㈠ 核酸蛋白检测仪步骤
核酸蛋白检测仪使用并不难,那么核酸蛋白检测仪步骤是什么呢?
在仪器使用前,首先连接好所需配套仪器:层析柱、恒流泵、自动部分收集器、记录仪(色谱工作站)。将各类插头与插座接妥(220v电源)。按下检测仪on电源开关,电源指示灯亮,说明整台仪器电源开始工作,然后观察光源指示灯,如果亮了,表示光源已开始工作,整台仪器可进入工作状态,将检测仪波长旋钮旋到所需波长刻度上,把量程旋钮拨到100%t档(仪器预热20分钟,待基线平直后可加样测试)。
接通记录仪电源开关,使电源开关拨到“通”指示灯亮。可根据记录仪说明书调换不同的纸速度,用户根据需要自行掌握,测量用10mv档。此时记录仪指针从零点开始向右移动某一刻度,调节检测仪“光量”旋钮使指针停腔穗竖留在记录仪大约中间位置5mv左右数字显示为50左右。
把检测分析仪器进样口聚乙烯塑料管接到恒流泵上,使凝胶层析柱中缓冲液流过检测仪(恒伍大流泵流量视凝胶层析柱大小选1-3ml/min)。用“调零”调整吸光度a值为0(量程开关拨到100%t调节光量旋族携钮,使记录仪指针在10mv数字显示为100,即透光率为100%。把量程开关拨到“0.0”档,缓慢调节a调零旋钮,使记录仪指示在“o”位,检测仪显示为“o”)。以上步骤结束,析系统平衡后即可用洗脱液开始洗脱样品,洗脱前再调一次吸光度0点。
㈡ 核酸和蛋白质序列分析的内容和方法有哪些
核酸和蛋白质序列分析的内容和方法有哪些
蛋白质结构分析方法:X射线晶体衍射分析和核磁共振
x 射线衍射法的分辨率可达到原子的水平,使它可以测定亚基的空间结构、各亚基间的相对拓扑布局,还可清楚的描述配体存在与否对蛋白质的影响。多维核磁共振波谱技术已成为确定蛋白质和核酸等生物分子溶液三维结构的唯一有效手段。NM R技术最大的优点不在于它的分辨率,而在于它能对溶液中和非晶态的蛋白质进行测量。
蛋白质的序列结构测定:
1.到目前为止,最经典的蛋白质的氨基酸序列分析方法是,sarI等人基于Edman降解原理研制的液相蛋白质序列仪,及后来发展的固相和气相的蛋白质序列分析仪。
2.质谱:早期的质谱电离的方式主要是电子轰击电离(EI),它要求样品的挥发性好,一般与
气相色谱联用。但使用G C/M S分析,肽的长度受到限制,只能分析小的肽段。近年来,
在离子化的技术及仪器方面取得了突破性进展,使得质谱所能测定的分子量的范围大大超
出了10k u。因此,软离子化技术、基质辅助的激光解吸/离子化(MALDI)和电喷雾离子化(E SI)显得尤为有前途。通过串联质谱技术(MS/MS)和源后衰减基质辅助的激光解吸/离子化(PSD—MAIDI—MS),人们就可以从质谱分析中获得肽及蛋白质的结构信息。
㈢ 核酸提取仪的主要步骤及方法
1. 环境温度:5℃~40℃;环境相对湿度;电压:50%~80%范围:100~240Vac,50/60 Hz。
2. 将仪器放在水平实验台上。
3. 放置仪器时应保证仪器周围10cm内无障碍物;多台仪器同时使用时,每台仪器之间的距离应不小于50cm。
4. 仪器主机通电之前,必须先用六角扳手取下磁棒架固定螺丝,否则通电运行将会损坏仪器。
5. 96孔板和磁力棒套的安装必须与对应的卡槽完全契合。
6. 请勿将该仪器安放在过度潮湿、高温或阳光直射等温度变化剧烈的区域,这可能会影响仪器的性能。
7. 请勿和其它大功率器件如离心机、空调等共用同一电源插座以免电源电压波动影响系统运行。
8. 请将适配器连接到仪器,把适配器与电源插座相连,并打开仪器开关。
9. 请勿在有潜在有害液体或气体的环境中操作该仪器。
10. 本仪器详细操作步骤,请参阅以下的说明。
1.5注意事项
1. 仪器应放在湿度低、灰尘少并远离水源的地方,室内应通风良好,仪器后方勿紧靠墙壁或堆放其他物品,以免影响散热。
2. 实验运行过程中禁止直接关闭电源开关。如果需要提前停止实验,请先在触屏软件上点击停止运行并确认后再关闭电源。
3. 裂解孔、洗涤孔和洗脱孔的样本体积应在50μL-1000μL,避免体积过多,溢出孔位。
4. 机器运行及测试进行时,请勿触摸加热条,以免烫伤。
5. 紫外灯开启灭菌时,请勿直视紫外光。
6. 移动仪器之前,请先切断电源,再用螺钉固定磁棒架。
7. 仪器长期不使用时,请拔掉插头,并用软布或塑料袋覆盖仪器,以防止灰尘进入。
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