Ⅰ 血球计数板的计数公式
红细胞数/L=N×5×10×稀释倍数。N为:五个中方格的RBC总数。
计数需要注意的:
1、目镜测微尺每格长度=两个重叠刻度间物镜测微尺格数×10/两个重叠刻度间目镜测微尺格数。
2、以同样方法,分别在不同倍率的物镜下测定测微尺上每格的实际长度。
3、如此测定后的目镜测微尺的尺度,仅适用于测定时所用的显微镜的目镜和物镜的放大倍数。若更换物镜,目镜的放大倍数时,必须再进行校正标定。
(1)血细胞分析仪计数方法扩展阅读
血球计数板优点:此法是在显微镜下直接进行测定,方便快捷并且仪器损耗较小。
血球计数板缺点:在一定的容积中的微生物的个体数目包括活细胞均被计算在内,还有微小杂物也被计算在内。这样得出结果往往偏高。这种方法常用于形态个体较大的菌体或孢,若是观测细菌或是霉菌,就要换成油镜了!
参考资料
网络-血球计数板
Ⅱ 细胞计数的方法
你好,很高兴为你解答:
显微镜直接计数法:
显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。细胞(英文名:cell)并没有统一的定义,比较普遍的提法是:细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成,但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。
Ⅲ 血细胞怎么做计数实验
实验
目的原理 了解血细胞计数的原理并掌握红细胞、白细胞、血小板计数的方法,红细胞计数结果结合血红蛋白值还可以计算出红细胞平均血红蛋白量(MCH)可作为生理机能检查和临床诊断的指标。用相应的稀释液将血液稀释若干倍(另有抗凝、固定、着色作用),置于计数室中,在显微镜下计数一定容积内的血细胞数。 稀释血液有血细胞吸管法和试管法,本实验采用后者。
实验对象与用品 鸡或家兔。血细胞计数板、专用盖玻片、吸血管、显微镜、手揿计数机、血细胞稀释液、拭镜纸、毛笔。
方法步骤
(一)熟悉计数室
血细胞计数板系一长方形厚玻片,常用的改良牛氏(Improved-Neubauer) 计数板在中央横沟的两边各有一计数室,两计数室结构完全相同。计数室较两边的盖玻片支柱低0.1毫米。因此,放上盖玻片时,计数板与其间距即计数室空间的高为0.1毫米(图8-1)。在低倍显微镜下可见计数室被双线划分成9个边长为1毫米的大方格。四角的大方格又各分为16个中方格,这是用来计数白细胞的。中央大方格被划分为25个中方格,每一中方格又划分成16个小方格(图8-2称25×16,也有的计数板为16×25的,小方格面积一致)。中央大方格的四角及中心5个中方格(16×25者则为四角上的中方格)为红细胞或血小板计数范围。
(二)红细胞计数
先用试管稀释法制备禽类血细胞悬液:将禽类红细胞稀释液Ⅰ、Ⅱ分别置水浴锅中预热到41~42℃,取Ⅰ液1mL于试管中,用吸血管加入新鲜鸡血(或肝素抗凝血)20霯,再加入Ⅱ液1mL混匀,置该水浴锅中保温50s左右,置室温,即为待检的血细胞悬液。可用于充液计数。取干洁的计数板,置于水平的显微镜载物台上,盖上盖玻片,使两侧各空出少许。摇匀血细胞悬液,用滴管吸取,将滴管尖轻轻置于盖玻片边缘外,让滴出的血细胞悬液凭毛细管作用吸入计数室内,刚好充满计数室为宜(图8-3)。静置2min后计数,先用低倍镜观察,不均匀则抛弃。计数时用虹彩、集光器、反光镜等调节入射光角度和强度,认清 计数室位置。采用“由上至下,由左至右,顺序如弓”的顺序,对压边线细胞采取“数上不数下,数左不数右”的原则(图8~4)。依次计数并记录5个中方格中分别有多少个红细胞。
(三)血小板计数
