维生素分析方法有哪几种

㈠ 食品分析作业测定食品中维生素的方法有哪些

色谱法，紫外分光光度法

㈡ 水果中维生素c含量的测定方法有几种

水果中维生素c含量的测定方法有三种，分别为原子吸收分光光度法、紫外可见分光光度法、高效液相色谱法。

1、原子吸收分光光度法
利用原子吸收分光光度法问接测定维生素C的含量，是利用维生素C可以与一些金属离子发生氧化还原反应，通过测定反应掉的金属离子的量，进而间接计算出维生素c的含量。

2、紫外-可见分光光度法

利用紫外-可见分光光度法测定维生素C的含量是基于维生素c在紫外光区有特征吸收，但是因为维生素C结构中具有不饱和键，具有还原性，不易稳定存在，直接测定误差较大。所以在利用紫外分光光度法测定时，维生素标准溶液和待测样的配制条件非常重要。

3、高效液相色谱法

高效液相色谱法是以液体为流动相，采用高压输液系统，将维生素C的溶剂装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而测量出维生素c的含量。

(2)维生素分析方法有哪几种扩展阅读

维生素c含量的测定方法对比：

由于维生素C自身的不稳定，导致了很多方法测定结果误差较大，所以对维生素C稳定存在条件的探索非常重要。高效液相色谱法因为测定较准确、灵敏度高、选择性好，有较好的发展前景，是目前发展较快的一种方法。

㈢ 测定维生素c的含量的方法还有哪些

雨滴计算通过网络搜索的

维生素C不同的测定方法

目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果.

