脂肪酸值快速测定新方法

‘壹’ 脂肪检测的原理是什么实验操作流程

脂肪检测方法可用索式提取法：

一、索式提取法（经典方法）

1、原理：

样品经前处理后，放入圆筒滤纸内，将滤纸筒置于索式提取管中，利用乙醚或石油醚在水浴中加热回流，使样品中的脂肪进入溶剂中，回收溶剂后所得到的残留物，即为脂肪（粗脂肪）
采用这种方法测出游离态脂，此外还含有磷脂、色素、蜡状物、挥发油、糖脂等物质，所以用索氏提取法测得的脂肪为粗脂肪。

2、 适用范围与特点

索氏提取法适用于脂类含量较高，结合态的脂类含量较少，能烘干磨细，不宜吸湿结块的样品的测定。此法只能测定游离态脂肪，而结合态脂肪无法测出，要想测出结合态脂肪需在一定条件下水解后变成为游离态的脂肪方能测出。

另外此法是经典方法，对大多数样品结果比较可靠，但需要周期长，溶剂量大。

二、实验操作流程

1、滤纸筒的制备

将滤纸剪成长方形8×375px ，卷成圆筒，直径为150px，将圆筒底部封好，最好放一些脱脂棉，避免向外漏样。

2、称取样品，将样品烘干磨细，称取一定量与纸筒封好上口，最好用测定水的样品。

3、索式抽提器的准备

索氏抽提器由三部分组成，回流冷凝管、提取管、提脂瓶组成。提脂瓶在使用前需烘干并称至恒重。其它要干燥。

4、抽提

将装好样的纸筒放入抽提管 ， 倒入乙醚，乙醚的量从提取管加入，加入的量为提取瓶体积的2/3 接上冷凝装置，在恒温水浴中抽提，水浴温度大约为55℃左右，可用滤纸检验，理论值抽提6-8小时，实际值3-4小时，但也根据样品性质来决定。
5、回收乙醚

当乙醚在提取管内即将虹吸时立即取下提取管，将其下口放到乙醚回收瓶内，使之倾斜，然后将提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。

6、计算

脂肪%= (W2-W1)/W x 100

W2——瓶和样品重（g）W1——瓶子重量（g） W——样品重量（g）

或：脂肪%=（抽提后滤纸与样品重量—抽提前滤纸重量）/样品重量 × 100

滤纸筒应事先放入烧杯与100-105℃烘箱烘至恒重。

(1)脂肪酸值快速测定新方法扩展阅读：

索式提取法注意事项

（1）样品应干燥后研细，装样品的滤纸筒一定要紧密，不能往外漏样品，否则重做。

（2）放入滤纸筒的高度不能超过回流弯管，否则乙醚不易穿透样品，使脂肪不能全部提出，造成误差。

（3） 碰到含多糖及糊精的样品要先以冷水处理，等其干燥后连同滤纸一起放入提取器内。

（4） 提取时水浴温度不能过高，一般使乙醚刚开始沸腾即可（约45℃左右），回流速度以8-12次/时为宜。

（5） 所用乙醚必需是无水乙醚，如含有水分则可能将样品中的糖以及无机物抽出，造成误差。

（6） 若用干样品测定脂肪，可按下式计算原来样品脂肪的含量

脂肪（%）= （W1-W2）(100-A) / W

A— 100克样品中水分的含量（g）

(7) 冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管，这样不仅可以防止空气中水分进入，而且还可以避免乙醚挥发在空气中。这样可防止实验室微小环境空气的污染，如无此装置，塞一团干脱脂棉球亦可。

