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光学分析方法中

发布时间:2023-01-23 14:15:15

A. 光的特性分析方法包括

光同时具备以下四个重要特征:

1、在几何光学中,光以直线传播。笔直的“光柱”和太阳“光线”都说明了这一点。

2、在波动光学中,光以波的形式传播。光就像水面上的水波一样,不同波长的光呈现不同的颜色。

3、光速极快。在真空中为3.0×108m/s,在空气中的速度要慢些。在折射率更大的介质中,譬如在水中或玻璃中,传播速度还要慢些。

4、在量子光学中,光的能量是量子化的,构成光的量子(基本微粒),我们称其为“光量子”,简称光子,因此能引起胶片感光乳剂等物质的化学变化。

B. 光学分析法的紫外-可见分光光度法

紫外-可见光区一般指波长200nm至760nm范国内的电磁波。根据物质分子对此光区电磁波的吸收特性进行定性和定量分析的方法称为紫外-可见分光光度法。紫外分光光度法使用的辐射波长范围是200~400nm,主要是引起分子中的外层价电子的能级跃迁。分子吸收此区域的紫外线后,在发生价电子能级跃迁的同时,也伴随着分子的振动和转动能级的跃迁,故形成带状紫外吸收光谱。据此可进行某些类型的有机物的定性、定量和结构分析:可见分光光度法使用的辐射波长范围是400~760nm,具有长共轭结构的有机物或有色无机物吸收一定波长的可见光后,发生价电子能级跃迁,并伴随振动和转动能级的跃迁,其吸收光谱也是带状光谱。通常紫外分光先度计都有可见光波段,因此常将两者一起称为紫外-可见分光光度法。

C. 光学分析的分类

光学分析可分为非光谱法及光谱法两大类方法。 分子信标技术是荧光分析方法在DNA检测领域的又一延伸。分子信标的概念是1996年由Tyagi等提出的。分子信标是一段与特定核酸互补的DNA探针,空间结构上呈“发夹”结构,其中环序列是与靶DNA互补的探针;茎的一端连接上一个荧光分子,另一端连上一个淬灭分子。当靶序列不存在时,分子信标呈“发夹”结构,茎部的荧光分子与淬灭分子非常接近(7~10nm),荧光分子发出的荧光被淬灭分子吸收,此时检测不到荧光信号;当有靶序列存在时,分子信标的环序列与靶序列特异性结合,形成稳定的双链体线性结构,此时荧光分子与淬灭分子分开,产生可被检测的荧光信号。分子信标技术具有背景信号低、灵敏度高、特异性强等优点,在DNA检测中有着广阔的应用前景。目前,分子信标技术已应用于PCR靶标的实时荧光定量检测。Perlette等在袋鼠肾细胞质中注入分子信标,实时检测了活细胞中的RNA及RNA/DNA杂交过程。通过选择不同的荧光分子-淬灭分子对,可设计出多色分子信标,荧光系统检测到不同颜色的荧光,可实现多个靶序列的同时检测。另外,可利用金表面对荧光的淬灭作用,将荧光标记的“发夹”分子固定在金表面,没有靶序列时荧光被金表面淬灭,有靶序列杂交后产生荧光。
实际上,分子信标是一种基于荧光能量转移(FRET)的技术。荧光能量转移是指当荧光给体和受体间的分子距离足够近时,发生分子间的能量转移,荧光从一个分子向另一个分子转移。因为DNA的存在可影响体系的能量转移,引起荧光强度的改变,荧光能量转移技术在DNA检测中有着广泛的应用。高峰等研究了吖啶橙-罗丹明B二聚体能量体系作为荧光探针用于DNA的测定。Bazan等在带正电的共轭聚电解质(cationicconjugatedpolymers,CCP)中加入荧光标记的肽苷酸(PNA-C*),由于PNA本身不带电,不会和共轭聚电解质发生作用。当溶液中加入和PNA互补的DNA时,DNA带有很强的负电荷,会和带正电的共轭聚电解质形成复合物,同时DNA和荧光标记的肽苷酸杂交,形成共轭聚电解质-DNA-(PNA-C*)的三元复合物,拉近了共轭聚电解质和荧光探针C*荧光强度即可判断出是否有待测DNA。 常用的比色法有两种:目视比色法和光电比色法,两种方法都是以朗伯-比尔定律(A=εbc)为基础。常用的目视比色法是标准系列法,即用不同量的待测物标准溶液在完全相同的一组比色管中,先按分析步骤显色,配成颜色逐渐递变的标准色阶。试样溶液也在完全相同条件下显色,和标准色阶作比较,目视找出色泽最相近的那一份标准,由其中所含标准溶液的量,计算确定试样中待测组分的含量。
光电比色法是在光电比色计上测量一系列标准溶液的吸光度,将吸光度对浓度作图,绘制工作曲线,然后根据待测组分溶液的吸光度在工作曲线上查得其浓度或含量。与目视比色法相比,光电比色法消除了主观误差,提高了测量准确度,而且可以通过选择滤光片来消除干扰,从而提高了选择性。但光电比色计采用钨灯光源和滤光片,只适用于可见光谱区和只能得到一定波长范围的复合光,而不是单色光束,还有其他一些局限,使它无论在测量的准确度、灵敏度和应用范围上都不如紫外-可见分光光度计。20世纪30~60年代,是比色法发展的旺盛时期,此后就逐渐为分光光度法所代替。

