1. 请写出常用的化合物纯度检测方法
化合物纯度的鉴定方法
一
通过TLC的纯度的鉴定??1
展开溶剂的选择,不只是至少需要3种不同极性展开系统展开,通常是首先要选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,如氯仿\甲醇,环己烷\乙酸乙酯,正丁醇\醋酸\水,分别展开来确定组分是否为单一斑点。这样做的好处是很明显的,通过组份间的各种差别将组分分开,有可能几个相似组份在一种溶剂系统中是单一斑点,因为该溶剂系统与这几个组分的分子间力作用无显着的差别,不足以在TLC区分。而换了分子间作用力不同的另一溶剂系统,就有可能分开。这是用3种不同极性展开系统展开所不能达到的。??2
对于一种溶剂系统,至少需要3种不同极性展开系统展开,一种极性的展开系统将目标组分的Rf推至0.5,另两种极性的展开系统将目标组分的Rf推至0.8,0.2。其作用是检查有没有极性比目标组分更大或更小的杂质。??3
显色方法,光展开是不够的,还要用各种显色方法。一般一定要使用通用型显色剂,如10%硫酸,碘,因为每种显色剂(不论是通用型显色剂,还是专属显色剂在工作中都遇到他们都有一化合物不显色的时候),再根据组分可能含有混杂组份的情况,选用专属显色剂。只有在多个显色剂下均为单一斑点,这时才能下结论样品为薄层纯????二
通过熔程,判断纯度。原理很简单,纯化合物,熔程很短,1~2度。混合物熔点下降,熔程变长。????三,基于HPLC的纯度鉴定,对于HPLC因为常用的系统较少,加之其分离效果好,我们一般不要求选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,只要求选这三种不同极性的溶剂系统,使目标峰在不同的保留时间出峰。????四,基于软电离质谱的纯度鉴定。如ESI-MS,APCI-MS。大极性化合物选用ESI-MS,极性很小的化合物选用APCI-MS,这些软电离质谱的特点是只给出化合物的准分子离子峰,通过正负离子的相互沟通来确定分子量。如果样品不纯,就会检出多对准分子离子峰,不但确定了纯度,还能明确混杂物的分子量。????五,基于核磁共振的纯度鉴定,从氢谱中如果发现有很多积分不到一的小峰,就有可能是样品是样品中的杂质。利用门控去偶的技术通过对碳谱的定量也能实现纯度鉴定。????这里只是对常见的纯度鉴定方法做了一个小结,从快速,便宜,简便的要求出发,以第一点最合要求,往后次之,所以对第一点详加讲述。当然每种方法多有各自的局限性,如基于氢谱的纯度鉴定,如果发现有很多积分不到一的小峰,还有可能使样品中的活泼质子,基于软电离质谱的纯度鉴定,如果混杂物的分子量与目标物一样就无法
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2. 如何检查一种酶的制剂是否达到纯的制剂
我们知道这里指的纯是指酶纯度达到了酶的指标即比活力达到要求,可另一方面比活力达到要求,而蛋白中含有污染病毒,核酸,宿主细胞杂蛋白,及分离中带人的有害物质等等,这也是等于没达到纯化,所以在分离时要选择正确的分离方法,在每步分离后计算纯倍数,收获率,比活力,最后当产品的纯度,活性,安全性,稳定性和一致性达到要求,这就 好 了
3. 如何鉴别动物基因是纯种或是杂种
①鉴别一只动物是纯合体还是杂合体和检验杂种基因型,都采用测交法,所以鉴定一只白色(显性性状)的羊是否是纯种,用测交的方法,错误; ②利用某纯种生物个体培养优良品种,用杂交育种的方法,错误;③不断提高小麦抗病(显性)品种的纯合度,最好方法用自交.连续多代自交,并淘汰不抗病品种,后代中抗病纯合度越来越高,正确; ④检验杂种F1的基因型,用测交的方法;看后代是否出现性状分离,若出现,则待测动物为杂合子,反之为纯合子,错误.所以采用自交方法,可以解决③不断提高小麦抗病(显性)品种的纯合度的遗传学问题.故选A.
鉴定显性动物是纯种还是杂种可以用测交的方法。具体做法如下:将该显性动物和隐性动物多次交配,观察后代的表现型。如果后代都是显性,说明该显性动物是纯种;如果后代出现隐性,说明该显性动物是杂种。