❶ 急呀 知道的给说一下 生化实验！！！制作定 量分析测定标准曲线的原理和方法
植物生理生化实验课程教学大纲
一、课程基本概况
1. 课程名称：植物生理生化实验
2. 课程名称（英文）： Experiments of Plant physiology and Biochemistry
3. 课程编号：B16035
4. 课程总学时：60学时（均为实验教学）
5. 课程学分：3学分
6. 课程分类：必修课
7. 开设学期：第3、4学期
8. 适用专业：园艺、农学、植物保护、植物生物技术等农科类本科专业。
9. 先行课：《物理学》、《化学》、《分析化学》、《植物生理生化》等。
二、课程性质、目的和任务
本课程是植物生理学的配套课程，是农科类各专业必修的专业基础课，属于以植物为对象各专业的工具课程之一。其先行课为物理学、化学、分析化学、植物学、生理生化。该课程主要介绍植物生理生化的实验研究技术以及常用植物生理生化指标的分析方法及原理，为专业课的学习与科学研究工作提供技术支持与手段。
通过本课程的学习，要求学生掌握植物生理生化的一些基本实验技术与原理，熟悉植物生理生化常规仪器的使用方法，能独立设计并完成一般性实验内容，操作规范，能够完成以植物为材料的基本的科学研究工作。从而达到更好地利用植物、人为地影响和改造植物，使之更大限度的为人类服务的目的。。
三、主要内容、重点及难点
实验一 应用纸层析分离鉴定氨基酸
（一）目的要求：学习纸层析分离技术，掌握纸层析分离鉴定氨基酸的原理和方法。
（二）重点：纸层析分离鉴定氨基酸的原理、操作方法、结果分析。
（三）难点 点样适量、分析确定层析结果。
实验二 氨基酸含量的测定——茚三酮比色法
（一）目的要求：掌握茚三酮比色法测定氨基酸含量的原理和方法；学习分光光度计的使用；学习标准曲线的制作。
（二）重点：实验原理和操作方法
（三）难点：样品提取、标准曲线制作和使用。
实验三 可溶性糖含量的测定——蒽酮法
（一）目的要求：掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法，了解可溶性糖含量这一生理指标的意义。练习分光光度计的使用和标准曲线的制作。
（二）重点：实验原理和方法；蒽酮试剂的配制。
（三）难点：样品提取及适度稀释，标准曲线制作和使用。
实验四 蛋白质含量的测定
（一）方法：考马斯亮蓝比色法；福林酚比色法
（二）目的要求：掌握测定蛋白质含量的原理和方法，了解蛋白含量测定的意义及使用方面。练习分光光度计的使用和标准曲线的制作。
（三）重点：了解实验原理，正确运用方法。
（四）难点：样品提取及适度稀释，标准曲线制作和使用。
实验五 酶的基本性质
（一）目的要求：通过实验，进一步理解酶的重要性质和影响酶活性的条件。
（二）重点：酶的专一性，温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响，鉴定酶促反应速度快慢的依据和方法
（三）难点：鉴定酶促反应速度快慢的依据和方法。
实验六 RNA的提制
（一）目的要求：掌握浓盐法提制RNA的原理和方法，进一步理解RNA的理化性质。
（二）重点：理解实验原理和各步操作的方法、意义和目的。
（三）难点：理解实验原理和各步操作的方法、意义和目的。
实验七 RNA含量的测定
（一）目的要求：掌握苔黑酚法测定RNA含量的原理和方法；学习RNA含量和纯度的计算方法及计算原理；进一步练习分光光度计的使用和标准曲线法的应用。
（二）重点：掌握苔黑酚法测定RNA含量的原理和方法；学习RNA含量和纯度的计算方法及计算原理。
（三）难点：正确称量，掌握测定原理。
实验八 淀粉酶活性的测定
（一）目的要求：了解α淀粉酶和β淀粉酶催化的产物和作用条件，掌握α淀粉酶活性、β淀粉酶活性和淀粉酶总活性的测定原理和方法；进一步理解酶的作用条件。
（二）重点：淀粉酶活性的测定原理和方法，进一步理解酶的作用条件。
（三）难点：通过控制实验条件，准确测定不同淀粉酶的活性。
实验九 电泳法分离酶或蛋白质
（一）方法：醋酸纤维薄膜电泳；聚丙烯酰胺凝胶电泳
（二）目的要求：掌握电泳的概念、原理以及电泳技术
（三）重点：电泳的原理和电泳技术
（四）难点：电泳技术的掌握
实验十 谷物种子中赖氨酸含量测定
（一）方法：茚三酮溶液显色法；染料结合（DBL）法；.三硝基苯磺酸（PDAB）法
（二）目的要求：掌握测定原理、方法及技术
（三）重点：原理及标准曲线制作
（四）难点：材料处理
实验十一 植物组织水势的测定
（一）方法：小液流法
（二）目的要求：学习并掌握小液流法植物组织水势的测定方法，理解水分在细胞内外的转移的条件和水势的概念。
（三）重点：测定原理和方法
（四）难点：根据试材确定浓度系列；检验操作方法。
实验十二 呼吸强度的测定
（一）方法：小篮子法；氧电极法。
（二）目的要求：掌握呼吸强度的测定原理和方法；学习滴定管的使用。
（三）重点：测定原理和方法。
（四）难点：滴定管的使用；滴定终点的把握。
实验十三 叶绿素含量的测定
（一）方法：光电比色法
（二）目的要求：掌握分光光度法测定叶绿素含量的原理和方法；学习分光光度计的使用。
（三）重点：叶绿素的提取、含量计算。
（四）难点：叶绿素的提取、定容；按要求稀释到适当浓度；正确地使用分光光度计。
实验十四 光合色素的提取分离与理化性质
（一）目的要求：进一步理解光合色素的重要理化性质；学习鉴定理化性质的方法。
（二）重点：光合色素的种类；光合色素的化学与光学性质；纸层析分离鉴定光合色素的方法。
（三）难点：皂化反应；吸收光谱。
实验十五 硝酸还原酶活力测定
（一）方法： 对-氨基苯磺酸法。
（二）目的要求：掌握测定硝酸还原酶活力的原理及方法，加深对硝酸还原酶在植物体内重要作用的认识；学习真空泵的使用；练习标准曲线的制作。
（三）重点：测定原理和方法；真空泵的使用；标准曲线的制作。
（四）难点：理解测定原理；制作出符合要求的标准曲线；理解各步操作的目的性。
实验十六 种子生活力的测定
（一）方法（三种方法同时做）：红墨水染色法；TTC染色法；BTB显色法。
（二）目的要求：理解测定原理；学会用三种方法测定种子生活力。
（三）重点：三种方法的原理与操作；各步注意事项。
（四）难点：在实践中能根据具体种子的特点选择适用的测定方法；能正确判别种子的生活力。
实验十七 超氧化物歧化酶（SOD）活性测定
（一）方法：NBT光化还原法。
（二）目的要求: 认识SOD的作用及测定SOD活性的意义，掌握SOD的测定原理和方法。
（三）重点：掌握测定原理和方法；理解照光的意义。
（四）难点：测定原理；具体使用中能根据酶活决定加入提取液的数量；各种试剂的作用；实验条件的控制。
实验十八 过氧化物酶（POD）活性的测定
（一）方法：联苯胺氧化法；愈创木酚法。
（二）目的要求：认识过氧化物酶的作用，掌握过氧化物酶活性的测定原理和方法。
（三）重点：明了测定原理；掌握测定方法。
（四）难点：具体使用中能根据酶活决定加入提取液的数量及三滤乙酸的量；准确保温。
实验十九 丙二醛（POD）含量的测定
（一）方法：硫代巴比妥酸法。
（二）目的要求：认识丙二醛的来源、作用及测定意义，掌握测定原理和方法。
（三）重点：测定原理和方法
（四）难点：明了测定原理；掌握测定方法。
实验二十 植物细胞差别透性的测定
（一）方法：电导率仪法。
（二）目的要求：了解逆境对细胞膜透性的影响，掌握电导仪法测定细胞膜透性的原理和方法；学习电导仪的使用。
（三）重点：明了测定原理；掌握测定方法；学会使用电导率仪。
（四）难点：正确控制实验环节，正确使用电导率仪。
实验二十一 光合强度的测定
（一）方法：改良半叶法；氧电极法；光合测定仪法。
（二）目的要求：学习不同方法测定光合强度的原理；进一步理解总光合强度和净光合强度；掌握测定方法；要求能根据需要和条件独立完成光合强度测定。
（三）重点：相关仪器的使用、测定原理和方法；实验环节的条件控制。
（四）难点：正确使用仪器和测定方法。
实验二十二 脯氨酸含量影响
（一）方法：酸性茚三酮法；磺基水杨酸法。
（二）目的要求：掌握脯氨酸的测定方法及原理；能根据需要独立完成测定过程。
（三）重点：标准曲线的制作、植物材料的处理。
（四）难点：标准曲线的制作、植物材料的处理。
实验二十三 植物根系活力的测定
（一）方法：TTC比色法；α-萘胺氧化法。
（二）目的要求：理解根系活力的内涵，掌握根系活力的测定原理和方法。
（三）重点：实验原理和方法
（四）难点：操作方法
实验二十四 维生素C含量的测定