㈣ 维生素C所有实验方法，国内外人士的研究概况

目前研究Vc测定方法的报道较多，有关Vc的测定方法如荧光法、2,6-二氯靛酚滴定法、2,4-二硝基苯肼法、碘量法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等，各种方法对实际样品的测定均有满意的效果。为了解国内Vc含量测定方法及其应用方面的现状及发展态势。方法以"Vc或抗坏血酸和测定"为检索词对1994～2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)中的理工A、B和医药卫生专辑进行篇名检索，对所得有关Vc含量测定的文献数据分别以年代、作者区域、载刊等级、样品类型、测定方法等进行计量分析。结果核心期刊载刊文献占文献总量的45.06％，其中光度法占65.69％，电化法占18.63％，色谱法占12.75％；复杂被测样品文献占文献总量的45.06％，其中光度法占60.92％，色谱法占19.54％，电化法占10.34％。结论目前国内Vc含量测定仍以光度法为主流，但近年来色谱法，特别是HPLC法上升趋势尤为明显。
1.4.1还原型Vc的测定
1.4.1.1 2,6-二氯酚靛酚法(2,6-D法)
其原理是利用2,6-二氯酚靛酚钠盐(C12H6O2NCl2Na)在酸性条件下将还原型抗坏血酸氧化成氧化型抗坏血酸，而其本身被还原成无色的衍生物；当还原型抗坏血酸全部被氧化时，过量的2,6-二氯靛酚钠盐呈现红色，指示终点。该方法适于测定无色和浅色样液或提取液中的AsA，无须特殊仪器，操作简便、快速、准确[7]。
由于大多数果蔬和其制品有颜色，影响了终点的准确性。使用白陶土脱色[8]和加1,2-二氯乙烷[9]均不能得到理想的结果。作为对该法的改进，向一定量的AsA提取液中加入过量2,6-D与AsA作用后，剩余的2,6-D被二甲苯萃取、比色。样液中AsA含量与二甲苯萃取液中浅红色呈线性负相关。因花青素不溶于二甲苯，故可测定深色样品[10]。应用流动注射分析(Flow Injection Analysis,简称FIA)，使该法的分析速度更快(120样品/h)、灵敏(检出限0.5 ug/ml)[11]。由于2,6-二氯靛酚和还原型抗坏血酸具有不同的电位(2,6-二氯靛酚的氧化还原电位是150mV，AsA的氧化还原电位是100 mV)，利用铂和氯化银复合电极测定其电位差的变化，可准确地测定样液中AsA的含量。该法适宜色泽较深样品中AsA的测定。溶解氧测定是利用极谱分析法原理进行的,其基本电路与电位滴定相似[12]。但样品中同时存在的Fe2+、Sn2+、SO2、SO3、S2O32-等还原性杂质对本法则有干扰。扣除样品中内源还原性物质是对2,6-二氯靛酚法的一个改进[13]。
1.4.1.2 碘量法
其原理是基于AsA还原碘，自身氧化DAsA,而碘可由碘酸钾还原碘化钾来得到，当多余碘存在时，淀粉呈蓝色，指示终点。反应式如下:
KI+KIO3+6H→2K++3H2O+I2 (1-1)
还原型抗坏血酸+I2+2H+→氧化型抗坏血酸+2HI
该法简便，但在测定深色样品时，准确度欠佳[14]。
1.4.1.3 分光光度法
其原理是三价铁离子被AsA还原二价铁离子，后者与4,7-二苯基-1,10-菲咯啉(Bathophenanthroline, BP)生成红色络合物，其强度与样品中AsA含量有化学计量关系。该法具有快速，灵敏的优点；此外，样品中DAsA还可被Dithiothreitol (DTT)还原为AsA，同时测定DAsA的含量[15]。
采用流动注射分析停留技术还可实现AsA与果蔬常用抗褐变剂L-半胱氨酸的同时测定[16]。
1.4.1.4 间接光度法
测定是在pH=5.0的乙酸-乙酸钠缓冲溶液中，抗坏血酸与铁(III)和1,10-二氮杂菲溶液相互作用，形成橘红色的Fe(II)-二氮杂菲络合物，在波长510 nm处，吸光度与50mL抗坏血酸含量在10~200ug浓度内呈线性关系。该法的特点是简便快速，灵敏度高，干扰少[15]。
1.4.1.5 紫外光度法
其原理是还原型Vc(AsA)在紫外区243.8nm处有最大吸收峰，以Cu2+作催化剂，利用溶解氧，将在243.8nm处有最大吸收的AsA选择性氧化为243.8nm处无最大吸收峰的DAsA，进行本底校正，此法具有简便、快速、准确的特点[17]。
1.4.1.6 光电比浊法
其原理是在酸性提取液中的AsA，可被亚硒酸氧化成DAsA，后者还原成元素硒，在一定条件下，其溶液中形成稳定的悬浊液。当20~50mL浸出液中AsA含量在0~4mg时，浊度与AsA含量成正比。样品中含有单宁、山梨酸、还原酮类不干扰测定。Fe2+、SO2在常温下干扰不明显，仅亚锡离子有干扰[18]。
1.4.1.7 高效液相色谱法(HPLC)
此法的优点不仅操作简便，分离时间短，对结构不稳定的Vc尤为适合；缺点是所用仪器较为昂贵[20]。
1.4.1.8 极谱法
其原理是用溴水将AsA氧化成DAsA，而后者与邻苯二胺缩合，可用于极谱定量测定Vc含量。脱氢型的还原糖、还原酸等对测定有干扰，可用氯仿萃取分离干扰物质后进行测定[18]。
1.4.2 Vc总量的测定
1.4.2.1 2,4-二硝基苯肼法
此法为测定Vc总量最常用的方法。其原理是用活性炭把AsA氧化成DAsA，在pH5以上时，后者分子重排，其内酯环裂开生成2,3-二酮古乐糖酸(DKG)，与硝基苯肼偶联，生成红色的脎，其呈色强度与DKG浓度成正比；如果再测定出DKG、DKG + DAsA的含量，则可计算出AsA、DAsA的含量。该法虽然测试过程长、须严格掌握测试条件，但其准确度和精密度均较高[20]。
1.4.2.2 荧光分光光度计法
其测定Vc的基本原理是:样品中的AsA被氧化成DAsA，并与邻苯二胺反应，生成荧光物质喹喔啉(Quinoxaline)衍生物，荧光强度与DAsA的浓度成正比，用荧光计测定荧光强度。该法具有较强的专一性，样品中有些成分会造成干扰，可作空白试验校正干扰物质所产生的荧光。此法的优点是，生成荧光物质所需时间短，操作简单，能在短时间内测定Vc总量和分开测定AsA、DAsA的含量[19]。
1.4.2.3 过氧化物酶法
果蔬中的Vc在过氧化氢存在下，添加合成底物1,4-二氨基苯，通过过氧化物酶氧化显色，作为Vc氧化终点，然后比色测定。该法的特点是不需要昂贵的仪器，适应性强，容易掌握，费用低，检测快速，不需要预先纯化所分析的试样[20]。
这个是我论文的综述部分，你看看吧！

