植物基因功能研究方法

Ⅰ 植物转基因技术有哪些

农杆菌介导法、DNA直接插入法、花粉管通道法和植物病毒介导法。

农杆菌介导法就是指利用农杆菌转化受体细胞，将目标基因插入受体细胞基因组的转化技术。该方法是目前研究最多，机理最清楚，应用最为广泛和成熟的植物转基因技术。DNA直接插入法是指不需要借助质粒载体的转化而实现外源目标基因插入的方法。

(1)植物基因功能研究方法扩展阅读：

植物转基因技术注意事项：

用户需要注意对于功能基因组的研究和分子育种，由于不需要植物组织培养、苄基腺嘌呤激素和pH值调节等，因此花序浸润法具有简单、快速、高效和实用等特点。随着该方法的进一步完善，它在植物基因工程及其衍生领域中将表现出更大的潜力。

同时对于难以采用组织培养途径进行离体转化的物种，凡是开花期比较集中或去掉主薹后能集中抽发侧薹而开花，并且种子量较大，都可以尝试这种方法进行转基因。

Ⅱ 怎样探索一些与发育相关的基因如何进一步验证其功能

探索验证与发育相关的基因，比方说，控制开花的基因我们假设是一个。
1、用某种方法把它敲除，即基因敲除，植物不开花了，那我们就可以说，这是控制开花的基因；
2、用反义RNA进行抑制，基因不表达了，也可以确定；
3、把这个基因克隆出来，转到另外一种生物上面，这种转基因生物能开花了，呵呵，就可以验证了。

很简单吧？其实很难，确定一个基因要好多年。。。

Ⅲ 研究植物基因表达的组织特异性的方法有哪些多多益善

研究植物基因表达的组织特异性的方法有哪些多多益善
从DNA到蛋白质的过程叫基因表达(gene expression)，对这个过程的调节即为基因表达调控(regulation of gene expression or gene control)。 基因调控是现代分子生物学研究的中心课题之一。因为要了解动植物生长发育规律。形态结构特征及生物学功能，就必须搞清楚基因表达调控的时间和空间概念，掌握了基因调控机制，就等于掌握了一把揭示生物学奥秘的钥匙。基因表达调控主要表现在以下几个方面：①转录水平上的调控；②mRNA加工、成熟水平上的调控；③翻译水平上的调控； 基因表达调控的指挥系统有很多种，不同生物使用不同的信号来指挥基因调控。原核生物和真核生物之间存在着相当大差异。原核生物中，营养状况、环境因素对基因表达起着十分重要的作用；而真核生物尤其是高等真核生物中，激素水平、发育阶段等是基因表达调控的主要手段，营养和环境因素的影响则为次要因素。

Ⅳ 研究基因功能的方法和原理

基因转导、反义技术、转基因和基因剔除、染色体转导、RNA干涉等是目前研究基因功能的主要方法。

Ⅳ 试述一个基因的分子生物学的研究方法

额，这个题目好大，我从植物基因组的研究随便说下。
一般来说，一个基因的研究涉及到基因的定位以及功能验证，至于机理和其他研究则不在讨论范围内。
基因的定位：一般来说，首先植物通过杂交来构建定位群体，这其中包括初级定位群体和精细定位群体。初级定位群体一般是F2群体，精细定位群体一般是近等基因系还有染色体片段代换系。通过分子标记，可将基因定位在染色体上的某个区域。这时候又有几种方法。一般来说，如果能直接定位的话当然最好，但是如果标记定位区域有几个开放阅读框，即所谓的候选基因，则需要克隆这几个基因，然后通过转基因将这些候选基因分别转到野生型植株体内，观察基因的表达的变化，从而确定到底是哪个基因。
然后就是功能验证，一般就是转基因，如果是隐性基因的话，会选择用RNA干涉或者其他方法敲除掉这个基因的显性基因来验证功能。
说的很粗略，大概就是这么个意思，因为涉及到很多知识，要详细说起来的话上万字也不一定说的完，而且有的我也不是很清楚，处于学习过程中。

Ⅵ 植物定量抗病性状的遗传的基本分析方法是什么

经典的数量遗传学把控制数量性状的基因作为一个整体来研究，认为数量性状是由许多作用相等的微效基因共同影响的。进行数量遗传学分析，要选取表型对立的亲本杂交，建立适宜的子代实验群体，观测群体性状的表型分布，个体或品系间表型的相关，利用统计分析方法，将所得观测结果配合群体均值、方差、协方差的理论模型，估算基因数目，计算遗传力，描述与数量表型相关基因的特征，诸如加性效应、显性效应、上位效应、基因型与环境互作效应等。

