毒性毒力的研究方法

❶ 毒理学试验方法有哪些

现代毒理学的研究方法，由于其本身包括众多的分支学科，分别在相应的学科领域里建立了自己的研究方法，现归纳为两大类。(一)实验研究(微观研究)动物实验的方法仍是现代毒理学实验的重要方法之一，传统的毒理学通过整体动物实验已为人类提供了大量的以剂量-效应(反应)为主的数据库，结合人群接触水平对许多化学物质进行了安全性(危险度)评价。
由于外源物的数量巨大，整体动物实验需要消耗大量的时间和经费，也不能满足数以万计的外源化学物质的毒性评价要求，另一方面为了保护动物，尽量减少动物的使用，所以由过去以整体动物试验占主导地位的观念，转向以体外试验为主导地位的趋势。但也需指出，体外试验的发展并不排斥整体实验的重要性，两者相互补充，互为验证才能为科学研究提供可靠数据，随着生命科学的发展，分子生物学的理论及技术被引入现代毒理学，近年来在分子水平上建立了许多新方法。

1．体内试验
哺乳动物体内试验，也称整体动物实验，一般包括：急性毒性试验、亚急性毒性试验、亚慢性毒性试验及慢性毒性试验。还有特殊毒性实验，如哺乳动物致突变试验、致畸试验、致癌试验。以上试验在毒理学中统称“三性”和“三致”试验。

常用的试验动物：大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、家兔、狗、猴等。检测环境污染物的毒性试验，常选用鱼、蚤类或其他水生生物。还可用鸟类、昆虫进行试验。
近年来为了从分子水平探讨致突、致癌机制，转基因动物已开始在毒理学试验中应用。
转基因动物是一种集整体水平、细胞水平和分子水平于一体的实验动物，更能体现生命整体研究的效果，它是把经典的与现代的毒理学研究方法相结合，无疑会推动现代毒理学实验研究的发展。
2．体外试验
利用游离器官、培养的细胞、细胞器以及利用微生物等进行毒性研究的方法为体外试验，此方法多用于观察外源物对生物体特殊毒性的初步筛检及作用机制和代谢转化过程的深入研究。

体内与体外试验各有优点和局限性，应根据试验目的和要求，选择一组试验，才能互相弥补优缺点。(二)人群调查(宏观研究)人群调查也称为人群毒理学，是在人群中研究外源物对人体产生毒作用的规律，为人群检测和制订预防措施提供比动物试验更直接更可靠的毒理学资料，主要包括以下3个方面：
1．中毒临床观察
常见于偶然发生的事故，如误服、自杀、毒性灾害等，通过急性中毒事故的处理和治疗，可直接观察到中毒的症状并分析可能的毒效应的靶器官。

2．志愿者试验
在不损害人体健康的原则下，有时可设计一些不损害人体健康的受控试验，仅限于低剂量、短时期的接触毒性作用可逆的化学品，目前国际上提倡健康志愿者的毒性试验，减少由动物试验结果外推于入的不确定性，特别是一些神经毒物出现的毒性效应，如头晕、目眩、复视等需要表达的中毒症状，只有人才能真实地反映出来，所以国外健康志愿者的毒理学研究资料倍受重视。

3．流行病学调查
将动物试验的结果，进一步在人群调查中验证，可以从人群的直接观察中，取得动物试验所不能获得的资料，优点是接触条件真实，观察对象是一个大的群体，为人群检测和防治措施提供比动物试验更直接、更可靠的科学资料，但是也存在许多难点：①人群中观察外源物的毒性效应大多数为慢性毒性效应，特别是人类致癌物质其致癌效应所需时间过长；②接触人群中所用的观察指标是非特异性的，与对照人群比较需要足够例数：③外环境因素混杂，外源物的种类繁多而且多种化学物质可出现联合作用，难以确定某种特定的化学物质毒性效应和其因果关系。
近年来由于分子生物学的发展和渗透，在传统流行病学调查方法中引进了细胞、分子水平的人群检测方法，如生物标志物作为癌症早期判断的信息，把分子生物学与流行病学结合为一体发展为分子流行病学。这门新兴学科利用分子生物学、分子遗传学、生物化学、免疫学等手段研究，评价不同人群或个体致癌危险度及其机制，从而使现代毒理学由实验动物研究发展到人群和个体易感性研究的新阶段。
它可以解答人体从接触化学物质到发生疾病的过程中所发生的一系列连续性的变化，从中提取更多的癌前病变的信息，为癌症的早期判断、早期防治提供科学依据。可以预测，分子流行病学在21世纪将会得到更大的发展。
综上所述，正确的方法是将宏观研究与微观研究有机地结合起来，宏观研究为微观研究提供线索，微观研究为宏观研究提供依据，两者结合起来才能对外源化学物质作出准确的危险度评价。

