Ⅰ 生物的基因工程中，将重组DNA进入动物用什么方法，转入植物中用什么方法
将目的基因导入动物细胞使用的是显微注射技术。基本操作程序：首先将含有目的基因的表达载体提纯，并使DNA浓度保持在1~3μg/mL；然后，从从雌性动物体内取出卵（卵可以在体内受精，也可以在体外受精），采用显微注射仪进行显微注射；再将注射了目的基因的受精卵，经胚胎早期早期培养一段时间后，再植入到雌性动物的输卵管或子宫内，使其发育成为具有新性状的动物。——这是高中生物选修3三上的内容。
将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法（农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有感染能力。）除此之外还有基因枪法（又称微弹轰击法，对单子叶植物较好，但是成本太高了）和花粉管通道法（我国科学家独创的哦，支持这个，是一种十分简便经济的方法）——这也是在高中生物选修3上的，课上老师会详细讲，仔细听就行了。希望对你有用。o(∩_∩)o
Ⅱ 基因工程中怎样把两段目的基因连接起来
1、把两个目的片段PCR扩增出来，或许两头都还要酶切一下，以形成互补的粘性末端。PCR时注意所用种类的热聚合酶是否在产物末端添加A，酌情处理。
2、两个互补粘性末端用连接酶连接，两个平末端用DNA聚合酶连接，两个非互补粘性末端用DNA聚合酶一边补平一边连接。
Ⅲ 基因工程又叫基因拼接技术．（1）在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录
（1）目的基因的获取主要有两种途径，一是从供体细胞的DNA中直接分离基因，二是人工合成基因．人工合成的方法之一有反转录法，即以目的基因转录的mRNA为模板，逆转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA（目的基因）．
（2）由于真核生物基因中有不表达的核苷酸序列（内含子），所以要想真核生物的基因在原核细胞中表达，就必须除去目的基因中的内含子．
（3）由于同种限制酶切割形成的粘性末端相同，因此目的基因和运载体上具有相同的粘性末端．当把切割后的运载体与目的基因放在一起，并加入DNA连接酶，将会出现3种环状的DNA分子，即运载体自连的、目的基因片段自连的、运载体与目的基因片段相连的环状DNA分子．
故答案为：
（1）信使RNA（mRNA）逆转录（反转录）双链DNA（目的基因）
（2）动植物细胞除去内含子
（3）3运载体自连的、目的基因片段自连的、运载体与目的基因片段相连的环状DNA分子
Ⅳ 基因工程
不好意思，搞错了
一,逆转录法
逆转录法是先分离纯化目的基因的mRNA,再反转录成cDNA,然后进行cDNA的克隆表达.
1,mRNA的纯化
mRNA的特点:3'末端含有一多聚腺苷酸组成的末端.
方法:亲和层析法
2,cDNA第一链的合成
一般 mRNA都带有3'-polyA,所以可以用寡聚dT作为引物,在逆转录酶的催化下,开始cDNA链的合成.
用放射性探针法检测.
3,cDNA第二链的合成
以cDNA第一链为模板合成第二链.
4,cDNA克隆
用于cDNA克隆的载体有两类:质粒DNA和噬菌体.又将其分为表达型载体和非表达型载体.选用表达型载体可以增加目的基因的筛选方法,有利于目的基因的筛选.
cDNA片段与载体的连接通常采用下面方法:
加同聚尾连接:在载体和cDNA的3'末端加上互补的同型多聚酶序列.
人工接头连接:所谓人工接头是指用人工合成的,连接在目的基因两端的含有某些限制酶切点的寡核苷酸片断.
5,将重组体导入宿主细胞
6, cDNA文库的鉴定
7,目的cDNA克隆的分离和鉴定
(1)核酸探针杂交法
(2)免疫反应鉴定法
逆转录-聚合酶反应法.该方法是mRNA经逆转录合成cDNA第一链,不需再合成第二链,而是在特异引物的协助下,用PCR法进行扩增,特异地合成目的cDNA链,用于重组,克隆.
Ⅳ 植物基因工程的内容(基因克隆方法、连接、转化、筛选及鉴定)
1）目的基因制备和分离：一般通过文库筛选、同源序列比对等方法进行克隆。
2）DNA重组载体的构建：选择植物表达载体，根据载体选择或添加酶切位点，然后进行酶切连接，构建重组载体。
3）转化：转化方法有多种：农杆菌法：将重组载体用电击或热激的方法将其转入农杆菌中，再用农杆菌侵染植物；基因枪法：将重组载体与金粉混合后用基因枪轰击组织块；此外还有其他一些方法。
4）植物阳性植株的筛选和鉴定：一般先用抗性初次筛选后，在基因水平上用PCR扩增目的片段或做Southern杂交；在RNA水平上做半定量或Nouthern杂交.