D. 在光学分析法中,采用钨灯作光源的是什么光谱,采用氘灯作光源的是什么光谱

氘灯一般用的是紫外光谱,钨灯一般用于400nm~2500nm,他们经常结合使用在光谱仪或者单色仪中 极星光学

E. 光学分析法有哪些类型

光学分析法是基于物质对光的吸收或激
发后光的发射所建立起来的一类方法,
比如紫外-可见分光光度法,红外及拉曼
光谱法,原子发射与原子吸收光谱法,
原子和分子荧光光谱法,核磁共振波谱
法,质谱法等。

F. 原理为辐射的发射的光学分析法有哪些

金属的光谱分析法是指通过分析样品的光谱特性来定量其中不同元素的含量。以较为先进的直读光谱仪为例,具体分析过程包括:1.通过电容火花放电的方式使被测金属表面蒸发形成原子蒸汽,由于受到高能激发,这些原子的核外电子会从基态跃迁到激发态,由于激发态的电子处于不稳态,会跃迁回基态,并放出光子,形成光源。2.不同的元素其发出的光子特征波长不一样。将光源的光通过分光系统分光后,由光电检测器检测各个元素特征波长上的光强,光强的大小就表示该元素含量的高低。与化学分析法相比,光谱分析的突出优点在于全元素同时分析,分析速度快,通常在30秒内可以报出所有元素的含量,并且由于全自动分析,分析准确度高。而化学分析则不同的元素需要采取不同的分析方法,速度极其慢,而且测定结果受外围环境以及操作员操作水平限制,重复性和准确度较差。国内目前能制备大型的直读光谱分析仪,价格一般20w左右,江苏没有生产商。大型仪器的缺点在于运行维护成本高,占地面积大,对外界环境的要求高,不适用于中小企业的使用。小型光谱仪目前国内正处于研制阶段,尚未有商业成型的仪器。国外的小型光谱仪售价一般在40w左右。

G. 光学分析法可分为光谱法与非光谱法,两者的本质区别是

我是学分析化学的.
光谱法是辐射光子与物质作用,引起物质电子或原子结构发生变化,产生发射或吸收光子的现象,这类光谱发最终获得的数据也通常是直观的波长—强度图谱.
光谱法有紫外-可见吸收、分子荧光磷光光谱、红外吸收光谱、拉曼光谱、核磁共振.
非光谱法是光子与物质作用,物质本身并没有太大改变,只是光的辐射方向与物理性质的变化.
通常这类有折射法、旋光色散法、偏振法.

你的答案可以填:紫外-可见、红外、荧光.折射、旋光色散、偏振.

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