❷ 怎样测定药剂的毒力

一种有效的药剂作用于生物体后，生物体必然要产生相应的反应。在其他条件固定时，这种反应与该药剂的剂量相关。严格地讲，剂量应该是生物个体或生物单位体重所接受的有效成分的量。但由于种种原因，在一般毒力测定中不易得到准确的剂量，尤其是以生物群体为施药对象时，更是如此。所以，有时生物测定中所用药剂的浓度和处理时间可笼统称为剂量，当处理时间固定时，浓度即具有剂量的意义。在一定剂量下，病、虫、草所表现的中毒现象称为反应。在进行毒力测定时取样的供试生物种群中，各个体由于种种原因对药剂的反应是有差别的。实验证明，有少数个体忍受力较强或很强，也有少数个体比较敏感或高度敏感。因此，用逐渐增加的系列剂量测定时，所得供试生物反应（例如死亡）的百分比应增加。如果以剂量数值为横轴，死亡百分率为纵轴，做成的曲线为非对称的S形曲线。如果将剂量数值换算成对数值，曲线则变成对称的S形曲线。如果再将死亡百分率换算成几率值，则剂量反应曲线变成为直线，称为剂量对数－几率值直线。

所谓几率值就是几率的单位，总共分为10个单位（1～10），其实质就是常态分布的平均值加减标准误差所得的数值范围。剂量反应曲线绘成直线，是为了更准确地求出代表大多数生物个体对药剂反应的平均值，即致死中量（LD50）。在比较药剂的毒力、毒性时，经常要采用致死中量，否则不能代表大多数生物个体的反应情况。另外，毒力还可用LC50、EC50或ED50等来表示。

单独只用LD50或EC50来比较各药剂的毒力有时还是不够的，常还要对直线的坡度角进行观察。坡度角的大小反映供试生物群体对某些药剂敏感性的集中性和分散性。坡度角大则集中程度高，坡度角小则分散程度高。所以，有时除比较LD50值外，还要比较LD95值。

由于供试生物个体的内在因素以及毒力测定时条件控制上的变化，有时会影响以致死中量来进行比较的准确性，因此，可用相对毒力指数来比较。即每次试验均设标准药剂处理，求出各次试验中各种药剂与标准药剂的比值，然后进行比较。计算公式如下：

