药代研究代谢途径的常用方法

A. 同位素示踪法建立以前的代谢研究方法是什么

同位素标记是研究体内代谢水平的常用方法,将同位素标记的化合物引进代谢体系来观察其代谢过程与结果的方法就是同位素示踪法。同位素有稳定同位素和放

B. 物质代谢的研究方法

5.纯酶的应用：从完整动物发展到亚细胞结构水平的各种方法中，各种酶都是相互混杂，而且与生物体内各种组成成分也未分开。这对完全了解一化学反应的细节是极其困难的。使用纯酶不但能知道它所催化的确切反应，而且还可详细研究其促进反应的各个方面。将许多由纯酶促进的反应依次拼凑起来，对一些重要物质的代谢途径，不论是合成的抑或是分解的，均可大体弄清。事实也是如此。现在蛋白质、糖类、脂类、核酸、生物氧化，以及一些生物活性物质等在体内的转变途径，都已有一定的了解。
此外，在物质代谢途径的研究中，微生物也常被利用。从上面的叙述可以看出，在物质代谢的研究中，就使用的材料而言，是由完整动物逐渐发展到纯酶。这一发展过程，正是现代科学技术和仪器发展的结果。近代技术和仪器的发展不但能定位、分离、提纯、追踪、鉴别及测定代谢物及其产物，而且还能对参加物质代谢中生物分子的组成、结构、构型、构象及其各种性质等加以研究，而所得结果往往有可能用以解释或确定其在物质代谢中的功能。

C. 阐述代谢组学研究中对代谢物进行分离分析的常用技术有哪些

阐述代谢组学研究中对代谢物进行分离分析的常用技术有哪些
代谢组学的研究方法与蛋白质组学的方法类似，通常有两种方法。一种方法称作代谢物指纹分析 （metabolomic fingerprinting），采用液相色谱-质谱联用（LC-MS）的方法，比较不同血样中各自的代谢产物以确定其中所有的代谢产物。从本质上来说，代谢指纹分析涉及比较不同个体中代谢产物的质谱峰，最终了解不同化合物的结构，建立一套完备的识别这些不同化合物特征的分析方法。另一种方法是代谢轮廓分析（metabolomic profiling）,研究人员假定了一条特定的代谢途径，并对此进行更深入的研究。
对于代谢产物来说，不仅只有质谱峰这个特征。更进一步说，质谱（MS）并不能检测出所有的代谢产物，并不是因为质谱的灵敏度不够，而是由于质谱只能检测离子化的物质，但有些代谢产物在质谱仪中不能被离子化。采用核磁共振（NMR）的方法，可以弥补色谱的不足。剑桥大学的Jules Griffin博士，正在使用质谱与核磁共振结合的方法，试图建立机体中的完整代谢途径图谱。Griffin用核磁共振检测高丰度的代谢产物，由于核磁共振检测的灵敏度不高，所以只用于分析低丰度代谢产物。

D. 研究微生物代谢途径常用的方法有哪些

微生物的代谢调节主要有两种方式：酶合成的调节和酶活性的调节.
酶合成的调节
【酶合成的调节】：微生物细胞内的酶可以分为组成酶和诱导酶两类.组成酶时微生物细胞内一直存在的酶,它们的合成只受遗传物质的控制,而诱导酶则时在环境中存在某种物质的情况下才能够合成的酶.例如,在用葡萄糖和乳糖作碳源的培养基本上培养大肠杆菌,开始时,大肠杆菌只能利用葡萄糖而不能利用乳糖,只有当葡萄糖被消耗完毕以后,大肠杆菌才开始利用乳糖,只有当葡萄糖被消耗完毕以后,大肠杆菌才开始利用乳糖.
酶活性的调节
【酶活性的调节】：微生物还能够通过改变已有酶的催化活性来调节代谢的速率.酶活性发生主要原因时,代谢过程中产生的物质与酶结合,致使酶的结构产生变化.这种调节现象在核苷酸、维生素的合成代谢中十分普遍.
总结
上述两种调节方式时同时存在,并且密切配合、协调作用的.通过对代谢的调节,微生物细胞内一般不会累积大量的代谢产物.