（一）方法：滴定法；二苯胺萃取比色法；2，4二硝基苯肼比色法；荧光法。
（二）目的要求：掌握测定原理和方法；能根据需要和条件选择适当的测定方法。
（三）重点：相关仪器的使用、测定原理和方法；实验环节的条件控制。
（四）难点：正确掌握操作方法。
实验二十五 综合性实验——植物组织中POD的提取分离纯化与鉴定
（一）方法：采用分段盐析法提取分离POD；用透析法脱盐；用福林酚法测定蛋白质含量；愈创木酚法测定POD活性，计算比活力和回收率；用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离鉴定POD同工酶。
（二）目的要求：掌握实验的基本原理和方法；能设计实验操作流程。
（三）重点：相关仪器的使用、测定原理和方法；各实验环节的衔接。
（四）难点：实验技术的综合运用。
实验二十六 设计性实验——植物组织衰老过程中的生理变化
（一）方法和实验流程：设计使植物组织衰老的处理方法；根据理论知识，设计在衰老的不同阶段测定与衰老有关的生理指标；确定各生理指标的测定方法；写出实验设计方案；配制药品；取材、测定；写出实验报告。
（二）目的要求：学习实验设计方法，初步培养科学研究的基本能力。
（三）重点：实验设计、相关仪器的使用、测定原理和方法；各实验环节的衔接。
（四）难点：试验设计、实验技术的综合运用。
四、学时分配表
教学时数分配
顺 序
授 课 内 容
学时分配
小计
生化实验部分
（第三学期与生化理论课教学平行开课）
实验一
应用纸层析分离鉴定氨基酸
4
4
实验二
氨基酸含量的测定——茚三酮比色法
3
3
实验三
可溶性糖含量的测定——蒽酮法
3
3
实验四
蛋白质含量的测定——福林酚法
3
3
实验五
RNA的提制
4
4
实验六
RNA含量的测定
3
3
实验七
淀粉酶活性的测定
4
4
实验八
聚丙烯酰胺凝胶电泳分离同工酶
6
6
综合性实验
（任选）
将蛋白质含量测定、酶活性测定、聚丙烯酰胺凝胶电泳三项实验内容综合起来，开设综合性实验植物组织POD的提取分离纯化与鉴定。
18
18
备选实验一
酶的基本性质
4
4
备选实验二
谷物种子中赖氨酸含量测定
3
3
生理实验部分
（第四学期与植物生理理论课教学平行开课）
实验十一
植物细胞水势测定
3
3
实验十二
呼吸强度测定
3
3
实验十三
光合色素含量测定
3
3
实验十四
光合色素的提取分离与理化性质
3
3
实验十五
硝酸还原酶活性测定
3
3
实验十六
种子生活力快速测定
3
3
实验十七
超氧化物岐化酶（SOD）活性测定
3
3
实验十八
过氧化物酶（POD）活性测定
2
2
实验十九
丙二醛（MDA）含量测定
3
3
实验二十
细胞差别透性测定
4
4
备选实验一
光合强度测定
4
4
备选实验二
脯氨酸含量测定
3
3
备选实验三
根系活力测定
3
3
备选实验四
维生素C含量测定
3
3
设计性实验（任选）
将光合色素含量测定、POD、SOD活性测定、MDA含量测定和细胞差别透性测定结合起来，开设设计性实验植物组织衰老过程中的生理变化。
15
15
注：根据需要和实验室条件从中选择60学时实验，生理、生化部分各30学时。
五、课程教学的基本要求和主要环节
（一）实验教学的基本要求：
1．坚持精讲多练的原则，讲授、演示、指导与学生独立设计独立完成相结合，让学生成为实验课主体。
2．将能力培养做为实验课的主要目标追求。一方面要求学生掌握实验原理，能根据实验原理适当调整实验步骤；另一方面训练学生能根据专业研究的需要，能独立地从选择实验内容、确定实验方法、试剂配制、实验条件控制、仪器使用等环节完成实验内容；
3．把培养学生动手能力做为实验课重点之一，达到规范操作目的。
4．实验内容可根据需要和实验室条件在大纲范围内选择10～11项，并应根据需要和实验室条件启动备选实验。
（二）教学主要环节
1．实验教学：与相应理论课相伴进行。
2．考试及成绩构成：本课程为考查课。成绩由两部分构成，一是实验报告成绩，占总成绩的30%～50%；二是期末考试成绩，占总成绩的50%～70%。
六、本课程与其它课程的联系与分工
本课程与物理学、化学、分析化学、植物学、生理生化理论课有重要联系，与化学尤其是分析化学的联系尤为重要。
化学课为本课程奠定试剂配制、实验室基本操作方法与操作规范的基础，本课程运用这些知识与技能基础完成教学，并在教学中使之巩固和强化；
植物学为以植物为材料试材准备和取舍提供基础知识；
植物生理生化为本课程的学习提供必要的理论指导，本课程的学习加深对生理生化知识的理解，并使深奥的理论知识具有可操作性，甚至使之物质化。
七、建议教材与参考教材
建议教材：刘永军主编《植物生理生化实验》，中国农业科技出版社，2002年。
参考教材：
1．李合生主编. 植物生理生化实验原理及技术.北京：高等教育出版社，2000.
2．李建武等主编. 生物化学实验原理和方法. 北京：北京大学出版社，2000.
3．白宝璋等. 植物生理学测试技术. 中国科学技术出版社，1993
4．西北农业大学. 基础生物化学实验指导. 陕西科学技术出版社，1986
5．张志良主编. 植物生理学实验指导（第二版）. 北京：中国农业出版社，2000.
6．邹琦主编. 植物生理学实验指导. 北京：高等教育出版社，1990.
7．朱广廉等主编. 植物生理学实验. 北京：北京大学出版社，1990 .
9．李秀锦主编. 实用生化实验技术. 北京：中国农业出版社，1995.
10．刘福岭编着. 食品物理与化学分析方法. 北京：轻工业出版社，1987.
11．张承圭等合编. 生物化学仪器分析与技术. 北京：高等教育出版社，1990.
12．何忠孝主编. 电泳. 北京：科技出版社，1999.
13．华东师范大学生物系植物生理教研组编. 植物生理学实验指导，人民教育出版社，1980
14．.植物生理与分子生物学报
15．.植物生理学通讯
❷ 铁的化合物的制备和检测实验报告
铁化合物的制备及其组成的测定实验报告
（20学时）
实验目的：
1.了解并掌握铁化合物的制备方法及组成测定方法
2.掌握水浴加热、非水溶剂洗涤的方法
3.进一步熟练滴定操作方法
4.掌握实验结果数据的处理方法
实验原理：
1. 黄色铁化合物Fex(C2O4)y•zH2O的制备
H2C2O4•2H2O+Fe(NH4)2(SO4)2•6H2O Fex(C2O4)y•zH2O + (NH4)2SO4
2. 绿色铁化合物KxFey(C2O4)z•wH2O的制备
Fex(C2O4)y•zH2O＋K2C2O4•H2O+H2O2 Kd Fea(C2O4)b•cH2O+ H2O
Kd Fea(C2O4)b•cH2O+ H2C2O4•2H2O KxFey(C2O4)z•wH2O
1. 铁化合物的分析
在酸性条件下，高锰酸钾可同时氧化草酸根和二价铁离子：
Fex(C2O4)y•zH2O＋H2SO4＋KMnO4 Fe2(SO4)3+ K2SO4+ Mn2++CO2+H2O
(5C2O42-＋8H2SO4＋2KMnO4 K2SO4+2 Mn2++7 SO42-+ 10CO2+8H2O)
用锌片或锌粉还原高价铁成低价铁：
Fe3+＋Zn Fe2+＋Zn2+
低价铁与高锰酸钾反应:
Fe2+ + KMnO4＋H2SO4 5 Fe3+ + Mn2++ K2SO4+H2O
用硫氰酸铵来检测三价铁离子：
Fe3+＋SCN- Fe (SCN )3(血红色)
实验步骤：
1. 黄色铁化合物Fex(C2O4)y•zH2O的制备
称取7.5 g H2C2O4•2H2O固体溶于75ml水中（甲溶液）。称取15g Fe(NH4)2(SO4)2•6H2O固体溶于60ml蒸馏水中，再加约1.5ml 2mol/L H2SO4溶液酸化，放在水浴上加热到溶解（乙溶液）。
在搅拌条件下把甲溶液加到乙溶液中，将甲、乙溶液混合后在40－600C水浴加热。静止，待产物沉淀完全后，并冷却到室温以下抽滤，过滤时尽可能将沉淀搅拌后倒在布氏漏斗中央，用蒸馏水分3次洗涤产物，再用丙酮分2次洗液产物，抽干，将表面皿凹面朝上放在沸水烧杯上，将过滤的沉淀物连同滤纸一起放在表面皿凹面上烘干。烘干程度以成松散粉体为准。烘干后产品放入塑料袋中保存，称重，以备后面实验使用。
2．绿色铁化合物KxFey(C2O4)z•wH2O的制备
