⑴ 脂肪检测的原理是什么实验操作流程
脂肪检测方法可用索式提取法:
一、索式提取法(经典方法)
1、原理:
样品经前处理后,放入圆筒滤纸内,将滤纸筒置于索式提取管中,利用乙醚或石油醚在水浴中加热回流,使样品中的脂肪进入溶剂中,回收溶剂后所得到的残留物,即为脂肪(粗脂肪)
采用这种方法测出游离态脂,此外还含有磷脂、色素、蜡状物、挥发油、糖脂等物质,所以用索氏提取法测得的脂肪为粗脂肪。
2、 适用范围与特点
索氏提取法适用于脂类含量较高,结合态的脂类含量较少,能烘干磨细,不宜吸湿结块的样品的测定。此法只能测定游离态脂肪,而结合态脂肪无法测出,要想测出结合态脂肪需在一定条件下水解后变成为游离态的脂肪方能测出。
另外此法是经典方法,对大多数样品结果比较可靠,但需要周期长,溶剂量大。
二、实验操作流程
1、滤纸筒的制备
将滤纸剪成长方形8×375px ,卷成圆筒,直径为150px,将圆筒底部封好,最好放一些脱脂棉,避免向外漏样。
2、称取样品,将样品烘干磨细,称取一定量与纸筒封好上口,最好用测定水的样品。
3、索式抽提器的准备
索氏抽提器由三部分组成,回流冷凝管、提取管、提脂瓶组成。提脂瓶在使用前需烘干并称至恒重。其它要干燥。
4、抽提
将装好样的纸筒放入抽提管 , 倒入乙醚,乙醚的量从提取管加入,加入的量为提取瓶体积的2/3 接上冷凝装置,在恒温水浴中抽提,水浴温度大约为55℃左右,可用滤纸检验,理论值抽提6-8小时,实际值3-4小时,但也根据样品性质来决定。
5、回收乙醚
当乙醚在提取管内即将虹吸时立即取下提取管,将其下口放到乙醚回收瓶内,使之倾斜,然后将提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。
6、计算
脂肪%= (W2-W1)/W x 100
W2——瓶和样品重(g)W1——瓶子重量(g) W——样品重量(g)
或:脂肪%=(抽提后滤纸与样品重量—抽提前滤纸重量)/样品重量 × 100
滤纸筒应事先放入烧杯与100-105℃烘箱烘至恒重。
(1)食品中脂类的测定方法研究进展扩展阅读:
索式提取法注意事项
(1)样品应干燥后研细,装样品的滤纸筒一定要紧密,不能往外漏样品,否则重做。
(2)放入滤纸筒的高度不能超过回流弯管,否则乙醚不易穿透样品,使脂肪不能全部提出,造成误差。
(3) 碰到含多糖及糊精的样品要先以冷水处理,等其干燥后连同滤纸一起放入提取器内。
(4) 提取时水浴温度不能过高,一般使乙醚刚开始沸腾即可(约45℃左右),回流速度以8-12次/时为宜。
(5) 所用乙醚必需是无水乙醚,如含有水分则可能将样品中的糖以及无机物抽出,造成误差。
(6) 若用干样品测定脂肪,可按下式计算原来样品脂肪的含量
脂肪(%)= (W1-W2)(100-A) / W
A— 100克样品中水分的含量(g)
(7) 冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管,这样不仅可以防止空气中水分进入,而且还可以避免乙醚挥发在空气中。这样可防止实验室微小环境空气的污染,如无此装置,塞一团干脱脂棉球亦可。
(8)如果没有无水乙醚可以自己制备,制备方法如下:在100ml乙醚中,加入无水石膏50克,振摇数次,静止10小时以上,蒸馏,收集35℃以下的蒸馏液,即可应用。
(9)将提取瓶放在烘箱内干燥时,瓶口向一侧倾斜45度防止挥发物乙醚易与空气形成对流,这样干燥迅速。
(10)如果没有乙醚或无水乙醇时,可以用石油醚提取,石油醚沸点30-60℃为好。
(11)使用挥发乙醚或石油醚时,切忌直接用火源加热,应用电热套、电水浴、电灯泡等。
(12) 这里恒重的概念有区别,它表示最初达到的最低重量,即溶剂和水分完全挥发时的恒重,此后若在继续加热,则因油脂氧化等原因会导致重量增加。
(13) 在干燥器中的冷却时间一般要一致。
⑵ 食品中总脂测定的原理及方法
以下为国标测定方法:
食品中脂肪的测定方法 GB 5009.6-85
本标准适用于各类食品中脂肪含量的测定。
第—法索氏抽提法
1原理
样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后,蒸去溶剂所得的物质,在食品分析上称为
脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外,还含色素及挥发油、蜡、树脂等物。抽提法所测得的脂
肪为游离脂肪。
2 试剂
2.1无水乙醚或石油醚。
2.2 海砂:同GB 5009.3-85《食品中水分的测定方法》2.3。
3仪器
索氏提取器。
4操作方法
4.1样品处理
4.1.1固体样品:精密称取2~5g(可取测定水分后的样品),必要时拌以海砂,全部移入
滤纸筒内。
4.1.2 液体或半固体样品:称取5.0~10.0g,置于蒸发皿中,加入海砂约20g于沸水浴上
蒸干后,再于95~105℃干燥,研细,全部移入滤纸筒内。蒸发皿及附有样品的玻棒,均
用沾有乙醚的脱脂棉擦净,并将棉花放入滤纸筒内。
4.2抽提
将滤纸筒放入脂肪抽提器的抽提筒内,连接已干燥至恒量的接受瓶,由抽提器冷凝管
上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处,于水浴上加热,使乙醚或石油醚不断回
流提取,一般抽取6~12h。
4.3 称量
取下接受瓶,回收乙醚或石油醚,待接受瓶内乙醚剩1~2mL时在水浴上蒸干,再于,
95~105℃干燥2h,放干燥器内冷却0.5h后称量。
4.4计算
m1-m0
X = ─────── × 100
m2
式中,X——样品中脂肪的含量,%;
m1——接受瓶和脂肪的质量,g;
m0——接受瓶的质量,g;
m2——样品的质量(如是测定水分后的样品,按测定水分前的质量计),g。
第二法酸水解法
5原理
样品经酸水解后用乙醚提取,除去溶剂即得游离及结合脂肪总量。
6试剂
6.1盐酸
6.2 95%乙醇。
6.3 乙醚。
6.4 石油醚。
7仪器
100mL具塞刻度量筒。
8操作方法
8.1样品处理
8.1.1固体样品:精密称取约2g,置于50mL大试管内,加8mL水,混匀后再加10mL盐酸。
8.1.2 液体样品:称取10.0g,置于50mL大试管内,加10mL盐酸。
8.2将试管放入70~80℃水浴中,每隔5~10min以玻璃棒搅拌一次,至样品消化完全为
止,约40~50min。
8.3取出试管,加入10mL乙醇,混合。冷却后将混合物移于100mL具塞量筒中,以25mL乙
醚分次洗试管,一并倒入量筒中。待乙醚全部倒入量筒后,加塞振摇1min,小心开塞,放
出气体,再塞好,静置12min,小心开塞,并用石油醚-乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着
的脂肪。静置10~20min,待上部液体清晰,吸出上清液于已恒量的锥形瓶内,再加5mL乙
醚于具塞量筒内,振摇,静置后,仍将上层乙醚吸出,放入原锥形瓶内。将锥形瓶置水浴
上蒸干,置95~l05℃烘箱中干燥2h,取出放干燥器内冷却0.5h后称量。
8.4计算
同4.4
⑶ 脂肪怎么检测
测定身体内脂肪重量的方法很多,现在简单地介绍几种。
1、重水法 用重水法可以测出被测人全身的含水量。已知人体除脂肪部分(LBM)的含水率是72%,由全身的含水量和LBM的含水率就可以计算出被测人的除脂肪重量,进而求出身体内的脂肪重量。
2、放射性同位素40K法 人体除脂肪部分(LBM)中天然钾(K)的含量是一定的。天然钾(K)由稳定性同位素39K和41K及放射性同位素40K组成。天然钾(K)中放射性同位素40K的百分含量也是一定的。一克天然钾(K)中的放射性同位素40K每分钟发生二十八次?-衰变。用全身记数器测定被测人体内每分钟发生?-衰变时放出的?粒子数,就可以计算出被测人的除脂肪体重。然后,求出身体内的脂肪重量。
