均三嗪的分析方法

① 关于三聚氰胺

三聚氰胺（英文名：Melamine），是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，重要的氮杂环有机化工原料。简称三胺，俗称蜜胺、蛋白精，又叫2,4,6-三氨基-1,3,5-三嗪、1,3,5-三嗪-2,4,6-三胺、2,4,6-三氨基脲、三聚氰酰胺、氰脲三酰胺。

(1)标准样品配制：

取50mg三聚氰胺标准品，以20%甲醇溶解定容至50mL得到1000ppm的标准溶液，使用时，以提取液(0.1%三氯乙酸)稀释至所要的浓度。

(2)提取：

称取饲料样品5g，加入50ml0.1%三氯乙酸提取液，充分混匀，加入2mL2%乙酸铅溶液，超声20min。

然后取部分溶液转移至10mL离心管中，8000rpm/min离心10min，取上清液3mL过混合型阳离子交换小柱(PCX)。

(3)净化(PCX小柱，60mg/3mL)：

a)活化及平衡：3mL甲醇，3mL水

b)上样：加入提取液3mL

c)淋洗：3mL水;3mL甲醇;弃去淋洗液并将小柱抽干。

d)洗脱：5mL5%氨化甲醇(v/v)洗脱。(5%氨化甲醇的配制：5mL氨水+95mL甲醇)。

e)浓缩：50℃，氮气吹干，20%甲醇/水定容至2mL，HPLC分析或衍生后GC/MS分析。

3.2HPLC检测方法

3.2.1三聚氰胺HPLC-UV检测方法

三聚氰胺是强极性化合物，在传统的反相C18柱上保留很差，需要用离子对试剂色谱方法才能有良好的保留与分离，按照美国食品药品监督管理局(FDA)的三聚氰胺检测方法和中国农业部公布的三聚氰胺检测方法，采用艾杰尔(Agela)ASB系列亲水色谱柱，可以得到良好的分离效果，分析色谱图如下：

(a)色谱柱：VenusilASBC84.6×250mm;标准：FDA方法;流动相：缓冲液：乙腈=85：15;缓冲液：10mM柠檬酸，10mM辛烷磺酸钠，调pH为3.0;流速：1.0mL/min;柱温：40oC;波长：240nm

(b)色谱柱：VenusilASB-C184.6×250mm;标准：中国农业部颁标准方法;缓冲液：10mM柠檬酸,10mM庚烷磺酸钠;流动相：缓冲溶液:乙腈=85:15;流速：1.0mL/min;柱温：40℃;波长：240nm

3.2.2三聚氰胺LC-MS检测方法

由于FDA公布的HPLC-UV方法中，流动相添加了离子对试剂，因此限制了液质联用方法的使用;但不用离子对试剂色谱方法，三聚氰胺在传统的C18柱上保留很差，不能得到较好的分离定量〔3〕。

基于此问题，艾杰尔科技公司自主开发了新的方法，采用艾杰尔(Agela)ASB系列亲水色谱柱，不用离子对试剂也能得到有效的保留与分离。因此方法中流动相不含离子对试剂，可以用于质谱检测。

与FDA2007年4月公布的《(HPLC-UV)》相比较，该方法大大降低了最低检测限(MSD：0.5ppm;UV：2ppm)，提高了检测灵敏度。

以该方法分别在ASB-C84.6×250mmASB-C184.6×250mm得到的谱图如下：

图3LC-MS方法检测三聚氰胺的谱图

缓冲液：10mM的NH4AC;流动相：Buffer:：ACN=95：5;流速：1.0mL/min;进样量：样品先用70%ACN溶解成约1mg/mL，用ACN稀释成0.1mg/mL，进10uL;柱温：40℃;波长：240nm

4结果与讨论

4.1阳离子交换柱(PCX)