（8）如果没有无水乙醚可以自己制备，制备方法如下：在100ml乙醚中，加入无水石膏50克，振摇数次，静止10小时以上，蒸馏，收集35℃以下的蒸馏液，即可应用。

（9）将提取瓶放在烘箱内干燥时，瓶口向一侧倾斜45度防止挥发物乙醚易与空气形成对流，这样干燥迅速。

（10）如果没有乙醚或无水乙醇时，可以用石油醚提取，石油醚沸点30-60℃为好。

（11）使用挥发乙醚或石油醚时，切忌直接用火源加热，应用电热套、电水浴、电灯泡等。

（12） 这里恒重的概念有区别，它表示最初达到的最低重量，即溶剂和水分完全挥发时的恒重，此后若在继续加热，则因油脂氧化等原因会导致重量增加。

（13） 在干燥器中的冷却时间一般要一致。

‘贰’ 脂肪酸的测定方法和原理

脂肪酸的测定方法和原理有标准。直接找国标就可以了。根据食品的类型。查找相关的国标或行业标准。按照标准的方式方法来进行检验。

‘叁’ 买来的脂肪酸如何测量它的酸值 另外还需要测量其他的值吗

用碱性标准溶液滴定，计算酸值。
脂肪酸的指标有色泽、水分、酸值、皂化、碘值、碳链组成等。检查哪些项目需要根据用途来决定。

‘肆’ 玉米脂肪酸值如何检测

玉米脂肪酸我们经常做，是按照GB/T 20570-2006（在食品伙伴网可以免费下载）里的附录A操作的，只是把氢氧化钾的配置方法改成了用蒸馏水配置，他所说的不含二氧化碳的蒸馏水，即将蒸馏水煮沸，沸腾20min后，冷却，冷却时要加盖。

‘伍’ 脂肪酸值详细资料大全

粮食脂肪酸值是检验粮食中游离脂肪酸含量多少的量值。其检验结果以中和100g粮食试样中游离脂肪酸所需氢氧化钾的量来表示。脂肪酸值的变化反映了稻谷和玉米常用的品质劣变程度。在国标的谷物储藏判定规则中，作为稻谷和玉米的宜存指标。

基本介绍

• 中文名 ：脂肪酸值
• 外文名 ：fatty acid value
• 单位 ：(KOH)/(g/100g)

产生原理,测定方法,滴定法,比色法,色谱法,影响因素,储藏时间,温度,湿度,霉菌,其他,

产生原理

脂肪酸值是衡量游离脂肪酸含量的指标。游离脂肪酸产生的途径是脂肪酸值变化的根本原因。天然植物中含有很大比例的油脂。天然油脂主要由3分子高级脂肪酸与1分子甘油组成，故又称甘油三酯。脂肪的种类不同，油脂性状不同。如玉米油含90%不饱和脂肪酸，室温下呈液态。一般来说，不饱和脂肪酸比饱和脂肪酸更加的不稳定。因为不饱和脂肪酸的双键很容易被氧化，这是玉米不耐保存的重要原因。对于稻谷来说，油脂在糙米中约占2%。大部分含于米糠及胚芽中．因此精米仅含脂0.8%。构成米糠油的脂肪酸以油酸(45%)及亚油酸(33%)为主，总计88%也是不饱和脂肪酸。米糠油酸败甚速，故其酸值增加很快。完整的糙米不易酸败，但组织破坏的生米糠及白米则易氧化。因此破碎的稻谷和谷外糙米也是导致脂肪酸上升的重要原因。但是由于稻壳的保护很致密。并且破碎没有玉米那么大，所以它比玉米要好保管一点。 天然植物本身含有一些游离脂肪酸。同时也会有一些脂肪酸从脂肪分子上水解下来。这些都是脂肪酸值的来源。脂肪酸的裂变过程主要是脂肪酸的酸败过程。酸败作用有2种类型：即水解型和氧化型。

测定方法

滴定法

滴定法使用氢氧化钾-乙醇溶液滴定中和提取液中的游离脂肪酸，以酚酞变色显示终点，该法简单易行，不需要特殊仪器和试剂。该法存在的主要问题如下： ①由于粮食游离脂肪酸是有机弱酸的混合物，其滴定终点突变不明显。 ②在粮食游离脂肪酸提取过程中，一些色素进入提取液以及提取液变混浊等增加了终点判断的难度，使得个体间判断终点差异增大。 ③氢氧化钾-乙醇标准溶液较易吸收空气中的C0 ₂ ，因为生成的碳酸盐在醇中溶解度比水中小，乙醇较易挥发也会影响标准液的浓度。 ④难以实现自动化操作，不便于大批样品的测定。

