常用分析方法hplc

⑴ HPLC法中定量分析方法大致有哪几种

气相色谱定量检测一般就两种，一个是外标法，一个是标法，对于没有标准物质的，就只能靠容面积归一法粗略定量。

通过对人类和环境有影响的各种物质的含量、排放量的检测，跟踪环境质量的变化，确定环境质量水平，为环境管理、污染治理等工作提供基础和保证。简单地说，了解环境水平，进行环境监测，是开展一切环境工作的前提。

(1)常用分析方法hplc扩展阅读：

HPLC根据固定相和流动相的成分分为正相色谱和反向色谱。

正相色谱法

采用极性固定相（如聚乙二醇、氨基与腈基键合相）；流动相为相对非极性的疏水性溶剂（烷烃类如正已烷、环已烷），常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物（如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等）。

⑵ HPLC原理及基本操作是什么

原理

高效液相色谱法仪根据各种各样的相互作用力来分离混合物。这种相互作用力通常是分析物及分析管柱之间的一种非共价性质。

使用高效液相色谱时，液体待检测物在不同的时间被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物中不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，每个峰顶都代表一个另外化合物的种类，最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。

以液体为流动相而设计的色谱分析仪器称为液相色谱仪。采用高压输液泵，高效固定相和高压灵敏检测器等装置的液相色谱仪成为高效液相色谱仪。高效液相色谱仪种类繁多，但不论何种类型的高效液相色谱仪，基本上都分为4个部分：高压输液装置，进样系统，分离系统和检测系统。

操作

将要分离和分析的样品混合物以不连续的小体积（通常为微升）引入渗透通过色谱柱的流动相流中。样品的组分以不同的速度通过色谱柱，这是与吸附剂（也称为固定相）的特定物理相互作用的函数。每个组分的速度取决于其化学性质，固定相（柱）的性质以及流动相的组成。

特定分析物洗脱（从色谱柱中出现）的时间称为其保留时间。在特定条件下测得的保留时间是给定分析物的识别特征。

可以使用许多不同类型的色谱柱，其中填充了粒径，孔隙率和表面化学性质各异的吸附剂。使用较小的颗粒尺寸的包装材料需要使用较高的操作压力（“背压”）的和通常改善的色谱分辨率（连续的分析物从柱中出现的峰之间的分离度）。吸收剂颗粒本质上可以是疏水的或极性的。

常用的流动相包括水与各种有机溶剂的任何混溶性组合（最常见的是乙腈和甲醇）。一些HPLC技术使用无水流动相（请参见下面的正相色谱法）。

流动相的水性成分可能包含酸（例如甲酸，磷酸或三氟乙酸）或盐以帮助分离样品成分。在色谱分析过程中，流动相的组成可以保持恒定（“等度洗脱模式”）或变化（“梯度洗脱模式”）。等度洗脱通常在分离与固定相亲和力非常不同的样品成分时非常有效。

在梯度洗脱中，流动相的组成通常从低到高洗脱强度变化。流动相的洗脱强度由分析物的保留时间反映，高洗脱强度可产生快速洗脱（=较短的保留时间）。

反相色谱中的典型梯度曲线可能始于5％的乙腈（在水或水性缓冲液中），然后在5–25分钟内线性增长至95％的乙腈。恒定流动相组成的周期可以是任何梯度曲线的一部分。例如，流动相的组成可以在5％的乙腈中保持1-3分钟，然后线性变化直至95％的乙腈。

流动相的选定组成取决于各种样品组分（“分析物”）和固定相之间的相互作用强度（例如，反相HPLC中的疏水相互作用）。根据它们对固定相和流动相的亲和力，在色谱柱中进行分离过程中，分析物会在两者之间分配。

此分配过程类似于液-液萃取过程中发生的分配过程，但该过程是连续的，而不是逐步进行的。在此示例中，使用水/乙腈梯度洗脱，一旦流动相在乙腈中的浓度更高（即，在洗脱强度更高的流动相中），则更多的疏水性组分将较晚洗脱（从色谱柱中洗脱）。