E. 代谢流分析实验如何进行

然而，从自然界分离具有特殊性状的野生型微生物菌种以及利用传统诱变方法筛选遗传性状优良的菌种，则是代谢设计和靶点选择的重要信息资源和理论依据。经过长达数十年的研究，生物化学家已对相当数量生物细胞内的代谢途径进行了鉴定，并绘制出较完整的代谢网络图，这就为代谢工程的实施奠定了基础。然而，正确的靶点设计还必须对现有的代谢途径和代谢网络信息进行更深入的分析。首先，根据化学动力学和计量学原理测定代谢网络中的代谢流分布（即代谢流分析），其中最重要的是细胞内碳和氮元素的流向比例关系；其次，在代谢流分析的基础上调查其控制状态、机制和影响因素（即代谢控制分析）；最后，根据代谢流分布和控制的分析结果，确定代谢设计的合理靶点，通常包括拟修饰基因的靶点、拟导入途径的靶点或者拟阻断途径的靶点等。代谢流分析是指导代谢工程（被称为第三代基因工程）的重要方法，目前国内仍处于研究的初期阶段，国内天津大学赵学明教授翻译了该领域着名的图书《代谢工程-原理与方法》，可以得到详细的信息。

F. 药用植物次生代谢产物生产途径有哪些

药用植物次生代谢产物的五种生产途径。
1、直接从植物中提取次生代谢产物；
2、化学合成模拟；
3、微生物(细菌或真菌)发酵；
4、利用植物组织和细胞培养法生产次生代谢产物；
5、利用基因工程生产次生代谢产物。

G. 药代动力学有哪些实验步骤

1.要拟定方案
2.要招募受试者
3.通过伦理委员会
4.对受试者要有知情同意书
5.实验药物和受试药物的准备
6.受试者服药
7.采血
8检测分析
9.统计报告

