⑴ 酶解分离原生质体有哪些常用的方法
分离常用方法:分离原生质体时,首先要使酶制剂大量吸附到细胞壁上去。
因此,一般先将材料分离成单细胞,然后分解细胞壁。采用将酶液减压渗入组织,或将组织切成薄片等方法,都可增加酶液与纤维素分子接触的机会。用酶法分离原生质体可以采用以下两种不同的方法路线。两步法或顺序法:首先用离析酶或果胶酶处理组织使胞间层降解,把细胞分开再用纤维素酶处理这些游离的细胞,使原生质体释放出来。
一步法或同时法:即把一定量的纤维素酶、果胶酶和半纤维素酶组成混合酶溶液,将材料置于其中处理,一次即可得到分离的原生质体。因为一步法方便省力,因此很常用。