荧光分析测定方法

1. 如何利用荧光分析法测定溶液中铝离子的含量

在适宜酸度下，铝离子能与8-羟基喹啉反应生成稳定的8-羟基喹啉铝配位化合物，该配位化合物用氯仿萃取后，其萃取液在365nm紫外光照射下，会产生荧光，荧光峰值位于530nm处，以此可建立铝离子含量的荧光测定方法。在0.002~0.24
μg·mL-1Al的范围内，荧光强度与Al的浓度成线性关系。

2. 荧光检测方法

荧光检测是一种自然发光反应，通过荧光素酶与 ATP进行反应，可检测人体细胞、细菌、霉菌、食物残渣，在15秒钟内得到反应结果。光照度通过专用设备进行测量，并以数字形式予以表示，在1975年首先被应用到食品工业中，在1985年在化妆品制造业中得到应用。
荧光定量：采用国际主流的荧光定量PCR技术，迅速提升技术水平。
结果稳定：检测结果CV值与进口全自动PCR仪接近，具有自检功能，避免错误数据的输出。
封闭操作：全部检测过程均为闭管操作，于反应管处检测荧光，有效防止污染，解决PCR技术中最棘手之难题。
准确定量：满足临床对量化的需求，定量荡围宽，可涵盖大部分病原微生物，自动曲线拟合。
灵敏度高：利用光谱信号灵敏性的优势，有效提高检测灵敏度。
安全：全程无毒检测。
操作简便：省去后处理的烦琐过程。
直接打印：直接打印结果，无须记录大量数据。
升级版：FS1000有与电脑连接的数传输口，可以连接电脑，根据用户需要提供先进分析软件，全面分析实验数据。（电脑和打印机选配件）
故障率低：维护非常简单。
节约资源：可利用现用PCR扩增仪，最大限度节约资源。

3. 液体激光荧光光谱法

方法提要

直接向水样中加入荧光增强剂，使之与水样中铀酰离子生成一种简单的配合物，在激光(波长337nm)辐射激发下产生荧光。采用标准铀加入法定量测定铀。

测定范围为0.02～20μg/L。

水样中常见干扰离子的含量为:Mn²⁺1.5mg/L，Fe³⁺铁6mg/L，Cr⁶⁺6mg/L，腐握旅升殖酸3mg/L。

仪器和装置

铀分析仪 最低检出限0.05μg/L。

微量注射器 50μL或0.1mL玻璃移液管。

试剂

荧光增强剂 荧光增镇渣强倍数不小于100倍。

铀标准储备溶液ρ (U)=1.00mg/mL配制同83.5.1。

铀标准溶液 用pH2的HNO₃酸化水将铀标准储备溶液逐级稀释，配制为ρ(U)=10.0μg/mL，0.500μg/mL和0.100μg/mL的铀标准溶液。

分析步骤

取5.00mLpH为3.0～11.0的被测水样(如铀含量较高，可用水适当稀释)于石英比色皿内段老，调节补偿器旋钮直至表头指示为零(不为零时，可记录读数N₀)，加入0.5mL荧光增强剂，充分混匀，测定荧光强度为N₁，再加入0.050mL0.100μg/mL铀标准溶液(高档测量应加入0.050mL0.500μg/mL铀标准溶液)，充分混匀，测定荧光强度为N₂。

按下式计算水样中铀的含量:

岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术

式中:ρ(U)为水样中铀的质量浓度，μg/L;N₀为水样未加荧光增强剂前的荧光强度;N₁为加荧光增强剂后水样的荧光强度;N₂为样品加标准铀后的荧光强度;ρ₁为加入标准铀溶液的浓度，μg/mL;V₁为加入标准铀溶液的体积，mL;V为分析用水样的体积，mL;K为水样稀释倍数;R为全程回收率，%。

注意事项

液体激光荧光法中，当加入荧光增强剂进行水样测量时，如试样产生沉淀，必须将被测试样经稀释或其他方法处理，不再产生沉淀后，方可进行测量。

4. 分子荧光分光光度法

分子荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定的方法。

由于不同的物质其组成与结构不同，所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长也不同，同一种物质应具有相同的激发光谱和荧光光谱，将未知物的激发光谱和荧光光谱图的形状、位置与标准物质的光谱图进行比较，即可对其进行定性分析。

荧光分光光度计是最常见的实验仪器，主要用于对经光源激发后产生荧光的物质或经化学处理后产生荧光的物质成份分析。在检测食品安全、自然环境污染等重要的人类课题上，发挥积极的作用。

荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器，有滤光片荧光计、滤光片-单色器荧光计等，通常均由以下四个部分组成：激发光源、用于选择激发光波长和荧光波长的单色器、样品池及测量荧光的检测器。

5. 荧光分析法的特点

荧光分析是一种先进的分析方法，它比电子探针法、质谱法、光谱法、极谱法等都应用的较广泛和普及，这同荧光分析具有很多优点分不开的。荧光分析所用的设备较简单，如目测荧光仪和荧光光度计构造非常简单完全可以自己制造。比起质谱仪、极谱仪和电子探针仪来它在造价上要便宜很多倍，而且荧光分析的最大特点是：分析灵敏度高、选择性强和使用简便。同时具备这三大特点的仪器并不多 。 在紫外线照射下能直接发射荧光的化学元素并不很多，所以对一些元素进行荧光分析时大部分采用间接测定法，这就是用有机试剂与被测定的元素组成络合物。这些络合物在紫外线照射下能发射出不同波长的荧光素，然后由荧光强度测定出该元素的含量。由于有机荧光试剂的品种繁多，用荧光分析可测定的元素有六十多种 。
例如对铅的荧光分析：铅离子Pb与Cl离子组成铅氯络合物，该络合物在短波紫外光270毫微米激发下，它会发射出蓝色荧光，荧光峰值波长在480毫微米，根据荧光强度在标准工作曲线上测定出Pb的含量。该法能测定0.1~0.6微克铅/毫升。