比色法

（1）生成反胶团 该法将有机溶剂(异辛烷)，表面活性剂[双一(2一乙基己基)磺基丁二酸钠]和少量水以一定比例混合形成光学透明的稳定反胶团体系，半径以纳米计的细小水滴在该体系中被有机溶剂包围，而表面活性剂的薄层分布于两者之间。将酚红溶于反胶团pH=9的水相中。酚红的PK ₁ 等于7.8，在碱性介质中显红色，其水溶液于558 nm处有最大吸收。当介质pH下降时，酚红的分子结构发生变化，分子共轭体系减小，颜色也相应转变为黄色(弱酸或中性溶液)，最大吸收出现在430 nm处。当测定大米表面脂肪酸含量时，将大米试样的异丙醇提取液加入到上述反胶团体系，充分混合后于560 nm比色，游离脂肪酸含量通过标准曲线计算得到。标准曲线由0.001%～0.02%油酸异丙醇标准溶液代替试样提取液按上述方法比色得到。该法测定结果与滴定法相比无显着差别，但该法测定精密度高于滴定法，可能由于大米表面脂肪酸含量低，致使滴定法难以判断滴定终点而造成误差。由于该法灵敏度高、测定速度快，适合测定脂肪酸含量低的试样及需要快速测定大批样品的场合。 （2）铜皂比色 2003年Goffman等报导使用铜皂比色法测定米糠游离脂肪酸含量。该法最初由Duncombe提出，使用Cu(N0 ₃ )·3H ₂ O和三乙醇胺为铜试剂和显色试剂，脂肪酸与上述试剂反应后生成铜皂，通过比色测定含量。

色谱法

色谱法测定游离脂肪酸含量的报导已有许多，但大多用于测定油料、油脂或生物样品中的游离脂肪酸含量。色谱法需要标准品作对照，该法更适合测定试样中单个脂肪酸的含量和脂肪酸组分。 2000年Nishiba报导使用薄层色谱和火焰离子化检测器测定大米游离脂肪酸含量，用于研究大米储藏期间脂肪酸值的变化。该法将薄层层析操作简单和火焰离子化检测器灵敏度高的优点结合在一起，与滴定法相比，该法灵敏度高，所需试样量少， 能敏感地检测大米储藏期间的脂肪酸变化，同时避免肉眼判断终点导致的主观误差。但是该法的分析重现性基于温度和湿度的稳定，所以保持温湿度稳定及避免灰尘干扰是准确测定的前提。

影响因素

储藏时间

储存时间越长脂肪酸值越高，在储藏过程中，如保管不当，会发生结露、发热、霉变，粮食局部或全仓粮温升高，从而使粮食籽粒内部脂肪发生酸败反应，使得脂肪酸值升高。新收获的玉米脂肪酸值较低，一般在30(KOH)/(g/100g)以下，随着储藏时间的延长而增加，在华南地区一般一年会升高10(KOH)/(g/100g)左右。如果储备条件不好。会很快的升到了50(KOH)/(g/100g)以上，就不宜保存了，必须轮换。

温度

脂肪在高温高湿下极易发生酸败，致使游离脂肪酸含量增加，脂肪酸值升高，稻谷品质发生劣变。张瑛等人对稻谷在储藏过程中品质的变化做了研究认为脂肪酸值随着储藏时间延长明显增加。张玉荣也认为，在高温(400℃)的条件下，玉米的脂肪酸值和储藏时间呈正相关。

湿度

控制粮食水分是保证粮食储藏安全和粮食品质的关键。粮食水分高，可导致粮粒中酶活性增强，呼吸加剧，各种代谢活动更加旺盛，消耗干物质速度加快，从而使粮食储藏稳定性降低，脂肪酸值就随之升高，粮食的品质发生劣变。

霉菌

在玉米储藏过程中，霉菌会影响玉米胚及其它部分脂肪的变化。结果表明，温度和湿度升高，霉菌生长会更加旺盛，玉米胚中脂肪酸值提高不大，而其它部分则显着提高。这是因为霉菌在胚中生长更旺盛，而胚中产生的脂肪酸能被霉菌分解利用。

其他

粮食破碎粒增大了玉米粒中脂肪与空气中氧气的接触面积，使粮食籽粒更易发生酸败而使脂肪酸值升高，粮食品质发生劣变。此外，脂肪酸值还和地区也有关，北方的粮食一般储存时间比较长一些。

