㈠ 感受态细胞(细菌),什么是感受态细胞
野生型E.coli并不容易转化,这是由于细菌产生一种酶能迅速降解进入的外源DNA。经过多年的努力,科学家们发现了一种方法可以增加细胞吸收外源DNA的效率。那就是用化学方法处理细胞,使其改变膜对DNA的通透性。这种细胞就称为感受态细胞,即细胞处于能摄入核酸分子时的生理状态。这种方法已经成为基因工程的常规技术,它对于我们利用体外DNA重组技术来了解真核和原核生物的基歼碰因功能特别重要。细菌的转化有两种类型:一种是自然转化(natural transformation),在自然转化中细菌可以自由地吸收DNA,通过它来进行遗传转化;另一种是工程转化(engineered transformation),在这种转化中,细菌发生改变使得它们能摄入并转化外源DNA。枯草杆菌中的转化属于自然转化,E.coli转化就腔嫌属于氏圆谈工程转化。
㈡ 将目的基因导入微生物细胞。 是叫做…感受态细胞法 还是 钙离子处理法
额,这个叫转化。Cacl2法是用来做感受态细胞的,感受态细胞才会来转化。
㈢ 将目的基因导入微生物细胞时,用钙离子处理细胞,有什么作用,它处理的是什么
钙离子处理过的细胞称为感受态细胞 。所谓感受态 就是能够比较容易吸收物质 即轿卖通透性变大 不管是原核还是真核的都可以。用氯化让帆岁钙处理细菌后,实质是增加了细胞膜的通透性,坦睁不是细胞壁。 细胞壁本来就是全透性的 。
㈣ 钙离子处理细胞的方法与感受态细胞法的区别
将目的基因导入微生物细胞,应采用感受态细胞法(Ca2+处理法)
㈤ 中Ca2+处理细菌是增加细胞壁还是细胞膜的通透性
是增加细菌细胞壁的通透性
细菌细胞壁的主要功能是保护细胞、维持细胞形状、协助鞭毛运动等,而且还与细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的敏态芦感性有关。细菌的细胞壁梁闭闷是多孔性的,可容许水和一些化学物质通过,但大分子的物质不能通过
高等教育出版社的《现代分子生物学》中没有明确指出作用部位和原理:“将快速生长中的大肠杆菌置于经低温预处理的低渗氯化钙溶液中,便会造成细胞膨胀(形成原生质球),并与转化混合物中的外源DNA形成粘附在细胞表面的复合物。立即将该体系转移到42度下做短暂的热刺激,复合物便会被细胞所吸收。”
转化把纯化的DNA导入细菌细胞的过程称为转化。原核细胞的转化过程就是导入外源DNA的过程。对于大肠杆菌来说,人们一般采用先用冰冷的CaCl2处理,然后置于42°C高温下帮助其吸收外源的DNA,这种方法的最大转化频率为10-3,其效率是每微克DNA一般可以转化107~108个细胞。目前CaCl2转化方法的机制尚不清楚,可能是细胞壁被打了一些孔,DNA分子从这些孔洞中进入细胞,而这些孔洞随后又可以被宿主细胞修复。可以接橡弯受DNA的细胞称为感受态细胞。大肠杆菌需要诱导才能变成感受态细胞,而有些细菌细胞则在自然条件下,或是在改变培养基和其他培养条件下就可变成感受态细胞。
㈥ 将目的基因导入微生物细胞时,用钙离子处理细胞,有什么作用,它处理的是什么
首先用钙离子处理细胞,使细胞处于一昌乱种能吸收周围dna分子的生理状态(感受态细胞)。然后将重组表达载体dna分子耐察档溶于缓冲液与感受态细胞混合,在一定温度下促进感受态细胞吸收dna分子,完成没扒转化过程
㈦ 将目的基因导入微生物细胞之前,要用Ca2+处理细胞,处理过的细胞叫()A.感受态细胞B.敏感性细胞C
由于原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传瞎山物质相对较少等,磨纯中所以常用原核生物作为受体.在将目的基因导入微生物细胞之前,要用Ca2+处理细胞,使处理过的细胞成为感裤弯受态细胞,便于重组质粒的导入.
故选:A.
㈧ 用钙离子处理成为感受态细胞的转化方法
原因:目的基因导入植物细胞时,由于没有经过钙离子处理没有变成感受态细胞,细胞的通透性小,目的基因难以进入细胞。
感受态细胞主要原理:
1、通过处理使细胞的通透性变大。
2、使得细胞膜表面出现一些孔洞,便于外源基因或载体进入感受态细胞。
3、由于细胞膜的流动性,这种孔洞会被细胞自身所修复。
(8)用ca2处理细胞称为什么方法扩展阅读:
氯化钙法:
1、将快速生长的大肠杆菌置于经低温(0℃)预处理的低渗氯化钙溶液中,便会造成细态枣胞膨胀,同时Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构,促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来,离开所在区域,诱导细胞成为感受态细胞。
2、此时,将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激(90s),细胞膜的液帆燃拆晶结构会发生剧烈扰动,并随机出现许多间隙,外源DNA就可能被细胞吸收。进入细胞的外源DNA分子通过复制、表达,实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状。
3、将转化后的细段信胞在选择性培养基上培养,筛选出带有外源DNA分子的阳性克隆。
㈨ 用钙离子将受体细胞变为感受态细胞的方法叫什么法
准确来说是:钙离子转化法
㈩ 将同的基因导入微生物的方法:先用Ca2+处理再融合为什么一定要用Ca2+这个过程怎么理解
用钙离子处理细胞,是为了让细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,这种细胞称为感受态细谨搭皮胞,这种状态的细胞更易完成目的基因的导枝慎入。可参考就中祥差生物选修三。