用于遗传分析的定量抗病性指标很多，诸如病害潜伏期、病斑长度、病斑数量、病原菌繁殖量、发病率、发病严重度、病害发展曲线下面积（，AUDPC），等等。这些指标都具有数量性状的一般特点，其变异是连续的，在杂种一代往往表现出两亲本的中间类型，无显性和表现部分显性，有时还会出现超亲分离，表现杂种优势。定量抗病性的性状易受环境条件的影响，在子二代既有基因型分离的差异，又有环境引起的表型变异。控制定量抗病性状的基因数目多，单个基因效应小，但其作用是可以累加的。经典数量遗传学并不企图认知单个的基因，而是用统计的方法从基因的总效应上进行分析。

不同的定量抗病性指标，遗传基础可能不同。因而同一个品种对同一种病害的定量抗病性，因选用的指标不同，遗传分析的结果也不相同。在进行定量抗病性遗传分析时，应选择病理学意义明确、差异明显而稳定、易于定量观测和统计分析的性状。国内一些研究单位习惯选用病情指数作为定量指标，并不合理。病情指数是一个综合指标，其两个组分，即发病率与严重度，不论病理学意义和遗传基础都不相同。即使病情指数相同，由于两者的贡献率不同，也并不是等值的。定量抗病性的表达，不仅取决于寄主基因型和环境条件，也取决于病原菌。分析定量抗病性遗传仍要提倡选用纯净的菌种接种致病。依靠自然发病或使用混杂的菌种接种，因缺乏可靠而均一的致病性，或者由于菌量偏低、菌种的适合度偏低等原因，而难以揭示发病程度的遗传差异。寄主的生理状态和发育阶段对发病程度有明显影响，必须选择适当的接种时间和接种方法。对于定量抗病性，品种与病原菌菌系之间没有显着的互作，如果发现显着的互作，就要检查是否受到定性抗病性的干扰。

抗病性的定量性状对环境高度敏感，在进行遗传分析时，必须保持环境要素稳定并适于发病。环境不适宜，品种在一个地方表现抗病，而在另一个地方就可能表现感病。环境敏感性状难以准确测度，往往低估抗病性状的遗传率。

Ⅶ 转基因植物有哪些分析鉴定方法

分析、确定了75个品种的转基因构建成分,为开展转基因检测奠定了基础。

2、不同类型的植物提取基因组DNA的方法略有差异,该研究优化了CTAB、SDS快速提取法,并选择了磁珠吸附试剂盒法,成功提取了适合于PCR反应的植物基因组DNA。

3、以植物内源基因18SrRNA为靶标,设计、优化后筛选出特异性引物和探针,建立了以18SrRNA为目标的检测植物基因组DNA提取质量的PCR与荧光PCR鉴定体系。

4、首次以CaMV35S、FMV启动子、NOS终止子、标记基因NPTII、抗除草剂基因EPSPS、PAT、抗虫基因CryIAb为检测目标,设计、筛选出特异性引物,优化实验参数,建立了转基因植物PCR定性检测方法体系,灵敏度达0。

1﹪。

5、克隆了CaMV35S、FMV启动子、NOS终止子、标记基因NPTII、抗除草剂基因EPSPS、PAT、抗虫基因CryIAb的阳性质粒作为转基因植物检测的阳性对照。

6、于反应体系中引入UNG酶,建立了无污染的荧光PCR扩增体系。

7、首次以FAM荧光素标记探针5端作为发光基团,以TARMA标记探针3端为淬灭基团,以CaMV35S、FMV启动子、NOS终止子、标记基因NPTII、抗除草剂基因EPSPS、PAT、抗虫基因CryIAb为检测目标,设计、筛选出特异性引物和探针,优化实验参数,建立了转基因植物通用性荧光PCR定性检测方法体系。

8、以FAM和TET两种荧光素标记外源基因和内源基因,建立了转基因大豆抗除草剂基因EPSPS和转基因玉米抗虫基因CryIAb的荧光PCR定量检测体系,两体系的灵敏度均达到0。

1﹪以上。

9、首次利用反向PCR技术扩增出华番1号基因组未知DNA序列,并通过DNA测序,利用BLAST软件进行同源性比较,找出载体与基因组整合位点DNA序列。

10、利用荧光PCR技术,设计出特异性引物与探针,优化实验参数,建立了一种灵敏、精确、定量和鉴定华番1号品种特异性的高效检测体系。

这在国内为首次利用整合位点进行转基因植物检测和品种特异性鉴定的方法……