伸长形成根状茎。原球茎的诱导与品种和培养基本关系较大,一般而言,对根状茎进行切割繁殖,切割的长度一般为1厘米左右。用液体培养的方法根状茎增殖快,培养基以MS附加NAA
2毫克/升较好。为了得植株再生,用液体培养和固体培养交替进行为好。等到根状茎繁殖到一定数量后,转入到再生培养基中进行植株再生,再生培养基根据兰花的种类不同而异,一般而言用MS+BA2-5毫克/升+NAA0.2毫克/升的琼脂培养基上分化效果较好。
国兰试管苗“自立”能力差,移栽养护技术难度大,在具体移栽过程中,建议先炼苗3—4天,然后将幼苗移到通风透水保湿的适宜介质中,在高湿弱光下缓苗一个星期,之后,放在摄氏温度20—25度,空气相对湿度50%左右的条件下养护,定期施肥喷药,这样便能有效提高试管苗成活率。

⑶ 女生快速长高方法技巧大全 小个子女生必看

很多女生想长高,却找不到正确的长高方法。下面我为大家总结了女生快速长高方法技巧大全,仅供大家参考。

饮食起居
1. 睡前不要想得太多,九十分钟内进入熟睡状态,生长激素分泌最多

2. 每天定时定量压腿,就算 长高 不了身材还是很重要吧。

3. 多上厕所,多吃能通顺肠道的食物。少坐着,多站。

4. 每天坚持喝豆浆、牛奶,补充蛋白质非常重要。

5. 睡眠时间8小时以上,睡前伸懒腰,双手和脚同时朝相反的方向拉伸。

6. 喝很多很多水,加快新陈代谢,对皮肤也很好。

7尽可能多吃,不偏食。别怕长胖,减肥随时可以,不要吃过多甜食和碳酸饮料。

8、盐也是增高的大敌,必须养成少吃盐
悬垂长高
在单杠或克己的家庭悬杠上,天天晨起和晚睡前各练一次。办法:双手正握杠,脚离空中,满身抓紧,腰、髋、腿作悄悄颤动;吊悬2-3分钟后,休息2分钟再做,10-15次后再做5次负重悬垂———踝部系5公斤重物。每做一次休息2分钟。此法被很多有毅力且时间充足的人群认为,十分有效!
女生长高的小动作
①并拢两脚,笔直地站立,把一条腿向后移开半步,然后把上体向前弯曲,不要弯膝盖,使手指能触到地面为止,如此,连续做15~20次。

这个 动作 ,可以使大腿及膝盖的线条优美柔和,令左右两腿匀称。

②两脚打开30~60厘米,挺直地站立,把一条腿向后退半步,然后把上身扭曲,使指尖能够触及另一侧的脚趾。并连续做10~15次。

这个动作,可以使两腕的线条优美柔和,腰围缩小,并矫正脊椎柱的弯曲。

③两脚打开60~70厘米,把一条腿向后退半步,再抬起双臂,与肩膀同高,然后把双臂水平地向后甩去。向长腿的方向扭转7次,向短腿的方向扭转4次。

这动作,可以使腰围紧缩,体态娇美。

以上就是我为大家总结的女生快速长高方法技巧大全,仅供参考,希望对大家有所帮助。

⑷ 16岁的人如何快速长高 有什么方法和技巧

16岁的人再长个子还是有希望的,只要自己有信心并选择合适的方法坚持下去。下面我为大家总结了16岁的人如何快速长高,有什么方法和技巧,仅供大家参考。

引体向上能帮你长高
一些牵拉悬垂的动作能促进你 长高 ,这里首推引体向上,同时引体向上是打造上半身肌肉的最佳动作之一。动作要点在于最大限度地用力和最大程度地放松。

开始和结束阶段有10秒的悬垂状态,每天可以按照自己的能力做2组。运动是最有效最健康的、不吃药的增高方法,为了自己的理想身高和强壮的体魄,赶快行动起来吧。
补充矿物质
人体的长高,决定于骨骼的生长发育,其中下肢长骨的增长与身高最为密切。也就是说,只有长骨中骺软骨细胞的不断生长,人体才会长高,钙、磷是骨骼的主要成分。

所以,5-10月份要多补充牛奶、虾皮、豆制品、排骨、海带、紫菜等含钙、磷丰富的食物。另外,要到户外多晒太阳,增加紫外线照射机会,以利于体内合成维生素D,促使胃肠对钙、磷的吸收,从而保证骨骼的健康成长。
经常进行体育锻炼
经常参加适宜长高和健脑的体育锻炼,能促使全身血液循环,保障骨骼肌肉和脑细胞得到充足的营养,促使骨骼变粗、骨质密度增厚、抗压抗折能力加强。运动能促进生长激素的分泌,使骨骼、肌肉、大脑发育得更好。

所以,应多参加适宜长高和健脑的活动,例如跳绳、踢毽、跳皮筋、艺术体操和各种球类活动等,也可以通过增高产品的辅助治疗与运动有机的结合实现增高的最佳疗效。
注重营养补充
营养是儿童体格生长的关键。体格正常生长所需的能量、蛋白质和氨基酸,必须由食物供给,主要是肉、蛋、豆及豆类食物。骨的形成还需要足够量的钙、磷及微量的锰和铁。

钙的摄入不足及维生素D缺乏时,会造成骨矿化不足,维生素A缺乏会使骨变短变厚,维生素C缺乏会使骨细胞间质形成缺陷而变脆,这些都会影响骨的生长。

一般家庭在有荤有素的饮食中,营养应该是全面及足量的, 家长 应该注意不要让孩子养成偏食的习惯,更不要让孩子过多地吃零食而影响重要营养物质的摄入。

以上就是我为大家总结的16岁的人如何快速长高,仅供参考,希望对大家有所帮助。

阅读全文

与快速增殖的方法和技巧相关的资料

热点内容
网吧吃鸡设备封禁解决方法 浏览:132
最简单粗暴的练腹肌方法 浏览:382
交通事故责任认定简单方法 浏览:851
油菜封草最佳方法 浏览:751
电缆热缩管使用方法 浏览:799
黄豆堵漏用什么方法好 浏览:509
有眼袋用什么方法更好呢 浏览:969
333333怎么用简便方法计算 浏览:913
沐浴凝露使用方法 浏览:923
抛光液使用方法 浏览:138
美的光波炉的使用方法 浏览:302
鉴定分析属于什么分析方法 浏览:118
实验方法从哪里来 浏览:447
擀皮锻炼方法视频 浏览:364
篮球训练简单方法 浏览:804
oppo手机闹铃声音在哪里设置方法 浏览:736
风疹的有效治疗方法 浏览:19
怎么减脸上的肉用1种方法 浏览:176
安速蟑螂屋使用方法 浏览:920
鸡舍消毒液的使用方法 浏览:785