1、核酸检测是指采集咽拭子、痰液或者下呼吸道标本,实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸,如果呈阳性,即可确诊感染新型冠状病毒,这属于确诊新型冠状肺炎的依据。
2、核酸检测方法:取病人的唾液或者咽拭子的样本。
提取病人唾液或者咽拭子的样本里的遗传物质,如果病人有病毒,则样本里就会有该病毒的遗传物质RNA。
进行提取液中RNA的逆转录,把RNA逆转录成cDNA。
用病毒cDNA的特异性引物进行PCR扩增。
若果有扩增出病毒的DNA条带,则判定病人体内有该病毒。
若果没有扩增出DNA条带,则判定病人体内无该病毒。
‘贰’ 核酸病毒检测有PCR和快检,这两个检测方式有什么区别
检验核酸病毒有PCR和快检两种方式,一般常规PCR检测是在样品采集之后,要对样品进行核酸纯化,再进行后续的PCR反应,在这个过程中大约需要30~60分钟。在进行PCR检测的过程中,可以进行多个样本的检测,PCR反应的时间大约在两个小时左右。不同医院的仪器设备不同,仪器的好坏能够影响检测样本的多少,通常一个反应板可以同时检测96个样品。
医护人员采集人们的少量咽拭子,根据其中病毒的浓度来确定是否是阳性,还是阴性。新冠肺炎病毒的核酸物质主要是RNA,在检验过程中通过技术可以将RNA进行逆转录,转化为DNA。 PCR技术可以通过特殊的酶在生物体外,对转录的DNA片段进行复制,再将DNA片段扩大,从而达到检测的目的。选择核酸检测的方式主要根据自己情况而定,主要依靠医生的判断。
‘叁’ 什么是核酸检测怎么检测
核酸检测是在实验室的条件下,通过分析致病微生物DNA或者RNA基因学的序列,进行临床病因学的确诊。此种核酸检测的方法是利用PCR扩增的方法进行检测,需要很多的步骤,最快也要6个小时才能出结果。此种检测灵敏度高、成本高,完全手工操作,工作量非常大,同时要求实验室的条件也非常高。它是目前及早确定病人是否感染病毒,以及及早发现和及早治疗最有效的检测方法新型冠状病毒核酸检测的方法,目前采用的是实时PCR荧光法这种PCR荧光法也叫聚合酶链式反应,是通过一种分子生物学的技术用来放大这种极少见的RNA病毒。可以将新冠病毒RNA片段扩增到百万倍以上,这样更容易检测出新冠病毒
‘肆’ 核酸检测的方式都有什么
核酸检测主要有酸检测试剂、抗体检测两种方法,第一种方法通常是通过咽拭子进行PCR检测,基因扩增,然后再进行核酸检测。 而抗体检测是选择抽血,抽血的方法得出结果看,观察其抗体滴度是否升高,这种情况常常是指在抽血前常出现不能产生抗体的情况。
核酸检测是一种“进行时”检测,通过聚合酶链反应等方法检测病毒基因组中特定的核酸序列,从而判断被检测者此刻是否感染了病毒。
与核酸检测不同,新冠病毒抗体检测显示的是哪些人曾经被感染。抗体检测又被称为血清学检测,目的是检测血液样本中的抗体。人体感染病毒后,会产生IgM或IgG抗体。
被感染初期,人体会迅速产生IgM抗体,以抗感染;相比之下,产生IgG抗体的速度更慢,但IgG抗体保留时间更长。抗体检测就是检测血清中是否有这些特异性抗体,以确定被测试者是否曾被感染。
(4)核酸检测用的什么tcr方法扩展阅读:
六种人不宜做核酸检测
一、釆样前30分钟,对于有吸烟、喝酒、嚼口香糖等人群不宜做核酸检测,以免影响检测的准确度。
二、进食太饱的人不宜做核酸检测,否则容易发生恶心呕吐,影响采用结果的准确性。
三、核酸检测前有口服抗病毒和抗感染的药物的,应推迟做核酸检测,避免影响检测结果。
四、若是进行鼻拭子采样的话,对于鼻咽部有病症的急性期,如出血、水肿等人群可以暂不予检测。
五、刚进行核酸检测时出现恶心呕吐的人,应暂缓做核酸检测,需等检测者缓解后再予以进行。