㈤ 维生素A和维生素E的化学检验方法

第一篇高效液相色谱法
2原理
样品中的维生素A及维生素E经皂化提取处理后，将其从不可皂化部分提取至有机溶剂中。用高效液相色谱法C18反相柱将维生素A和维生素E分离，经紫外检测器检测，并用内标法定量测定。最小检出量分别为VA：0.8ng；α－E：91.8ng；γ－E：36.6ng；δ－E：20.6ng。
3试剂
实验用水为蒸馏水。试剂不加说明为分析纯。
3.1无水乙醚：不含有过氧化物。
3.1.1过氧化物检查方法：用5mL乙醚加1mL 10%碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉液，水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。
3.1.2去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，瓶中放入纯铁丝或铁末少许。弃去10%初馏液和10%残馏液。
3.2无水乙醇：不得含有醛类物质。
3.2.1检查方法：取2mL银氨溶液于试管中，加入少量乙醇，摇匀，再加入10%氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。
3.2.2脱醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中。取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。将两者倾入1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天(不时摇动，促进反应)，经过滤，置蒸馏瓶中蒸馏，弃去初蒸出的50mL。当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增加。
3.3无水硫酸钠。
3.4甲醇：重蒸后使用。
3.5重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。
3.610%抗坏血酸溶液(m/V)：临用前配制。
3.71∶1氢氧化钾溶液。
3.810%氢氧化钠溶液(m/V)。
3.95%硝酸银溶液(m/V)。
3.10银氨溶液：加氨水至5%硝酸银溶液中，直至生成的沉淀重新溶解为止，再加10%氢氧化钠溶液数滴，如发生沉淀，再加氨水直至溶解。
3.11维生素A标准液：视黄醇(纯度85%)或视黄醇乙酸酯(纯度90%)经皂化处理后使用。用脱醛乙醇溶解维生素A标准品，使其浓度大约为1mL相当于1mg视黄醇。临用前用紫外分光光度法标定其准确浓度。
3.12维生素E标准液：α－生育酚(纯度95%)，γ－生育酚(纯度95%)，δ－生育酚(纯度95%)。用脱醛乙醇分别溶解以上三种维生素E标准品，使其浓度大约为1mL相当于1mg。临用前用紫外分光光度法分别标定此三种维生素E的准确浓度。
3.13内标溶液：称取苯并〔e〕芘(纯度98%)，用脱醛乙醇配制成每1mL相当于10μg苯并〔e〕芘的内标溶液。
3.14pH1～14试纸。
4仪器和设备
4.1实验室常用设备。
4.2高压液相色谱仪带紫外分光检测器。
4.3旋转蒸发器。
4.4高速离心机
4.4.1小离心管：具塑料盖1.5～3.0mL塑料离心管(与高速离心机配套)。
4.5高纯氮气。
4.6恒温水浴锅。
4.7紫外分光光度计。
5操作步骤
5.1样品处理
5.1.1皂化
称取1～10g样品(含维生素A约3μg，维生素E各异构体约为40μg)于皂化瓶中，加30mL无水乙醇，进行搅拌，直到颗粒物分散均匀为止。加5mL 10%抗坏血酸，苯并〔e〕芘标准液2.00mL，混匀。加10mL1：1氢氧化钾，混匀。于沸水浴上回流30min使皂化完全。皂化后立即放入冰水中冷却。
5.1.2提取
5.1.2.1将皂化后的样品移入分液漏斗中，用50mL水分2～3次洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗中。用约100mL乙醚分两次洗皂化瓶及其残渣，乙醚液并入分液漏斗中。如有残渣，可将此液通过有少许脱脂棉的漏斗滤入分液漏斗。轻轻振摇分液漏斗2min，静置分层，弃去水层。
5.1.3洗涤
5.1.3.1用约50mL水洗分液漏斗中的乙醚层，用pH试纸检验直至水层不显碱性(最初水洗轻摇，逐次振摇强度可增加)。
5.1.4浓缩
5.1.4.1将乙醚提取液经过无水硫酸钠(约5g)滤入与旋转蒸发器配套的250～300mL球形蒸发瓶内，用约10mL乙醚冲洗分液漏斗及无水硫酸钠3次，并入蒸发瓶内，并将其接至旋转蒸发器上，于55℃水浴中减压蒸馏并回收乙醚，待瓶中剩下约2mL乙醚时，取下蒸发瓶，立即用氮气吹掉乙醚。立即加入2.00mL乙醇，充分混合，溶解提取物。
5.1.5将乙醇液移入一小塑料离心管中(4.4.1)，离心5min(5000rpm)。上清液供色谱分析。如果样品中维生素含量过少，可用氮气将乙醇液吹干后，再用乙醇重新定容。并记下体积比。
5.2标准曲线的制备
5.2.1维生素A和维生素E标准浓度的标定方法
取维生素A和各维生素E标准液若干微升，分别稀释至3.00mL乙醇中，并分别按给定波长测定各维生素的吸光值。用比吸光系数计算出该维生素的浓度。测定条件如下表所示。
表1
标 准 加入标准的量
s，μl 比吸光系数
波 长
λ，nm
视 黄 醇
γ－生育酚
δ－生育酚
α－生育酚 10.00
100.0
100.0
100.0 1835
71
92.8
91.2 325
294
298
298