❸ 菌种的毒力试验和毒理试验的区别

毒力是说毒性有多强——多大剂量足够造成破坏性的后果。
毒理是研究毒性的机理，毒物作用于哪个器官、哪个组织、哪个酶，等等。

❹ 什么叫急性毒性试验为什么这是测定化学物质毒性的常用方法

急性毒性试验是指一次或24小时内多次染毒的试验，是毒性研究的第一步。要求采用啮齿类或非啮齿类两种动物。通常为小鼠或大鼠采用经口、吸入或经皮染毒途径。急性毒性试验主要测定半数致死量（浓度），观察急性中毒表现，经皮肤吸收能力以及对皮肤、粘膜和眼有无局部刺激作用等，以提供受试物质的急性毒性资料，确定毒作用方式、中毒反应，并为亚急性和慢性毒性试验的观察指标及剂量分组提供参考。
一、概念和试验目的
(一) 急性毒性概念
急性毒性是指机体(人或实验动物)一次(或24小时内多次)接触外来化合物之后所引起的中毒效应，甚至引起死亡。
但须指出化合物使实验动物发生中毒效应的快慢和剧烈的程度，可因所接触的化合物的质与量不同而异。有的化合物在实验动物接触致死剂量的几分钟之内，就可发生中毒症状，甚至死亡。而有的化合物则在几天后才显现中毒症状和死亡，即迟发死亡。此外，实验动物接触化合物的方式或途径不同，“一次”的含义也有所不同。凡经口接触和各种方式的注射接触，“一次”是指在瞬间将受试化合物输入实验动物的体内。而经呼吸道吸入与经皮肤接触，“一次”是指在一个特定的期间内实验动物持续地接触受试化合物的过程，所以“一次”含有时间因素。
(二) 实验目的
1.求出受试化合物对一种或几种实验动物的致死剂量(通常以LD50为主要参数)，以初步估计该化合物对人类毒害的危险性。
2.阐明受试化合物急性毒性的剂量－反应关系与中毒特征。
3.利用急性毒性试验方法研究化合物在机体内的生物转运和生物转化过程及其动力学变化。也可用于研究急救治疗措施。
二、实验动物和染毒方法
(一) 实验动物选择
在卫生毒理学领域中，体内试验以实验动物为研究对象，最终是为了阐明受试外来化合物对人的急性危害性质和危害强度。所以选择实验动物时，要求在其接触化合物之后的毒性反应，应当与人接触该化合物的毒性反应基本一致，虽然利用任何一种或几种实验动物的急性毒性结果向人外推都必须十分慎重，但这一选择实验动物的原则仍非常重要。
1.物种选择以选择哺乳动物为主。目前实际应用中以大鼠和小鼠为主，尤以大鼠使用很多。需指出大鼠并非对外来化合物都最敏丅感。家兔常用于研究化合物的皮肤毒性，包括对粘膜的刺激。猫、狗也用于急性毒性试验，但因价贵不易于大量使用。猪为杂食动物，对一些化合物的生物效应表现与人有相似之处，尤其是皮肤结构与人较近似。但因体大、价贵，不便大量使用。
归纳起来，在进行化合物急性毒性研究中，选择实验动物的原则是：尽量选择对化合物毒性反应与人近似的动物；易于饲养管理，试验操作方便；易于获得、品系纯化，且价格较低的动物。为了有利于预测化合物对人的危害，要求选择两种以上的实验动物，最好一种为啮齿类，一种为非啮齿类，分别求出其急性毒性参数。
一般研究外来化合物急性毒性，需雌雄两性动物同时分别进行，每个剂量组两性动物数相等。急性毒性使用小鼠体重以18~25g、大鼠180~240g、豚鼠200~250g、家兔2~2.5kg、猫1.5~2.0kg左右为宜。
(二) 实验动物喂养环境
实验动物喂养室室温应控制在22±3℃，家兔可控制在20±3℃，相对湿度30%～73%，无对流风。每笼动物数以不干扰动物个体活动及不影响试验观察为度，必要时需单笼饲养。饲养室采用人工昼夜为好，早6点至晚6点进行12小时光照，其余12小时黑暗，一般食用常规试验室饲料，自由饮水。
(三) 实验动物染毒方法
1.经口(胃肠道)接触目的是研究外来化合物能否经胃肠道吸收及求出经口接触的致死剂量(LD50)等。由于外来化合物可以污染饮水及食物，因此，此种染毒方式在卫生毒理学中占有重要地位。
(1) 灌胃是将液态受试化合物或固态、气态化合物溶于某种溶剂中，配制成一定浓度，装入注射器等定量容器，经过导管注入胃内。
在每一试验系列中，同物种实验动物灌胃体积最好一致，即以单位体重计算所给予的毫升数应一致，即ml/kg或ml/g计。这是因为成年实验动物的胃容量与体重之间有一定的比例。按单位体重计算灌胃液的体积，受试化合物的吸收速度相对较为稳定。小鼠一次灌胃体积在0.2~1.0ml/只或0.1~0.5ml/10g体重较合适，大鼠一次灌胃体积不超过5ml/只(通常用0.5~1.0ml/100g体重)，家兔不超过10ml/2kg体重，狗不超过50ml/10kg体重。