‘陆’ 脂肪酸酸价的测定方法

1、油脂中游离脂肪酸的多少与酸价有直接关系，所谓酸价，是中和一克油脂中的游离脂肪酸所需要氢氧化钾的mg数。
2、测定酸价时加入乙醇主要是起到稀释的目的。

‘柒’ 脂肪酸值的测定国家标准

法律分析：肪酸值是粮食品质劣变的灵敏指标之一.我国目前的测定方法GB5510-85是采用苯提取脂肪酸、GB/T15684-95是采用无水乙醇提取脂肪酸,国际标准ISO7305:1998是用95%乙醇提取脂肪酸.为了与国际标准接轨,对三种标准方法进行对照实验,并将提取的脂肪酸进行气相色谱分析,得出方法之间的差异。

法律依据：《中华人民共和国食品安全法》

第一条 为了保证食品安全，保障公众身体健康和生命安全，制定本法。

第二条 在中华人民共和国境内从事下列活动，应当遵守本法：

（一）食品生产和加工（以下称食品生产），食品销售和餐饮服务（以下称食品经营）；

（二）食品添加剂的生产经营；

（三）用于食品的包装材料、容器、洗涤剂、消毒剂和用于食品生产经营的工具、设备（以下称食品相关产品）的生产经营；

（四）食品生产经营者使用食品添加剂、食品相关产品；

（五）食品的贮存和运输；

（六）对食品、食品添加剂、食品相关产品的安全管理。

‘捌’ 实验室玉米提取脂肪酸的方法和步骤！

A.1 范围

本方法规定了玉米储存品质判定。

A.2 原理

在室温下无水乙醇提取玉米中的脂肪酸，用标准氢氧化钾溶液滴定，计算脂肪酸值。

A.3 试剂和材料

除非另有规定，仅使用分析纯试剂。

A.3.1 无水乙醇。

A.3.2 酚酞—乙醇溶液（10g/L）;1.0g酚酞溶于100mL95%（V/V）乙醇。

A.3.3 不含二氧化碳的蒸馏水：将蒸馏水烧沸，加盖冷却。

A.3.4 c(KOH)=0.01mol/L氢氧化钾—95%乙醇标准滴定溶液。

A.3.4.1 c(KOH)=0.5mol/L氢氧化钾标准储备液的配置

称取28g氢氧化钾，置于聚乙烯容器中，先加入少量无CO2的蒸馏水（约20ml）溶解，再将其稀释至1000ml，密闭放置24h.吸取上层清液至另一聚乙烯塑料瓶中。

A.3.4.2 c（KOH）=0.5mol/L氢氧化钾标准储备液的标定

称取在105℃烘2h并在干燥器中冷却后的邻苯二钾酸清钾2.04g，精确到0.0001g，溶于50ml不含CO2蒸馏水中，滴加酚酞-乙醇指示剂（A3.2）3～5滴，用配制的氢氧化钾标准储备液滴定至微红色，以30s不褪色为终点，记下所耗氢氧化钾标准储备液ml数（V1），同时做空白试验（不加邻苯二钾酸氢钾,同上操作），记下所耗氢氧化钾标准储备液ml数（V0）,按式计算氢氧化钾标准储备液浓度。

100×m

c(KOH)= —————————…………………. (1)

(V1-V0) ×204.22

式（1）中：

c(KOH)—氢氧化钾标准储备液浓度，mol/L;

1000—换算系数：

m—称取邻苯二甲酸氢加的质量，g；

V1—滴定所耗情氧化钾标准储备液体积，ml;

V0—空白试验所耗氢氧化钾标准液体积，ml;

204.22—邻苯二钾酸氢钾的摩尔质量g/mol.

注：氢氧化钾标准储备液按要求定时复标。

A.3.4.3 c（KOH）=0.01mol/L氢氧化钾-95%乙醇标准滴定溶液

准确移取20.0ml/L氢氧化钾标准储备液，用95%（V/V）乙醇稀释定容至1000ml,盛放于聚乙烯塑料瓶中。临用前稀释。

注：稀释用乙醇应事先调整为中性。

A.4 仪器与设备

A.4.1 具塞磨口锥形瓶：250ml.

A.4.2 移液管：50.0ml、25.0ml.

A.4.3 微量滴定管：5ml，最小刻度为0.02ml: 10ml，最小刻度为0.05ml.

A.4.4 天平：感量为0.01g以上。

A.4.5 振荡器：往返式，震荡频率为100次/min.