浓度计算：


5.2.2标准曲线的制备
本方法采用内标法定量。把一定量的维生素A、γ－生育酚、α－生育酚、δ－生育酚及内标苯并〔e〕芘液混合均匀。选择合适灵敏度，使上述物质的各峰高约为满量程70%，为高浓度点。高浓度的1/2为低浓度点(其内标苯并〔e〕芘的浓度值不变)，用此二种浓度的混合标准进行色谱分析，结果见色谱图。维生素标准曲线绘制是以维生素峰面积与内标物峰面积之比为纵坐标，维生素浓度为横坐标绘制，或计算直线回归方程。如有微处理机装置，则按仪器说明用二点内标法进行定量。
本方法不能将β－E和γ－E分开，故γ－E峰中包含有β－E峰。
5.3高效液相色谱分析
5.3.1色谱条件(推荐条件)
5.3.1.1预柱：ultrasphere ODS 10μm，4mm×4.5cm。
5.3.1.2分析柱：ultrasphere ODS 5μm，4.6mm×25cm。
5.3.1.3流动相：甲醇∶水＝98∶2。混匀。于临用前脱气。
5.3.1.4紫外检测器波长：300nm。量程0.02。
5.3.1.5进样量：20μL。
5.3.1.6流速：1.7mL/min。
5.4样品分析
取样品浓缩液20μL，待绘制出色谱图及色谱参数后，再进行定性和定量。
5.4.1定性：用标准物色谱峰的保留时间定性。
5.4.2定量：根据色谱图求出某种维生素峰面积与内标物峰面积的比值，以此值在标准曲线上查到其含量。或用回归方程求出其含量。
6计算


式中：X2——某种维生素的含量，mg/100g；
C——由标准曲线上查到某种维生素含量，μg/mL；
V——样品浓缩定容体积，mL；
m——样品质量， g。
用微处理机二点内标法进行计算时，按其计算公式计算或由微机直接给出结果。
7结果的允许差
同一实验室，同时测定或重复测定结果相对偏差绝对值≤10%。
第二篇比色法
8原理
维生素A在三氯甲烷中与三氯化锑相互作用，产生蓝色物质，其深浅与溶液中所含维生素A的含量成正比。该蓝色物质虽不稳定，但在一定时间内可用分光光度计于620nm波长处测定其吸光度。
9试剂
本实验用水均为蒸馏水。
9.1无水硫酸钠：同3.3。
9.2乙酸酐。
9.3乙醚：同3.1。
9.4无水乙醇：同3.2。
9.5三氯甲烷：应不含分解物，否则会破坏维生素A。
9.5.1检查方法
三氯甲烷不稳定，放置后易受空气中氧的作用生成氯化氢和光气。检查时可取少量三氯甲烷置试管中加水少许摇振，使氯化氢溶到水层。加入几滴硝酸银液，如有白色沉淀即说明三氯甲烷中有分解产物。
9.5.2处理方法
试剂应先测验是否含有分解产物，如有，则应于分液漏斗中加水洗数次，加无水硫酸钠或氯化钙使之脱水，然后蒸馏。
9.625%三氯化锑－三氯甲烷溶液：用三氯甲烷配制25%三氯化锑溶液，储于棕色瓶中(注意勿使吸收水分)。
9.71∶1氢氧化钾溶液。
9.8维生素A或视黄醇乙酸酯标准液：同3.11。其标定方法同5.2.1。
9.9酚酞指示剂：用95%乙醇配制1%溶液。
10仪器和设备
10.1实验室常用设备。
10.2分光光度计。
10.3回流冷凝装置。
11操作步骤
维生素A极易被光破坏，实验操作应在微弱光线下进行，或用棕色玻璃仪器。
11.1样品处理：根据样品性质，可采用皂化法或研磨法。
11.1.1皂化法：适用于维生素A含量不高的样品，可减少脂溶性物质的干扰，但全部试验过程费时，且易导致维生素A损失。
11.1.1.1皂化：根据样品中维生素A含量的不同，称取0.5～5g样品于三角瓶中，加入10mL 1∶1氢氧化钾及20～40mL乙醇，于电热板上回流30min至皂化完全为止。
11.1.1.2提取：将皂化瓶内混合物移至分液漏斗中，以30mL水洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗。如有渣子，可用脱脂棉漏斗滤入分液漏斗内。用50mL乙醚分二次洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗中。振摇并注意放气，静置分层后，水层放入第二个分液漏斗内。皂化瓶再用约30mL乙醚分二次冲洗，洗液倾入第二个分液漏斗中。振摇后，静置分层，水层放入三角瓶中，醚层与第一个分液漏斗合并。重复至水液中无维生素A为止。
11.1.1.3洗涤：用约30mL水加入第一个分液漏斗中，轻轻振摇，静置片刻后，放去水层。加15～20mL 0.5mol/L氢氧化钾液于分液漏斗中，轻轻振摇后，弃去下层碱液，除去醚溶性酸皂。继续用水洗涤，每次用水约30mL，直至洗涤液与酚酞指示剂呈无色为止(大约3次)。醚层液静置10～20min，小心放出析出的水。
11.1.1.4浓缩：将醚层液经过无水硫酸钠滤入三角瓶中，再用约25mL乙醚冲洗分液漏斗和硫酸钠两次，洗液并入三角瓶内。置水浴上蒸馏，收回乙醚。待瓶中剩约5mL乙醚时取下，用减压抽气法至于，立即加入一定量的三氯甲烷使溶液中维生素A含量在适宜浓度范围内。
11.1.2研磨法：适用于每克样品维生素A含量大于5～10μg样品的测定，如肝的分析。步骤简单，省时，结果准确。
11.1.2.1研磨：精确称2～5g样品，放入盛有3～5倍样品重量的无水硫酸钠研钵中，研磨至样品中水分完全被吸收，并均质化。
11.1.2.2提取：小心她将全部均质化样品移入带盖的三角瓶内，准确加入50～100mL乙醚。紧压盖子，用力振摇2min，使样品中维生素A溶于乙醚中。使其自行澄清(大约需1～2h)，或离心澄清(因乙醚易挥发，气温高时应在冷水浴中操作。装乙醚的试剂瓶也应事先放入冷水浴中)。
11.1.2.3浓缩：取澄清提取乙醚液2～5mL，放入比色管中，在70～80℃水浴上抽气蒸干。立即加入1mL三氯甲烷溶解残渣。
12测定步骤
12.1标准曲线的制备
准确取一定量的维生素A标准液于4～5个容量瓶中，以三氯甲烷配制标准系列。再取相同数量比色管顺次取1mL三氯甲烷和标准系列使用液1mL，各管加入乙酸酐1滴，制成标准比色列。于620nm波长处，以三氯甲烷调节吸光度至零点，将其标准比色列按顺序移入光路前，迅速加入9mL三氯化锑－三氯甲烷溶液。于6s内测定吸光度，将吸光度为纵坐标，以维生素A含量为横坐标绘制标准曲线图。
12.2样品测定
于一比色管中加入10mL三氯甲烷，加入1滴乙酸酐为空白液。另一比色管中加入1mL三氯甲烷，其余比色管中分别加入1mL样品溶液及1滴乙酸酐。其余步骤同标准曲线的制备。
13计算


