豆甾醇纯度的气相色谱分析方法

❶ 第十九章：气相色谱法

分离机制：吸附色谱、分配色谱

固定相的聚集状态：气-液色谱法、气-固色谱法

操作形式：柱色谱、填充柱色谱、毛细管柱色谱

固定液一般是高沸点液体，在室温下呈固态或也太，在操作温度下为液态

要求：蒸汽压不低于10Pa，热稳定性好；选择性高；对试样中各组分由足够的溶解能力

分类：

固定液的选择：

载体：

载体钝化：

吸附剂：石墨化炭黑、硅胶、氧化铝、分子筛

高分子多孔微球：耐高温、色谱峰形对称；无柱流失现象，寿命长；一般按极性顺序分离，极性大先出

净化管：硅胶和分子筛可以消除水分，装有活性铜基催化剂的柱管和装有105型钯催化剂的柱管可降低氧含量，采用5A分子筛净化器可消除微量烃，净化管中填料应该经常更换

结构简单、不破坏样品、通用性强、灵敏度低

检测原理：测定纯载气与色谱柱中载气的热导差值产生信号

使用注意事项：

灵敏度高、响应快、噪声小、线性范围宽，样品被破坏且只能测定含碳化合物，适宜痕量组分分析

检测原理：离子化室、火焰喷嘴、发射极、收集极。加热使被测组分电橡镇离产生的离子在电场作用下定向运动形成电流

使用注意事项：

高选择性、高灵敏度，只对含有强电负性元素响应

结构和原理：放射源辐射氮气产生电子和正离子，形成电流，电负性原子捕获电子与正离子反应形成中性粒子，降低电流，产生信号

使用注意事项：

低柱温有利于分离

分离方程式：

增加k，分离度增加但是峰变宽；增加n，峰变锐，改善分离度；增加α，分离选择性增加而提高分离度

对一些挥发性或热稳定性差的物质，需进行预处理

按材质：金属、玻璃、弹性熔融石英（FSOT）

按制备方法：开管型、填充型

按内壁状态：

按内径：

对于高效薄膜毛细管柱，液相传质阻抗小，影响柱效的主要是气相传质阻抗，为了降低该项，选用氢气氦气作为载气

流路系统与填充柱没有本质差别，主要区别是在进样系统增加分流装置，在柱后增加尾吹起供气装置

拉制、柱表面处理、固定液涂渍

柱外效应对分离效率和定量结果影响很大，在进样部分要有特殊处理装置

HS-GC：取样品上方的气相部分进行分析，一般过程包括：加热平衡、取样、进样、气相源如辩色谱分析。柑橘取样和进样不同可分为静态顶空气相色谱法和动态顶空气相色谱法

根据《中国药典》要求，色谱法用于药物分析时，需按各品种项下要求对色谱系统进行适用性试验，即用规定的对照品溶液或系统适用性试验液进行试验，以判定所用色谱系雹缺统是否符合规定