称取2 g自制的黄色化合物，加入5ml蒸馏水配成悬浮液，边搅拌边加入3.2g K2C2O4•H2O固体。在400C水浴下滴加过氧化氢溶液，不能加快，否则会爆沸，此时有棕色沉淀析出。加热至沸，将3.2g H2C2O4•2H2O固体慢慢加入至亮绿色透明溶液，往清液中加入8ml95％乙醇，如产生混浊，微热可使其溶解，放在暗处待其析出晶体并自然冷却到室温，晶体抽滤、用5ml1：1乙醇溶液洗涤产物、抽干，装入塑料袋中保存，称重，另用纸包好以免见光组成发生变化，产品以备后实验使用。
3．产物定性试验
（1）将0.5g自制的黄色化合物配成酸性溶液（2mol/LH2SO4）。进行定性分析。
①加NH4SCN溶液检验铁的价态
②在酸性溶液试验与KMnO4溶液的作用，观察现象并检验反应后铁的价态。再加1片Zn片，反应后再次检验铁的价态。
绿色化合物定性分析可与上述方法相同，并将结果以表格列入相关表格中。
4．黄色化合物的组成测定
（1）在电子天平上准确称取0.12-0.15g的自制产品各两份，分别加入20ml2mol/LH2SO4溶液溶解，并稍加热以促使加快溶解（低于400C），在70-800C水浴下用KMnO4标准溶液滴定至红色为终点。(开始速度放慢些)。记下消耗的KMnO4标准溶液的体积为V1。
（2）在已到终点的上述滴定液中按讲义操作，求出第二次滴定的KMnO4标准溶液的体积为V2。（也可用Zn片来代替Zn粉作还原剂还原高价铁，还原反应结束后将过量的Zn片用玻璃棒挑出，用少蒸馏水冲洗Zn片和玻璃棒上溶液入上述溶液中，再用标准溶液滴定。在还原过程中当酸度不足时可补加6mol/LH2SO4溶液1－3ml，以维持溶液的足够酸度）。
将有关数据记录下来以便后期处理，计算该黄色化合物的组成。
实验结果与处理
1．铁化合物产量（g）
黄色铁化合物Fex(C2O4)y•zH2O 6．5 绿色铁化合物KxFey(C2O4)z•wH2O 6．4
a) 铁化合物定性分析
取0.5g产品配成酸性溶液实验
试样 ① ②
步骤 1 2 3 4
试剂 KSCN KMnO4溶液 KSCN Zn粉 KSCN
黄色铁化合物
绿色铁化合物
从上表结果中可看出，黄色化合物的铁是正？价，绿色化合物的铁是正？价。
b) 铁化合物的组成测定（CKMnO4=0.0320 mol/L）
（1）化学方程式见原理部分，计算公式如下：
i. 每克产品含C2O2-4 mmol数：
ii. 每克产品含C2O2-4 mmol数：
iii. 每克产品含H2Ommol数：
黄色：
（2）将有关数据记入下表中：
化合物种类 黄色化合物 绿色化合物
序 号 1 2 1 2
称样重W/g
第一次消耗
KMnO4体积V1 /ml
第二次（与铁）消耗
KMnO4体积V2/ml
草酸根消耗
KMnO4体积V3/ml
每克产品含
C2O2-4 mmol数
平均 =
平均 =
每克产品含
Fe mmol数
平均nFe = 平均nFe=
每克产品含
水mmol数 称重： 烘干：
摩尔比 :nFe: nH2O
化成整数摩尔比
:nFe: nH2O
化合物的可能化学式 K3Fe(C2O4)3•3H2O
❸ 怎样测试自制樱桃酒中黄曲霉素
黄曲霉素（AF)的检测方法从最初以薄层层析法为主，发展到高效液相色谱法、微柱法、酶联免疫吸附法等多种方法普遍应用，其进展与新的化学检测手段和新仪器的出现密不可分。这些新方法、新手段的快速应用，为黄曲霉毒素的检测提供了更广泛的选择余地，适应了不同的检测目的和要求。
薄层层析法
薄层层析法（TLC）是测定AF的经典方法，其原理是将样品经过提取、柱层析、洗脱、浓缩、薄层分离后，在波长365nm紫外光下产生蓝紫色或黄绿色荧光，并根据其在薄层上显示的最低检出量来确定其含量。
高效液相色谱法
HPLC具有高分辨率，分析时间较短等优点。它的原理是样品溶液中欲分离的几种化合物在流动相和固定相之间有不同的分配量，从而达到分离的目的。AF经柱后电化学衍生化后，能发射特征性荧光，被荧光检测器捕获后而得到检测，最后经化学工作站处理数据。这一检测方法，将化学分析试验与领先的计算机技术结合，使自动化程度得到极大的提高，在试验空间、人力和仪器都保持不变的情况下，能检测更多的样品。HPLC是近几年发展起来的检测AFB1的方法，主要是用荧光检测器检测。该法快速而准确，但需要昂贵的仪器设备，未能广泛使用。
微柱法
微柱法测定AF，是利用微柱管内的硅镁型吸附剂吸附AF并在365nm紫外光下显示荧光，其强度与一定浓度的AF含量成正比关系，由此可简略定量AF。
酶联免疫吸附法
酶联免疫吸附法（ELISA）是抗原（或抗体）吸附剂和用酶标记的抗体（或抗原）与标本中的待测物（抗原和抗体）起特异的免疫学反应，用测定酶活力的方法来增加测定的敏感度，是一种定性或半定量的方法。大致采用两种方法检测AF：一种是用双抗体夹心法；另一种是用竞争法。免疫吸附法测定的试剂盒及配套仪器、方法被列入国家标准（GB/T5009 22-1996第二法）。
关于运用酶联免疫法检测AFB1的检测报道也较多，目前国外已有较成熟的检测食品及饲料中AFB1等真菌毒素的ELISA试剂盒出售，我国自20世纪90年代以来也有一些以ELISA检测食品及饲料中AFB1的研究报道。
其他方法
（1）溴化荧光分光光度法（SFB）
样品经甲醇-水混合溶剂提取后，部分提取液通过固相分离进行柱前处理，500μL纯化的提取液用溴试剂衍生化后，用荧光检测计中检测，样品荧光吸收度与硫酸喹啉液的吸收度比较可直接换算成AF的总含量。该法已通过AOAC和美国农业部联邦谷物检测中心的认证。
（2）超光谱方法（HS）
超光谱法是基于反射能基础上的一种非侵入无破坏的映像技术，用于农产品检测中，能够快速地提供该产品的有关化学和其他方面的内部细节。另据研究报道，培训黄蜂可用于AF检测。由于AF主要是由黄曲霉产生的，寄生黄蜂通过培训能把黄曲霉的气味和糖水联系起来，并对这些气味产生有区别的行为反应，借此来识别目标气味的存在。这种培训反应正在应用于储藏玉米、花生的AF监控和检测实践当中，目前还未给出有关的结果评定。
各方法对比
薄层层析法对样品处理繁琐，实验过程复杂，所需时间多，易受杂质干扰，较适合于对AF的定性检测，是研究AF初期所使用的主要方法。今后，虽然薄层层析法在不断地改进，并在一般实验室均可完成操作，但由于它复杂的前处理过程致使在应用中仍然会受到一定程度的限制。
高效液相色谱法测定AF，技术水平要求较高，目前采用这种方法检测AF较多，但具体一次实验所使用的化学药剂和处理途径差别很大，对实验结果的精度造成影响，这种方法还应在实践中进一步改进。但总体上说高效液相色谱法操作较为简便，同时可检测多个AF种类，适于大批量样品的分析。将免疫亲和柱与高效液相色谱法结合应用，是目前采用较多的一种方法，今后将被广泛应用。
微柱法测定AF，主要是用来检验AF的存在与否以及快速筛选出超标样品，而要对AF种类进行区分定量检验，则需要对不同AF组分进行分离，再利用其他方法检测。因此，微柱法并不能完成整个AF检测过程，仅适用于定性检验。
酶联免疫吸附法操作简便，使用较为安全，但由于酶本身的不稳定性，用此方法检验AF有可能带来假阳、阴性结果，而且研制出的AF快速测试盒多以测定最具毒性的种属为主，食品和饲料工业上利用它来界定食品或饲料中AF的超标问题。酶联免疫吸附法的检测精度还有待于提高。
溴化荧光分光光度法的最大优点是检测时不使用AF对照品，同时快速、灵敏，适合大批量样品普查，仪器价格也较低，张雪辉等比较了用SFB法和溴衍生HPLC检测中药中AF的结果，发现SFB法在测定中药时可能出现许多假阳性结果。
❹ 银量、硼量、锡量、铅量及镓量的测定 交流水平电极发射光谱法
1 范围
本方法规定了地球化学勘查试样中银、硼、锡、铅、镓含量的测定方法。
本方法适用于水系沉积物、土壤试料中银、硼、锡、铅、镓量的测定。
本方法检出限（3S）：银0.020μg/g；硼1.0μg/g；锡0.6μg/g；铅0.5μg/g；镓0.4μg/g。
本方法测定范围：银0.06μg/g～5.0μg/g；硼3μg/g～600μg/g；锡1.8μg/g～200μg/g；
铅1.5μg/g～200μg/g；镓1.2μg/g～200μg/g。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本方法的本部分的引用而成为本部分的条款。
下列不注日期的引用文件，其最新版本适用于本方法。
GB/T 20001.4 标准编写规则 第4部分：化学分析方法。
GB/T 14505 岩石和矿石化学分析方法总则及一般规定。
GB6379 测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性。
