‘壹’ 鉴定培养细胞活力有多种方法，fda是主要方法之一，其原理是什么
细胞活力鉴定的方法：
1、相差显微镜观察法 2、FDA染色法 3、伊凡蓝染色法
FDA染色法：是测定原生质体活性的一种方法，即荧光素双醋酸酯染色，FDA本身无荧光，
进入原生质体后便产生荧光素，它不能自由进入原生质体膜，因此有活力的细胞便产生荧光。
原生质分离，酶，纤维素酶，离析酶。
步骤：叶片表面消毒→去除表皮→叶碎片漂浮在含有酶和渗透压稳定剂的溶液中→培育→原
生质体沉到培养皿底部→除去酶溶液→将原生质体移入CPW清洗→离心→清洗基质两次
→重悬浮于培养基→除去小的个体，用血球计计数→调整到合适的密度重悬浮于培养基。
原生质体的培养：
培养基，MS+NAA 2.0ppm+BA 0.5ppm+3%蔗糖+9%甘露醇
注意：
1、原生质体分离后，非常脆弱，需要渗透压保护剂的保护直到细胞壁形成。
2、针对不同的研究对象，培养基中生长素和细胞分裂素的水平要做适当调整。
影响原生质体培养的因素，营养需求（NH4+不能过多）渗压剂，培养密度（105/mL）
贮藏条件（通常在黑暗处）。
培养方法:液体基质培养法,半液体基质培养法,固体基质培养法,看护培养。
固体培养的步骤,原生质体移入培养基→1体积含原生质体的培养基与1体积含琼脂糖
(40℃)的培养基混和→倒转培养皿在25℃下培养→原生质体重新产生细胞壁并分裂成细
胞团→细胞团于琼脂糖基质中传代培养,培养基中应减少渗压剂以利于愈伤组织的形成→诱
导分化成植物的根茎。
原生质体分离培养的意义：
1、除去了细胞壁为植物细胞之间的融合扫平了障碍，同时叶为制造新杂种开辟了道路。
2、原生质体可摄入外源DNA,细胞器、细菌或病毒颗粒，这些特性与植物全能性相结合为高等植物的遗传饰变打下基础。
3、获得细胞无性系和选育突变体的优良起始材料。
取洗涤过的原生质体悬浮液 0.5ml置于10×100mm的小试管中，加入 FDA溶液使其最终浓度为 0.01混匀、置于室温5min后用荧光显微镜观察。激发光滤光片用QB24压制滤光片用JB8。发绿色荧光的原生质体为有活力的，不产生荣光的为无活力的。由于叶绿素的关系，叶肉原生质发黄绿色荧光的为有活力的，发红色荧光的为无活力的。
‘贰’ 全自动血液细胞分析仪 怎样使用
全自动血球仪使用很简单的
一般分为三种模式
不知道你的有几种
一、全血模式
就是你用的样本是
静脉血
用抗凝管采好静脉血把抗凝管皮塞拿下直接放到血球仪的探针下按个测量键
机器就可以自动进样测量了
二、预稀释模式
这个用到的是
末梢血
也就是指尖血或者耳垂血
先把血球仪调到该模式下，用一样本至于探针下，按下测量键或者稀释键（各家不一样）探针自动打入一定量试剂，然后取相应血量
一般采用患者的第二滴血
，仪器一般用量
：13微升--20微升
左右
放入样杯中再放于探针下
按测量键即可
三、穿刺模式
该模式只有高档机有，就是不用把抗凝管的皮塞拔下只要把取好血的抗凝管放进去按测量即可，比较安全，污染率低，价格当然也比较贵
目前进口的品牌高端一些多数都有该功能，国内只有少数几家，像迈瑞、普朗好像优利特也有。
基本就这样
你看着用
或者和厂家联系下
让他们给你培训下
毕竟要测人的。
‘叁’ 细胞活力测定常用的简便方法是
MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
缺点：由于MTT经还原所产生的甲瓒产物不溶于水，需被溶解后才能检测。这不仅使工作量增加，也会对实验结果的准确性产生影响，而且溶解甲瓒的有机溶剂对实验者也有损害。
细胞活力常用百分比表示，活力的大小对试验结果有很大影响。细胞活力的测定有许多方法，最简便常用的方法是台盼蓝（trypanblue）染色法。台盼蓝又称锥蓝，是一种阴离子型染料，这种染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜，故活细胞不着色，但死亡细胞的细胞膜通透性增加，可使染料通过细胞膜进入细胞内，使死细胞着色呈蓝色。