pr与rna分析方法

1. RNA的提取方法步骤及原理.

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:

Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。

Trizol作用原理:

在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后，裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。

水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后，用乙醇可从中间相沉淀得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。

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与DNA不同，RNA一般为单链长分子，不形成双螺旋结构，但是很多RNA也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。

RNA的碱基配对规则基本和DNA相同，不过除了A-U、G-C配对外，G-U也可以配对。

在细胞中，根据结构功能的不同，RNA主要分三类，即tRNA（转运RNA），rRNA（核糖体RNA），mRNA（信使RNA）。mRNA是合成蛋白质的模板，内容按照细胞核中的DNA所转录；tRNA是mRNA上碱基序列（即遗传密码子）的识别者和氨基酸的转运者；rRNA是组成核糖体的组分，是蛋白质合成的工作场所。

2. 分离DNA和RNA主要方法有哪些

[思路分析]：①取鸡血细胞液（其红细胞椭圆具核,除骆驼外,猪、羊、狗等哺乳动物红细胞无核）,或取新鲜猪肝、菜花、洋葱等材料.虽然在细菌的转化实验中提取的是无核细胞中的DNA,但一般而言,均是从具核的生物材料中提取DNA.当然,在提取出的DNA中也含有一定量的胞质DNA,即线粒体DNA和叶绿体DNA.值得推介的材料是洋葱,取材容易,操作简便,效果明显.将家用加盐洗洁精与洋葱碎屑混合研磨并过滤后,再加酒精,微摇后即出现白色的毛絮状DNA混合物.②使红细胞溶血破膜以及化学药剂十二烷基磺酸钠 SDS（洗洁精的主要成分）或三氯乙酸溶膜.在低渗溶液中,如加蒸馏水使血细胞过度渗透吸水直至破裂,同时用玻棒加速血细胞及核破裂,经一级过滤后滤出液为DNA核蛋白和RNA核蛋白.对于菜花、洋葱等植物材料,在研磨破坏其细胞壁的同时,可考虑适量加入乙二胺四乙酸EDTA以防止DNA酶解.③利用DNA和RNA溶解度的不同析出DNA.在浓氯化钠溶液（2 mol/L）中,DNA核蛋白的溶解度很大,而RNA核蛋白的溶解度很小.在稀氯化钠溶液（0.14mol／L）中DNA的溶解度最低,蛋白质的溶解度很高而出现盐溶现象,经二级过滤后滤出液主要为DNA粗制品.④DNA不溶于酒精,经三级过滤后,再利用乙醇沉淀法使其他物质溶于酒精而进一步纯化DNA.⑤二苯胺或甲基绿鉴定法即DNA遇二苯胺（沸水浴）被染成蓝色,遇甲基绿被染成蓝绿色,且颜色的深浅与DNA纯化程度有关.在此过程中设计对照实验,以增强实验中二苯胺对DNA专一性显色结果的可信度.分离DNA和RNA主要方法有哪些

3. 检测DNA和RNA检测方法有什么区别

您好！检测DNA的方法有：1.光密度测定。2.琼脂糖电泳凝胶检测法。3。二苯胺法。
检测RNA的方法有：1.光密度测定。2.苔黒酚法。
主要的嘧啶和嘌呤具有共轭双键，使碱基，核苷，核苷酸和核酸在240-290nm的紫外波段有一段强烈的吸收峰，因此核酸具有紫外吸收特性，在260nm,处是最大的紫外光吸收值，根据朗波-比尔光吸收定律来计算出核酸含量。

4. 图示中心法则并阐明DNA、RNA和Pr的关系

再从RNA传递给蛋白质的转录和翻译的过程，只有寄生到寄主细胞中后才发生，RNA分子产生与其序列互补的DNA分子，以及遗传信息从DNA传递给DNA的复制过程.com/view/15948:
http，这个过程即为反转录(reverse
transcription)，在病毒单独存在时是不能进行的。在反转录酶催化下，这种DNA分子称为互补DNA(complementary
DNA)，简写为cDNA中心法则是指遗传信息从DNA传递给RNA://ke..com/view/15948://ke

5. 预对某个基因的表达（RNA和Pr水平）进行定性和定量分析，可采用的技术路线和主要实验方法

检测mRNA表达水平可以做RT-PCR或者northern-blot，定量分析可以做real time PCR。
检测蛋白表达水平可以用western-blot，定量分析可以做流式细胞分析。