GB/T 14496—93 地球化学勘查术语。
3 方法提要
试料以硫酸钾、硫粉、碳粉、聚三氟氯乙烯粉、三氧化二铝、氧化镁混合物作缓冲剂，镉和锑作内标，其中银分析内标线为：Cd 326.11nm，硼分析内标线为：Sb259.81nm，锡分析内标线为：Cd 326.11nm，铅分析内标线为：Cd 326.11nm，镓分析内标线为：Sb 326.75nm。于平面光栅摄谱仪上，用水平电极、对电极摄谱（截取曝光），谱板可在GBZ-1型自动测光仪上测量各元素谱线的相对黑度，根据相对黑度的高低可测得试料中银、硼、锡、铅及镓的含量。
注1：聚三氟氯乙烯使硼形成氟化硼，有利于蒸发。这种缓冲剂的分馏效应明显，可截取曝光，抑制了大量基体元素的蒸发，降低了光谱背景，从而降低了测定元素的检出限。
注2：采用水平电极摄谱，弧焰稳定，分析精密度提高。
4 试剂
除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水。
4.1 硫酸钾
光谱纯
4.2 沉降硫
4.3 碳粉
光谱纯
4.4 聚三氟氯乙烯粉
4.5 三氧化二铝
光谱纯
4.6 氧化镁
光谱纯
4.7 氧化镉
光谱纯
4.8 三氧化二锑
光谱纯
4.9 二氧化硅
光谱纯
4.10 三氧化二铁
光谱纯
4.11 氧化钙
光谱纯
4.12 硫酸钠
光谱纯
4.13 二氧化钛
光谱纯
4.14 硼酸
光谱纯
4.15 二氧化锡
光谱纯
4.16 氧化铅
光谱纯
4.17 三氧化二镓
光谱纯
4.18 硫代硫酸钠
4.19 无水亚硫酸钠
4.20 醋酸
φ（HAc）=28%
4.21 硫酸铝钾
4.22 米吐尔
4.23 对苯二酚
4.24 无水碳酸钠
4.25 溴化钾
4.26 乙醇溶液（1+1）
4.27 缓冲剂
按（50+28+2+5+10+5+0.05+0.4）的比例称取50g硫酸钾（4.1）、28g沉降硫（4.2）、2g碳粉（4.3）、5g聚三氟氯乙烯粉（4.4）、10g三氧化二铝（4.5）、5g氧化镁（4.6）、0.05g氧化镉（4.7）、0.4g三氧化二锑（4.8），研磨8h以上，混合备用。
4.28 基物
按（70.5+12+5+5+5+2+0.5）的比例称取70.5g二氧化硅（4.9）、12g三氧化二铝（4.5）、5g三氧化二铁（4.10）、5g氧化钙（4.11）、5g硫酸钠（4.12）、2g氧化镁（4.6）、0.5g二氧化钛（4.13），研磨2天以上，混匀备用。
4.29 银标准系列
用银矿石一级标准物质GBW07258［含银量为446μg/g］与湖北水系沉积物监控样43GRD—36［含银量为0.028μg/g］，按不同比例稀释配制成含银量为：5.0μg/g、2.0μg/g、1.0μg/g、0.5μg/g、0.2μg/g、0.1μg/g、0.06μg/g、0.028μg/g共8个标准系列。按表1手续配制。
表1 银标准系列的配制
将4.29.1～4.29.8分别在玛瑙研钵中研磨2h后，装入磨口玻璃瓶中备用。
4.30 硼标准
4.30.1 硼标准Ⅰ（w（B）=3.0%）称取0.4290g不烘的硼酸（4.14），补加基物（4.28）至2.5000g，用玛瑙研钵研磨2h后，装入磨口小玻璃瓶中备用。
4.30.2 硼标准Ⅱ（w（B）=0.30%）称取1.0000g硼标准Ⅰ（4.30.1）及9.000g基物（4.28），在玛瑙研钵中研磨2h后，装入磨口小玻璃瓶中备用。
4.31 锡标准
4.31.1 锡标准Ⅰ（w（Sn）=10.0%）称取0.3174g已在105℃干燥2h的二氧化锡（4.15）及2.1826g基物（4.28），在玛瑙研钵中研磨2h后，装入磨口小玻璃瓶中备用。
4.31.2 锡标准Ⅱ（w（Sn）=1.0%）称取0.2500g锡标准Ⅰ（4.31.1）及2.2500g基物（4.28），在玛瑙研钵中研磨2h后，装入磨口小玻璃瓶中备用。
4.32 铅标准
4.32.1 铅标准Ⅰ（w（Pb）=10.0%）称取0.2693g已在105℃干燥2h的氧化铅（4.16）及2.2307g基物（4.28），在玛瑙研钵中研磨2h后，装入磨口小玻璃瓶中备用。
4.32.2 铅标准Ⅱ（w（Pb）=1.0%）称取0.2500g铅标准Ⅰ（4.32.1）及2.2500g基物（4.28），在玛瑙研钵中研磨2h后，装入磨口小玻璃瓶中备用。
4.33 镓标准
4.33.1 镓标准Ⅰ（w（Ga）=10.0%）称取0.3360g已在105℃干燥2h的三氧化二镓（4.17）及2.1640g基物（4.28），在玛瑙研钵中研磨2h后，装入磨口小玻璃瓶中备用。
4.33.2 镓标准Ⅱ（w（Ga）=1.0%）称取0.2500g镓标准Ⅰ（4.33.1）及2.2500g基物（4.28），在玛瑙研钵中研磨2h后，装入磨口小玻璃瓶中备用。
4.34 硼、锡、铅、镓混合标准［w（B）=600μg/g，w（Sn）=200μg/g，w（Pb）=200μg/g，w（Ga）=200μg/g］
称取2.000g硼标准Ⅱ（4.30.2），0.200g锡标准Ⅱ（4.31.2），0.200g铅标准Ⅱ（4.32.2），0.200g镓标准Ⅱ（4.33.2）及7.4000g基物（4.28），在玛瑙研钵中研磨2h后，装入磨口小玻璃瓶中备用。
4.34.1 硼、锡、铅、镓混合标准系列配制手续见表2。
表2 硼、锡、铅、镓混合标准系列配制
按表2分别称取标准和基物后，在玛瑙研钵中研磨2h后，装入磨口小玻璃瓶中备用。
4.35 显影液
A液：称取10g米吐尔（4.22）、260g无水亚硫酸钠（4.19）、50g对苯二酚（4.23）溶于5000mL水中，摇匀，储存于棕色玻璃瓶中在暗房内保存。贮存期为3个月。
B液：称取160g无水碳酸钠（4.24）、160g溴化钾（4.25）溶于4000mL水中，摇匀，储存于棕色玻璃瓶中在暗房内保存。贮存期为3个月。
4.36 定影液
称取960g硫代硫酸钠（4.18）、60g无水亚硫酸钠（4.19）、192mL醋酸（4.20）、30g硼酸（4.14）和60g硫酸铝钾（4.21）溶于4000mL水中，摇匀，储存于棕色玻璃瓶中在暗房内保存。贮存期为3个月。
5 仪器及材料
5.1 摄谱仪
PGS-2平面光栅摄谱仪。仪器规格见附录A（A.1）条。
5.2 自动测微光度计
GBZ-1型。
5.3 两电极规格
3.5 mm×4 mm×0.7mm无颈碳电极。
5.4 感光板
天津I型光谱感光板。
5.5 玛瑙研钵
6 分析步骤
6.1 试料
试料粒径应小于0.074mm，在室温干燥后，装入磨口小玻璃瓶中备用。
试料量 称取0.1g试料，精确至0.0002g。
6.2 空白试验
随同试料分析全过程用基物（4.28）做双份空白试验。
6.3 质量控制
选取同类型水系沉积物或土壤一级标准物质2个～4个样品，随同试料同时分析。
6.4 测定
6.4.1 称取试料（6.1）和0.0500g缓冲剂（4.27）置于5mL瓷坩埚中，依次放入玛瑙研钵（5.5）中研磨1min将试料与缓冲剂混匀，同时等份装入两支3.5mm×4mm×0.7mm无颈碳电极（5.3）中。压紧，加两滴乙醇溶液（4.26），待试料将溶液吸收后，于红外灯下干燥45min。
注：在测定土壤试料时，当试料有机质高时需灼烧，否则摄谱时易跳溅。
6.4.2 在附录A（A.1）条的仪器工作条件，在各元素分析线对的波长处，依次对试料进行水平对电极摄谱。按附录A（A.3）条显影与定影。按附录A（A.4）条的测量条件在自动测光仪上测量试料谱线的相对黑度。测量时每条谱带要调焦。同时在绘制的工作曲线（6.5）上查得试料中各元素的含量，并打印分析结果。含量超过工作曲线范围的可再用缓冲剂按比例冲稀，再重新按（6.4.1）条进行。
6.5 工作曲线的绘制
6.5.1 于一组5mL瓷坩埚中分别称取0.1000g银标准系列（4.29.1～4.29.8），并分别加入0.0500g缓冲剂，依次在玛瑙研钵中研磨1min后再装入电极中，压紧。
6.5.2 于另一组5mL瓷坩埚中分别称取0.1000g混合标准系列（4.34.1.1～4.34.1.8），分别加入 0.0500g缓冲剂（4.27），依次在玛瑙研钵中研磨1min后再装入电极中，压紧。
6.5.3 以下按（6.4.1～6.4.2）条步骤进行摄谱、显影与定影，并测量分析线的相对黑度。以银、硼、锡、铅、镓量的lgC为横坐标，黑度差ΔP为纵坐标，绘制各元素的工作曲线。
7 分析结果的计算
按下式计算银（硼、锡、铅、镓）的含量：
区域地球化学勘查样品分析方法