三聚氰胺呈弱碱性(弱阳离子化合物)，净化过程一般应选择阳离子交换柱。混合型的阳离子交换柱(PCX)通过将磺酸基团(-SO3H)键合在极性高聚物聚苯乙烯/二乙烯苯(PEP)吸附剂上，具有阳离子交换和反相吸附两种机理，并具有以下优点：

a)可通过两种不同溶液的洗涤(水/一定pH值的缓冲溶液和有机溶剂)，使样品更干净，提高检测的灵敏度。

b)批次重复性好。

c)回收率高，重现性好，即使小柱跑干也可以得到较高回收率。

4.2LC-MS方法优点：

(1)检测过程简便：无须添加离子对试剂，三聚氰胺就可得到良好的保留与分离，避免了配制离子对流动相的复杂过程。

(2)提高了检测的灵敏度：无离子对试剂，可以用于质谱检测器，大大降低了最低检测限(MSD：0.5ppm;UV：2ppm)。

(3)降低了检测成本：不用离子对试剂，就不再需要买价格较贵的离子对试剂了，从而降低了检测成本。

(4)延长了色谱柱的使用寿命：避免了使用离子对试剂减少色谱柱寿命的影响。

(5)该方法所使用的色谱柱具有通用性：无论是用FDA方法、中国农业部部颁标准方法和本公司开发的LC-MS方法，使用艾杰尔(Agela)ASB系列亲水色谱柱均能得到一个很好的检测结果，从而给客户提供了多种选择空间。

国家食品质量监督检测中心有关人士说，在现有的国家标准奶粉检测中，主要进行蛋白质、脂肪、细菌等检测。三聚氰胺属于化工原料，是不允许添加到食品中的，所以现有标准不会包含相应内容。也就是说，三聚氰胺不属于常规检测项目，正常情况下，很少有人会想到去检测它。

② 复方阿米三嗪片的药物分析

方法名称：
复方阿米三嗪片—二甲磺酸阿米三嗪和萝巴新的测定—高效液相色谱法
应用范围：
本方法采用高效液相色谱法测定复方阿米三嗪片中二甲磺酸阿米三嗪和萝巴新的含量。
本方法适用于复方阿米三嗪片。
方法原理：
供试品经加流动相超声提取后，提取液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长222nm处检测二甲磺酸阿米三嗪和萝巴新的吸收值，计算出其含量。
试剂：
甲醇
仪器设备：
1. 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按二甲磺酸阿米三嗪和萝巴新分别计算均不低于900。
1.3 紫外吸收检测器
2. 色谱条件
2.1 流动相：甲醇 水 =85 15，每1000mL中加二乙胺5μL。
2.2 检测波长：222nm
2.3 柱温：室温
试样制备：
1. 称取供试品
取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于二甲磺酸阿米三嗪30mg和萝巴新10mg）。
2. 对照品溶液的制备
精密称取二甲磺酸阿米三嗪和萝巴新对照品适量，加流动相溶解并定量稀释制成每1mL约含二甲磺酸阿米三嗪0.3mg和萝巴新0.1 mg的溶液。
3. 供试品溶液的制备
将上述供试品置于100mL量瓶中，加流动相适量，超声处理30分钟，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤：
分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长222nm处测定二甲磺酸阿米三嗪和萝巴新的吸收值，计算出其含量。
参考文献：
中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，二部，p.428。