❺ 请问毒力、毒性、药效和防治效果的区别和联系是什么

农药其所以对有害生物具有防治效果，除了一些特异性杀虫剂外，基本都是由于药剂对生物体具有直接的毒杀作用或致毒效应。农药的毒性程度常以毒力或药效作为评价的指标。毒力是指药剂本身对不同生物发生直接作用的性质和程度。一般是在相对严格控制条件下，用精密测试方法，及采取标准化饲养的试虫或菌种及杂草而给予各种药剂的一个量度，作为评价或比较标准。毒力测定一般多在室内进行，所测定结果一般不能直接应用于田间，只能提供防治上的参考。药效是药剂本身和多种因素综合作用的结果。不同的剂型、不同的寄主植物、不同的有害生物防治对象、不同的使用方法以及各种田间环境因素，都与药剂作用效果有密切的、不可分割的关系。药效多是在田间条件下或接近田间的条件下紧密结合生产实际进行测试的。因此，对防治工作具有实用价值。毒力与药效的含义不同，但又相互联系，相辅相成。

❻ 农药的毒性、毒力和药效之间的相互关系是什么

实际上农药的毒性、毒力和药效是三个不同含义的农药用语。农药的毒性是指药剂对人体、家畜、水生动物和其他有益动物的危害程度；毒力是指农药在较单纯的条件下或在室内人为控制的条件下对病、虫、草、鼠等有害生物毒害的程度；而农药的药效是指农药在田间、试验小区等实际使用中对病、虫、草、鼠等有害生物的防治效果。不过这三者都是对有生命物质而言，因此，农药的毒性、毒力和药效三者之间有着密切的相关性，如有的农药毒性大、毒力也大、药效也好，如对硫磷（1605）、甲拌磷（3911）、涕灭威和克百威等就有这种相关性。但也有不少的农药，毒性低、其毒力和药效都很高，并不存在一定相关性，特别是近年来新发展的超高效品种农药，对人畜的毒性都很低，但对病、虫、草、鼠的毒力和药效却很高，如氰戊菊酯、溴氧菊酯、氯氰菊酯、甲霜灵、三唑酮、三唑醇、烯效唑、绿黄隆、甲黄隆、稻无草、苯磺隆等，上述这些药剂每亩使用量多则几克，少则还不到1克，就能有效的防除为害林业生产的有效生物。这种高效、低毒农药是今后农药发展的方向。