由于同一检测器对相同质量的不同物质具有不同的响应值，因此不能用峰面积来直接计算物质的量，需要引入校正因子的概念。

相对校正因子 ：被测物质i与标准物质s的绝对校正因子之比

1.归一化法：

简便、定量结果与进样量无关，操作条件变化对结果影响小但是必须在一个分析周期内测定所有组分，且检测器对它们都有信号，不能用于微量杂质测定

❷ 气相色谱的方法

顶空进样法是气相色谱特有的一种进样方法。适用于挥发性大的组分分析。测定时，精密称取标准溶液和供试品溶液各3-5 ml分别置于容积为8 ml的顶空取样瓶中。将各瓶在60摄氏度的水浴中加热30-40 min，使残留溶剂挥发达到饱和，再用在同一水浴中的空试管中加热的注射器抽取顶空气适量（通常为1 ml）。进样，重复进样3次，按溶剂直接进样法进行计算与处理。
顶空进样法使待测物挥发后进样，可免去样品萃取、浓集等步骤，还可避免供试品种非挥发组分对柱色谱的污染，但要求待测物具有足够的挥发性。
顶空分析是通过样品基质上方的气体成分来测定这些组分在原样品中的含量。其基本理论依据是在一定条件下气相和凝聚相（液相和固相）之间存在着分配平衡。所以，气相的组成能反映凝聚相的组成。可以把顶空分析看作是一种气相萃取方法，即用气体做“溶剂”来萃取样品中的挥发性成分，因而，顶空分析就是一种理想的样品净化方法。传统的液液萃取以及SPE都是将样品溶在液体里，不可避免地会有一些共萃取物的干扰分析。况且溶剂本身的纯度也是一个问题，这在痕量分析中尤为重要。而其做溶剂可避免不必要的干扰，因为高纯度气体很容易得到，且成本较低。这也是顶空气相被广泛采用的一个原因。
作为一种分析方法，顶空分析首先简单，它只取气体部分进行分析，大大减少了样品本身可能对分析的干扰或污染。作为GC分析的样品处理方法，顶空是最为简便的。其次，是可以使气化后进样，顶空分析有不同模式，可以通过优化操作参数而适合于各种样品。第三，顶空分析的灵敏度能够满足法规的要求。第四，顶空进样可相对的减少用于溶解样品的沸点较高的溶剂的进样量，缩短分析时间，但对溶剂的纯度要求较高，尤其不能含有低沸点的杂质，否则会严重干扰测定。最后，与GC的定量分析能力相结合，顶空GC完全能够进行准确的定量分析。 根据取样和进样方式的不同，顶空分析有动态和静态之分。所谓静态顶空就是将样品密封在一个容器中，在一定温度下放置一段时间使气液两相达到平衡。然后取气相部分带入GC分析。所以静态顶空GC又称为平衡顶空GC，或叫做一次气相萃取。如果再取第二次样，结果就会不同于第一次取样的分析结果，因为第一次取样后样品组分已经发生了变化。与此不同的是连续气相萃取，即多次取样，直到样品中挥发性组分完全萃取出来。这就是所谓的动态顶空GC。常用的方法是在样品中连续通入惰性气体，如氦气，挥发性成分即随该萃取气体从样品中逸出，然后通过一个吸附装置（捕集器）将样品浓缩，最后再将样品解析进入GC进行分析。这种方法通常被称为吹扫-捕集分析方法。

❸ 化学，如何验气体的纯度

如果条件允许的话，可以使用气相色谱仪对气体纯度检测生成色谱图进行精确做埋运分析。

气相色谱仪对气体分析纯梁的原理：

按照气体导入检测器的先后次序，经过对比，可以液指区别出是什么组分，根据峰高度或峰面积可以计算出各组分含量。通过把被色谱柱分离的样品组分根据其特性和含量转化成电信号，经放大后，由记录仪记录成色谱图。