流动相组分，添加剂（例如盐或酸）和梯度条件的选择取决于色谱柱和样品组分的性质。通常对样品进行一系列的试验，以便找到可以充分分离的HPLC方法。

用途

高效液相色谱作为一种重要的分析方法，广泛的应用于化学和生化分析中，常用于医药品、化学、环保、生命科学、与食品工业的研究上。

高效液相色谱从原理上与经典的液相色谱没有本质的差别，它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相，可将液体混合物中的成分分离、成分定性及定量分析。适于分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。例如：可检测分析食品中的三聚氰胺的含量。

⑶ HPLC分类及其原理

HPLC分类有很多种，可以根据不同的依据进行分类。

1. 根据流动相和固定相的极性不同，HPLC可以分为正相色谱和反相色谱。

正相高效液相色谱： 色谱柱中的固定相是由硅胶、氧化铝等极性化合物组成。当色谱运行时，由于样品中的极性化合物对固定相有较强的亲和力，使它们在色谱柱中的保留时间比非极性化合物长，因此非极性化合物最先被洗脱出来。许多物质都可以用正相色谱法分析，但由于药物、食物和其他生物制品大都是非极性的，所以在日常生活中应用不如反向色谱法广泛。

反相高效液相色谱 ：固定相由非极性化合物组成，如十八烷基硅烷、C18、C8等有机化合物。流动相是极性的。因此，极性高的化合物最先被洗脱，低极性或无极性的化合物最后洗脱。

HPLC大都是对药物、食品、生化分子等物质进行分析，而它们在自然界中都是极性物质（水溶性）。因此，反相高效液相色谱应用更为广泛。

2. 根据分离原理的不同，HPLC可分为以下六种。

亲和色谱： 主要利用样品与固定性之间的亲和性，实现分离。

离子交换色谱： 基于固定相与流动相的带电基团发生可逆交换，达到分离目的。离子交换树脂用于分离含有带电离子的样品。对于阴离子，使用阴离子交换树脂；对于阳离子，使用阳离子交换树脂。主要用于分离酸性和碱性化合物。

离子对色谱： 在反相色谱的流动相或固定相中加入离子配对剂，与样品中可电离的成分形成“对离子”。常用的离子配对剂有戊烷、己烷、庚烷或辛烷磺酸盐等。

吸附色谱： 是利用吸附性不同的原理，根据样品中的组分对固定相的亲和力不同而发生分离。

空间排阻色谱： 按样品中的组分的分子大小顺序进行分离。色谱柱是由琼脂糖、葡聚糖、聚丙烯酰胺等软凝胶制成，也可用烷基葡聚糖、聚苯乙烯等半刚性凝胶。

手性色谱： 用于分离样品中的光学活性异构体。固定相采用化学键合硅胶。常应用于医药、生物等领域。

3. 根据分析目的不同，HPLC可以分为分析型液相色谱和制备型液相色谱。

分析型液相色谱： 主要利用检测器对混合物中各组分进行定性和定量分析。

制备型液相色谱： 主要是对混合物中各组分进行分离纯化。制备型的色谱柱和进样量都比分析型大。

4. 正如大家所知道的，混合物的分离是由于流动相流过HPLC色谱柱完成的，其中流动相可以是单一的溶剂，也可以是混合溶剂，因此HPLC可以分为等度洗脱和梯度洗脱两种类型。

等度洗脱： 只有一种溶剂，所有的操作都是在一种溶剂下进行的。

梯度洗脱： 流动相由两种或两种以上的溶剂组成，并不断改变其浓度配比。

迪信泰检测平台以液相/气相为依托，组建国际领先的HPLC、LC-MS、GC-MS等检测平台，为广大科研工作者提供高质量、快速、精准的一站式检测服务，涉及生物、食品、药物、化妆品、环境等多领域。