采取血液并立即与抗凝剂混合(由于血小板具有趋向于凝集和粘附于异物表面的特性)。以血小板稀释液(10%EDTANa2 10mL与0.8%NaCl90mL组成)将血液稀释200倍,混匀后滴入血细胞计数室内,静置15min,待血小板下沉后。于高倍镜下计数(同红细胞 计数)。在高倍镜下血小板呈椭圆形、圆形或不规则的折光小体分布于红细胞间,注意与杂质相区别。也可用复方尿素稀释液稀释血液,应静置20min以上,待红细胞充分溶解后再充液计数。
(四)计算
按计数室构造及血液稀释倍数,将血细胞计数结果换算成每立方毫米中血细胞的个数。以每100mL血液中的血红蛋白量(g)乘以10再除以红细胞数(106/mm3)得红细胞平均血红蛋白量(MCN,单位μμg)。
(五)仪器洗涤
计数板、盖玻片和测定管用清水冲洗,再用绸布或细布沾干。
要求与思考题
1.计算结果,报告中简要说明计算过程。求出本组同学测定的均值并评价之。
2.了解各类稀释液成分,分析各物质的作用。
注意事项
1.充液前应充分混匀血细胞悬液,充液要连续、适量,充液后应待血细胞下沉后再计
数。
2.计数板、盖玻片、吸血管及测定管等用过后必须立即按要求洗涤干净。
组织建议 将相同类型的计数板集中在一个组内,便于指导。本实验属于基本操作,各位朋友均应独立操作得出结果。
附注:
1.本法可同时计数禽类白细胞数,计算方法也类似。
2.禽类血细胞稀释液为:
Ⅰ液
中性红 25.0mg
NaCl 0.9g
加蒸馏水至100.0mL
Ⅱ液
结晶紫 12.0mg
柠檬酸钠 3.8g
福尔马林 0.8mL
加蒸馏水至100.0mL
3.哺乳类红细胞稀释液可用生理盐水或阿扬(Hayem)氏液(NaCl 1g,Na2SO4·10H2O 5g,HgCl2 0.5,加蒸馏水至200mL过滤)。白细胞稀释液成分为冰醋酸0.1mL,1%龙胆紫1mL加蒸馏水至100mL,或直接用2%醋酸溶液。
4.血小板复方尿素稀释液配方为:尿素10g,柠檬酸钠0.5g,甲醛0.1mL,加蒸馏水到100mL,混合,待完全溶解后过滤。置冰箱内可保存1~2周。
Ⅳ 关于血球仪的测量方法
血球仪的测量方法:
1、采血
血液分析一般要求用抗凝的静脉血,尽可能不用末梢皮肤穿刺采血。因为不同部位皮肤穿刺血的细胞成分及细胞与血浆的比例常不一致,与静脉血的差别更大。从技术角度讲,毛细血管采血量较少,全自动的血液分析仪需血量较大,不易采到足够量,更不能在需要的时候进行重复检查,因此除了少数不易取静脉血如婴儿、大面积烧伤的病人及某些需要经常采血检查的病例,如白血病、肿瘤放疗或化疗病人外,均应采用静脉血检测。
2、容器的选择
存放抗凝血的容器应尽量采用密闭式的,以防止水分蒸发或环境污染等方面的影响。为了减少对血小板分析的影响,应使用塑料试管,采血后应立即混匀。如果采用玻璃制品应首先对容器进行硅化处理,以防止血小板黏附,造成血小板计数的减少。
目前在发达国家普遍使用真空采血系统,这一系统使标本在采血和测试期间完全与外界隔离,避免空气或异物污染血液,也防止发生溶血,提高检测准确性,同时也防止采血及检验人员因直接接触血液而受到感染的危险。
3、抗凝剂
国际血液标准化委员会(ISCH)推荐使用的抗凝剂是EDTA二钾,含量规定为1.5-2.2mg/ml血。此抗凝剂不影响白细胞计数及大小,对红细胞形态影响也最小,并且可以抑制血小板的聚集。EDTA二钠用于血常规检查与EDTA二钾抗凝血的结果相比无明显变化,但其溶解度较低,抗凝速度慢,不适合末梢血的抗凝。
需要注意的是EDTA二钾可以使红细胞体积轻度膨胀,采血后短时间内MPV非常不稳定,半小时后方趋于平稳。枸橼酸盐类抗凝剂对MPV及其他凝血因子影响极小,可用于血小板的分析。
4、稀释标本