(3)豆甾醇纯度的气相色谱分析方法扩展阅读：

气相色谱仪的仪器特点：

（1） 大屏幕液晶中文显示，同时显示各路控温参数及载气流量或检测器参数，各种数据一目了然。

（2） 数字流量显示，采用电子质量流量计，从屏幕精确显示载气流量。

（3） TCD断气自动保护，仪器断气或漏气时，微机系统自动断开桥电流，保护钨丝不被损坏。

（4） 先进的气路流程，仪器采用一次进样，三检测器技术，分离效果更好，灵敏度更高。

（5） 自动功能：开机后，仪器自动检测运行状态，如有问题自动显示故障部位及故障类型，并对仪器自我保护。

（6） 专用色谱工作站和色谱数据处理器。

❹ 药物分析——气相色谱法

气相色谱法：以气体为流动相的色谱法称为气相色谱法。不适用于难挥发和热稳定性差的物质分析。

原理：各组分在固定相与载气（流动相）间分配系数不等，按大小依次被载气带出色谱柱，小先流出。

一、基本原理：

（一）、基本概念：

一个组分的色谱峰用三项参数：峰高或峰面积（用于定量）、峰位（用保留值表示，用于定性）、峰宽（用于衡量柱效）。

（1）、保留时间 （tR） ：从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔。

（2）、死时间 （t0）：分配系数为零的组分的保留时间。

（3）、相对保留值 （r）：两组分的调整保留值之比。

（4）、半峰宽 （Wh/2）：峰高一半处的峰宽。

（二）、塔板理论：

塔板理论方程式（高斯方程式）

理论塔板式数

理论塔板高度

（三）、速率理论：

H=A B/u Cu

影响塔板高度的因素：

1、涡流扩散 2、纵向扩散 3、传质阻抗

二、气相色谱仪：

（1）、色谱柱：固定相与柱管组成。 填充柱、毛细管柱； 分配柱、吸附柱

（2）、固定液：高沸点的液体，操作下为液态。 甲基硅油、聚乙二醇等

选择原则：按相似含基乱性、按主要差别、按麦氏差别选择。

（3）、载体：化学惰性的多孔性微粒

（4）、毛细管色谱柱：开管型、填充型

（5）、检测器： 医学教。育网搜集整理

1、浓度型检测器：热导检测器和电子捕获检测器

2、质量型检测器：氢焰离子谈档化检测器

中国药典2000对气相色谱规定：除检测器种类、固定液品种及特殊指定的色谱柱材料不锋猛得任意更改外，其他均可适当改变，色谱图于30min内记录完毕。

❺ 豆甾醇的制备方法

天然植物甾醇在结构上与动物甾醇如胆甾醇相似,是植物中的一种活性成份,存在于各种植物油中。植物甾醇及其衍生物因其特有的生物学活性和物理化学性质,广泛应用于医药、食品和化妆品等行业。从植物油中分离出来的甾醇是由一类结构相似,物性差别小的甾类化合物组成,主要包括豆甾迹做铅醇、b -谷甾醇、菜油甾醇和菜籽甾醇,它们在结构上的主要区别在于侧链基团的不同。混合植物甾醇的有效分离是实现单组分高纯度姿好植物甾醇规模化生产过程中一个重要的研究课题,对混合植物甾醇进行分离精制,可以为胡羡甾体药物的生产提供较为廉价。
系植物甾醇之一，并为植物细胞膜的常用甾醇。常和油脂共存于许多植物种子和花粉中。

❻ 气相色谱法的分析方法

气相色谱法的分析方法分为以下几个步骤：

1、样品的来源和预处理方法

GC能直接分析的样品必须是气体或液体，固体样品在分析前应当溶解在适当的溶剂中，而且还要保证样品中不含GC不能分析的组分（如无机盐），可能会损坏色谱柱的组分。这样，我们在接到一个未知样品时，就必须了解的来源，从而估计样品可能含有的组分，以及样品的沸点范围。如能确认样品可直接分析。如果样品中有不能用GC直接分析的组分，或样品浓度太低，就必须进行必要的预处理，包括采用一些预分离手段，如各种萃取技术、浓缩和稀释方法、提纯方法等。

2、确定仪器配置

所谓仪器配置就是用于分析样品的方法采用什么进样装置、什么载气、什么色谱柱以及什么检测器。

3、确定初始操作条件

当样品准备好，且仪器配置确定之后，就可开始进行尝试性分离。这时要确定初始分离条件，主要包括进样量、进样口温度、检测器温度、色谱柱温度和载气流速。进样量要根据样品浓度、色谱柱容量和检测器灵敏度来确定。样品浓度不超过mg/mL时填充柱的进样量通常为1-5uL，而对于毛细管柱，若分流比为50：1时，进样量一般不超过2uL。进样口温度主要由样品的沸点范围决定,还要考虑色谱柱的使用温度。原则上讲，进样口温度高一些有利，一般要接近样品中沸点的组分的沸点，但要低于易分解温度。

4、分离条件优化

分离条件优化目的就是要在*短的分析时间内达到符合要求的分离结果。在改变柱温和载气流速也达不到基线分离的目的时，就应更换更长的色谱柱，甚至更换不同固定相的色谱柱，因为在GC中，色谱柱是分离成败的关键。

5、定性鉴定

所谓定性鉴定就是确定色谱峰的归属。对于简单的样品，可通过标准物质对照来定性。就是在相同的色谱条件下，分别注射标准样品和实际样品，根据保留值即可确定色谱图上哪个峰是要分析的组分。定性时必须注意，在同一色谱柱上，不同化合物可能有相同的保留值，所以，对未知样品的定性仅仅用一个保留数据是不够的，双柱或多柱保留指数定性是GC中较为可靠的方法，因为不同的化合物在不同的色谱柱上具有相同保留值的几率要小得多。