式中：m1——从工作曲线上查得的各元素的量，μg；m0——从工作曲线上查得空白试验（6.2）中各元素的量，μg；m—试样质量，g。
8 精密度
银、硼、锡、铅、镓量的精密度见表3至表7。
表3 精密度［w（Ag），10-6］
表4 精密度［w（B），10-6］
表5 精密度［w（Sn），10-6］
表6 精密度［w（Pb），10-6］
表7 精密度［w（Ga），10-6］
附 录 A
（资料性附录）
A.1 摄谱仪工作条件
表A.1 摄谱仪工作条件
电极架形状：水平电极架
中间波长：314.0nm
狭 缝：12μm
遮光板：自制的，6 mm×8mm
光栅刻线：1302条/mm
激发光源：交流电弧，电流18A
曝光时间：41s截取曝光
A.2 感光板的裁板与放置
测定硼元素感光板裁用9cm×6cmⅠ型感光板，放置在暗盒短波位置，距暗盒边缘1.5cm处；测定其他元素裁用大感光板9cm×18cmⅠ型感光板，放置在暗盒长波位置，距暗盒另一侧边缘3.0cm处。
A.3 显影与定影条件
A.3.1 显影
显影液配制 取显影液（4.37）中A液、B液按1+1混合。
显影温度 19℃显影。
显影时间 测定硼元素感光板（短波，9cm×6cmI型感光板）显影3min；测定其他元素用大感光板（长波，9cm×18cmⅠ型感光板）显影4min。
A.3.2 定影
将光谱感光板经显影后立即放入定影液（4.38）中定影0.5h。
A.4 测量条件
采用PGS-2型二米平面光栅摄谱仪光栅转角为11.0°时的色散曲线，参考线Fe280.7nm，每条谱线要调焦，用GBZ-1型自动测微光度计进行测量并自动处理数据。
附 录 B
（资料性附录）
B.1 从实验室间试验结果得到的统计数据和其他数据
如表B.1至表B.5。
本方法精密度协作试验数据是由多个实验室进行方法合作研究所提供的结果进行统计分析得到的。
表B.1至表B.5中不需要将各浓度的数据全部列出，但至少列出3个或3个以上浓度所统计的参数。
B.1.1 列出了试验结果可接受的实验室个数（即除了经平均值及方差检验后，属界外值而被舍弃的实验室数据）。
B.1.2 列出了方法的相对误差参数，计算公式为RE=-x0）/x0×100%，公式中为多个实验室测量平均值；x0为一级标准物质的标准值。
B.1.3 列出了方法的精密度参数，计算公式为RSD=×100%，公式中Sr为重复性标准差、SR为再现性标准差。为了与GB/T20001.4所列参数的命名一致，本方法精密度表列称谓为“重复性变异系数”及“再现性变异系数”。
B.1.4 列出了方法的相对准确度参数。相对准确度是指测定值（平均值）占真值的百分比。
表B.1 Ag统计结果表
表B.2 B统计结果表
表B.3 Sn统计结果表
表B.4 Pb统计结果表
表B.5 Ga统计结果表
附加说明
本方法由中国地质调查局提出。
本方法由武汉综合岩矿测试中心技术归口。
本方法由武汉综合岩矿测试中心负责起草。
本方法主要起草人：杨波涌、丁 莹。
本方法精密度协作试验由武汉综合岩矿测试中心叶家瑜、江宝林组织实施。
❺ 食品分析的方法
膳食调查的方法：
1、称重法。步骤：确定调查对象和家庭成员；确定家庭食物种类；确定调查的天数；确定用餐人次总数。注意事项：市品重转换可是重量；不要疏漏小杂粮和零食的登记；人日数和总人日数的计算。
2、记账法。多用于建有伙食账目的单位，集体食堂或部队，
步骤为：与膳食管理人员见面，了解伙食结存，了解进餐人数，了解食物购进数量，食物消费量计算和记录，计算总人日数，核对记录结果，编制归档。
注意事项：食物消费量随季节变化较大，应在不同季节内开展多次短期调查；如果被调查单位人员的劳动强度、性别、年龄等组成不同，按标准人核算；要注意摄入自制的食品，要分开登记；注意是各种食物的可食部；不要疏漏小杂粮和零食的登记；要结合称重法。
3、化学分析法。非常精确的一种调查方法，都是在实验室中进行，
4、询问法。分24小时回顾法和膳食史法，
步骤：确定调查对象的基本内容；确定回顾调查表的内容；
注意事项：不适用于小的儿童和年龄较大的老人。
5、食物频率法。就是用食物食用的频率来估算。
步骤：确定家庭就餐的总人日数；统计食物的种类；某一阶段食用次数。
注意事项：尽量估算准确。
❻ 化学实验方案
http://www.ahnu.e.cn/kecheng/jxcg/all/1_7/cailiao/zongjiebaogao.htm
化学是一门以实验为基础的学科。化学上的许多理论和定律都是从实验中发现归纳出来的。同时，化学理论的应用、评价也有赖于实验的探索和检验。虽然到了近代乃至现代，化学的飞速进步已经产生了各种新的研究方法，但是，实验方法仍然是化学不可缺少的研究手段。新课程改革将科学探究作为突破口，科学探究不但是一种重要的学习方式，同时也是中学化学课程的重要内容，它对发展学生的科学素养具有不可替代的作用。而化学实验是科学探究的重要形式。
用化学实验的方法学习化学，既符合化学的学科特点也符合学生学习化学的认识特点，是化学教学实施素质教育的基本手段。新课程标准提倡学生独立进行或合作开展化学实验研究。通过化学实验能激发学生的学习兴趣，帮助学生通过使用探究形成化学概念、理解化学基础理论、掌握化学知识和技能，培养学生的科学态度和价值观，帮助学生发展思维能力和训练实验技能，从而达到全面提高学生的科学素养的目的。
一、对新课程标准下的中学化学实验的认识
《普通高中化学课程标准》明确了高中化学课程的基本理念：立足于学生适应现代生活和未来发展的需要，着眼于提高21世纪公民的科学素养，构建“知识与技能”、“过程与方法”、“情感态度与价值观”相融合的高中化学课程目标体系。“知识与技能”即过去的“双基”；“过程与方法”是让学生掌握学习的方法，学会学习；“情感态度与价值观”是人文关怀的体现。所以新的课程理念的核心是“让学生在知识探索的过程中，在知识、学法、人文等方面得到发展。”其中第5条特别强调：“通过以化学实验为主的多种探究活动，使学生体验科学研究的过程，激发学习化学的兴趣，强化科学探究的意识，促进学习方式的转变，培养学生的创新精神和实践能力。”[1]高中化学课程由2个必修模块和6个选修模块组成，其中“化学实验”是作为一个独立的模块有别于以往教材的处理，突出其重要的地位。
教育部2001年颁发的《基础教育课程改革纲要》为化学课程改革指明了方向，根据新的教学理念及由此产生的新课程标准，对照新旧教材，我们不难发现新课程在实验教学方面有以下几个主要方面的转变：
1、从只注重培养实验操作能力向培养实验思维能力和培养实验操作能力并重转变，改变以往为“教”设计实验变为“学”设计实验，使实验更好地配合学生的主动学习，打破以往教师垄断实验方案的设计向教师帮助、指导学生参与实验方案的设计的转变，这就是所谓的化学实验的探究化[2]。改变化学实验“照方抓药”式的现状的关键，是加强化学实验的探究化设计，这对于更好发挥化学实验的功能，促进学生科学素养主动、全面的发展具有重要的意义。例如：必修1中“验证铁能否与水蒸气反应”的探究实验，教材一方面提供了实验必要的仪器和药品，让学生来设计实验方案；另一方面又提供了一个实验方案，让学生参考并尝试利用该方案进行实验，最后让学生小结交流探究活动的收获。这样的实验教学，在指导学生学习设计实验的同时又锻炼了学生进行实验探究的动手能力。
另外，新课标不再硬性划分演示实验和学生实验，而是给教师创造性和学生的主动性提供空间。教师通过实验创设学习情景，为学生提供可观察的化学现象和实验操作，其活动指向是学生自主观察、分析思考、交流讨论、实验研究，不是教师单纯的表演或展示。从这一角度看，它和学生实验一样，都是学生的活动。在新课标中也提倡学生进行合作开展化学实验研究实现从“单兵作战”的自发研究向群众性研究与组队研究的“两条腿走路”转变。
2、从只重视理论到理论与实际相结合的转变，更加重视化学实验与生活、技术的联系，注重用实验探究的方法解决实际问题；使学生的课内学习转变为课内和课外相结合的模式，更适应开放式学习的需要，这就是所谓的化学实验的生活化[2]。
