比较光学分析六种方法

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Ⅱ 光度分析的方法

光度分析的方法
（1）目视比色法
用眼睛比较溶液颜色的深浅以确定待测组分含量的方法，称为目视比色法。最常用的是标准系列法。它是用一套质料相枯渗同、大小形状相同、带有刻度、等体积的比色管组成。将一系列不同体积的标准溶液依次加入比色管中，取一定量的待测溶液置于另一比色管中，然后分别加入等量的显色剂及其它试剂，最后用水稀释至刻度（比色管容量有10、25、50、100mL等几种）。摇匀并放置一定时间待反应达平衡后，从管口垂直向下观察，比较待测液与标准溶液颜色的深浅。若待测液与某一标准液颜色深度一致，则说明两者浓度相等；如果待测液的颜色深度介于某相邻两标准之间，则取其平均值作为待测液的浓度。
目视比色法仪器简单、操作简便、灵敏度也较高、显色反应如不遵从比耳定律也能进行。因而它被广泛应用于准确度要求不高的常规分析野搜中。
目视比色法的主要缺点是准确度不高，如果待测溶液中存在第二种有色物质，甚至无法进行测定。另外，由于许多有色溶液颜色不够稳定，标准系列不能久存，经常在测定时需同时配制。
（2）光度分析法
通常，将使用光电比色计测定有色溶液的吸光度进行定量分析的方法称为光电比色法，将使用分光光度计进行测定的方法称为分光光度法。两种方法的测定原理是相同的，所不同的仅在于获得单色的方法不同，光电比色法是采用滤光片，而分光光度法是利用棱镜或光栅单色器。由于两者均基于吸光度的测定，所以可统称为光度分析法。操作步骤都是测量一系列标准溶液的吸光度，绘制工作曲线。并在相同条件下，测量待测试样的吸光度，由工作曲线上查出试样中待测物的含量。
光度没脊脊法与目视比色法比较，具有下列优点：
a.使用仪器代替人眼进行测量，消除了人工的主观误差，从而提高了准确度。
b.测定溶液中有其它有色物质共存时，可以选择适当的单色光和参比溶液来消除干扰，因而可提高选择性。
c.使用标准曲线法可简化手续，加快分析速度。

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Ⅲ 光学分析法有哪些类型

光学分析法是基于物质对光的吸收或激
发后光的发射所建立起来的一类方法，
比如紫外-可见分光光度法，红外及拉曼
光谱法，原子发射与原子吸收光谱法，
原子和分子荧光光谱法，核磁共振波谱
法，质谱法等。

Ⅳ 光学分析的分类

光学分析可分为非光谱法及光谱法两大类方法。 分子信标技术是荧光分析方法在DNA检测领域的又一延伸。分子信标的概念是1996年由Tyagi等提出的。分子信标是一段与特定核酸互补的DNA探针，空间结构上呈“发夹”结构，其中环序列是与靶DNA互补的探针；茎的一端连接上一个荧光分子，另一端连上一个淬灭分子。当靶序列不存在时，分子信标呈“发夹”结构，茎部的荧光分子与淬灭分子非常接近（7～10nm），荧光分子发出的荧光被淬灭分子吸收，此时检测不到荧光信号；当有靶序列存在时，分子信标的环序列与靶序列特异性结合，形成稳定的双链体线性结构，此时荧光分子与淬灭分子分开，产生可被检测的荧光信号。分子信标技术具有背景信号低、灵敏度高、特异性强等优点，在DNA检测中有着广阔的应用前景。目前，分子信标技术已应用于PCR靶标的实时荧光定量检测。Perlette等在袋鼠肾细胞质中注入分子信标，实时检测了活细胞中的RNA及RNA/DNA杂交过程。通过选择不同的荧光分子-淬灭分子对，可设计出多色分子信标，荧光系统检测到不同颜色的荧光，可实现多个靶序列的同时检测。另外，可利用金表面对荧光的淬灭作用，将荧光标记的“发夹”分子固定在金表面，没有靶序列时荧光被金表面淬灭，有靶序列杂交后产生荧光。
实际上，分子信标是一种基于荧光能量转移（FRET）的技术。荧光能量转移是指当荧光给体和受体间的分子距离足够近时，发生分子间的能量转移，荧光从一个分子向另一个分子转移。因为DNA的存在可影响体系的能量转移，引起荧光强度的改变，荧光能量转移技术在DNA检测中有着广泛的应用。高峰等研究了吖啶橙-罗丹明B二聚体能量体系作为荧光探针用于DNA的测定。Bazan等在带正电的共轭聚电解质(cationicconjugatedpolymers，CCP）中加入荧光标记的肽苷酸（PNA-C*），由于PNA本身不带电，不会和共轭聚电解质发生作用。当溶液中加入和PNA互补的DNA时，DNA带有很强的负电荷，会和带正电的共轭聚电解质形成复合物，同时DNA和荧光标记的肽苷酸杂交，形成共轭聚电解质-DNA-(PNA-C*）的三元复合物，拉近了共轭聚电解质和荧光探针C*荧光强度即可判断出是否有待测DNA。 常用的比色法有两种：目视比色法和光电比色法，两种方法都是以朗伯-比尔定律（A=εbc）为基础。常用的目视比色法是标准系列法，即用不同量的待测物标准溶液在完全相同的一组比色管中，先按分析步骤显色，配成颜色逐渐递变的标准色阶。试样溶液也在完全相同条件下显色，和标准色阶作比较，目视找出色泽最相近的那一份标准，由其中所含标准溶液的量，计算确定试样中待测组分的含量。
光电比色法是在光电比色计上测量一系列标准溶液的吸光度，将吸光度对浓度作图，绘制工作曲线，然后根据待测组分溶液的吸光度在工作曲线上查得其浓度或含量。与目视比色法相比，光电比色法消除了主观误差，提高了测量准确度，而且可以通过选择滤光片来消除干扰，从而提高了选择性。但光电比色计采用钨灯光源和滤光片，只适用于可见光谱区和只能得到一定波长范围的复合光，而不是单色光束，还有其他一些局限，使它无论在测量的准确度、灵敏度和应用范围上都不如紫外-可见分光光度计。20世纪30～60年代，是比色法发展的旺盛时期，此后就逐渐为分光光度法所代替。

Ⅳ 三种常用的光谱分析方法

三种常用的光谱分析方法如下：

光谱分析法指的是物质的一类分析方法，主要有原子发射光谱法、原子吸收光谱法、紫外-可见吸收光谱法、红外光谱法等。

其在饲料加工分烂睁析领域应用相当广泛，特别是在测定饲料中的铅、铁、铅、铜、锌等离子的含量中的应用。荧光分析也是近年来发展迅速的痕量分析方法，该方法操作简单、快速、灵敏度高、精密度和准确度好，并且线形范围宽，检出限低。