❼ 病原微生物毒力减弱的方法有哪些

(一)致病性与毒力的概念 病原微生物的致病作用取决于它的致病性和毒力. 1.致病性 又称病原性,是指一定种类的病原微生物,在一定条件下,引起动物机体发生疾病的能力,是病原微生物的共性和本质.病原微生物的致病性是对宿主而言的,有的仅对人有致病性,有的仅对某些动物有致病性,有的兼而有之.病原微生物不同引起宿主机体的病理过程也不同,如猪瘟病毒引起猪瘟,结核分支杆菌则引起人和多种动物发生结核病,从这个意义上讲,致病性是微生物种的特征之一. 2.毒力 病原微生物致病力的强弱程度称为毒力,毒力是病原微生物的个性特征,表示病原微生物病原性的程度,可以通过测定加以量化.不同种类病原微生物的毒力强弱常不一致,并可因宿主及环境条件不同而发生改变.同种病原微生物也可因型或株的不同而有毒力强弱的差异.如同一种细菌的不同菌株有强毒、弱毒与无毒菌株之分. (二)细菌致病性的确定 着名的柯赫法则是确定某种细菌是否具有致病性的主要依据,其要点是：第一,特殊的病原菌应在同一疾病中查到,在健康者不存在；第二,此病原菌能被分离培养而得到纯种；第三,此培养物接种易感动物,能导致同样病症；第四,自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养物. 柯赫法则在确定细菌致病性方面具有重要意义,特别是鉴定一种新的病原体时非常重要.但是,它也具有一定的局限性,某些情况并不符合该法则.如健康带菌或隐性感染,有些病原菌迄今仍无法在体外人工培养,有的则没有可用的易感动物.另外,该法则只强调了病原微生物的一方面,忽略了它与宿主的相互作用是不足之处. 近年来随着分子生物学的发展,“基因水平的柯赫法则”(Koch’s postulates for genes)应运而生.取得共识的有以下几点：第一,应在致病菌株中检出某些基因或其产物,而无毒力菌株中无.第二,如有毒力菌株的某个基因被损坏,则菌株的毒力应减弱或消除.或者将此基因克隆到无毒菌株内,后者成为有毒力菌株.第三,将细菌接种动物时,这个基因应在感染的过程中表达.第四,在接种动物体内能检测到这个基因产物的抗体,或产生免疫保护.该法则也适用于细菌以外的微生物,如病毒. （三）毒力大小的表示方法 在实际工作中,毒力的测定显得特别重要,尤其是在疫苗和血清效价测定及药物疗效研究等工作中,必须先测定病原微生物的毒力.毒力大小常用以四种方法表示,其中最具实用的是半数致死量和半数感染量. 1．最小致死量(MLD) 指能使特定实验动物于感染后一定时间内死亡所需的最小的活微生物量或毒素量. 2．半数致死量(LD50) 指能使接种的实验动物于感染后一定时间内死亡一半所需的活微生物量或毒素量.测定LD50应选取品种、年龄、体重乃至性别等各方面都相同的易感动物,分成若干组,每组数量相同,以递减剂量的微生物或毒素分别接种各组动物,在一定时限内观察记录结果,最后以生物统计学方法计算出LD50.由于半数致死量采用了生物统计学方法对数据进行处理,因而避免了动物个体差异造成的误差. 3．最小感染量(MID) 指能引起试验对象(动物、鸡胚或细胞)发生感染的最小病原微生物的量. 4．半数感染量(ID50) 指能使半数试验对象(动物、鸡胚或细胞)发生感染的病原微生物的量.测定ID50的方法与测定LD50的方法类似,只不过在统计结果时以感染者的数量代替死亡者数量. （四）改变毒力的方法 1.增强毒力的方法 在自然条件下,回归易感动物是增强微生物毒力的最佳方法.易感动物既可以是本动物,也可以是实验动物.特别是回归易感实验动物增强病原微生物的毒力,已被广泛应用.如多杀性巴氏杆菌通过小鼠、猪丹毒杆菌通过鸽子等都可增强其毒力.有的细菌与其他微生物共生或被温和性噬菌体感染也可增强毒力,如魏氏梭菌与八叠球菌共生时毒力增强,白喉杆菌只有被温和噬菌体感染时才能产生毒素而成为有毒细菌.实验室为了保持所藏菌种或毒种的毒力,除改善保存方法（如冻干保存）外,可适时将其通过易感动物. 2.减弱毒力的方法 病原微生物的毒力可自发地或人为地减弱.人工减弱病原微生物的毒力,在疫苗生产上有重要意义.常用的方法有：长时间在体外连续培养传代,如病原菌在体外人工培养基上连续多次传代后,毒力一般都逐渐减弱乃至失去毒力；在高于最适生长温度条件下培养,如炭疽Ⅱ号疫苗是将炭疽杆菌强毒株在42～43℃培养传代育成；在含有特殊化学物质的培养基中培养,如卡介苗是将牛型结核分支杆菌在含有胆汁的马铃薯培养基上每15天传1代,持续传代13年后育成；在特殊气体条件下培养,如无荚膜炭疽芽孢苗是在含50%CO2的条件下选育的；通过非易感动物,如猪丹毒弱毒苗是将强致病菌株通过豚鼠370代后,又通过鸡42代选育而成；通过基因工程的方法,如去除毒力基因或用点突变的方法使毒力基因失活,可获得无毒力菌株或弱毒菌株.此外,在含有抗血清、特异噬菌体或抗生素的培养基中培养,也都能使病原微生物的毒力减弱.