新课标“注重从学生已有的经验出发，让他们在熟悉的生活情景中学化学”，帮助学生“从科学、技术和社会相互联系的视角认识化学”，从历史和现实的结合上了解化学。此外，新课标还列出若干可供选择的学习情景素材，这有助于教师落实“贴近生活，联系实际”的教学要求，加深学生对“科学——技术——社会”观念的理解，增强学生的社会责任感，启发教师不断地从社会生活和新的科技发展中吸取新鲜的信息，学生在体验中逐步认识化学在促进社会可持续发展中的重要作用。通过化学实验来解释和解决日常生活和社会实际问题，对于拓展化学实验的功能，提高学生的科学素养，具有十分重要的意义和价值。化学实验的内容选取于日常生活和社会生活中的许多化学现象，实验药品取用于学生身边常见的化学物质，这样可使学生有一种亲切感，感到化学并不神秘，就在我们身边，有利于调动学生学习的积极性和激发他们对实验探究的兴趣。在新课程的教材中就有很多这样的实验素材。诸如必修2中“用生活中的材料制作简易电池”实验；选修1中“鲜果中维生素C的还原性”实验；选修2中“用淀粉自制吸水材料，并进行模拟保水试验”；选修4中“温度对加酶洗衣粉的洗涤效果的影响”实验；选修5中“自制肥皂与肥皂的洗涤作用”实验；选修6中“用氧化还原滴定法或电化学分析法测定污水中化学耗氧量”实验等等。
3、从只应用近代实验方法向适当应用现代实验方法和仪器，重视中学实验向现代化转变，这就是所谓的化学实验的现代化[2]。
化学实验的现代化科学手段的发明与使用，是和人类对物质的组成和结构的探索分不开的。鉴定物质的化学成分需要定性分析，测定物质的各组分的含量需要定量分析，确定物质的结构需要结构分析。高中化学新课程在化学分析方法的定量化和实验手段的现代化方面，跟以往的化学课程相比有了很大的改进。在高中化学新课程中引入了现代仪器分析的四大类仪器或方法（光谱类、色谱类、质谱类、电化学类）。例如：选修5中，“用质谱法测定相对分子质量”，“用红外光谱、核磁共振氢谱等方法鉴定分子结构”；选修6中“用化学方法或红外光谱法检验卤代烷中的卤素”实验，“用中和滴定法或气相色谱法测定醋酸中醋酸的含量”实验等。值得注意的是，对于这些现代实验分析仪器和方法的学习并不是要求学生都要掌握它们的具体的原理和应用技术，不同的实验技术所要求的程度是有区别的。有的只是属于介绍性质，只要求学生掌握其最基本的原理，达到拓展科学视野的目的就可以了。
4、重视绿色化学思想与可持续发展观念在实验中的体现，这就是所谓的化学实验的绿色化[2]。高中化学新课程在设计上十分注重“体现绿色化学思想”。例如：选修6（实验化学课程模块）中，将“形成绿色化学的观念”作为一项重要目标；将“树立绿色化学思想，形成环境保护的意识”单独作为一条“内容标准”；将“查阅资料：符合‘绿色化学’思想的化工产品的生产” 作为“活动与探究建议”中的一项学习活动。
二、开展化学实验教学要注意的问题
在新课程标准下，化学实验教学有了更为突出的作用和意义。因此，抓好实验教学是化学教学中十分重要的教学内容。那么，在开展化学实验教学过程中要注意哪些问题呢？笔者认为可以从以下几个方面去考虑：
(一)、加强思想认识，重视实验教育功能的发挥
激发学习兴趣、体验科学探究、训练可行方法、学习化学知识、学会团结协作是化学实验的主要教育功能。对此教师首先要有深刻的思想认识，同时要通过具体的教学实践发挥好这些化学实验教育功能。
具体而言，教师在实验内容的设计和选择上，需要注意从学生已有的经验和将要经历的社会生活实际出发，以激发学生学习化学兴趣，帮助学生认识化学与人类生活的密切关系，关注人类所面临的与化学相关的社会问题，培养学生的社会责任感、参与意识和决策能力。通过化学实验教学，可以让学生学习化学知识，在学习过程中，会得到大量的感性认识，将感性认识转化为理性认识，并运用已有知识和相关资料解决问题。同时，学会团结协作是当前社会分工日益完善、细致所导致的对人才自身素质的要求，在实验内容的选择中要重视选择一些需要通过小组协作方式才能完成的试验探索，让学生在实验探索的过程中根据要求，进行分工协作，共同完成实验，在实验探究中学会合作与分享。
新课程在必修1的第一章《从实验学化学》里就已经明确了“化学是一门以实验为基础的自然科学”并强调了掌握好实验方法的重要意义。我们可以利用好第一节《化学实验基本方法》的教材，先对学生进行化学学科特点和化学学习方法的教育，这包括了实验安全教育和实验规范教育。实验安全教育可以通过学生分组进行思考与交流再由学生小结，使学生认识到化学实验的操作应该规范，应该仔细检查安全措施，确保实验的安全和成功。然后，利用小组合作做实验可以两人一组，有大致的分工，职责基本明确，紧密配合的形式完成“粗盐的提纯”实验。学生完成实验后要做好总结和相互评价，老师最后结合自己观察的情况点评学生们的表现，表扬一些组或个人。通过这样的实验教学，既培养了学生的实验安全意识，又树立了学生的团结协作意识。
(二)、提高动手能力，关注学生实验技能的培养
进行化学实验的基础是实验者必须对化学实验基本方法和技能有一定的了解。新课程标准的课程目标中将“获得有关化学实验的基础知识和基本技能，学习实验研究的方法，能设计并完成一些化学实验”列作“知识与技能”目标之一。在新课程里增加了大量的学生实验探究的内容，在实验探究中的每一个实验，必须由学生亲自动手做实验才能完成，因此，提高学生的实验动手能力是完成好化学实验教学的基础。同时，要十分重视学生解决问题的能力培养，特别是观察、实验、假说、推理、收集资料、分析资料、处理数据等。要重视通过实验发展学生思维的敏捷性、灵活性、深刻性、独创性和批判性等良好的品质，培养学生的实践精神和创新能力。
值得注意的是，教材编写时由于考虑到各种条件的限制，往往是演示实验多，学生实验少，如果教师教学是按照“教师演示实验→学生观察实验→教师引导学生得出结论→例题→课堂训练→课后巩固练习”，其效果是学生会应试而没有得到发展。因此，教师要创造条件，根据实际情况，灵活处理教材，尽可能做到演示实验学生化，让每个学生都有动手的机会。其学生操作流程是：根据要解决的问题→设计实验原理→选实验器材→动手实验→记录现象及数据→处理数据得出结论。
例如：在必修1的第一章第一节《化学实验基本方法》中，教材并没有硬性区分演示实验和学生实验，为了更好的提高学生的实验能力，提倡教师多采用边讲边实验的教学方式。这样有利于学生掌握实验技能，培养观察、思维、独立操作等能力，容易获得成功感。建议实验1“粗盐的提纯”、实验2“硫酸根离子的检验”作为边讲边进行学生实验，实验3“实验室制取蒸馏水”作为演示实验，实验4“萃取和分液”即需在老师的指导或示范下学生完成实验。
(三)、培养问题意识，提高学生问题解决的能力
增强培养学生的问题意识，将问题转化为课题的能力是提高学生设计问题、解决问题能力的前提。问题意识是指学生在认识活动中意识到的一些怀疑、焦虑、探究的心理状态，这种心理状态驱使学生积极思维，不断提出和解决问题。心理学研究表明，意识到问题的存在是思维的起点，没有问题的思维是肤浅的思维、被动的思维。在化学实验教学中，能用于实验探究的问题可能来自自然现象、社会生活和生产实践，也可能来自学习的过程中，还有可能来自教师精心设计的问题情境，无论是什么情况，始终要让学生产生发现问题和解决问题的渴求和欲望。对于教材中某些验证性的实验如果改为探究性的实验，可将学生带入科学探究的情境中，从而不断增强他们发现问题和解决问题意识和能力。
例如，对于必修1中的“Fe(OH)2的制备和性质”探究实验，教师先讲清楚Fe(OH)2的颜色、状态及溶解性，然后演示新制的FeSO4与NaOH溶液反应，结果学生未能观察到白色絮状沉淀，而看到的却是灰绿色沉淀。这一现象会立即引起了学生的注意，教师要及时引导学生提出问题：①为什么要用新制的FeSO4溶液？②为何将滴管插入试管里溶液的底部，慢慢挤出NaOH溶液？③久置的NaOH溶液中溶解了什么物质？当学生通过分析认识到FeSO4、Fe(OH)2易被空气中的氧气所氧化时，换一瓶已煮沸过的NaOH溶液，以除去溶解的氧气，再进行实验，先得到了白色沉淀，但过一会儿就转变成灰绿色，然后逐渐变为红褐色，这一现象又引起了学生的疑问。教师进一步引导讨论：采取什么方法能使生成的Fe(OH)2氧化速率减慢？经过一系列的思考、讨论、比较，最后选用在新制FeSO4液面上，滴加几滴苯作保护层，将滴管伸入试管底部；滴加煮沸过的NaOH溶液终于得到了白色Fe(OH)2沉淀，并保持了较长的时间。通过类似的实验教学，最终会使学生发现问题和解决问题变成一种习惯，成为一种需要。
三、开展化学实验教学的点滴经验
实验是培养学生解决问题能力的重要途径。实验教学中的问题发现和形成、实验设计、操作、观察、思维、表达和交流等科学实践活动，可以有效地培养学生的实验意识、课题发现能力、实验设计能力、实验观察能力和实验操作能力，可以有效地培养学生的思维习惯和思维能力，这是其他活动形式难以代替的。