③ 中国香港化妆品功效检测费用

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化妆品中有害成分检测1.美白产品：对苯二酚、铅、汞、砷、防腐剂等2.类产品：41种糖皮质：、泼尼松、倍他米松、曲安萘德、以及肾上腺素等;性：雌三醇、己烯雌酚、雌二醇、睾丸酮、甲基睾丸酮、雌酮等;铅、汞、砷、镉、防腐剂等。3.防腐剂：甲基氯异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、苯甲醇、苯氧乙醇、苯甲酸，对羟基苯甲酸酯类、氯苯甘醚、三氯生、三氯卡班等4.防晒剂：二苯酮、对氨基苯甲酸、甲氧基肉桂酸乙基己酯、水杨酸乙基己酯、4-甲基苄亚基樟脑、PABA乙基己酯、奥克立林、胡莫柳酯、乙基己基三嗪酮、亚甲基双-苯并三唑基、四甲基丁基酚、双-乙基己氧苯酚、甲氧苯基三嗪等中国香港化妆品功效检测费用化妆品功效试验机构，找微谱。
化妆品作为与人体健康密切相关的产品，其安全性和功效性受到消费者、生产企业和x监管部门的重视，工商行政管理、质量与技术监督、卫生监督、食品与药品等x的负责监管，并颁布了相应的化妆品管理法规。依照不同国家现有的化妆品条例，当化妆品在正常或可被预见的使用情况下，该化妆品不会危害人体健康。合规格的产品标签和产品档案（即技术咨询文档/技术档案）等，必须预先作好受检的准备。其中为了确保化妆品质量的安全，《化妆品卫生规范》共列出在化妆品组分中禁用的化学物质有421种，限用的化学物质有三百余种。其中的物质具有强烈的毒性、致突变性、致x性、致畸性，或者对皮肤、粘膜可能造成明显损伤，或者有特殊的、化妆品中不希望具有的生物活性。微谱旗下化妆品事业部，专业为化妆品品牌商、生产商等提供化妆品成分分析、 配方分析、配方研发、备案申报、检测测试、质量控制、功效评价、毒理评价等技术服务。
检测内容①耐寒耐热：将样品放置在40°C和-5~-15°C的环境中保持24h，观察样品外观，是否变色、分层，pH值、黏度是否超出规定范围。②离心实验：在离心机中以3000转/min的速度离心30min，观察产品是否分层。③色泽稳定性：检验有颜色化妆品的色泽是否稳定，如花露水的色泽稳定性采用干燥箱加热法。④pH值、黏度、浊度：通过pH计、黏度计检测化妆品的pH值和黏度值。，浊度一般直接目测，是否有不溶解的沉淀物出现。⑤微生物指标：化妆品中不得检出的微生物有粪大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌，限制化妆品中霉菌和酵母菌的总数，此外，眼部、口唇类及儿童、婴儿用的化妆品中限制的菌落总数比其他化妆品要低。⑥x物质：化妆品中可能存在的x污染物有汞、铅、砷、甲醇，分别限量在1mg/kg、40mg/kg、10mg/kg、2000mg/kg。化妆品功效宣称评价机构，找微谱。
检测项目：化妆品：微生物指标：菌落总数、霉菌和酵母计数、大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、军团菌等理化指标：总活性物、铅、砷、汞等重金属，甲醇、甲醛、黄曲霉x、耐寒、耐热、磷酸盐、pH、水分含量等毒性试验：鼠伤寒沙门氏菌/细菌回复突变试验、急性经口毒性试验、急性经皮毒性试验酶活性检测：纤维素酶、糖化酶、淀粉酶、蛋白酶、耐热淀粉酶、超氧化物歧化酶（SOD）等安全性检测：杀菌剂、防腐剂、防霉剂和抗菌剂等化妆品配方分析，找微谱。四川化妆品功效评价认证机构
化妆品保湿功能评价，找微谱。中国香港化妆品功效检测费用
化工工业在各国的国民经济中占有重要地位，是许多大国的基础产业和支柱产业，化学工业的发展速度和规模对社会经济的各个领域有着直接影响。私营有限责任公司企业普遍把研发创新能力看作企业重要的重点竞争力，加大研发进度、提升科技水平，并积极构建开放性和国际化的创新体系。配方分析，成分检测，产品研发，认证应用于国民经济和的众多领域中，成为我国化工体系中市场需求增长快的领域之一，近年来很多产品的消费量年均增长都在10%以上。通过服务型的优化和升级，化工行业已经从初期的以“三废治理”为主，发展为包括环保产品、环境服务、洁净产品、废物循环利用，跨行业、跨地区，产业门类基本齐全的产业体系。中国香港化妆品功效检测费用