六、被采样者用手或其他物品触及拭子采样冠、棉签的前端的不宜进行,否则容易造成污染,影响检测结果,需更换进行重做。
‘伍’ 核酸检测方法
对于新型冠状病毒的核酸检测,首先根据试剂盒说明书”样本要求“部分进行样本采集,常规的样本类型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等。
获得患者样本后,需尽快进行检测,如无法立即检测需要转运的样本,应按照说明书的要求进行低温封装,并送到专门的检测机构进行检测。检测机构收到样本后,对样本进行核酸提取,核酸提取试剂应使用批准产品说明书中指定的核酸提取试剂盒。
病毒RNA需要首先逆转录为cDNA,再进行扩增检测。PCR扩增和检测应使用批准产品说明书中指定的荧光定量PCR仪,通过荧光定量PCR所得到的样本Ct值的大小,可以判断患者样本中是否含有新型冠状病毒。
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核酸检测原理
所有生物除朊病毒外都含有核酸,核酸包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),新型冠状病毒是一种仅含有RNA的病毒,病毒中特异性RNA序列是区分该病毒与其它病原体的标志物。新型冠状病毒出现后,我国科学家在极短的时间里完成了对新型冠状病毒全基因组序列的解析。
并通过与其它物种的基因组序列对比,发现了新型冠状病毒中的特异核酸序列。临床实验检测过程中,如果能在患者样本中检测到新型冠状病毒的特异核酸序列,应提示该患者可能被新型冠状病毒感染
‘陆’ 核酸检测的原理是什么
核酸检测其实是检测受测者体内是否有新冠病毒的核酸(RNA)。每种病毒的核酸内部都含有核糖核苷酸,不同的病毒所含的核糖核苷酸数量和排列顺序不同,使得每种病毒都具有特异性。
新冠病毒的核酸也是独特的,核酸检测就是对新冠病毒的核酸进行特异性检测。在进行核酸检测之前,需要采集受测者的痰液、咽拭子、肺泡灌洗液、血液等样本,对这些样本进行检测,就可以发现受测者的呼吸道感染了什么病菌。新冠病毒核酸检测常用的是咽拭子样本检测,将样本裂解提纯,从中提取出可能存在的新冠病毒核酸,检测的准备工作就做好了。
新冠病毒核酸检测主要用荧光定量RT-PCR技术,这种技术是荧光定量PCR技术与RT-PCR技术的结合。在检测过程中,先采用RT-PCR技术将新冠病毒的核酸(RNA)逆转录为对应的脱氧核糖核酸(DNA);再采用荧光定量PCR技术,将得到的DNA进行大量复制,同时,使用特异性探针对复制得到的DNA进行检测,打上标记。
如果存在新冠病毒核酸,仪器就可以检测到荧光信号,而且,随着DNA的不断复制,荧光信号不断增强,这样就间接检测到了新冠病毒的存在。
核酸检测为阳性不一定是确诊
核酸检测结果呈阳性,就可以确认受测者上呼吸道存在病毒核酸,但并不能直接确诊为新冠肺炎患者。在核酸检测为阳性的情况下,还要综合流行病学史对受测者进行进一步的诊断,如果受测者还有发热、咽痛、咳嗽、乏力等症状,以及与已确诊的感染者有接触史等,就可以诊断为确诊病例。
如果受测者没有任何相关症状,一般诊断为无症状感染者。无症状感染者也有传染性,而且一些无症状感染者后来也开始出现症状,变成了确诊患者。
以上内容参考 潇湘晨报—核酸检测的原理到底是什么?为什么会出现假阴性?
‘柒’ pcr核酸检测是什么意思方法及步骤
核酸检测是目前全球用来对是否携带新冠病毒进行确定的一种有效方式。目前大家主要使用的是鼻拭子、咽拭子以及抗体血清lgm进行参考。但是根据最新的新加坡入境要求是进行pcr核酸检测,那么pcr核酸检测是什么意思呢?