新教材为学生创造了许多动手的机会，怎样才能调动好学生的积极性？我在担任新课程高一化学的教学过程中，尝试通过不同的教学活动提高学生的实验能力，积累了一点经验与大家分享。我借助于学生手头上的一本教辅书《化学活动与探究》组织学生开展课外实验教学。该书的活动项目取材于教材中的典型，并设计成活动卡片。每个卡片上包括了6个栏目：问题思考、活动探究目的、活动探究用品、活动探究内容、交流与讨论、收获与体会。以下是一些具体的做法：在开始活动前，让全班学生自愿分成8个小组，实行组长负责制。每个星期轮排1个小组进行实验，各组自由选题，实验的内容可以从活动卡片中30个活动项目中选取。组长负责组织，在课余时间内完成实验，包括实验预习、分工、活动记录（包括实验内容、实验讨论、实验收获等，以上内容在实验报告中反映）及活动评价（包括自评、他评，他评中包括组长对组员的评议和组员对组长的评议）。整个小组的实验活动在1个星期内完成，并由组长在下周的化学课上用15分钟进行“结案陈词”（告知同学他们的实验课题、实验过程、实验结果、实验收获、活动评价的得分等）。累计每个星期不同小组的实验报告，定期进行展示，让大家进行投票选出最佳合作小组等。在各组活动过程中，老师也会参与到其中，小组做得好的地方，要及时地表扬，对于存在的问题要及时予以点拨、疏通，起到指点迷津的作用；并对他们实验过程进行评价，并纳入学分制的计算范畴。通过这些实验活动有利于培养学生实事求是、尊重科学、勇于探索的思想品质；培养学生团结协作、求实的科学态度，同时也激发了学生学习化学的兴趣。在实验教学中不仅要求学生认真对待实验，作为教师更要认真对待每一个实验，通过实验启发引导学生关注实验过程，突出学生在实验教学中的主体地位，增强实验的探索性，培养学生的科学探究和实验设计、评价能力。
总而言之，化学实验是中学化学教学内容的重要组成部分，新课程实验教学改革在高中化学课程改革中的地位举足轻重。广大的化学教师要在新的教学理念的指导下，认真、细致地学习研究新课程，提高认识，明确目标。围绕实验展开学习是中学化学教学特色的充分体现，化学实验教学只要真正得到落实，对激发学生学习化学的兴趣，培养学生的创造性思维，开发学生潜能，发展学生的个性将会产生积极的作用，也为化学教育走素质教育之路发挥出独特的功能[3]。新理念、新课标、新教材迫切要求实验教学理念的更新，这是一次挑战，让我们有所准备，勇于面对这一挑战。
❼ 谁有组织切片的制作过程
一、制备显微标本的切片法
一石蜡包埋切片制作法
这是最常用的切片法。以石蜡作为组织的填充支持介质，将整块组织加以包埋，最后凝固成均匀一致的固态结构。用切片机制取极薄的切片。为了让石蜡能浸入组织内部，需将组织经过脱水等处理。过程大致如下：
⑴固定：生物标本脱离机体或培养环境，细胞会发生自溶，腐败分解。因此，需用固定剂处理，使蛋白质凝固停止濒死或死后变化。凡供永久保存的标本都需经固定处理。
常用的固定剂是甲醛、乙醇等，能使蛋白质凝固。还有由几种试剂配成的固定液，例如Carnoy固定液，由无水酒精、氯仿、冰醋酸配成，固定力更快更强，不含水分，可避免水溶性物质如糖原等在固定过程中损失。
⑵脱水：是将组织细胞所含水分除去。通常用乙醇（Alcohol，酒精），浓度递升到 100%。此过程还使组织块进一步硬化。
⑶透明：是用既能溶于纯酒精又能融解石蜡的有机溶剂，将组织中的酒精取代，以便石蜡浸入。通常用二甲苯（xylene）为透明剂。
⑷浸蜡：在温箱内进行。已透明的组织块放入加热融解的石蜡中，让石蜡浸透组织，作为支持介质。
⑸包埋：将已浸蜡的组织块放入热融的包埋石蜡中，迅速冷凝，组织决便被蜡包埋。
⑹切片：用切片机。常用的切片机有轮转式、平推式的。用轮转式的易于切出连续切片。切片厚度随制片目的而调整。教学标本厚度多是5~6μm。
⑺贴片烤干：石蜡切片在温水上展平后，移在玻片上，烤干，即可供染色处理。染色后用树胶、盖坡片封固，可永久保存。
二冷冻切片法
冷冻切片法是借组织在低温下，冻结变硬而达到符合切片要求。冷冻切片法需有冷冻切片机，或在普通切片上配制冷设施。恒冷切片机是高级冷冻切片设备。它有一个恒冷箱，标本致冷台和切片机都装在箱内。恒冷箱的作用类似冰箱，可在一定范围内调整温度，其结构有利于保持箱内恒定低温，减少箱门打开时环境温度的干扰。切片机的轮转把手装在箱外，便于操纵切片。
冷冻切片法的优点是：在处理得当时，它可以最大限度地保持组织的新鲜状态。并且，由于不需经脱水、透明、浸蜡等过程中有机溶剂的处理，及湿箱浸蜡热的影响，甚至可不经固定。所以能很好地保存组织细胞的各种成分和酶的活性，因此在酶的组织化学研究中常用此切片法。
二、显示标本结构成分的染色法
一苏木素伊红染色法（HE染色法）
为最常用的染色法。该法应用于各种组织的染色，是组织学技术的基本方法，对任何液体固定的组织和各种包埋的切片均可使用，只是对不同包埋的切片法处理略有不同。下面简介石蜡包埋切片的HE染色法。
1、脱蜡：石蜡切片的组织内部充满石蜡，不能使水溶性染液着色，因此在染色前必须首先用二甲苯将石蜡脱掉，共两次。
2、下行入水：将已脱蜡的标本浸入无水酒精及各级酒精，使组织逐步接近水。3、蒸馏水略洗。
4、苏木素溶液染色约5—15分钟
5、自来水洗去多余染料。
6、入稀释的盐酸酒精溶液中分色，边分色边镜检，至核呈红紫色，细胞质无
色为合适。
7、分色后用自来水或加数滴氨水碱化，直至细胞核变成蓝色。这一步骤也可称为“蓝化”。
8、入蒸馏水洗去碱性水分。
9、入70%酒精→80%酒精各5分钟。
10、入伊红染液染色30秒至数分钟。
11、以95%酒精对伊红分色，至胞浆，结缔组织等呈桃红色。
12、上行脱水：染色后的切片，因组织内含水而不透明，不能清晰地观察其微细结构。因此，须将组织内的水分经各级酒精→无水酒精逐步置换，最后进入不含水份的透明剂内。
13、透明：入二甲苯透明剂，二次（各数分钟）。
14、取出切片：将组织周围多余的二甲苯擦去，滴树胶后加盖玻片封固。
结果：细胞核蓝紫色，胞浆、胶原纤维、肌纤维为桃红色，嗜酸性颗粒为鲜红色，弹性纤维呈明亮桃红色。
二组织化学和细胞化学染色法
组织化学和细胞化学，是将物理和化学的技术运用到组织标本，用显微镜和化学分析方法来研究组织和细胞内的化学成分，并观察该化学成分在组织、细胞内的定位、含量及其变化规律。这些化学成分借着化学反应所产生的不溶性着色物质来显示。对于某些化学成分，例如：Fe++糖原、核酸等，可以用直接或间接的化学反应产生着色沉淀而显示其部位和相对含量。对于酶类，显示它的活性，须有该种酶的底物（被该种酶作用的物质），由酶对底物的分解，直接或间接地生成着色物质而被显示。凡是在光学显微镜下观察细胞原位显示的化学物质，称组织化学，若用电镜观察细胞原位化学成分的着色部位，则称电镜细胞化学，下面从原理方面简要介绍几种常用的组织化学染色技术：
1、显示琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的硝基-BT法：
（Succinate dehydrogenase）
⑴酶的定位及生物学意义：
琥珀酸脱氢酶是线粒体标志酶，其存在于所有有氧呼吸的细胞，和线粒体内膜紧密结合。该酶不需辅酶而自身有黄素蛋白（FP,Flavoprotein）为辅基。在组化反应中常用来反映三羧酸循环的情况。其催化过程如下：
弱-单甲（紫红色）
HOOC-CH2-CH2-COOHFPH2四唑（甲）↓
（有色）强-双甲（深紫蓝色）
（琥珀酸）（黄素蛋白）
HOOC-CH=CH=COOHFPH2四唑（无色）
（延胡索酸）
⑵原理：上述的反应最后一步的原理是，硝基-BT（Nitro-blue tetrozolyum，四唑氮蓝）系异环族化合物四唑盐，当它接受氢时，本身被还原为有色沉淀产物（甲
）（Formazan）。
⑶孵育液配制：
A液（贮备液）
0.2M磷酸缓冲液（PH7.6）10ml等量混合
0.2M琥珀酸钠（S01.succinate） 10ml备用
B液：
硝基四唑（Nitro-Br）2mg
2ml
0.2M磷酸缓冲液（PH7.6） 2ml
取：A液2ml
B液2ml孵育液
聚乙烯吡烷酮（PVP） 300mg
⑷方法：
①新鲜恒冷箱冷冻切片，厚6~8μm，平贴在盖玻片上。
②滴染法：将有冷冻切片的盖玻片（标本面朝上）平放于预热好的培养皿中（底部垫一湿滤纸），滴加孵育液至全部覆盖组织，于37℃温箱中孵育45~60分钟（肝，心肌组织15分钟即可）。
③于生理盐水中冲洗二次（轻晃，以防脱片）。
④10%福尔马林生理盐水固定10分钟。
⑤15%酒精浸洗5分钟（换二次）。
⑥甘油明胶封片。
