血吸虫基因研究方法

① 对血吸虫的了解，详细一点

血吸虫一般在沿海沿江一些城市的发病率高些，对血吸虫的研究一直不停，在转染上可以使用RFECT进行更具体的研究，先把细胞株激活再转染,这样应该不能提高转染效率。我们实验室用24孔板做，每孔2ulRFECT，设置siRNA终浓度10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度，每个梯度做2个复孔,做转染前一天铺板,细胞密度在45%。

② 血吸虫如何传染人与人之间能传染吗如何预防

在什么情况下才会传染得上血吸虫病？
大家知道，血吸虫病的流行链主要由5个环节组成：一是患者、病畜粪便中的虫卵进入水中，在适宜的温度下孵化为毛蚴。二是毛蚴钻入钉螺体内，发育成尾蚴。三是尾蚴从钉螺体内释放出后，在水面漂浮，如遇到人或牛、羊等可寄生的动物，迅即钻入其体内，随血流到达肠系膜血管，发育为成虫并在此寄生。四是成虫每天排出大量虫卵（1000-3500个）。人经过反复多次、多数量感染后，大量虫卵集聚引起肝脏纤维化、门静脉高压，造成晚期血吸虫病（晚血）。五是部分虫卵随患者、病畜的粪便排出体外，引起新的感染循环。
人和人在什么情况下会传染？
我们已经了解到以下一些特点：血吸虫病病人、病畜不会直接传染人、畜，必须通过钉螺这一中间环节；钉螺也是“受害者”，是被血吸虫毛蚴感染和寄生的对象；所有的感染环节都与水有明确的关系：即没有水，虫卵不能孵化；没有水，毛蚴不能钻入钉螺体内；没有水，钉螺体内的尾蚴不能逸出，人、畜也就不会感染。另外，还有一个非常值得我们重视的特点，就是钉螺的平均寿命只有1年；寄生有血吸虫幼虫的感染性钉螺的平均寿命仅为214天。

自尾蚴钻入皮肤，经童虫移行并发育为成虫，成虫成熟后交配产卵，虫卵沉积于肠道与肝脏等处组织内，虫卵沉积于组织内所诱发的虫卵肉芽肿反应乃是本病的基本病理改变。
(1)尾蚴性皮炎：一般发生于感染后6～8小时，长者2～3天。局部皮肤毛细血管扩张、充血、出血及水肿，皮肤出现红色丘疹，成为“尾蚴性皮炎”。持续1～2天后，丘疹自行消退。
(2)童虫移行所致病变：肺部病变明显，局部可见点状出血，严重感染者可发生出血性肺炎，出现咳嗽、发热、荨麻疹等表现，
(3)成虫寄生引起的病变：产生局部轻微的静脉内膜炎、轻度贫血。轻微血管壁坏死和肝内门静脉分支栓塞性脉管炎。某些初次重度感染者可出现重度发热、全身不适、荨麻疹、腹痛、腹泻、肝脾肿大等急性血吸虫病表现，
(4)虫卵肉芽肿：有急性和慢性之分。
急性期临床上出现腹痛、腹泻、便血等症状，粪便中可检出虫卵。
至慢性期，轻度感染者，临床上通常无症状。感染较重者，病变部位的肠系膜纤维增厚形成肿块。
在纤维增厚、慢性溃疡、息肉形成基础上有发生癌变的可能。
血吸虫病引起肝病变，为早期肝肿大。晚期肝变硬、缩小，形成血吸虫性肝硬化和脾功能亢进。
血吸虫引起的异位损害以肺和脑部最多见，

预防
1. 不要触有血吸虫病的水
2. 积极治疗病人、病畜、减少传染源。
3. 消灭钉螺。
4. 管好水源，不喝生水。

血吸虫通过接触疫区的水，水中尾蚴通过皮肤侵入体内，治疗血吸虫首选吡喹酮，可以10mg/kg/体重，每日3次，连用4日，在服首剂1小时后可出现头昏，头痛，乏力，腥痛，关节痛，腹泻，恶心等，一般不需处理，于停药数小时至一二天即消失，服药后可心率减慢，偶见心电图改变，肝酶升高等，应医生复查，严重心，肝，肾患者慎用。
治疗贫血、月经量少、老年血虚头晕等症均有较好的疗效；近年来还发现黄花根具有抗结核和治疗吸血虫的作用。黄花的食用方法很多，蒸、煮、炖、炒、褒汤、做羹等均可，因其具有丰富的营养价值和清香可口的美味，逐渐成为家庭餐桌和高级宴席上大的名珍佳肴，用它制成风味别具的药膳及饮料、罐头等保健食品则更是风靡国内外。

本文就几种黄花药膳的家庭制作方法作一介绍，供读者选用。

黄花银耳羹 黄花50克、银耳30克、红枣20克、樱桃克、桂花草10克，冰糖适量，先将黄花切细，红枣去核，银耳浸泡涨后与桂花、樱桃一同放入沙锅内炖煮直黄花烂熟，印数耳成根装时加入冰糖在食用。此方具有补合气血、养心安神、润肺清热、美容之功效。长期食用可使人面色红润、皮肤柔嫩、细滑光洁。

