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淀粉测定方法研究进展

发布时间:2023-09-02 16:09:40

㈠ 甘薯中淀粉含量如何测定要具体方法、步骤

简单的来说:
使用高压锅在121度的温度下,用0.5N的硫酸水解淀粉,时间:10min。把淀粉水解成葡糖糖,用碘液检查淀粉是否水解彻底,后用碱液中和。然后,加入醋酸铅、硫酸钠去除杂质、铅等。定容250ML.。过滤,取滤液用来检测总糖的含量,然后取另一份滤液用直接滴定法测定还原糖的含量,总糖减去还原糖就等于用酸水解以后的葡萄糖含量,乘以0.9就是淀粉的含量。关键控制的环节是尽量控制好样品水解的程度,因为马铃薯中含半纤维素较多,容易被水解掉,产生误差。

复杂的来说:
食品中淀粉的测定(5009.9-2003 食品中淀粉的测定)
第一法 酶水解法
一、目的与要求:
1、了解食品中淀粉含量的分析原理及分析方法
2、掌握用酶水解法和酸水解法测定淀粉的方法。
二、实验原理
样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。
三,试剂:
1、0.5%淀粉酶溶液:称取淀粉酶0.5克,加100毫升水溶解,数滴甲苯或三氯甲烷,防止长霉,贮于冰箱中。
2、碘溶液:称取3.6克碘化钾溶于20毫升水中,加入1.3克碘,溶解后加水稀释至100毫升。
3、乙醚
4、85%乙醇
5、6N盐酸:量取50毫升盐酸加水稀释至100毫升。
6、甲基红指示液:0.1%乙醇溶液。
7、20%氢氧化钠溶液。
8、碱性酒石酸铜甲液:称取34.639克硫酸铜(CuS04•5H2O)。加适量水溶解,加0.5毫升硫酸,再加水稀释至500毫升,用精制石棉过滤。
9、碱性酒石酸铜乙液:称取173克酒石酸钾钠与50克氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500毫升,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
10、0.1000N高锰酸钾标准溶液。
11、硫酸铁溶液:称取50克硫酸铁,加入200毫升水溶解后,人100毫升硫酸,冷后加水稀释至1000毫升。
四、操作方法:
1、样品处理:
称取2-5克样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪,再用约100毫升85%乙醇洗去可溶性糖类,将残留物移入250毫升烧杯内,并用50毫升水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15分钟,使淀粉糊化,放冷至60℃以下,加20毫升淀粉酶溶液,在55-60℃保温1小时,并时时搅拌。然后取1滴此液加1滴溶液,应不显现蓝色,若显蓝色,再加热糊化并加20毫升淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显蓝色为止。加热至沸,冷后移入250毫升容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤,弃去初滤液。取50毫升滤液,置于250毫升锥形瓶中,并加水至刻度,沸水浴中回流1小时,冷后加2滴甲基红指示液,用20%氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100毫升容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并人100毫升容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。
2、测定:
吸取50毫升处理后的样品溶液,于400毫升烧杯内,加入25毫升碱性酒石酸铜甲液及25毫升乙液,于烧杯上盖一表面皿,加热,控制,在4分钟内沸腾,再准确煮沸2分钟,趁热用铺好石棉的古氏坩埚或c4垂融坩埚抽滤,并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀,至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400毫升烧杯中,加25毫升硫酸铁溶液及25毫升水,用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解,以0.1000N高锰酸钾标准溶液滴定至微红色为终点。