6、定量分析

要确定用什么定量方法来测定待测组分的含量。常用的色谱定量方法不外乎峰面积（峰高）百分比法、归一化法、内标法、外标法和标准加入法（又叫叠加法）。峰面积（峰高）百分比法*简单，但*不准确。只有样品由同系物组成、或者只是为了粗略地定量时该法才是可选择的。相比而言，内标法的定量精度，因为它是用相对于标准物（叫内标物）的响应值来定量的，而内标物要分别加到标准样品和未知样品中，这样就可抵消由于操作条件（包括进样量）的波动带来的误差。至于标准加入法，是在未知样品中定量加入待测物的标准品，然后根据峰面积（或峰高）的增加量来进行定量计算。其样品制备过程与内标法类似但计算原理则完全是来自外标法。标准加入法定量精度应该介于内标法和外标法之间。

7、方法的验证

所谓的方法验证，就是要证明所开发方法的实用性和可靠性。实用性一般指所用仪器配置是否全部可作为商品购得，样品处理方法是否简单易操作，分析时间是否合理，分析成本是否可被同行接受等。可靠性则包括定量的线性范围、检测限、方法回收率、重复性、重现性和准确度等。

❼ 使用气相色谱仪分析检测的方法是什么

1.安装拆卸色谱柱必须在常温下。

2.填充柱有卡套密封和垫片密封，卡套分三种，金属卡套，塑料卡套，石墨卡套，安装时不易拧的太紧。垫片式密封每次按装色谱柱都要换新的垫片（岛津色谱是垫片密封）。

3.色谱柱两头是否用玻璃棉塞好。防止玻璃棉和填料被载气吹到检测器中。

4. 毛细管色谱柱 安装插入的长度要根据仪器的说明书而定，不同的色谱汽化室结构不同，所以插进的长度也不同。需要说明的如果你用 毛细管色谱柱 采用不分流，汽化室采用填充柱接口这时与汽化室连接毛细管柱不能探进太多，略超出卡套即可。

❽ 豆甾醇是否溶解于冰醋酸

冰醋酸化学式为CH3COOH。冰醋酸是无色、有刺激性酸味的液体，熔点16.6℃、沸点117.87℃、密度为1.0492g/cm3。纯醋酸在16.6℃以下能结合成冰状固体。冰醋酸易溶于水及许多有机溶剂。冰醋酸有强烈的腐蚀性，它的水溶液有弱酸性，能跟许多活泼金属、碱性氧化物、碱等反应生成醋酸盐。某些醋酸盐如醋酸锰、醋酸铝可用做染色工业的媒染剂。工业上生产醋酸有两类方法：一类是以粮食或酒为原料，用发酵法酿醋，食用醋常用此法。食用醋除含3～6%的醋酸，还含有其它有机酸、蛋白质等。另一类是用石油裂解气提取的乙烯(C2H4)或丁烷(C4H10)为原料，在一定条件下氧化成醋酸。醋酸是重要的有机化工原料，用于生产醋酸纤维、喷漆尘兄溶剂、香料、染料、医药等。

1.物质的理化常数:

国标编号 81601

CAS号 64-19-7

中文名称 乙酸

英文名称 Acetic acid

别 名 醋酸；冰醋酸

分子式 C2H4O2；CH3COOH 外观与性状 无色透明液体，有刺激性酸臭

分子量 60.05 蒸汽压 1.52kPa/20℃ 闪点：39℃

熔 点 16.7℃ 沸点：118.1℃ 溶解性 溶于水、醚、甘油，不溶于二硫化碳

密 度 相对密度(水=1)1.05；相对密度(空气=1)2.07 稳定性 稳定

危险标记 20(酸性腐蚀品) 主要用途 用于制造醋酸盐、醋酸纤维素、医药、颜料、酯类、塑料、香料

2.对环境的影响:

一、健康危害

侵入途径：吸入、食入、经皮吸收。

健康危害：吸入后对鼻、喉和呼吸道有刺激性。对眼有强烈刺激作用。皮肤接触，轻者出现红斑，重者引起化学灼伤。误服浓乙酸，口腔和消化道可产生糜烂，重者可因休克而致死。

慢性影响：眼睑水肿、结膜充血、慢性咽炎和支气管炎。长期反复接触，可致皮肤干燥、脱脂和皮炎。

二、毒理学资料及环境行为

毒性：属低毒类。

急性毒性：LD503530mg/kg(大鼠经口)；1060mg/kg(兔经皮)；LC505620ppm，1小时(小鼠吸入)；人经口1.47mg/kg，最低中毒量，出现消化道症状；人经口20～50g，致死剂量。

亚急性和慢性毒性：人吸入200～490mg/m3×7～12年，有眼睑水肿，结膜充血，慢性咽炎，支气管炎。

致突变性：微生物致突变：大肠杆菌300ppm(3小时)。姊妹染色单体交换：人淋巴细胞5mmlo/L。

生殖毒性：大鼠经口最低中毒剂量(TDL0)：700mg/kg(18天，产后)，对新生鼠行为有影响。大鼠睾丸内最低中毒剂量(TDL0)：400mg/kg(1天，雄性)，对雄性生育指数有影响。

危险特性：其派指袭蒸气与空气形成爆炸性混合物，遇明火、高热能引起燃烧爆炸。与强氧化剂可发生反应。逗歼

燃烧(分解)产物：一氧化碳、二氧化碳。

3.现场应急监测方法:

气体检测管法；水质检测管法

气体速测管（北京劳保所产品、德国德尔格公司产品）

4.实验室监测方法:

气相色谱法《空气中有害物质的测定方法》(第二版)，杭士平主编

5.环境标准:

前苏联 车间空气中有害物最大允许浓度 5mg/m3

前苏联(1975) 居民区大气中有害物最大允许浓度 0.1mg/m3(最大值)

0.003mg/m3(昼夜均值)

前苏联(1975) 污水中有机物最大允许浓度 10mg/L

嗅觉阈浓度 2.5mg/m3

6.应急处理处置方法:

一、泄漏应急处理

疏散泄漏污染区人员至安全区，禁止无关人员进入污染区，切断火源。建议应急处理人员戴自给式呼吸器，穿化学防护服。不要直接接触泄漏物，在确保安全情况下堵漏。喷水雾能减少蒸发但不要使水进入储存容器内。用沙土、蛭石或其它惰性材料吸收，然后收集运至废物处理场所处置。也可以用大量水冲洗，经稀释的洗水放入废水系统。如大量泄漏，利用围堤收容，然后收集、转移、回收或无害处理后废弃。

二、防护措施

呼吸系统防护：空气中浓度超标时，应该佩带防毒面具。紧急事态抢救或逃生时，佩带自给式呼吸器。

眼睛防护：戴化学安全防护眼镜。

防护服：穿工作服(防腐材料制作)。

手防护：戴橡皮手套。

其它：工作后，淋浴更衣。注意个人清洁卫生。

三、急救措施

皮肤接触：脱去污染的衣着，立即用水冲洗至少15分钟。若有灼伤，就医治疗。

眼睛接触：立即提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗至少15分钟。就医。

吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。呼吸困难时给输氧。给予2-4%碳酸氢钠溶液雾化吸入。就医。

