血凝分析根据检测原理有哪些方法

Ⅰ 简述常见的抑制血液凝固的方法及基本原理

抗凝----应用化学或物理学的方法，抑制或除去血液中的某些凝血因子以阻止血液凝固的方法。
抗凝剂----能阻止血液凝固的化学试剂。
一、枸橼酸钠
【原理】枸橼酸钠（柠檬酸钠）是枸橼酸钠的三钠盐。它能与血液中的钙离子形成可溶性的螯合物，使Ca2+失去凝血作用，从而阻止血液凝固。
【应用范围】血沉、凝血象、血小板功能检查及血液保养液。
【用量】凝血象:
109mmol/L水溶液,与血液之比为1:9；血沉:
106mmol/L水溶液,与血液之比为1:4。
二、乙二胺四乙酸盐
【原理】乙二胺四乙酸（EDTA）盐可与血液中的钙离子结合形成配位化合物，从而阻止血凝。
【应用范围】一般血液学检查和血液粘度测定。不适于凝血象及血小板功能检查。
【用量】其有效抗凝浓度为1～2mg/ml血液。血细胞分析仪用EDTA-K2作抗凝剂，用量为EDTA-K2•2H2O
1.5～2.2mg/ml血液。
三、肝素
【原理】通过与抗凝血酶Ⅲ结合，增强抗凝血酶的作用，灭活丝氨酸蛋白酶，从而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集，阻止血液凝固。
【应用范围】血细胞比容测定、血液粘度测定和多种生化分析。
用量：通常用肝素的钠盐或钾盐粉剂配成1g/L肝素水溶液。取0.5ml置小瓶中，37～50℃烘干后，能抗凝5ml血液。
四、草酸盐
草酸盐也是常用的抗凝剂，优点是溶解度大，作用原理是溶解后解离的草酸根与标本中的Ca2+形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断。

Ⅱ 简述血凝仪检测的原理

1.凝固法
也称为生物学法，将凝血因子或激活剂加入到血浆中，使血浆发生凝固，凝血仪记录血浆凝固过程中一系列的变化（如光、电、机械运动等），并将这些变化的信号转变成数据，计算机处理分析后得出检测结果。目前在凝血仪上使用的凝固法大致分为三类：光学法、黏度法和电流法。
（1）光学法：待测血浆在凝固过程中，纤维蛋白原逐渐转变为纤维蛋白，其理学性质也发生改变，透射光和散射光强度发生改变，凝血仪根据这种光学性质的改变来判断凝固终点。光学法可分为透射比浊法和散射比浊法。
（2）黏度法：在待测血浆中加入小磁珠，利用变化的磁场使小磁珠产生运动，随血浆的凝固，血液黏度增加，小磁珠的运动逐渐减弱，仪器根据小磁珠运动强度的变化来确定凝固终点。
（3）电流法：该法将待测血浆作为电路的一部分，由于纤维蛋白具有导电性，可利用电流的断与否来判断纤维蛋白的形成与否，即判断凝固终点。

Ⅲ 血凝实验与血凝抑制实验的原理是什么

血凝实验：当血液流出血管后，由于血浆中可溶性之纤维蛋白元变为不能溶解之纤维蛋白，,将所有的血球都网罗在内,于是流体会凝结成块。
血凝抑制实验：柠檬酸钠等抗凝剂能抑制血液凝结。

Ⅳ ACL9000全自动凝血分析仪的工作原理

1、光路系统
容纳反应盘的区域是检测组件，其内包含一个凝固法通道和一个发色底物法或免疫比浊法通道：
散射比浊法：所有ACL系统均有。使用660nm波长光散射检测凝固形成。
发色底物法/免疫比浊法：405nm，检测光吸收。

2、检测原理
1）散射比浊法（凝固法）检测

散射比浊法（凝固法）检测是指检测和记录血浆样本凝固的时间。该技术通过检测光散射的变化来确定凝固终点。

散射比浊法/凝固法，样本和试剂反应时，纤维蛋白原转化为纤维蛋白，光通过该反应介质，从而发生光散射。660nm光通过血浆，并在900角配备光传感器进行检测光信号。

纤维蛋白原凝固过程伴随着光散射信号的增强。随着所检测到的光信号的变化，光电探测器所检测到的电信号也随之变化。变化的电信号通过软件一系列的数学算法判定凝固终点。

2）发色底物法（图示：间接发色底物法）

发色底物法可分为直接和间接发色底物法。
直接法：分析物直接结合在特异性的发色底物上。比如：蛋白C、纤溶酶原PLG。
间接法：通过改进的测试体系，加入过量的具有反应活性的酶和能与待测物结合的物质，最后利用特异性合成底物结合剩余的酶，检测其活性，达到检测目的。比如：肝素、AT-III。

大多数情况下，在405nm处，通过检测合成底物中的对硝基苯胺（pNA）的吸光度值。

发色底物法通道利用比色原理检测反应杯中的吸光度变化值。405nm光源，穿过反应杯，并通过光学感应器进行接收。反应杯中的吸光度值与pNA的浓度成正比。光路检测器上接收到的光信号转换为电信号，此电信号与酶的活性成正比。

3）免疫比浊法

免疫比浊法是指直接检测和记录分析物的浓度。该方法通过检测光密度值的变化来检测分析物的物理浓度，而并非其活性。与透射比浊法一样，免疫比浊法依赖抗原抗体复合物的形成，从而检测透光度值的变化。

ACLTM 8/9/10000系统通过检测405nm通道的光密度值，与参比乳胶液对照得出结果。

使用405nm波长，通过检测反应杯中的吸光度值（ΔA）。透过反应杯的光通过光传感器进行检测。反应杯中液体吸收光信号的多少，直接与抗原抗体复合物的浓度成正比。光路检测器上接收到的光信号转换为电信号，此电信号与酶的活性成正比。