在使用半自动血液分析仪时,血液需要经过预稀释以后方能检验,应特别注意稀释溶血现象。稀释溶血是指血液经高倍稀释后,随着放置时间的延长血细胞自行溶解的现象。所以血液稀释后应尽快测定,以避少数量的减低。
5、溶血标本对分析结果的影响
由于标本的处理不当,例如采血不顺利、剧烈震荡等,可以造成标本试管内溶血。溶血严重的标本可以使红细胞和血球压积下降、血红蛋白相对增加,导致MCH和MCHC增高,而平均红细胞体积正常。这一结果可以使临床医生作用错误的判断,造成不良后果。所以对于溶血的标本,应重新采集标本后测定。
6、存放时间对结果的影响
抗凝全血在室温的条件下进行仪器测定,红细胞、白细胞和血小板各项指标可以稳定24个小时,白细胞分类可稳定6-8小时,血红蛋白可稳定数日。但如果在显微镜下进行白细胞分类,两小时后粒细胞形态即有变化,所以如果需要做显微镜形态学检查,应及早推制血片。虽然4摄氏度条件可延长血液储存期,但血小板不宜在低温下储存,会影响计数和体积,因此如不能及时检测血液应在室温下保存。
很多文献报道EDTA盐抗凝的静脉血,在采血后的一小时内检测MPV不稳定,血小板体积逐渐增高,可增大20%左右,一小时后趋向平稳,在1-6小时内变化小于3%。这是由于血液与EDTA盐抗凝剂混合后,血小板形状由凹形变为球形,体积增大的原因。所以为了结果的准确性,应该在一小时后进行测定。
我们发现用EDTA抗凝的末梢血也应至少在15分钟以后进行测定,因为在这段时间内有些标本血小板暂时的聚集现象,使血小板计数假性减少,这不仅影响血小板其它指标的准确性,也造成白细胞计数有所增高。取血后立刻检测,标本的血小板和白细胞体积分布直方图也是异常的,放置一段时间后再测定就可得到分布正常的直方图
7、溶血剂的用量及溶血时间
全自动血液分析仪可以控制溶血剂的加入量及溶血剂作用时间。但在使用半自动血细胞计数仪进行血细胞计数时,需要在血液预稀释后人工加入溶血剂,溶血以后再进行血细胞计数和分类计数,正确掌握溶血剂用量及溶血时间非常重要。如果加入量不足或加入后放置时间过短,可以造成溶血不完全,使未溶解的红细胞计入白细胞中,造成白细胞假性增加。溶血不完全也可影响血红蛋白的准确性。如果加入溶血剂量过多或放置时间太久白细胞明显变形,使白细胞直方图异常,白细胞分类计数结果不准确,甚至不能进行分类计数。
Ⅳ 血常规分析仪简易操作规程
血常规 检测仪又叫 血液 细胞分析仪、血球仪、血球计数仪等,是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一下面我为大家详细介绍下血常规分析仪简易操作规程,希望大家喜欢。
血常规分析仪操作规程1、 开机 前的准备
检查试剂是否足量,有无浑浊变质,试剂管道有无扭结;
检查主机与气源间的电路、气路连接是否正确;
检查分析仪与 外接设备 的连接是否正确;
检查电源连接是否正确。
血常规分析仪操作规程2、开机和用户登录
如果连接打印机,先开打印机开关。再依次打开气源后部、机器左侧面的电源开关及触摸屏左下方开关,待登录界面出现后,输入用户名和密码后,进入主界面。
血常规分析仪操作规程3、本底检查
在主界面点击“计数”按钮,检查显示在“计数”界面的本底结果是否满足以下要求:WBC≤0.3×109/L RBC≤0.3×1012/L HGB≤1g/L PLT≤10×109/L 如果本底没有达到要求,将会提示“本底异常”,请执行清洗或维护程序。
血常规分析仪操作规程4、每日质控
在进行样本分析前,每日需对分析仪进行质控分析。
血常规分析仪操作规程5、选择工作模式
A.在“计数”界面下,点击“模式”按钮,弹出“工作模式”对话框。