式中：X——样品中含维生素A的量，mg/100g(如按国际单位，每1国际单位＝0.3μg维生素A)；
c——由标准曲线上查得样品中含维生素A的含量，μg/mL；
m——样品质量，g；
V——提取后加三氯甲烷定量之体积，mL；
100——以每百克样品计。

㈥ 维生素C的测量方法(滴定)有哪几种

测定维生素C有多种方法传统的滴定法是手工滴定，根据指示剂颜色的变化确定
终点，通过测量滴定剂的消耗量，计算被测物质的含量。手
工滴定有很多不足：手工控制误差较大，计算复杂，针对不
同的反应需要特殊指示剂。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪
解决了这一问题，通过测量滴定反应中电位的变化确定终
点，全自动操作、计算，测量快速，结果准确。梅特勒-托利
多的滴定仪配有记忆卡软件包，存储有成熟滴定方法，可方
便快速解决实际应用问题，并且稍作改动就能作为新的测定
的实验方法

㈦ 维生素C的测定方法有哪些，各有何优缺点，请加以对比，最好能列表

2.6一二氯酚靛酚滴定法测定还原型抗坏血酸是多年采用的经典方法。该法简便易行、快速，目前仍被广泛运用。但此方法尚存着一定均缺点，突出的一点是滴定终点难以确定。利用2.6一二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性物质溶液而当抗坏血酸尚未被全部被氧化时，滴下的2.6一二氮酚靛酚立即被还原成无色。而溶液中的坑坏血酸一旦被氧化，则滴入的2.6一二氮酚靛酚则立即使溶液呈现红色。所以，当溶液从无色转变成微红色时，即表示溶液中的抗坏血酸刚刚
被全部氧化，此时为滴定终点。此种方法对于无色或淡黄色、绿色样品液的滴定终点易确定，而对于山植、大枣、草葺、酸枣等紫色、粉红或褐色等色泽的朵蔬样品液的滴定终点就难以观察确定。为此，往往经稀释，添加活性炭、白陶土来进行脱色处理，添加维生素C的方法来解决。既使如此，仍难得到满意的结果，测定数据也很难准确。为克服以上缺点，近年来经反复多次的实验研究，采用2.6一二氯酚靛酚反滴定法测果蔬中还原抗坏血酸，终于摸索出比较合理的实
验条件，收到了比较满意的效果。