❽ 食品毒理学的研究方法

毒理学的研究方法可分为两大类。一类是微观方法，另一类是宏观方法。根据采用方法的不同，可分为体内实验和体外实验 。
食品毒理学主要是借助于动物模型模拟引起人体中毒的各种条件，观察实验动物的毒性反应，再外推到人。
1.体内试验(in vivotest) ：也称为整体动物试验。可严格控制接触条件，测定多种类型的毒作用。实验多采用哺乳动物，例如大鼠、小鼠、脉鼠、家兔、仓鼠(hamster)、狗和猴等。在特殊需要情况下，也采用鱼类或其他水生生物、鸟类、昆虫等。检测外源化学物的一般毒性，多在整体动物进行，例如急性毒性试验，亚急性毒性试验、亚慢性毒性试验和慢性毒性试验等。哺乳动物体内试验是毒理学的基本研究方法，其结果原则上可外推到人；但体内试验影响因素较多，难以进行代谢和机制研究。
2.体外试验(in vitrotest)：利用游离器官、培养的细胞或细胞器进行毒理学研究，多用于外源化学物对机体急性毒作用的初步筛检、作用机制和代谢转化过程的深入观察研究。体外试验系统缺乏整体毒物动力学过程，并且难以研究外源化学物的慢性毒作用。 (1)游离器官：利用器官灌流技术将特定的液体通过血管流经某一离体的脏器(肝脏、肾脏、肺、脑等)，借此可使离体脏器在一定时间内保持生活状态，与受试化学物接触，观察在该脏器出现有害作用，以及受试化学物在该脏器中的代谢情况。(2)细胞：利用从动物或人的脏器新分离的细胞(原代细胞，primarycell)或经传代培养的细胞如细胞株(cellstrain)及细胞系(cellline)。(3)细胞器(organelle)：将细胞制作匀浆，进一步离心分离成为不同的细胞器或组分，例如线粒体、微粒体、核等，用于实验。
3.限定人体试验：通过中毒事故的处理或治疗，可以直接获得关于人体的毒理学资料，这是临床毒理学的主要研究内容。有时可设计一些不损害人体健康的受控的实验，但仅限于低浓度、短时间的接触，并且毒作用应有可逆性。保健食品的人体试食试验。
4.流行病学调查：通过流行病学调查的方法，不仅可以研究已知环境因素(外源化学物)对人群健康的影响(从因到果)，而且还可对已知疾病的环境病因进行探索(从果到因)。但流行病学研究干扰因素多，测定的毒效应还不够深入，有关的生物学标志还有待于发展。 如突发性大规模食物中毒的调查。
试验目的
急性毒性试验：测定LD50, 了解受试物的毒性强度、性质和可能的靶器官，为进一步进行毒性试验的剂量和毒性观察指标的选择提供依据，并根据LD50进行毒性分级；
遗传毒性试验：对受试物的遗传毒性以及是否具有潜在的致癌作用进行筛选；
致畸试验：了解受试物是否具有致畸作用
30天喂养试验：在急性毒性试验的基础上进一步了解其毒性作用，观察对生长发育的影响，并可初步估计最大未观察到有害作用剂量
亚慢性毒性试验--90天喂养试验：观察受试物以不同剂量水平经长期喂养后对动物的毒性作用性质和作用的靶器官，了解受试物对动物繁殖及对子代的发育毒性，观察对生长发育的影响，并初步确定最大NOAEL和致癌的可能性，为慢性毒性和致癌性试验的剂量选择提供依据；
代谢试验：了解受试物在体内的吸收、分布、代谢和排泄速度及蓄积性，寻找可能的靶器官；为选择慢性毒性试验的合适物种、品系提供依据，了解代谢产物的形成情况。
慢性毒性试验和致癌试验：了解经长期接触受试物后出现的毒性作用以及致癌作用；最后确定最大未观察到有害作用剂量，未受试物能否应用于食品的最终评价提供依据。

❾ 杀菌剂的毒力测定方法具体该怎么操作

一般认为，相同的细菌分子具有毒力。杀菌剂的毒性实际上是其化学分子与细菌生化目标相互作用的结果，这属于化合物对抗特定病原体的内在活性。杀菌剂的毒性是评估其活性的一个重要参数。

为了控制有效的化学物质以控制茎的分解，采用抑制菌丝生长的方法测定了多菌灵等10种化学杀菌剂的室内生物活性。结果表明，丙咪嗪、多菌灵、戊唑醇和丙环唑对菌丝生长的抑制作用最为明显，其EC50分别为0、0.33、0.14和0.16ml；偶氮菌酯、百菌清和异硫脲的抑制作用次之，CE50值分别为10.53、18.17和5.05.mL；代森锰锌、甲霜灵和甲基托布嗪对茎分解没有明显的抑制作用。

❿ 谈谈杀虫剂的毒力，毒性，毒效，药效，防效之间的区别和联系

毒力，药效和防效都是针对目标害虫的；毒性，毒效是针对非目标害虫而言的。