食入：误服者给饮大量温水，催吐。就医。

灭火方法：雾状水、泡沫、二氧化碳、砂土。

❾ 国标植物甾醇检测方法

前言
本方法适用于
保健食品
中
植物甾醇
的测定
本方法
谷甾醇
和
豆甾醇
的
检出限
为0.02μg
本方法
线性范围
为0.1~0.5mg/ml
1.方法提要
试样中的谷甾醇和豆甾醇经提取后在高效反相色谱C18柱分离，用
紫外检测器
检测，以外
标法定量谷甾醇和豆甾醇的含量。
2.仪器
高效液相色谱仪，带紫外检测器。
3.试剂
除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。
（1）异丙醇：色谱纯。
（2）乙腈：色谱纯
（3）乙醇。
（4）β—谷甾醇对照品：Fluka公司（纯度≥90%）
（5）豆甾醇对照品：Fluka公司（纯度≥90%）
（6）谷甾醇和豆甾醇混合标准溶液：精度称取β-谷甾醇和豆甾醇对照品0.0100g，移入
10ml容量瓶中，加入乙醇，
超声波
振荡助溶，并用乙醇定容到10ml，此为
浓度
1.0mg/ml的
标准储备液。
方法
1
4.测定步骤
（1）样品处理：称取均匀样品0.25g（精确到0.1mg），置于50ml容量瓶中，加入40ml乙
醇，超声波振荡60min取出，冷却后用乙醇定容至刻度，摇匀后经0.45μm微孔膜过滤，清液
待分析。
（2）标准工作曲线绘制：精度吸取β-谷甾醇和豆甾醇标准溶液（1.0mg/ml）1.0、2.0、5.
0ml，分别置于10ml容量瓶中，用乙醇定容，摇匀。分别取10μl标准工作系列溶液进样分析
，以测得的β-谷甾醇和豆甾醇的峰面积，分别对β-谷甾醇和豆甾醇的浓度绘制标准曲线。
（3）色谱条件
色谱柱：ODSC18液相色谱柱，4.6mm×250mm，5μm。
流动相：乙腈＋异丙醇（70＋30，V/V）。
流速：1ml/min。
柱温：室温。
紫外检测波长：210nm。
（4）样品测定：取样品滤液10μl进液相色谱仪分离测定，根据色谱峰保留时间定性，以外
标峰面积法进行定量。
5、结果计算
根据待测样品色谱峰面积，由标准曲线回归方程式的样液中β—谷甾醇和豆甾醇含量，计算出样品中的含量。
样品中β—谷甾醇和豆甾醇含量按下式进行计算
X
=
m×100
式中X-样品中β—谷甾醇和豆甾醇含量（g/100g）；
C—进样液中β—谷甾醇和豆甾醇的浓度（mg/ml）；
V—样品的定容体积（ml）；
m—样品的取样量（g式中X-样品中β—谷甾醇和豆甾醇含量（g/100g）；
C—进样液中β—谷甾醇和豆甾醇的浓度（mg/ml）；
V—样品的定容体积（ml）；
m—样品的取样量（g）

❿ 气相色谱仪的使用步骤

这个网上一搜，一大吧！下面找也找个了，希望有点用处

随着科技的发展，气相色谱仪成为现今主流的检测设备，该文主要介绍了气相色谱仪的相关原理、操作使用流程及其注意事项。文章可为气相色谱仪的使用人员提供相关的理论指导及实践经验。（重点看黑色字体涵盖内容就好）

气液色谱法于1952年第一次被创立，该方法发展至今已广泛应用于石油冶炼行业、化学化工行业、生物制药工业、环境监测等领域。而基于该方法生产的气相色谱仪已成为气相色谱分析的主要工具。但其操作、使用具有一定的规程，操作者必须具备良好的操作技能才能在实践中更好地发挥气相色谱仪的功能。

一、气相色谱仪使用方法、程序

气相色谱仪主要由固定相和流动相组成：固定相和流动相各自有不同的吸附和分配作用;通过两相的相对运动，被检测物质随流动相一起运动，这样物质就在两相间进行反复的分配，从而把不同的组织分离开来。气相色谱仪的使用和操作流程一般包括以下几个程序。

1.加热

不同厂家生产的气相色谱仪给定温度的方式是不相同的。温度给定方式一般可分为：微机设数法、旋钮定位法等。如果采用微机设数法给定温度，温度可以直接被指定和设置。如果是采用旋钮定位法，其使用则有技巧。采用过温定位法，将温控旋钮调至低于操作温度约30℃处，给气相色谱仪升温。

6.色谱柱

在安装毛细管时，要保证色谱柱的两端切口是平整的。毛细柱在长时间不使用的情况下，在将毛细柱接进入样口和检测器之前应将其两端切掉2cm左右。

7.检测器

未处于工作状态的检测器不应开启，应使其保持关闭状态。对于ECD检测器，其在排放放空气时应设置导管，把空气排出室外。平时使用时也应该注意，不要把空气引入到ECD检测器中。

结语

气相色谱仪作为现代主流的检测设备，其工作原理并不难懂，但设备使用有着严格的操作程序。每个使用环节都一定的要求，从气源、设备到外界环境条件都有特殊要求。只有了解了这些要求才能高效、快捷的使用气相色谱仪。