A.4.6 粉碎机：锤式旋风磨，具有风门可调和自清理功能，以避免样品残留和出样管堵塞。在粉碎样品时，磨膛不能发热。

A.4.7 电动粉筛：按GB/T 5507要求。

A.4.8 玻璃短颈漏斗。

A.4.9 中速定性滤纸。

A.4.10 锥形瓶：150ml.

A.5 试样制备

取混合均匀样品约80~100g，用锤式旋风磨粉碎，要求粉碎细度能一次性达95%以上过CQ16（相当于40目）筛，粉碎样品充分混合后（筛上、筛下的全部筛分范围样品）装入磨口瓶中备用。

注：1：按GB/T 5507检验样品粉碎细度，使用其它类型粉碎机可以达到细度要求，粉碎样品也只能选用锤式旋风磨。一次粉碎达不到细度要求的，该锤式旋风磨不能使用。

注：2：粉碎样品时，应按照设备说明书要求，合理调节风门大小，并控制进样量，防止和减少出料管留存样品，未必免出料管堵塞，减少磨膛发热，引起样品中脂肪酸值的变化，每粉碎10个样品应将出料管拆下清理。

注：3：制备耗的样品应尽快完成测定，如需较长时间存放，应存放在冰箱中，全部过程不得超过24h。

A.6 分析步骤

A.6.1 试样处理

称取制备试样约10g，精确到0.01g，于250ml具塞磨口锥形瓶中，并用移液管准确加入50.0ml无水乙醇（A3.1）置往返式震荡器上振摇30min,震荡频率为100次/min。静置1~2min，在玻璃漏斗中放入折叠式的滤纸过滤，并加盖滤纸。弃去最初几滴滤液，收集滤液25ml以上。

A.6.2 测定

精确移取25.0ml滤液于150ml锥形瓶中，加50ml不含CO2的蒸馏水，滴加3~4滴酚酞-乙醇指示剂后，用0.01mol/L的氢氧化钾—95%乙醇标准滴定溶液（A3.4.3）滴定至呈微红色，30s不消褪为止。记下耗用的氢氧化钾—95%乙醇溶液体积（V1）。

注：样品提取后一定要及时滴定；滴定应在散射阳光或日光型日光灯下对着光源方向进行；提取液颜色较深，滴定终点不易判定时，可用一已加入去CO2蒸馏水后尚未滴定的提取液作参照，当被滴定液颜色与参照相比有色差时，即可视为已到滴定终点。若上述参照比色法，仍无法准确判定滴定终点时，可在滤纸锥头放入0.5g粉末活性炭，褪色后滴定。

A.6.3 空白试验

取25.0ml无水乙醇于150ml锥形瓶中，加50ml不含CO2的蒸馏水，滴加3~4滴酚酞-乙醇指示剂，用0.01mol/L的氢氧化钾—95%乙醇溶液滴定至成微红色，30s不消褪为止。记下耗用的氢氧化钾—95%乙醇溶液体积（V0）.

A.7 结果的计算和表述

A.7.1 脂肪酸值已中和100g干物质试样中游离脂肪酸值所需氢氧化钾毫克数表示。按式（2）计算：

50 100

脂肪酸酯（KOHmg/100g干基）=（V1—V0）×56.1×———×—————×100

25 m(100—ω)

11220×（V1—V0）×C 100

=————————————×—————……….（2）

m 100—ω

式（2）中：

V1——滴定试样所耗氢氧化钾—95%乙醇溶液体积，mL；

V0——滴定空白所耗氢氧化钾—95%乙醇溶液体积，mL；

C——氢氧化钾-95%乙醇溶液的准确浓度，mol/L；

50——提取式样用无水乙醇的体积，mL；

25——用于滴定的滤液的体积，mL；

100——换算为100g（干）试样的质量，g；

m——试样的质量，g；

ω——试样水百分数，即每100g试样中含水分的质量，g；

注：用测定脂肪酸值的同一粉碎样品，按GB/T 5497中105℃恒重法测定样品水分含量，计算脂肪酸值干基结果。此水分含量结果不得作为样品水分含量结果报告。

A.7.2 结果表示

每份试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为测定结果，计算结果保留小数点最后一位数。

A.8 重复性

同一分析者对同一试样同时进行两次测定，结果差值不超过2mgKOH/100g.

