‘壹’ 影响高效液相色谱组分保留时间因素
色谱柱类型，这是最关键的因素，关系到分离效率的好坏，也关乎各个组分的保留时间；
流动相组成，改变流动相组成，就可以改变流动相的极性(正相、反相色谱)或者流动相的离子比例（离子色谱），从而有效改善不同组分的保留时间；
流动相流速，一般在保证分离度的前提下，流动相流速越快，保留时间越短；
流动相中含盐量，对于某些有机碱或者有机酸来说，调变流动相中含盐量可以有效改变分离效率，从而改变保留时间；
流动相温度，温度越高，保留时间提前。
‘贰’ 操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素有哪些
影响液相色谱保留时间的因素：
1、流动相的比例与极性。对于不同的柱子，分离度和保留时间往往都会有点差别，所以在操作的时候：a、可以适当调整流动相的比列，如甲醇—水（90:10），如分离效果与保留时间延长，可以调整88:12或者92:8或者95:5等。b、有时候还需要更换流动相的组成，甲醇就可以换成乙腈，看具体的实际操作而定。
2、柱子与柱温。不同的柱子保留时间会有所差别，主要是载体的吸附性和固定液的纯度不同，但保留时间一般不会相差太大，可以根据对照品或者标准品的保留时间指定。柱温在HPLC操作时，一般就调整到室温或者30度。
3、流速。流速的大小，液相色谱一般调整在0.8mL/min或者1.0mL/min。
4、进样量。进样量大，保留时间往往会延长。
5、输液系统的压力，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，保留时间将会缩短。
具体的影响因素还要在实际操作中慢慢考察，经过调整后才可以的到较好的色谱条件。
‘叁’ 液相色谱的保留时间总是不稳定，该怎么解决
⑴温度控制不好，向前或向后单向漂移，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。
⑵流动相组成发生变化，向前或向后单向漂移，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。
⑶流动相未平衡好（如缓冲溶液或离子对试剂，尤其是低浓度的盐溶液），向前或向后单向漂移，需对柱子进行更长时间的平衡。
⑷泵或者管路中有气泡，前后漂移，可通过排气等将气泡赶出。
⑸泵单向阀中的宝石球磨损，造成流动相倒流，压力不稳定，保留时间前后漂移。解决办法是更换部件。
⑹泵比例阀控制失灵，不同流路流动相比例不断变化，保留时间前后漂移。解决方法是更换部件。
⑺泵活塞杆密封垫老化，流动相渗漏。解决办法是换密封垫。
⑻在线混合器混合能力变差，不接梯度测试混合能力，并同手工配置流动相比较。
⑼系统管路有堵塞，引起压力不稳，导致保留时间漂移。
⑽吸滤头堵塞，流动相抽取受阻。清洗或更换吸滤头。
⑾色谱柱样品超载，解决办法是减少进样量。
⑿色谱柱键合的固定相流失，注意流动相pH值在容许范围。
⒀硅胶填料的位点被活化，使用可修饰流动相，加三乙胺或使用碱灭活柱等。
‘肆’ 高效液相色谱分析法中如果组分保留时间太长，可采取什么措施调节
可以适当提高流速，来缩短目标物被固定相吸附的保留时间。也可以改变一下流动相的比例或梯度洗脱的比例，通过调整流动相的极性来缩短目标物被固定相的吸附时间。
‘伍’ 液相色谱中如何调节样品组分的保留时间，原理是什么
估计你做的是反相HPLC吧？如果是梯度洗脱，可以从这几方面来考虑：
1. 柱子，很多人觉得应该先考虑流动相，但实际上柱子是必须首先考虑的一个因素。一个色谱条件在不同的柱子上都能重现的话，方法的耐用性也就比较理想了。柱子要考虑的因素有，粒径、表面孔径、碳载量、键合方式、封端方式等，简单点，多换几家品牌。
2. 流动相的组成和改性剂，这个不用多说了。
3. 梯度变化率，在出峰的时间点减慢梯度变化速度，要注意不同的系统梯度是有不同的滞后时间的。
4. 柱温。
5. 样品溶剂，尽量接近梯度起点。
最后补充一个：减小柱外效应。