㈧ 怎样测定蔬菜中的维生素C

1.滴定法测定维生素C
1.1测定原理
2，6一二氯靛酚法和碘量法是较常见的滴定测定维生素C的方法。还原型抗坏血酸还原染料2，6一二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6一二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2， 6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。
碘量法的原理：维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种，当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子，随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。
1.2测定操作
2，6一二氯靛酚法：取适量的样品可食部，加入100 mL 2%草酸溶液，制成匀浆。取同一样品匀浆10g，加入1%草酸溶液20 mL，摇匀，用滤纸过滤，取5mL过滤液于锥形瓶中，用2，6一二氯靛酚钠盐溶液滴定(1 mL≈0.02 mgVitC)，以淡红色存在30 s内不褪色为滴定终点。记录2，6-二氯酚靛酚钠盐溶液的消耗量，根据结果计算出样品中维生素C含量(mg/100 g)。
碘量法：将果蔬洗净，用纱布拭干其外部所附着的水分，若样品清洁可以不必洗。样品可以先纵切为4~8等份，分别称取20g可是用食部分，置于研钵中加入2% Hcl 15~10ml，研磨至浆状，移于 100ml 容量瓶中，用2% HCl 加至刻度线处，混匀，过滤，记录滤液总体积。样品液的测定: 在50ml 烧杯中，用移液管注入10% KI 溶液0．5ml，0.5% 的淀粉溶液 2ml，样品液 5ml，蒸馏水 2.5ml，用0.001N KIO3 液滴定，要一滴滴加入，并时时摇动烧杯，至微蓝色不褪色为终点( 一分钟不褪为止) 。记录所用 KIO3 液毫升数，计算维生素C含量。
1.3测定方法评价
2，6-二氯酚靛酚滴定法具有简便、快速、比较准确等优点，适用于许多不同类型样品的分析。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰，如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。碘酸钾滴定法较便宜，使用碘酸钾滴定法测定蔬菜中维生素C含量较为简便易行，而2，6一二氯靛酚法相对复杂。总的来说，滴定法操作简便、快速，无须特殊仪器，但在测定深色样品时，准确度和精确度欠佳。
2.荧光法测定维生素C
2.1测定原理
Deutsch和Weeks曾经报道过一种检测维生素C的荧光分析法(OPDA)，并被指定为维生素C的经典荧光分析法。在该方法中，维生素C先被活性炭(Norit)氧化为脱氢抗坏血酸(DHAA)，DHAA再与荧光底物邻苯二胺(OPDA)结合生成荧光产物，通过对该荧光产物的检测实现对维生素C的定量分析。孙振艳等[1]提出了一种新的测定维生素C的荧光分析方法。基于维生素C被Cu2+氧化为DHAA，DHAA进一步与苯甲酸及十六烷基三甲基溴化铵产生荧光协同增敏作用，通过对体系荧光强度的测定进行维生素C的定量分析。
2.2测定操作
荧光分析法(OPDA)的测定方法：称取一定量样品，研磨后用水浸泡，取清液加入适量1%草酸溶液，振摇约3min，加入0.2g已处理好的活性炭再充分振摇约3min后过滤，滤液加于两个25mL比色管再加入5.0mL缓冲溶液,，其中一管加入2.0mL硼酸溶液(即空白)摇匀，放置15min后，两管均加入邻苯二胺溶液10mL，避光放置30min待测。样品荧光强度减去空白荧光强度值即为样品相对荧光强度值。
孙振艳等的荧光分析法：在25 mL比色管中依次加入0. 6 mL CuSO4溶液，2. 0 mL十六烷基三甲基溴化铵溶液，2. 0 mL苯甲酸溶液，一定体积的维生素C标准溶液，，5. 0 mLNaOH-邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液，用蒸馏水定容，摇匀。在35℃恒温水浴中加热30 min，将溶液流水冷却至室温，激发波长为308 nm，在发射波长408nm处，测量荧光强度F，以不含维生素C的试剂空白为F0，计算ΔF=F-F。