同时量取50毫升水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液,按同一方法做试剂空白实验。
计算:X1=((A1-A2)×0.9)/( m1×50/250×V1/100×1000)×100
X1:样品中淀粉的含量,%;
A1:测定用样品中还原糖的含量,mg;
A2:试剂空白中还原糖的含量,mg;
0.9:还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数;
m1:称取样品质量,g;
V1:测定用样品处理液的体积,毫升(m1)。
第二法 酸水解法
一、原理:
样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖,然后按还原糖测定,并折算成淀粉。
二、试剂:
1、乙醚;
2、85%乙醇溶液;
3、6N盐酸溶液;
4、40%氢氧化钠溶液;
5、10%氢氧化钠溶液;
6、甲基红指示液:0.2%乙醇溶液
7、精密PH试纸
8、20%乙酸铅溶液
9、10%硫酸钠溶液
10、乙醚
11、碱性酒石酸铜甲液。 (配制见前)
12、碱性酒石酸铜乙液; (配制见前)
13、硫酸铁; (配制见前)
14、0.1000N高锰酸钾标液
三、仪器:
1、水浴锅
2、高速组织捣碎机:1200r/min
3、皂化装置并附250毫升锥形瓶。
四、操作方法:
1、 样品处理
A、粮食,豆类、糕点、饼干等较干燥的样品,称取2.0-5.0克磨碎过40目筛的样品,置于放有慢速滤纸的漏斗中,用30毫升乙醚分三次洗去样品中的脂肪,弃去乙醚。再用150毫升85%乙醇溶液分数次洗涤残渣,除去可溶性糖类物质。并滤干乙醇溶液,以100毫升水洗涤漏斗中残渣并转移至250毫升锥形瓶中,加入30毫升6N盐酸,接好冷凝管,置沸水浴中回流2小时。回流完毕后,立即置流水中冷却。待样品水解液冷却后,加入2滴甲基红指示液,先以40%氢氧化钠溶液调至黄色,再以6N盐酸校正至水解液刚变红色为宜。若水解液颜色较深,可用精密PH试纸测试,使样品水解液的PH约为7。然后加20毫升20%乙酸铅溶液,摇匀,放置10分钟。再加20毫升10%硫酸钠溶液,以除去过多的铅。摇匀后将全部溶液及残渣转入500毫升容量瓶中,用水洗涤锥形瓶,洗液合并于容量瓶中,加水稀释至刻度。过滤,弃去初滤液20毫升,滤液供测定用。
B、蔬菜、水果、各种粮豆含水熟食制品:按1:1加水在组织捣碎机中捣成匀浆(蔬菜、水果需先洗净、晾干、取可食部分)称取5-10克匀浆(液体样品可直接量取),于250毫升锥形瓶中,加30毫升乙醚振摇提取(除去样品中脂肪),用滤纸过滤除去乙醚,再用30毫升乙醚淋洗两次,弃去乙醚。以下按A自“再用150毫升85%乙醇溶液”起依法操作。
2、测定:
吸取50毫升处理后的样品溶液,于400毫升烧杯内,加25毫升碱性酒石酸铜甲液及25毫升乙液。于烧杯上盖一表面皿加热,控制在4分钟沸腾再准确煮沸2分钟,趁热用铺好石棉的古氏坩埚或G4垂融坩埚抽滤,并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀,至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400毫升烧杯中,加25毫升硫酸铁溶液及25毫升水,用玻棒搅拌使氧化铜完全溶解,以0.1000N高锰酸钾标液滴定至微红色为终点。
同时吸取50毫升水,加与测样品时相同量的碱性酒石酸铜甲乙液、硫酸铁溶液及水,按同一方法做试剂空白试验。
计算: x2=((A3-A4)×0.9)/( M2×V2/500×1000)×100
式中:
X2:样品中淀粉含量,%;
A3:测定用样品中水解液中还原糖含量,mg;
A4:试剂空白中还原糖的含量,mg;
m2:样品质量,mg;
V2:测定用样品水解液体积,m1;
500:样品液总体积,ml;
0.9:还原糖折算成淀粉的换算系数。