‘玖’ 国标中橄榄油油脂酸价的测定方案

油脂中的游离脂肪酸与KOH发生中和反应，从KOH标准溶液消耗量可计算出游离脂肪酸的量，反应式如下： RCOOH+KOH——-RCOOK+H2O

酸价是脂肪中游离脂肪酸含量的标志，脂肪在长期保藏过程中，由于微生物、酶和热的作用发生缓慢水解，产生游离脂肪酸。而脂肪的质量与其中游离脂肪酸的含量有关。一般常用酸价作为衡量标准之一。在脂肪生产的条件下，酸价可作为水解程度的指标，在其保藏的条件下，则可作为酸败的指标。酸价越小，说明油脂质量越好，新鲜度和精炼程度越好。

它的大小不仅是衡量毛油和精油品质的一项重要指标，而且也是计算酸价炼耗比这项主要技术经济指标的依据。而毛油酸价则是炼油车间在碱炼操作过程中计算加碱量、碱液浓度的依据。

在一般情况下，酸价和过氧化值略有升高不会对人体的健康产生损害。但如果酸价过高，则会导致人体肠胃不适、腹泻并损害肝脏。
测定方法

滴定法（国标法）
GB/T一5530—2005规定了测定动植物油脂酸度的方法包括热乙醇测定法、冷溶剂测定法和电位滴定法，其中热乙醇测定法为参考标准法，冷溶剂法只适用于浅色油脂，电位滴定法是利用pH计判断滴定终点，然后根据滴定所需氢氧化钾的量计算油脂酸值。滴定法的优点是简单、易行，无需特殊的仪器设备和化学试剂，但是该法具有如下的局限性：

（1）难以判别指示剂颜色的微弱变化而导致的测定误差大，尤其是在颜色较深或浑浊的油脂中，个体间终点判断差异增大；

（2）所需油脂样品数量大，中和滴定所耗费时间长；

（3）检测低酸价油脂时，其灵敏度和精确度较低；

（4）该法所需化学试剂与药品多，需要繁琐的溶液配制，酸碱滴定程序，难以实现现场快速检测的要求。

试纸法
该法的原理是利用食用油酸败所产生的游离脂肪酸与试纸上的药剂发生显色反应，然后根据试纸的颜色变化情况与标准的比色块比较，从而确定食用油样品酸败的程度。

杨漓等开发了一种试纸比色快速法测定食用油酸价，该法利用食用油脂酸败所产生的游离脂肪酸与试纸中的pH试剂发生显色反应，试纸的颜色变化反映了食用油的酸价变化，但该试纸法存在稳定性差、误差稍大的缺点，一般来说只适用于定性或半定量的检测。所以还需要在提高酸价测试试纸的均匀性和稳定性方面进行研究和改进，提高其分析测试的精确度和稳定性，该法在食用油酸败程度的快速检测、现场检测方面具有很大的发展潜力。

比色法
该法将有机溶剂（异辛烷），表面活性剂[双一（2一乙基己基）磺基丁二酸钠]和少量水以一定比例混合形成光学透明的稳定反胶团体系，将酚红溶于反胶团pH=9的水相中。酚红在pKl等于7．8时，在碱性介质中显红色，其水溶液于558nm处有最大吸收，游离脂肪酸含量通过标准曲线计算得到，该法灵敏度高、测定速度快，适合测定脂肪酸含量低的试样及需要快速测定大批样品的场合。

色谱法
该法首先利用乙醇等溶剂分析油脂中的游离脂肪酸，由于脂肪酸一般极性较强，挥发性低，热稳定性差，所以一般先用KOH/甲醇将其转化成相应的衍生物脂肪酸甲酯，从而降低其极性，增加其热稳定性，然后用Agilent 4890D气相色谱仪进行分析，使用FID检测器，其回收率在89%一109%。该法试剂用量少，适合于大批量的样品测定，但气相色谱法需要标准品作对照，该法更适合测定试样中单个脂肪酸的含量和脂肪酸组分。

近红外光谱法
Chen Man等用0．15%（w/w）酯酶于印℃恒温水浴下酶解天然棕榈油，配制成不同游离脂肪酸浓度梯度的棕榈油，利用近红外光谱扫描，由多元线性回归创建校正模型，即可得出棕榈油中游离脂肪酸含量此法测定速度较快，总分析时间为5min，环境温和。