PCR的意思是聚合酶链式反应,能够用来扩增DNA,从而将微量的DNA扩增到能够检测的程度。有些病毒的核酸是DNA,需要采用这个方法进行检测。所以PCR并不是进行的检查,而是检测DNA的一种方法。比如乙肝病毒DNA定量,用的就是这一种方法。检查DNA的目的,一方面是可以诊断疾病,如果连病原体的DNA都能检测到,就说明感染了这种病原体;另一方面是判断病毒复制的多少,从而判断病情严重程度或者治疗效果。
进行核酸检验,需要经过取样、留样、留存、核酸提取、上机检测五个步骤。
核酸检测的第一步就是采集人体分泌物,用鼻试子或咽试子擦拭鼻腔或咽后壁及双侧咽扁桃体处。
第二步医务人员进行留样,将试子头浸入细胞保存液中,折断尾部后立即旋紧管盖。
第三部要将样本放入密闭袋中,保存好并及时送检。
第四步将样本送进实验室,提取核酸。
第五步,将提取物进行荧光PCR扩增反应。
核酸(nucleicacid),是一类由核苷酸(nucleotide)构成的生物大分子,分为核糖核酸(ribonucleic
acid,宴前者RNA)和脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic
acid,DNA)两类,其中RNA多为单链结构,DNA多为双链结构。除朊病毒(prion)外,核酸是构成生命所必需的生物大分子,其主要作用是构成生命体的遗传信息载体,除此之外,还有部分核酸可作为及参与构成具有生物活性的酶分子或晌薯其他分子机器
。
核酸检测顾名思义就是针对核酸开展检测。
核酸检测有何独特的优势呢?为何能作为新冠病毒确诊的“金标准”呢?
其实每一种检测方法都有其擅长的应用场景。以病毒检测为例,通常的免疫学检测方法(胶体金、ELISA、化学发光等)的检测对象是病毒的抗原或抗体,相当于“侧面描绘”。由于从感染到可检测存在一个时间窗口期,因此免疫学检测方法一般不合适作为早期诊断。
1、假阳性
假阳性通常比较少。一般实验室人员操作不当会导致样本间交叉污染或扩增产物的遗留污染,该种情况下可能会导致假阳性。
不过假阳性可以通过严格控制检测流程、以及执行若干个阴性样本随机参与检测的策略而有效规避。
2、假阴性
在这里需要说明的是,PCR检测的假阴性与临床的假阴性实际上不是一个概念。
以网络上激烈讨论的新冠病毒的诊断为例,临床假阴性是指临床症状和影像学高度疑似被感染、但PCR检测却多次或始终为阴性的情况;而PCR检测假阴性是指所采集样本中存在足够量的新型冠状病毒但却没有检出悔简的情况。
避免核酸检测的假阴性,主要需要解决:(1)被感染者的细胞中有足量的病毒、(2)采集样本中可以采集到含有病毒的细胞、以及(3)检测出样本中的病毒这三个环节。
其中PCR试剂盒的技术参数优劣主要影响第三个检测环节。
仅针对第三个检测环节,若样本中病毒数量低于一个程度(低于最低检测限),PCR试剂盒就无法检出。从这个角度看,PCR检测的假阴性是无法完全避免的。这也是为何需要补充开发病毒的特异抗体检测的原因所在。
实验室建设坚持高标准、严要求,严格按照国家《医学生物安全二级实验室建筑技术标准》进行建设,建设面积100余平方米,分为试剂贮存和准备区、标本制备与提取区、扩增和产物分析区三个区域。实验室内配置全自动核酸提取仪、实时荧光定量PCR仪、扩增仪、高压灭菌器、B2型生物安全柜、超净工作台、超低温冰箱等仪器,消毒和防护设施齐全,符合相关生物实验室安全标准。为防止实验室外的区域被污染,实验室的气压均为负压,有效降低感染风险。此外,实验室配备了污水处理系统,达到了废液的合理排放和处理。
*目前我国多地区建设了PCR核酸检测实验室用以进行新冠病毒核酸检测
‘捌’ 现在核酸检测都有什么方法
通过呼吸道或口腔内的痰液做检测