H. 体内药物分析常用的分析方法有

药学专业知识（一）第六章生物药剂学，是研究药物吸收、分布、代谢与排泄过程，阐明药物制剂剂型因素，生物因素与药效关系。下面小编总结了药物在体内的各过程：

体内过程示意图
了解完药物在体内的过程示意图，接着我们来掌握执业药师考试中涉及的相关考点：

1. 需要掌握的几个概念

2. 药物的跨膜转运

【相关考题】

1.大部分口服药物的胃肠道中最主要的吸收部分是

A.胃

B.小肠

C.盲肠

D.结肠

E.直肠

2.借助载体或酶促系统，消耗机体能量，从膜的低浓度一侧向高浓度一侧转运的方式是

A.滤过

B.简单扩散

C.易化扩散

D.主动转运

E.膜动转运

答案：B D

I. 急求药物代谢论文1500字

中药是中华民族的伟大瑰宝，有着丰富的资源和悠久的
传承历史，历经了千百年的临床实践，虽然积累了丰富的临床
经验，为中华民族的健康事业作出巨大的贡献。但是中药的
研发仍然充满了挑战，如药材来源变异大、有效成分不明、质
量控制困难、缺乏清晰准确的安全性评价、药理作用机制不明
等等。因此，至今还没有一种中药通过美国FDA的新药审
批；而且，欧盟已经颁发了(欧盟传统药品法案)，也直接影响
了中药的出口。为了扭转目前这种尴尬的境地，实现真正与
国际接轨。发展祖国中医药事业，必须对中药的安全性、作用
机理及其药理活性成分有明确的认识，并深入剖析。近十多
年来。在西方药物发现和开发阶段利用体外和计算机辅助研
究技术进行化合物的吸收、分布、代谢、排泄和毒性(ADME／
T)特性研究，大大提高了新药研发的成功率【1]。所以借鉴西
方新药研发的成功经验，将ADME／T评价体系引入到中药的
研究中。特别是药物代谢研究，不仅有利于揭示中药的真正有
效成分和作用机理，而且有利于研究中药复方的配伍规律等。
本文将综述药物代谢(Dmg Metabolism)在中药研究中的应用
概况及其进展。
1 药物的代谢
药物在机体内的消除方式主要有两种：一种是药物不经
任何代谢而直接以原型随粪便和尿液排出体外；另一种是部
分药物在体内经代谢后，再以原型和代谢物的形式随粪便和
尿液排出体外。药物的代谢(drug metabolism)也称为药物生
物转化(biotransformation)，是药物从体内消除的主要方式之
一【2J
。药物在体内的代谢主要分为两个步骤【3j，第一步称为
I相代谢反应。药物在I相反应中被氧化、还原或水解，催化
I相代谢反应的酶主要为肝微粒体中的细胞色素P450酶。
第二步称为Ⅱ相结合反应。药物在Ⅱ相结合反应中与一些内
源性的物质(如葡萄糖醛酸、硫酸、甘氨酸、谷胱甘肽等)结合
或经甲基化、乙酰化后排出体外。催化Ⅱ相结合反应的酶主要
有葡萄糖醛酸转移酶、谷胱甘肽一s一转移酶、磺基转移酶和
乙酰基转移酶等【4 】。其中P450酶在众多外来化合物的生
物转化过程中扮演了重要角色，被P450酶催化的底物相当广
泛，90％以上药物的氧化是由P450酶催化的。是人体内最重
要的代谢酶，其催化的I相代谢反应是化合物在体内代谢的
关键步骤。因为这一步反应通常是药物从体内清除的限速步
骤，可影响化合物的半衰期、清除率等动力学特性，且P450酶活性常常随遗传因素、年龄、疾病状态或其他药物相互作用的
影响而发生改变L7J。
一般来说，药物在体内经过代谢转化后其药理活性发生
了较为复杂的变化，大致分为四种情况：第一，代谢物活性或
毒性降低；第二，形成活性代谢物；第三，形成毒性代谢物；第
四，前药的代谢激活。总之，药物代谢转化的最终结果是使药
物极性增加。有利于药物的排出体外【2．3】。
2 药物代谢研究的方法
药物代谢的研究方法分为体内法和体外法，两者各有优
缺点，所以通常两者相结合进行药物的评价研究。体外研究
可以通过高通量筛选对大量化合物进行筛选，对大量候选化
合物的药动学特性作出初步的评价。缩小体内筛选的范围，一
般应用于药物发现和开发的初期。体内代谢研究是体外研究
的良好的衔接点，因为有时候应用体外模型预测体内参数不
理想，必须借助体内筛选。当然在药物开发的后期，也要进行
动物和人体体内药物代谢研究，总之，两者相辅相成【3J。
2．1 体内法药物的体内代谢研究主要是在整体水平上进
行的。给予一定剂量的药物后，于不同的时间段分别收集胆
汁、尿液和粪便，然后用高效液相色谱法(HPLC)或液质联用
技术(LC-MS／MS)等方法在胆汁、尿液和粪便样品中寻找药
物的代谢物(包括I相和Ⅱ相代谢物)。并对代谢产物进行初
步的分析和鉴定，最终确定药物在体内的代谢途径。
2．2 体外法肝脏是药物代谢的主要和重要器官之一，是药
物生物转化的主要场所，因为富含有丰富的肝药酶，所以大部
分的药物在肝脏被代谢。故药物的体外代谢模型多以肝脏为
基础。常见的有：肝微粒体体外温孵法、肝细胞体外温孵法、离
体肝灌流法、肝切片法和重组I)450酶体外温孵法等。药物体
外代谢研究中应用到的方法除了高效液相色谱法(HPLC)或
液质联用技术(LCMS／Ms)，还有分子生物学的方法，如we．
ston bloting等。体外法因有其独特的快速简便和节约成本等
优势和特点。所以在药物代谢研究中得到了广泛的应用。
除了肝脏以外，口服药物还必须经过胃肠道消化吸收后