2.3测定方法评价
荧光分析法测定维生素C具有操作简单，精密度高，检出限低等优点，该法可以应用于水果、蔬菜和药物中维生素C的检测，适于推广。
3.光度分析法测定维生素C
3. 1测定原理
2，4-二硝基苯肼法和钼蓝比色法是常见测定维生素C的一种光度分析法。2，4-二硝基苯肼法的原理是总维生素C包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸，样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。钼蓝比色法是测定果蔬中还原型维生素C含量的一种常用方法，因偏磷酸和钼酸铵反应生成的磷钼酸铵经还原型的维生素C还原后生成亮蓝色的络合物，通过分光比色可以测定样品中还原型维生素C的含量。
3.2测定操作
2，4-二硝基苯肼法：取适量的样品可食部，加入100 mL 2%草酸溶液，制成匀浆。取匀浆20 g (含1~2 mg抗坏血酸)置入100 mL容量瓶中，用1%草酸溶液定容，混匀后过滤。取25 mL过滤液放入有2 g活性炭的25 mL比色管中，振摇1 min，过滤。然后取10 mL此氧化提取液，加入10 mL 2%硫脲溶液，混匀。按照GB12392-90中呈色反应方法，用分光光度计进行比色，根据结果计算出样品中抗坏血酸含量。按下式计算样品中Vc的含量:X=c·Vm×F×1001000。
X—样品中总抗坏血酸含量，mg/100g；
c—由标准曲线查得或回归方程算得“样品氧化液”总抗坏血酸的浓度，μg/mL； V—试样用1%草酸溶液定容的体积，mL； F—样品氧化处理过程中稀释倍数； m—试样质量，g。
钼蓝比色法：准确称取 100 g 样品， 加入草酸－EDTA 溶液， 经捣碎后移入 100 mL 容量瓶，定容，过滤，吸取 2 mL 上清液于 50 mL 容量瓶中，加入 1 mL 的偏磷酸－醋酸溶液，5％的硫酸 2．0 mL，摇匀，加入 4 mL 钼酸铵，以去离子水定容至 50 mL，20 min 后测定吸光度。
3.3测定方法评价
钼蓝比色法测定果蔬中还原型维生素C含量数据稳定性、准确性较好，是一种快速、准确、灵敏度高的测定方法，而且不受样液颜色的影响。2，4-二硝基苯肼比色法测定总VitC (还原型和氧化型)，特异性较好，但操作复杂，是我国食品中VitC测定的标准方法，此方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。
4.高效液相色谱法
4.1测定原理
高效液相色谱法是近年来发展起来的一种测定维生素 C 含量的方法，测定维生素 C 含量通常采用 C18柱或 C8柱，由于维生素 C 对紫外光有吸收，故检测器常用紫外检测器。
4.2测定操作
称取维生素C标准样品0.1000 g.转移至100 ml容量瓶中，用双蒸水定容，得到1.0mg·ml-1的维生素C标准溶液。参考Nisperos-Carriedo等的方法。准确称取果肉1.00 g，用5 ml 0.2%偏磷酸冰浴研磨， 10000 g离心15 min，残渣加入4 ml 0.2%偏磷酸再提取，合并上清液，定容至10 ml，经0.45μm滤膜过滤后待测。每个样品重复5次。维生素C在240 nm波长时有最大吸收峰，故以240 nm作为检测波长。以0.2%偏磷酸为流动相。分别吸取标准溶液1 ml、2 ml、4 ml、6 ml、8m，l各自定容至10 m，l从中分别吸取10.0μl进样分析，以峰面积(mv)为纵坐标，标样浓度(mg·ml-1)为横坐标，绘制标准溶液曲线，计算线性回归方程的回归系数和截距。将样品溶液分别进样10.0μl进行液相色谱分析，测定维生素C的色谱峰面积，代入标准曲线计算出维生素C含量。
4.3测定方法评价
高效液相色谱法具有高效、快速、稳定、结构准确、操作简便等特点。该法分离时间短，对结构不稳定的维生素C尤为适合，还特别适用于颜色较深的提取液样品的测定，成为近年来较受欢迎的维生素C测定方法。缺点是所用仪器较为昂贵。