B.点击模式项的“开放-全血” 、“开放-预稀释”或者“自动-全血”单选按钮选择需要的工作模式。
C.点击“CBC”或“CBC+5DIFF”单选按钮选择测量模式。
D.在“编号”框输入下一个分析样本的样本编号。对于“自动-全血”模式,在“编号” 、“管架号”和“试管号”编辑框分别输入起始样本的样本编号、管架号(输入范围为1-20)和试管号(输入范围1-10)。如选择使用内置条码扫描仪自动录入下一个分析样本的编号和/或自动录入管架号,点击“自动扫描编号”和/或“自动扫描管架号”复选框,然后输入起始样本的其他信息
E.设置完成后,点击“确定”按钮,保存输入的内容并返回“计数”界面
F.操作者也可在样本分析前,点击“工作单”按钮,录入和修改待分析样本的完整工作单信息
血常规分析仪操作规程6、开放进样全血测量
A.混匀用K2EDTA(1.5~2.2mg/mL 血)抗凝的样本,放到采样针下,确保采样针入血样内
B.按吸样键,采样针自动吸入样本,听到蜂鸣器响后,移开样本,分析仪自动执行样本分析
血常规分析仪操作规程7、开放进样预稀释测量
A.在“计数”界面,点击“稀释液”按钮,关闭加稀释液对话框
B.按吸样键,让分析仪自动排出的稀释液沿管壁流入管内,需小心避免液体溅出或产生气泡。听到蜂鸣器响后,移开离心管。操作者也可使用移液器取120μL稀释液到离心管中
C.加稀释液完毕,点击“确定”按钮,关闭加稀释液对话框
D.人工采集40μL血样注入盛有稀释液的离心管中,盖好盖子后混匀
E.将该预稀释血样放置3分钟后,再次混匀,放入采样针下,按吸样键,采样针自动吸入样本,听到蜂鸣器响后,移开样本,分析仪自动执行样本分析
血常规分析仪操作规程8、自动进样全血测量(配置自动进样器)
A.如使用内置条码扫描仪自动录入下一样本编号,将粘贴好条码标签的样本试管放入试管架
B.如不自动扫描样本编号,将试管按照样本编号顺序依次放入试管架的各试管位中
C.将放置好试管的试管架依次水平放置在进样器的右侧槽中。将有“MINDRAY”标志的侧背向分析仪。一次最多能同时放置5个试管架
D.在“工作单”界面下点击“开始”按钮,或者在“计数”按钮界面下点击“计数”按钮,分析仪自动执行样本分析
E.分析结束后,所有试管架自动移到进样器的左侧槽,可取走样本
血常规分析仪操作规程9、休眠
液路相关操作停止的时间超出设定的时间间隔后,分析仪会自动进入休眠状态。此时,仍可以执行与液路无关的任意操作。
分析仪处于休眠状态时,可按吸样键取消休眠。
血常规分析仪操作规程10、关机
每日工作完毕,在主界面点击“关机”按钮执行关机。
当屏幕变为黑屏后,关掉主机电源,并关闭其它外接设备的电源。
清空废液桶中废液,并妥善处理。
血常规分析仪 注意事项
1、电源要求
A.分析仪必须在良好接地条件下使用
B.必须使用指定规格的熔断器
C.确认输入电压符合分析仪要求 2、环境要求
A.正常工作温度范围:15℃~30℃
B.运行温度范围:10℃~40℃
C.正常工作湿度范围:30%~85%
D.大气压力范围:70kPa~106kPa
E.环境应尽可能无尘、无机械振动、无大噪音源和电源干扰
F.远离强电磁场干扰源
G.不要靠近电刷型电机、闪烁荧光灯和经常开关的电接触性设备
H.避免阳光直射或置于热源及风源前
I.选择一个通风良好的位置
J.不要将主机放置在斜面上
3、故障处理
若出现故障,可点击界面左上角的故障信息区获取故障帮助信息
4、定期维护
每日:执行正常关机
每月:分析仪每运行一个月左右,需要清洗开放采样部件,自动采样部件(配置自动进样器),并请执行探头清洁液维护,需用探头清洁液清洗分血阀、流动室、RBC池等组件或清洗整机
每两个月:当分析仪每运行两个月左右,请 手工 清洗分血阀