㈡ 淀粉酶的测定方法有哪些

植物中的淀粉酶能将贮藏的淀粉水解成麦芽糖。淀粉酶几乎存在于所有植物中,其中以禾谷类种子的淀粉酶活性最强。植物中有α–淀粉酶和β–淀粉酶,其活性因植物的生长发育时期不同而有所变化。通过本实验掌握淀粉酶的提取和测定方法。
原理:
α–淀粉酶和β–淀粉酶,各有其一定的特性,如β–淀粉酶不耐热,在高温下易钝化,而α–淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化。通常提取液中同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15 min以钝化β–淀粉酶,便可测定α–淀粉酶的活性。或者将提取液用pH3.6之醋酸在0℃加以处理,钝化α–淀粉酶,以求出β–淀粉酶的活性。
淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖,可用3,5–二硝基水杨酸试剂测定。由于麦芽糖能将后者还原生成3–氨基–5–硝基水杨酸的显色基团,在一定范围内其颜色的深浅与糖的浓度成正比,故可求出麦芽糖的含量。以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。

㈢ 怎样测定果实中的淀粉

答:淀粉是光合作用形成的单糖缩合而成的一种产物,在果实发育中,叶子所制造的碳水化合物运入果实,以淀粉的形式贮藏起来。淀粉在果实中还可通过淀粉酶水解成糖,这个作用是一个可逆反应。在果实发育的初期,果实中的积累大于消耗,因此淀粉含量不断增长,直至呼吸跃变期后淀粉加速糖化,分解大于积累,淀粉含量逐渐减少。因此果实淀粉含量在一定程度上与果实的成熟度有关。
(1)方法原理
淀粉遇碘可生成蓝色络合物,在一定浓度范围内,蓝色的深浅与淀粉的含量成正比。用高氯酸作提取剂,显色后在分光光度计上测定其吸光度,同时用苹果纯淀粉作为标准进行比较。
(2)试剂配制
①0.01摩尔/升碘酸钾溶液:称取在105℃下烘过2小时的碘酸钾(KIO3)3.567克溶于水,洗入1000毫升容量瓶中加水至刻度,此为0.1摩尔/升碘酸钾溶液。吸取10毫升放入100毫升的容量瓶中,加水至刻度即为0.01摩尔/升碘酸钾溶液。
②9.2摩尔/升高氯酸溶液:即60%的HClO4。
③5%碘化钾溶液:5克 KI溶于100毫升水中。
④硫代硫酸钠溶液:4克 Na2S2O3·5H2O溶于100毫升水中。
⑤苹果纯淀粉:将未成熟的元帅苹果洗净擦干,在菜擦子上擦碎加去离子水少许,用纱布过虑,再用水洗残渣一次,将滤液合并,放在大烧杯中静置过夜。次日淀粉即沉于杯底,小心弃去上层混浊液,再加水搅匀,如此倾洗多次,直至可溶性糖及其他杂物均被洗出。澄清后倾出上层水液。为除去其中的蛋白质,加入10%的氯化钠溶液,放置2小时,倾去上层清夜,用去离子水洗沉淀直至无氯离子。用82%乙醇洗涤数次,最后用乙醚抽洗几次,此时,淀粉为纯白色,干后可作为标准淀粉用。
(3)仪器设备
高速组织捣碎机、万分之一天平、百分之一天平等。
(4)测定步骤
将苹果去皮,从萼凹到果顶方向,对角线取两个碶形小块,粗粗切碎。称取100克加水100毫升,立即放在高速组织捣碎机上捣碎3分钟。再取浆状物10.00克(相当于样品5克)边摇边用吸管加入9.2摩尔/升高氯酸20毫升,放置10分钟。然后洗入100毫升容量瓶中,加水定容摇匀。用漏斗通过玻璃棉过虑,吸出一定量(视淀粉多少而定,一般为1~4毫升)放入另一100毫升容量瓶中加水至4毫升,加碘化钾1毫升,摇匀,再加0.01摩尔/升碘化钾液,摇匀,放置5分钟。在分光光度计上620毫微米波长下比色。
因为蓝色溶液中含有淀粉的胶体颗粒,所以每个有色溶液都要用它自己的褪色溶液作为空白。作法是将蓝色溶液加两滴硫代硫酸钠溶液使蓝色褪去,倒入另一比色杯中作为空白。
标准曲线的绘制:称取苹果纯淀粉0.1000克,加水9毫升,摇匀,再加9.2摩尔/升高氯酸20毫升,边加边摇,放置10分钟,洗入100毫升容量瓶中,加水至刻度摇匀。吸取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0毫升分别放入100毫升容量瓶中,相应加水至4毫升,各加5%碘化钾溶液1毫升,摇匀,再加0.01摩尔/升碘酸钾溶液1毫升,再摇匀,放置5分钟,用水稀释至100毫升。这时100毫升中含淀粉0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0毫克,照上法在分光光度计上测定其吸光度,将浓度作横坐标,吸光度作纵坐标,做标准曲线。
(5)结果计算
淀粉(%)(以鲜重为基础)=查表毫克数×V×100/W×V1×10 000
式中:V——样品稀释体积(毫升);
V1——吸取滤液体积(毫升);
W——样品鲜重(克)。
(6)注意事项
①淀粉有直链淀粉和支链淀粉两种。不同树种、品种,这两种淀粉的比例不同,因此,据实践证明,用苹果提纯的淀粉作为测定果实中淀粉的标准效果较好。
②加高氯酸溶液时,边加边摇,以免局部酸度过大。最后应将沿边的果汁冲下去,这时酸的浓度约为6.2摩尔/升,并严格控制浸出时间。
③加碘化钾和碘酸钾液时体积要准确,否则会影响显色的深浅。
④如果没有高速组织捣碎机,可用菜擦子擦碎果肉,迅速用研钵磨成糊状,称取5克样品,加入9.2摩尔/升高氯酸液20毫升,放置10分钟,用水洗入100毫升容量瓶中,加水定容,过滤后按上法进行。
标准淀粉0.1000克,加水4毫升,加9.2摩尔/升高氯酸液20毫升,放置10分钟,然后按上法进行,画出标准曲线。