Ⅳ 血凝仪的测定方法

光学法血凝仪是根据血浆凝固过程中浊度的变化来测定凝血功能。根据仪器不同的光学测量原理，又可分为散射比浊法和透射比浊法两类。
散射比浊法是根据待验样品在凝固过程中散射光的变化来确定检测终点的。在该方法中检测通道的单色光源与光探测器呈90°直角，当向样品中加入凝血激活剂后，随样品中纤维蛋白凝块的形成过程，样品的散射光强度逐步增加。当样品完全凝固以后，散射光的强度不再变化，通常是把凝固的起始点作为0%，凝固终点作为100%，把50%作为凝固时间。光探测器接收这一光学的变化，将其转化为电信号，经过放大再被传送到监测器上进行处理，描出凝固曲线。
透射比浊法，是根据待测样品在凝固过程中吸光度变化来确定凝固终点的、与散射比浊法不同的是该方法的光路同一般的比色法一样呈直线安排：来自光源的光线经过处理后变成平行光，透过待测样品后照射到光电管变成电信号，经过放大后监测处理。当向样品中加入凝血激活剂后，开始的吸光度非常弱，随着反应管中纤维蛋白凝块的形成，标本吸光度也逐渐增强，当凝块完全角成后，吸光度趋于恒定。血凝仪可以自动描绘吸光度的变化曲线并设定其中某一点对应的时间为凝固时间。 磁珠法是根据血浆凝固过程中粘度的变化来测量凝血功能的。根据仪器对磁珠运动测量原理的不同，又可分为光电探测法和电磁珠探测法。
光电探测法，在磁珠法中光电探测器的作用与光学法中不同，它只测量血浆凝固过程中磁珠的运动规律，与血浆的浊度无关。在磁珠法中的一对电磁铁安放在测试杯的两端，它们产生恒定的交替磁场使磁珠在测试杯中摆动，在与磁珠摆动的垂直方向安放一对光电接收装置，当磁珠摆幅衰减到50%时确定凝固终点。
光电探测法中还有一种利用红外光反射监测器监测磁珠运动的，下面介绍BE系列半自动血凝仪中将另加介绍。
电磁探测法又可称为双磁路磁珠法，其中一对磁路用于吸引磁珠摆动，另一对磁路利用磁珠摆动过程中对磁力线的切割所产生的电信号，对磁珠摆动幅读度进行监控，当磁珠摆动幅度衰减到50%确定凝固终点。 目前市售的半自动血凝仪主要由样品、试剂预温槽、加样器、检测系统（光学、磁场）及微机组成。有的半自动仪器还配备了发色检测通道，使该类仪器同时具备了检测抗凝及纤维蛋白溶解系统活性的功能。针对光学式半自动血凝仪受人为的因素影响多、重复性较差等缺陷，仪器中应有自动计时装置，以告知预温时间和最佳试剂添加时间；在测试位添加了试剂感应器，后者感应从移液器针头滴下的试剂后自动振动，使反应过程中血浆与试剂得以很好地混合；此外，该类仪器在测试杯顶部安装了移液器导板，在添加试剂时由导板来固定移液器针头，从而保证了每次均可以在固定的最佳的角度添加试剂并可以防止气泡产生。这一系列改进，提高了光学式半自动血凝仪检测的准确性。
一般半自动血凝仪都可进行凝固法测试，而需要用其它测试方法实现的凝血项目则可用生化分析仪、酶标仪等进行。 该类仪器的基本构成包括：样品传送及处理装置、试剂冷藏位、样品及试剂分配系统、检测系统、电子计算机、输出设备及附件等。
1. 样品传送及处理装置：一般血浆样品由传送装置依此向吸样针位置移动，多数仪器还设置了急诊位置，可以使常规标本检测必要时暂停以服从免疫比浊法将被检物与其相应抗体混合形成复合物，而产生足够大的沉淀颗粒，通过透射比法或散射比浊进行测定。此法操作简便，准确性好，便于自动化。
2. 试剂冷藏位：为避免试剂的变质，仪器往往有试剂冷藏功能，一般同时可以放置几十种试剂进行冷藏。
3. 样品及试剂分配系统：样品臂会自动提起标本盘中的测试杯，将其置于样品预温槽中进行预温。然后试剂臂将试剂注入测试杯中（性能优越的全自动血凝仪为避免凝血酶对其他检测试剂的污染，有独立的凝血酶吸样针），带有旋涡混合器的装置将试剂与样品进行充分混合后将送至测试位，经检测的测试杯被该装置自动丢弃于特设的废物箱中。
4．检测系统：这是涉及仪器测量原理的关键部分。检测血浆的凝固可以通过凝固反应检测法检测，即当纤维蛋白凝块形成时，检测散射光在660nm处浑浊液吸光度的变化；或通过凝固点检测法检测，即计算达到预先设定好的吸光度值时的凝固时间；而磁珠法则是通过测定在一定磁场强度下小钢珠的摆动幅度变化来测定血浆凝固点。发色底物法及免疫法是检测反应液在405nm、575nm及800nm时的吸光度变化来反映被检测物质的活性。
5. 电子计算机：根据设定的程序计算机指挥血凝仪进行工作并将检测得到的数据进行分析处理，最终得到测试结果。计算机尚可对患者的检验结果进行储存，记忆操作过程中的各种失误，及进行质量有关的工作。
6. 输出设备：通过计算机屏幕或打印机输出测试结果。
7. 附件：主要有系统附件、穿盖系统、条码扫描仪、阳性样品分析扫描仪等。