以上两种方法测量身体的脂肪重量时,都需要相当复杂而精密的仪器。
3、水中测量法 水中测量是一种比较精确而又比较简单的方法。就是使被测的人的身体浸在水中,测量身体在水中的浮力,然后,算出被测人的体积。假定人体脂肪的比重是0.9千克/立方分米。身体的除脂肪部分(LBA)的比重是1.095千克/立方分米,就可以算出身体内除脂肪部分的重量和脂肪的重量。
水中测量法的具体做法是:做一个具有管状框架的椅子,将这样的椅子挂在大称的称钩上。被测者坐在椅子上,使管状框架的椅子和被测人的身体全部浸在水中。人体内骨骼和肌肉的重量越大,被测人的身体就越往下沉,在水里的体重越重。人体内的脂肪越多,越有向上浮的倾向,在水中的重量越轻。
4、测量皮肤褶厚度的方法 测量皮肤褶的厚度可以粗略地推算出身体脂肪的百分数。皮肤褶厚度可以反映皮下脂肪的含量,但不能反映隐藏在肌肉里的脂肪。这种方法比较简单。
测量皮肤褶方法如下: 用拇指和食指捏起皮肤,不要把肌肉包括在内。用测量仪器或卡尺(也可用普通尺子)测量双折皮肤的厚度,以间接算出身体脂肪的百分数。
测量皮肤褶的部位在肩胛骨下角处、腹部、上臂外侧三角肌等三个部位。肩胛骨下角处在背部左肩下和右肩下。测量腹部皮肤褶时,要提捏上腹左前方和右前方的皮肤褶。测量出这三个部位的皮肤褶厚度以后,参考身体脂肪百分数推算表,就可以推算出自己的身体脂肪百分数。
在正常情况下,身体脂肪随年龄增长而增加,从20岁到60岁之间,每增长10岁,脂肪百分数增加百分之一。健康女子的身体脂肪率以22%为限,男子以15%为限,优秀运动员则更低呢。
⑷ 怎样检测牛奶中的脂肪
牛奶脂肪的测定 (罗紫一哥特里法)
一、实验原理:
利用氨一乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜,使非脂成分溶解于氨—乙醇溶液中,而脂肪游离出来,再用乙醚一石油醚提取出脂肪,蒸馏去除溶剂后,残留物即为乳脂肪。 二、仪器与试剂:
(1)抽脂瓶;
(2)25%氨水(相对密度0.91);
(3)96%乙醇 ;
(4)乙醚(不含过氧化物);
(5)石油醚(沸程30—60℃)
三、实验步骤
取一定量样品(牛奶吸取10.00ml;乳粉精密称取约1g,用10ml60℃水,分数次溶解)于抽脂瓶中,加入1.25ml氨水,充分混匀,置60℃水浴中加热5分钟,再振摇2分钟,加入10ml乙醇,充分摇匀,于冷水中冷却后.加入25ml乙醚,振摇半分钟,加入25ml石油醚,再振摇半分钟,静置30min,待上层液澄清时,渎取醚层体积,放出一定体积醚层于一已恒重的烧瓶中,蒸馏回收乙醚和石油醚,挥干残余醚后.放入l00—105℃烘箱中干燥1.5小时,取出放入干燥器中冷却至室温后称重,重复操作直至恒重。
四、
五、说明与注意事项
(1)乳类脂肪虽然也属游离脂肪,但因脂肪球被乳中酪蛋白钙盐包裹,又处于高度分散的胶体分散系中,故不能直接被乙醚、石油醚提取,需预先用氨水处理,故此法也称为碱性乙醚提取法。
(2)本法适用于各种液状乳(生乳、加工乳、部分脱脂乳、脱脂乳等),各种炼乳、奶粉、奶油及冰淇淋等能在碱性溶液中溶解的乳制品也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。
(3)若无抽脂瓶时,可用容积l00ml的具塞量筒替用,待分层后读数,用移液管吸出一定量醚层。
(4)加氨水后,要充分混匀,否则会影响下步醚对脂肪的提取。
(5)操作时加入乙醇的作用是沉淀蛋白质以防止乳化,并溶解醇溶性物质,使其留在水中,避免进入醚层,影响结果。
(6)加入石油醚的作用是降低乙醚极性,使乙醚与水不混溶,只抽提出脂肪,并可使分层清晰。
(7)对已结块的乳粉,用本法测定脂肪,其结果往往偏低。
⑸ 怎样检测食物中是否含有脂肪
对于含脂肪较高的植物种子来说,用熟的花生种子在白纸上有力挤压,白纸上会出“油迹”就是脂肪;要想检测食物中是否含有脂肪?可用一张白纸放在肉上。用力压,如果纸上有油渍说明含有脂肪。