才能进入血液发挥疗效(如人参皂苷的体内代谢[8 )，因此药
物在胃肠内菌群的代谢越来越受到人们的重视，而且已经有
人把药物在肠内菌代谢的研究引入到药物代谢的研究范畴。
其常见的研究方法也有整体肠内菌代谢实验和离体实验两
种，前者是对人或动物服药后的消化道各部分及其内容物进
行分析，后者有粪便温孵法和消化道内容物温孵法，随着微生
物技术的发展，也可用肠内菌纯菌株、混合菌或粗酶进行代谢
研究。3 药物代谢在中药研究中的应用
3．1 中药代谢产物谱的定性研究
要了解中药在体内的代谢转化规律，首先应该明白其在
体内转化成什么产物，而且这些产物有可能是活性增强的产
物或活性减弱的产物。也有可能是毒性成分。因此对代谢产物
谱的研究显得特别重要，它不仅可以阐明其在体内的代谢途
径和机制，也可以进行代谢产物的有效性和安全性评价。国
内对这一方面的研究报道较多，一般是将中药代谢后的各种
生物样品采用各种手段分离后进行分析鉴定。如阿基业等人
给予大鼠一定剂量的盐酸关附甲素后，在不同时间间隔收集
大鼠尿液，应用液质联用法进行分析鉴定。结果表明关附甲素
在大鼠体内可以转化成为关附壬索、关附醇胺、关附甲素葡萄
糖醛酸和硫酸结合物、关附壬索葡萄糖醛酸和硫酸结合物，经
过生物转化，代谢产物的极性增加，药效下降【9j。李晓海等人
采用大鼠肝微粒体体外温孵法和大鼠体内法对左旋一叶蔌碱
的代谢转化进行了研究，代谢产物分别鉴定为6一位羟基、6．位
羰基及5一位a及B羟基取代的左旋一叶蔌碱，还证实了体内
6一位羟基代谢物进一步形成了Ⅱ相结合物。最终基本阐明左
旋一叶蔌碱在大鼠体内外代谢转化的途径Cio】。徐文等人将
待测淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ与新鲜配制的大鼠肠内溶物悬
液在37℃孵化，采用高效液相色谱同时测定孵化前后溶液中
淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的浓度，结果表明淫羊藿苷被肠道
菌群迅速代谢成淫羊藿次苷Ⅱ，而淫羊藿次苷Ⅱ不被代
谢[11]。
3．2 中药代谢酶谱的研究
鉴定参与中药代谢的代谢酶种类及其贡献，对中药现代
化的研究同样重要。因为遗传因索和环境因素造成人体对药
物代谢的存在差异，这种差异表现为代谢酶的表达差异，其根
本原因是代谢酶的基因多态性决定的，依此可将人群分为强、
中和弱代谢型等表型C12J。强代谢者和弱代谢者之间药代动
力学性质存在显着差异[13J，因此给予不同代谢表型人群相同
的剂量，药物产生的疗效会完全不一样。甚至会中毒现象的发
生【l 。所以鉴定参与中药代谢的代谢酶种类及其贡献有利
于指导临床合理用药，保证用药安全有效。此外中药代谢酶
谱的研究还有利于研究中药的配伍规律、中药毒性研究等。
高凯等人采用大鼠肝微粒体体外温孵法和高效液相色谱技
术，通过运用不同的CYP同工酶选择性抑制剂和底物进行抑
制实验，初步选出介导甘草次酸单羟化所涉及的CYP同工酶
为CYP 3A1／2和CYP 2C9／10 cis}，研究结果提示当甘草次酸
在CYP 3A1／2和CYP 2C9／lO弱表达的代谢者人群中使用
时，应该注意剂量的控制，否则可能会出现中药的安全性问
题。
3．3 中药对代谢酶的诱导或抑制以及药物间相互作用研究
中药的化学成分非常复杂。许多中药有效成分对
CYP450酶表现出明显的诱导或抑制。如中药白芷中富含呋
哺香豆素化合物，研究发现白芷提取物可以抑制大鼠肝微粒
体CYP 3A、CYP 2C和CYP 2D1的活性，所以会抑制甲苯磺
丁脲、地西泮、硝苯地平等在体内的代谢[16]。中药黄芩的主
要有效成分黄芩苷。对 1Al、CYP 2B1和CYP 2Cll这3种同工酶有明显的诱导作用【l 。
中药在lJ笛床上常复方用药或与化合物合并用药。这就有
可能发生药物间的相互作用，引起药效、药动学、毒性等的变
化。药物间的相互作用主要表现为药物代谢酶的诱导或抑
制。如人参的有效成分人参皂苷Rd，它对CYP3A4有抑制作
用；而人参再造丸、通心络等中成药组方中又含有人参，因此
如果患者在服用通心络、人参再造丸等中成药时，同时服用经
CYP3A4代谢的化学药硝苯地平、胺碘酮等，就可能会导致低
血压等不良反应[18]。高月等人考察中药丹参、苦参、人参及
其与藜芦合用对大鼠肝P450酶活力及mRNA表达的影响，
结果显示这3种中药与藜芦配伍合用后均不同程度的抑制了
P450酶含量和主要的药物代谢酶CYP3A及CYP2E1的酶活
力。提示可能正是由于3种中药与藜芦配伍后对药物代谢酶
的抑制作用减缓了剧毒中药藜芦中相关物质的代谢．致毒性
增加，产生了不期望的中药毒性【l 。
4 展望
随着科学技术的发展，中药代谢的研究除了深入研究单
一成分的代谢外。首先应加强有效部位、单味药材和中药复方
的代谢研究，这样才能更准确更全面的阐明中药的药效作用
机制；其次，应该深入开展中药基于代谢酶的配伍规律的研
究，阐明中药复方中各单味药材之间的相互关系以及中药复
方的解毒机制。总之，随着中药代谢的深入研究，以及其他学
科和技术的合作。必将揭示中药的代谢规律、中药的配伍规律
和解毒机制等，为中药新药的研制、创新药物的发现以及指导
临床用药作出贡献。