5）基因表达产物的分离纯化和鉴定：这是蛋白水平上的鉴定，一般是提取纯化蛋白，做蛋白分析。
Ⅵ 在基因工程中，获取目的基因的方法有哪些
..刚好学到
基因工程流程的第一步就是获得目的DNA片段,如何获得目的DNA片段就成为基因工程的关键问题。所需目的基因的来源,不外乎是分离自然存在的基因或人工合成基因。常用的方法有PCR法、化学合成法、cDNA法及建立基因文库的方法来筛选
直接获取
1.从基因文库中获取 这个没什么就是现成的基因储存在受体菌上你用的时候提取出来就好了（基因组文库法 就是原教材中的用限制性内切酶直接获取。利用λ噬菌体载体构建基因组文库的一般操作程序如下：① 选用特定限制性内切酶， DNA进行部分酶解，得到DNA限制性片段② 选用适当的限制性内切酶酶解λ噬菌体载体DNA。③ 经适当处理，将基因组DNA限制性片段与λ噬菌体载体进行体外重组。④ 利用体外包装系统将重组体包装成完整的颗粒。⑤ 以重组噬菌体颗粒侵染大肠杆菌，形成大量噬菌斑，从而形成含有整个DNA的重组DNA群体，即文库。）经典解释
2.cDNA文库法（即原教材中提到的逆转录法）。cDNA文库，是指汇集以某生物成熟mRNA为模板逆转录而成的cDNA序列的重组DNA群体。虽然可用基因组文库法来获取真核生物的目的基因，但是由于高等真核生物基因组DNA文库比其cDNA文库大得多，相关工作量同样大得多。更为重要的是，在真核生物基因组中合有大量的间隔序列或内含子，但在大肠杆菌等原核生物中没有类似序列的存在，所以大肠杆菌不能从真核生物基因的初级转录本中去除间隔序列，即不能表达真核生物DNA。而在真核生物成熟mRNA中已不存在间隔序列（已在拼接过程中被去除），所以可以以真核生物成熟mRNA为模板，逆转录而成的cDNA可被大肠杆菌表达。因此，在基因工程中，cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法。
3.直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。这种方法有如用猎枪发射的散弹打鸟，无论哪一颗弹粒击中目标，都能把鸟打下来。鸟枪法的具体做法是：用限制酶（即限制性内切酶）将供体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞所提供的DNA（外源DNA）的所有片段分别在受体细胞中大量复制（在遗传学中叫做扩增），从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法吧带有目的基因的DNA片段分离出来。如许多抗虫，抗病毒的基因都可以用上述方法获得。
用“鸟枪法”获取目的基因的优点是操作简便，缺点是工作量大，具有一定的盲目性。
人工合成
1.(主要是序列已知的基因)。主要是通过DNA自动合成仪，通过固相亚磷酸酰胺法合成，具体过程可以网上查询，反正是可以按照已知序列将核苷酸一个一个连接上去成为核苷酸序列，一般适于分子较小而不易获得的基因。对于大的基因一般是先用化学合成法合成引物，再利用引物获得目的基因。
2.聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断；可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研 究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情，用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑
他只是给目的基因的扩增
Ⅶ 简述基因工程操作的几个步骤
基因操作的基本步骤
进行基因操作一般要经历四个基本步骤，也就是基因操作的“四步曲”。
提取目的基因
基因操作的第一步，是取得人们所需要的特定基因，也就是目的基因(如图)。如前
面提到的苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因，还有植物的抗病(抗病毒、抗细菌)基因、
种子的贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因、干扰素基因等，都是目的基因。
要从浩瀚的“基因海洋”中获得特定的目的基因，犹如大海捞针，是十分不易的。科学家们经过不懈地探索，想出了许多办法，概括地说，主要有两条途径：一条是从供体细胞的dna中直接分离基因；另一条是人工合成基因。
直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。这种方法犹如用猎枪发射的散弹打鸟，无论哪一颗弹粒击中目标，都能把鸟打下来。鸟枪法的具体做法是：用限制酶将供体细胞中的dna切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞所提供的dna(外源dna)的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制(在遗传学中叫做扩增)，从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有目的基因的dna片段分离出来。如许多抗虫、抗病毒的基因都可以用上述方法获得。
用“鸟枪法”获取目的基因的缺点是工作量大，具有一定的盲目胜。又由于真核细胞的基因含有不表达的dna片段，不能直接用于基因的扩增和表达，因此，在获取真核细胞中的目的基因时，一般是用人工合成基因的方法。
目前人工合成基因的方法主要有两条途径。一条途径是以目的基因转录成的信使rna为模板，反转录成互补的单链dna，然后在酶的作用下合成双链dna，从而获得所需要的基因。另一条途径是根据已知的蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使rna序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学的方法，以单核苷酸为原料合成目的基因(如图)。如人的血红蛋白基因、胰岛素基因等就可以通过人工合成基因的方法获得。
Ⅷ 高中生物基因工程，正反两种结构是指怎样连接
因为同种限制酶切割,产生的黏性末端相同，即目的基因两端暴露出来的碱基序列相同,与质粒相连时,若目的基因的正确碱基序列由左到右,则与质粒连接为正确连接。由于目的基因两州黏性末端相同,可以造成右侧连上（说简单点,就是启动子位置改变)这就是反向相连.