㈨ 测定食品中维生素C含量时往往会受哪些因素影响有什么解决措施

几种常见的检测方法进行简要的叙述。 
维生素C的测定方法 1. 滴定分析法 
采用滴定法测定维生素C的原理主要是利用维生素C的氧化还原性质，通过化学反应，选择合适的指示剂，根据样品溶液颜色的变化判定终点。常见的方法有 2,6-二氯吲哚酚滴定法(又称染料法)和碘量法等。其中 2,6-二氯吲哚酚滴定法的基本原理是：在酸性环境中，红色的2,6-二氯吲哚酚与维生素C反应被还原为无色的酚亚胺，以2,6-二氯吲哚酚染料为滴定剂，用滴定剂自身的颜色变化指示终点，当溶液中的维生素 C刚好被全部氧化时,溶液呈浅红色, 30s内不褪色,即为滴定终点,其反应式如图2所示。滴定分析法快速、准确、方便，可用于测定水果中少
量的维生素C。但当样品中含有 Fe(II)、Sn(II)、Cu(I)、SO2、S2O32−
等离子和富含丹宁酸、甜菜苷时，由于这些物质本身也有还原性，也会与氧化剂发生氧化还原反应，而使测定结果不准确。因此滴定分析法往往只适用于测定不含 L-脱氢抗坏血酸( DHA)、花青素含量较低及不含还原性离子的样品。 
2. 光度计法 
光度法测定样品中维生素C含量的原理大多利用显色剂与维生素C发生的氧化还原反应，通过测定溶液的吸光度建立标准曲线来测定样品维生素C的含量。然而，由于总抗坏血酸的局限性，例如GB/T12392-1990只能测定脱氢抗坏血酸。而对于还原型抗坏血酸测定，GB5009.159-2003则采用抗坏血酸与固蓝盐B( Fast blue salt  B)反应生成黄色的草酰肼-2-羟基丁酰内酯衍生物，在最大吸收波长420nm测定吸光度来检测。采用亚甲蓝褪色光度法也能够方便的测定维生素C，具有良好的选择性。利用抗坏血酸对于Cu(II)具有专一的还原作用，在Cu(II)的存在下，抗坏血酸将 Cu(II)迅速还原成 Cu(I)，Cu(I)与新亚铜灵(2,9-二甲苯-1,10菲绕啉)络合生成黄色水溶性物质，并在分光光度计下测定。此类方法结果可靠，重现性好，能准确测定维生素 C的含量，但如果待测液本身有颜色时，吸光度会受到影响，进而影响测定结果的准确性，且耗时较长。 
3. 电化学法 
电化学分析法是利用维生素C在电极上发生氧化反应而进行测定的。维生素 C在电极上失去  2个电子和 2个氢离子被氧化形成脱氢抗坏血酸，经过不可逆的水合作用形成脱氢古落糖酸。常用的工作电极有金属电极、石墨电极等，但维生素 C在此类电极氧化需要较高的氧化电位，在检测过程中易受到其它物质的干扰。近年来，采用修饰电极来降低氧化电位受到研究者的广泛重视，如纳米粒子金修饰的氧化钛膜电极(Au/Ti O2/Ti)，聚吡咯修饰的分子印迹(MIP)石墨电极等，大大提高了检测方法的灵敏度和选择性。电化学分析法具有分析速度快，操作简便、成本低、试剂用量少等优点，还可以与液相色谱、毛细管电泳生物传感器等联用来提高测定方法的灵敏度。其缺点是对样品前处理要求较高，操作较为繁琐。4. 化学发光法(CL) 化学发光法(CL)是利用维生素C与高锰酸钾、K2Cr2O7、Fe或铁氰化合物等发生氧化反应，并与鲁原子吸收光谱法(AAS)间接测定维生素 C的含量米诺(Luminol)或光泽精(Lucigenin)化学发光体系进行反应偶合来测定体系的发光强度进行维生素C的测定。Kato等利用在维生素  C中加入  Fe-叶绿酸发光体系发生淬灭来测定微量的维生素C, 化学发光法具有易操作、线性范围宽和灵敏度高的优点，是一种有效的痕量分析方法。5.流动注射分析法(FIA) 流动注射分析法(FIA)是将有色(或无色但有紫外吸收)溶液作为载流，当被测样品注入载流时，发生化学反应，使载流溶液颜色变淡(或紫外吸收降低)。若载流吸光度的变化与被测物质量具有一定的函数关系，即可以此对被测样品进行定量。流动注射法具有试剂用量少，重现性好，样品自动注射，占用空间少等优点, 特别适用于在大量样品中测定某一种目标分析物。近年来，FIA技术用于维生素  C测定受到很多研究者的关注，实现了快速、自动分析测定维生素C。流动注射系统可以与光谱法、电化学分析、色谱法、荧光法结合，与传统方法相比，大大提高了灵敏度和准确度。6. 液相色谱法(HPLC) 液相色谱法(HPLC)由于其具有灵敏度高、重现性好、操作简便和能实现多种维生素的同时测定等优点已成为近年来应用最广的分离和测定维生素C的方法。基于样品前处理方法、测定色谱条件和检测器的不同采用HPLC测定维生素C含量的方法也不尽相同。常用于测定维生素 C的色谱柱以反相柱为主，检测器包括的紫外(UV)或二极管阵列(PDA)检测器和电化学(EC)检测器等。例如：Maia等采用0.2%的偏磷酸–甲醇–乙腈  (90:8:2)为流动相，C18柱为色谱柱，在254nm波长下对药品中的维生素C含量进行测定。Quiros等，以0.1%(V/V) 的甲酸溶液为流动相，Mediterranea sea 18为色谱柱，在254 nm波长下测定果汁和饮料中维生素 C含量。由于流动相常常要使用含有一定的离子强度的缓冲溶液，故基本无法使用液相色谱–质谱联用技术来测定维生素C的含量。7. 原子吸收光谱法(AAS) 已有一些报道大致分为两类：沉淀法和阳离子树脂交换法。沉淀法的原理是：在酸性介质中维生素C与  Cu及    SCN反应生成一价铜盐  CuCNS (沉淀)，分离后用原子吸收法测铜含量而间接测定维生素C含量]。阳离子树脂交换法是通过维生素C换柱表面将高氧化态金属离子或氧化物 (Fe3+,  MnO2)还原为低氧化金属离子(Fe2+, Mn  )，通过流动注射在阳离子交