⑸结果：酶活性强处呈蓝色颗粒（双甲沉淀），酶活性较低时形成紫红色单甲。在光镜下，该酶活性于肝小叶内分布呈明显分带现象，周边带强于中央带。在心肌细胞纵切面，酶活性颗粒沿心肌细胞长轴整齐排列，相邻心肌细胞的空白处为闰盘。
2、显示葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-Pase）活性的铅法：
（Glucosel-phosphate phosphohydrolase）
①酶的定位及其生物学意义：
该酶主要位于内质网，是内质网的标志酶。G-6-Pase参与糖代谢，能水解葡萄糖-6-磷酸而释放出葡萄糖和磷酸。
⑵原理：G-6-Pase将底物（葡萄糖-6-磷酸钾盐）水解产生磷酸离子，后者被孵育液中的硝酸铅所捕获，最终反应物为颗粒状的硫化铅沉淀，其反应式如下：
酶Pb(NO3)2
葡萄糖-6-磷酸钾+H2O葡萄糖+磷酸
(NH4)2S
Pb2(PO4)2PbS↓
(无色)（棕色）
（试剂配制及方法详见组织学技术专着）
⑶结果：酶活性部位呈棕色硫化铅颗粒沉淀。在光镜下G-6-Pase活性颗粒较均匀地分布于胞质中。
3、显示碱性磷酸酶（APL）的钙钴法（Alkaline phosphohydrolase）
⑴酶的定位及其生物学意义：
ALP在碱性环境下能催化各种醇和酚的磷酸酯水解，参与磷酸根的跨膜转运过程，并有磷酸转移的作用，故在细胞膜上运输较活跃，如毛细血管内皮细胞，肾近曲小管刷状缘，肠上皮纹状缘等处，该酶的活性较高。
⑵原理：ALP将磷酸盐底物（如β-甘油磷酸钠等）分解产生磷酸根离子，后者为孵育液中的氯化钙捕获生成磷酸钙沉淀，但该沉淀为非金属盐，需加入硝酸钴，使其生成磷酸钴沉淀，因无色，再需通过硫化铵处理，形成棕黑色硫化钴沉淀而被显示。在PH9.2—9.4环境中表现最大活性。反应式如下：
ALPCa++
β-甘油磷酸钠磷酸离子Ca2(PO4)2
Co(NO3)2(NH4)2S
CO2（PO4）2CoS↓
（无色）（棕黑色）
⑶结果：酶活性部位为棕黑色CoS沉淀。
4、显示核酸的甲绿一派喏宁（Methyl green-pyronln）染色：
⑴原理：甲绿和派喏宁都是碱性染料，对两种核酸（DNA和RNA）能分别染色，其机制可能在于两种核酸分子都是多聚体，但聚合程度有所不同。甲绿具有两个带电荷的氨基，而派喏宁只有一个。因此在混合的染液中，二者竞争的结果是甲绿易与聚合程度较高的DNA结合呈现蓝绿色，而派喏宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色。
（试剂制备及方法详见组织学技术专着）
⑶结果：核内DNA呈蓝绿色，核仁及胞质内RNA呈桃红色。
5、显示糖原的过碘酸雪夫氏（PAS）反应：
⑴原理：糖原是一种动物多糖，无色，富含于肝细胞和肌细胞胞质中。PAS反应（Periodic acid schiff Reaction）能在糖原所在部位生成紫红色物质，从而将之显示。RAS反应分为两步：首先是强氧化剂过碘酸（Periodic acid,分子式为HIO4），将糖原中的葡萄糖分子的C-C键打开，将CHOH-CHOH氧化，生成二醛基，然后Schiff试剂中的无色亚硫酸品红分子与糖的醛基结合，生成新的紫红色复合物。
HIO4schiff试剂
多糖醛基紫红色反应产物
（氧化）
（试剂配制及方法详见组织学技术专着）
⑵结果：糖原呈紫红色颗粒状。
❽ 环氧当量 测定方法
盐酸丙酮法、溴化氢—冰乙酸法和高氯酸法
环氧当量是环氧树脂的重要当量，但检测较为麻烦。有没有一种快速、准确、简便实用的环氧当量测定方法？专家日前介绍的“溴化氢-冰乙酸非水滴定法”，就是可资业界的一种科学方法。这种方法在冰乙酸非水介质中，以结晶紫为指示剂、溴化氢与环氧基团迅速等摩尔反应，关键试剂是0.1mol的HBr-HOAe，有色样品、高填料样品或难以脱色的深色样品不同的测试也多有诀窍，溴化氢/冰乙酸电位滴定方法不乏秘密。常用的其他环氧分析方法相比，该方法具有简单、可靠、更准确的优点。
环氧当量(环氧值)是环氧树脂类胶粘剂、灌封料、复合材料等使用和质量控制的一项十分重要的指标(环氧当量=100/环氧值)，因而长期以来受到广泛关注并开展了大量研究，形成多种化学分析方法[1]。这些方法主要基于卤化氢、硫代硫酸盐(酯)和硫醇类能与环氧基进行计量的加成反应或进行离子化反应而用于环氧化合物分析。Budvak等早在1969年，Sorokina等在1978年就对环氧化合物的分析方法进行了详细报道和论述。以往国内多采用盐酸-丙酮返滴定法(HG2-741)并沿用至今，但当样品并非纯树脂而掺混有一定量的填料或有深色物质干扰终点判别时(如胶粘剂或灌封材料)常常难以测定。
1984年以来许多进口的环氧材料，要求采用一种“溴化氢-冰乙酸非水滴定法”进行质量控制。这种方法比国内长期普遍采用的盐酸一丙酮返滴定法快速、准确、灵敏，不仅能测定常用环氧树脂且适用于有填料或深色环氧材料的快速测定。与盐酸丙酮法相比，检测时间短、终点易判定、数据更准确集中、适用范围广。与国家标准GB/T 4612规定的高氯酸法[4]效果相当。但溴化氢-冰乙酸非水滴定法使用更加安全、价廉、简便。溴化氢-冰乙酸法在国内未被广泛采用的主要原因，在于其使用的标准滴定液国内无供应。中科院兰州化物所、西北工大材料院科研人员，通过测试方法的研究与试验自制了专用试剂，使该方法得以完善并建立了企业标准。经几家有关单位试用反映良好，解决了多种进口环氧材料长期质量控制的需要。
在生产实践中专家将盐酸丙酮法、溴化氢—冰乙酸法和高氯酸法对比测试。国标GB/T 13657-1992(双酚A环氧树脂)的附加说明表明，国标制订时参照采用了ASTM1763-198l(环氧树脂标准规范)，而该ASTM标准则规定采用ASTM D1652(溴化氢—冰乙酸法)测定环氧当量。其主要原因是因为盐酸丙酮法采用返滴定，仅滴定前就需要将试样放置1小时，且试剂需要现配现用；其二由于溴化氢-冰乙酸法和高氯酸法采用非水滴定，试样和试剂溶解好、反应迅速、终点容易判断，而盐酸丙酮法的部分试样在反应终点前后可能因溶样效果稍差出现混浊，影响终点判断。
此外在对进口和国产环氧胶、多种灌封料等分析测试实践中，大部分样品不像E-51(EP0144l-310或CYD-128)之类透明树脂，而是掺有大量填料、有色添加剂或有深色产物的样品，为此在实际应用溴化氢—冰乙酸法时，针对不同环氧样品分作3类处理。与高氯酸法相比，其原理都是通过溴化氢与环氧官能团进行加成反应。所不同的是高氯酸法是通过高氯酸与溴化四乙胺反应，转化出的溴化氢再与环氧官能团反应。两种方法使用的滴定剂使用前均需要进行标定，计算方法和操作也很相似(溴化氢-冰乙酸法通常不考虑温度/体积校正)、误差较小。而溴化氢一冰乙酸法因使用试剂更简单易得，实用性更好。
关于溴化氢—冰乙酸电位滴定，各种环氧材料均可以通过电位滴定进行环氧当量测定。
在通常情况下，可直接采用试剂直接滴定。但由于溴化氢的挥发和氧化等因素，ASTMD1052标准规定，采用高氯酸与溴化四乙胺反应进行电位滴定，对于低活性的环氧材料采用碘化四丁胺(与国标GB/T 4610高氯酸法完全相同)。其实这种高氯酸法是溴化氢-冰乙酸法的另一种应用形式。因为测试原理是利用高氯酸与溴化四乙胺反应原位合成初生态的溴化氢，而生成的溴化氢立即等当量与环氧基团反应，计算和测试方法相同。
在测试过程中由于易挥发氧化，可使用密封自动上液式滴定管。测试结果比较发现，自制试剂与进口试剂相当，偏差≤±1.5%，可满足使用要求。在对3个单位实验室不同测试人员的分析使用后认为，该方法和试剂可以满足产品质量控制使用要求。总之，溴化氢—冰乙酸法与盐酸丙酮法测试结果比较，具有数据集中、准确、经济安全、简便易行的优点，与高氯酸法应用效果相当。但溴化氢-冰乙酸非水滴定法使用更加安全、价廉、简便。采用氢溴酸与乙酸酐反应可以简便有效地制备HBr-HOAc 0.1mol/滴定剂。专家强调，由于溴化氢—冰乙酸法用标准滴定液可自制，可以在国内推广应用，尤其适用于进口环氧材料的测试分析。
❾ 自制薄层板鞋简述点样点位置及大小
影响可定会有的,最终的影响就是刺破的那个层析的结果不准确,也可能影响很小,因为这个是定性分析。色谱又称色层法或层析法，是一种物理化学分析方法，它利用不同溶质（样品）与固定相和流动相之间的作用力（分配、吸附、离子交换等）的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次平衡，使各溶质达到相互分离。