Ahmed A1一Alawi等开发了一种傅里叶变换红外光谱法（F1皿），快速准确测定食用油中游离脂肪酸的含量，该法的可重复性好，与传统的滴定法具有良好的拟合性，虽然近红外测定法具有诸多优点，但仪器价格昂贵，需要运用化学计量学方法建立标准样品的光谱特征与测定成分含量之间的数学模型，该法在食用油酸价的测定方面，应用文献较少。

电位滴定法
电位滴定法是一种经典的分析方法，具有设备简单、操作简便、精确度高等优点。自20世纪60年代以来，离子选择电极的迅速发展为电位滴定提供了一批良好的指示电极，提高了灵敏度和选择性。电位滴定法测定酸度或酸价的准确度比一般的滴定法高，对有色溶液、混浊溶液或没有合适指示剂判断终点的滴定分析较为适宜。

其测定原理是将指示电极（玻璃电极）和参比电极（甘汞电极）或复合电极插在油样溶液中组成一个原电池，其电动势大小与溶液的氢离子浓度大小有关。测定酸价时，在用标准碱液滴定油样溶液的过程中，用pH酸度计不断测量溶液的mV值（或pH值），随着滴定剂的加入，由于发生中和反应，游离脂肪酸浓度不断减少，因而指示电极电位相应变化，等到滴定终点附近时，指示电极电位突跃，测得的mV（或pH值）产生突跃变化，那么，由测得的mV值（或pH值）与滴定消耗碱液的体积，作出滴定曲线，就可找出滴定终点对应的碱液体积，计算出酸价值。

‘拾’ 总挥发性脂肪酸的测定方法

挥发性脂肪酸（VFA）的测定
挥发性脂肪酸是厌氧消化过程的重要中间产物，甲烷菌主要利用VFA形成甲烷，只有少部分甲烷由CO 2和H 2生成。但CO 2和H 2生成也经过高分子有机物形成VFA的中间过程。由此看来，形成甲烷的过程离不开VFA的形成，但是VFA在厌氧反应器中的积累能反映出甲烷菌的不活跃状态或反应器操作条件的恶化，较高的VFA（例如乙酸）浓度对甲烷菌有抑制作用。因此在反应器运行中，出水VFA用作重要的控制指标。
在VFA测定中，常进行VFA总量测定，其单位异mmol/L或换算为按乙酸计，以单位mg/L表示。
VFA包括甲酸，乙酸，丙酸，丁酸，戊酸，己酸以及它们的异构体。在运转良好的高速厌氧反应器中，VFA中乙酸可占有很高的比例，但是当反应器运行状态不好时，丙，丁酸浓度会上升。
滴定法分析
1． 原理：将废水以磷酸酸化后，从中蒸发出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用NaOH溶液滴定馏出液。废水中的氨态氮可能对测定形成干扰，因此应当首先在碱性条件下蒸发出氨态氮。
2． 药品
1) 10% NaOH 溶液；
2) NAOH标准溶液，0.1000mol/L;
3) 10%磷酸溶液，取70ml密度1.7g/cm3的磷酸用水稀释至1L;
酚酞指示剂，1%的乙醇溶液。
3． 测定步骤
蒸馏瓶中放入50ml待测废水，其VFA含量不超过30mmol.放入几滴酚酞指示剂。
加入10% NaOH溶液，使溶解呈碱性，并使NaOH略过量。
蒸馏至蒸馏瓶中剩余液体为50~60ml为止。
用蒸馏水将蒸馏瓶中的剩余液体稀释至原来体积，用10ml 10%的磷酸酸化，在接收瓶中放入10ml蒸馏水并使接收瓶与蒸馏瓶上的冷凝管连接，导入管应浸入接收瓶的液面以下。蒸馏至瓶中液体为15~20ml为止。待蒸馏瓶冷却以后，加入50ml蒸馏水再次蒸馏，至10~20ml液体为止。
加入10滴酚酞，用NaOH标准溶液滴定至淡粉色不消失为止。
4． 计算
挥发性脂肪酸含量计算如下：
VFA=V (NaOH)*C*1000/Vs (mmol/L)
式中：V(NaOH)-----滴定消耗的NaOH标准溶液的体积，ml;
c ------ 滴定消耗的NaOH标准溶液的准确浓度，mol/L;
Vs--------被测废水水样的体积，ml.