参考资料：Types Of HPLC | Their Principle And Application

⑷ 高效液相色谱有几种定量方法其中那种是比较精确的定量方法并简述

峰面积法、峰高法、归一法、外标法。峰面积法是比较精确的定量方法

⑸ hplc是下列哪种分析法的简写符号

hplc是高效液相色谱法的简写符号。根据查询相关公开信息显示，高效液相色搭毁谱法指高效液咐袭相色谱。高效液相色谱法（HPLC）又称高压液相色谱、高速液相色谱、高分离度液相色谱、近代柱色谱等。高效液相色知简备谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相。

⑹ HPLC-EL - SD、hplc - uv、比色法等不同分析方法的优缺点

1、优点：HPLC-EL-SD是一种重要的分离分析手段，获得了广泛的应用；悄厅hplc-uv占有极其重要的地位，据估计，70％左右的药品标准中的含量测定采用hplc-uv方法；比色法在早期启仔隐采用分部收集柱有色洗脱液后，用分光法和滴定法进行测定。
2、缺点：HPLC-EL-SD柱所用的固定相粒度很小(10μm以下)，因此它的分离效率偏低；hplc-uv中的流动相可以选择不同极性的液体，缺少亲和力戚梁；比色法应用于高沸点、热稳定性差、摩尔质量大的化合物的分离分析，限于分离分析低沸点的化合物及气体。

⑺ 高效液相色谱法中定性和定量依据是什么在HPLC中的定量方法有哪些

定性是依据保留时间
定量是依据峰面积和样品量的线性关系
定量方法常用的有：面积归一化法，外标法，内标法

⑻ HPLC、UV、GC、TLC是什么检测方法

TLC:薄层色谱法.系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值（Rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。
PC:纸色谱法.是一种可以测试物质的纯度与分离混合物的方法，因为它可以快速的完成分析，而且对材料的限制很少，所以是一种极方便而且有用的分析方法。纸色谱法用的分离原则跟薄层色谱法一样，物质分布在一个固定相与流动相。固定相通常是滤纸，流动相会带着物质在上面流动，这个装置将会根据混合物中不同物质对固定相的附着力和对流动相的溶解度而分离出来。分析颜料时，如果颜料中含有不只一种物质，不同颜色的物质会就根据溶剂和不同溶质的极性分开，这是因为不同的分子结构极有可能有不同的极性。这些不同的极性造就对溶剂的不同溶解度，使各种溶质会在溶剂扩散的不同位置沉淀在固定相上以斑点呈现，就可以根据固定相上的斑位置及大小作分析。
HPLC:高效液相色谱法.是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
GC:气相色谱.可分为气固色谱和气液色谱。气固色谱指流动相是气体，固定相是固体物质的色谱分离方法。例如活性炭、硅胶等作固定相；气液色谱指流动相是气体，固定相是液体的色谱分离方法。例如在惰性材料硅藻土涂上一层角鲨烷，可以分离、测定纯乙烯中的微量甲烷、乙炔、丙烯、丙烷等杂质。

⑼ 馨鲜酮含量检测方法

1. 高效液相色谱法（HPLC）：HPLC是一种常用的分析方法，可以用于检测馨鲜酮的含量。该方法需要使用高效液相色谱仪，将馨鲜酮从食品样品中分离出基缺来，然后测量其浓度。
2. 气相色谱法（GC）：GC也是一种常用的分析方法，可以用于检测馨鲜酮的含量。该方法需要使用气相色谱仪，将馨鲜酮从食品样品中分离出来，然后测量其浓度。
3. 毛细管电泳法（CE）：CE是一种高效、快速的磨衡分析方法，可以用于检测馨鲜酮的含量。该方法需要使用毛细管电泳仪，将馨鲜酮从食品样品中分离出来，然后测量其浓度。
4. 红外光谱法（IR）：IR可以用于分析分子结构和化学键，也可以用于检测馨鲜酮的含量。该方法需要使用红外光谱仪，将食品样品和馨鲜酮分别进行红外光谱分析，然后根据吸收峰的强度计算馨鲜搏游辩酮的含量。

⑽ 请问在色谱分析中提到的“HPLC”指的是什么

是高效液相色谱的意思.英文全称:
High Performance Liquid Chromatography