㈣ 检验淀粉的方法及现象

方法有二:
1.
用食盐,方法如下:
将食盐在炒锅里加热一段时间,之后取出待用,向待检验的水中加醋(最好是白醋或醋精),再加少许未加热的盐,搅拌之后加入加热炒过的盐,如果混合液变蓝则说明水中有淀粉.(注:食盐要加碘的)
2.
利用丁达尔现象:
将待测液装入透明玻璃杯,置于较黑暗处,用手电筒(光柱控制在直径2-3厘米,用白纸裹上)从侧面照射杯中液体,如果看到光柱(光柱中有小颗粒),则说明有淀粉.(因为淀粉溶在水里会形成胶体)

㈤ 淀粉的国标测定方法

生化需氧量(biochemical
oxygen
demand
)简称bod。是表示水中有机物等需氧污染物质含量的一项综合指标。它说明水中有机物处于微生物的生化作用进行氧化分解,使之无机化或气体化时所消耗水中溶解氧的总数量,其单位以ppm(毫克/升)表示。
bod一般指的是微生物可降解的有机物的量,即废水中可降解有机物的量。
bod的测定方法包括:
1.标准稀释法
这种方法是最经典的也是最常用的方法。简单的说,就是测定在20±1℃温度下培养五天前后溶液中的溶氧量的差值。求出来的bod值称为“五日生化需氧量(bod5)”。
2.生物传感器法
其原理是以一定的流量使水样及空气进入流通量池中与微生物传感器接触,水样中溶解性可升华降解的有机物受菌膜的扩散速度达到恒定时,扩散到氧电极表面上的氧质量也达到恒定并且产生一恒定电流,由于该电流与水样中可生化降解的有机物的差值与氧的减少量有定量关系,据此可算出水样的生化需氧量。通常用bod5标准样品对比,以换算出水样的bod5的值。
3.活性污泥曝气降解法
控制温度为30℃-35℃,利用活性污泥强制曝气降解样品2小时,经重铬酸钾消解生物降解后的样品,测定生物降解前后的化学计量需氧量,其差值即为bod。根据与标准方法的对比实验结果,可换算成为bod5值。
4.测压法
在密闭的培养瓶中,水样中溶解氧被微生物消耗,微生物因呼吸作用产生与耗氧量相当的co2,当co2被吸收后使密闭系统的压力降低,根据压力测得的压降可求出水样的bod值。

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