黄花百合粥 黄花费30克、百合30克、糯米100克、冰糖适量，先将黄花切段，百合去皮洗净切碎与糯米同放入沙锅，加入适量以火熬煮至米粥浓稠时加入冰糖搅均即可食用。此方具有健皮盒气、宁心安神之功效，适用于失眠症以及各种更年期综合症等。

黄花豆腐肉片汤 黄花50克、豆腐一块（约法三章250克切块）瘦肉类150克切片，将黄花同豆瓣放入锅内，加水适量煮20分钟后，再放入瘦猪肉片稍煮片刻，用生姜、盐、味精、葱花调味既可食用，此方具有补肾、养血、通乳之功效。适用于肾虚腰痛、耳鸣耳聋、记忆力。

不可献血!!!!

③ 血吸虫怎样检查

诊断标准
疑似病例
在流行区有疫水接触史并有下列临床表现： ①急性血吸虫病：疫水接触部位皮炎，发热，肝肿大伴肝区压痛，腹泻，嗜酸粒细胞显着增多。 ②慢性血吸虫病：无症状或慢性肠道感染症状，肝脾肿大，嗜酸粒细胞高于正常。 ③晚期血吸虫病：不能用其他原因解释的肝硬化，生长发育障碍，或腹部肉芽肿。
确诊病例
疑似病例加下列任何一项： ①粪便发现血吸虫卵或孵化检出毛蚴。 ②直肠粘膜或肝组织活检找到血吸虫卵或虫卵肉芽肿。
病原诊断
从粪便内检查虫卵或孵化毛蚴以及直肠粘膜活体组织检查虫卵。有：⑴直接涂片法：重感染地区病人粪便或急性血吸虫病人的粘液血便中常可检查到血吸虫虫卵，方法简便，但虫卵检出率低。⑵毛蚴孵化法：可以提高阳性检出率。⑶定量透明法：用作血吸虫虫卵计数。⑷直肠粘膜活体组织检查：慢性及晚期血吸虫病人肠壁组织增厚，虫卵排出受阻，故粪便中不易查获虫卵，可应用直肠镜检查。
免疫诊断
⑴皮内试验（intradermaltest，IDT）：一般皮内试验与粪检虫卵阳性的符合率为90％左右，但可出现假阳性或假阴性反应，与其他吸虫病可产生较高的交叉反应；并且病人治愈后多年仍可为阳性反应。此法简便、快速、通常用于现场筛选可疑病例。 ⑵检测抗体：血吸病人血清中存在特异性抗体，包括IgM、IgG、IgE等，如受检者未经病原治疗，而特异性抗体呈阳性反应，对于确定诊断意义较大；如已经病原治疗，特异性抗体阳性，并不能确定受检者体内仍有成虫寄生，因治愈后，特异性抗体在体内仍可维持较长时间。目前检测抗体的血吸虫病血清学诊断方法很多，常用的有以下几种：1）环卵沉淀试验（circunovalprecipitintest，COPT）：通常检查100个虫卵，阳性反应虫卵数（环沉率）等于或大于5％时，即为阳性。粪检血吸虫卵阳性者，COPT阳性率平均为97.3％（94.1%～100%）。2）间接红细胞凝集试验（indirecthaemagglutinationtest，IHA）：粪检血吸虫虫卵阳性者与IHA阳性符合率为92.3%～100%，正常人假阳性率在2％左右，与肺吸虫、华支睾吸虫、旋毛虫感染者可出现假阳性反应。IHA操作简便，用血量少，判读结果快，目前国内已广泛应用。3）酶联免疫吸附试验（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）：此试验具有较高的敏感性和特异性，并且可反应抗体水平，阳性检出率在95％～100％，假阳性率为2.6％，病人在吡喹酮治疗后半年至一年有50％至70％转为阴性。4）免疫酶染色试验（immunoenzymicstainingtest，IEST）。
杀虫治疗
：以吡喹酮为首选药物。吡喹酮为一广谱抗蠕虫药，治疗血吸虫病疗效卓着。急性血吸虫病患者，吡喹酮治疗后，6～12个月粪便检查阴转率为90%左右，慢性与晚期患者为91%～100%，具体用药方法如下： ①急性血吸虫病：总剂量按120mg/kg计算，分12次、4天服完，体重超过60kg者，仍按60kg计算，应以住院治疗为宜。 ②慢性血吸虫病：一般可采用总剂量60mg/kg，分6次、2天服完，或40mg/kg顿服。个别年老体弱者，总剂量可减至35～40mg/kg，两次分服。 ③慢性血吸虫病：晚期患者多数患夹杂症，药代动力学研究表明慢性与晚期患者服用吡喹酮后，药物吸收慢、排泄差，血药浓度明显增高，并维持较长时间，晚期患者血液浓度更高。因此，药物剂量应适当减少和个体化。一般可按总剂量40mg/kg计，一次服完，或分两次1天服完。服药期间应加强观察，服药前后应暂时停用利尿剂。

④ 血吸虫的致病机理是什么

致病
血吸虫发育的不同阶段，尾蚴、童虫、成虫和虫卵均可对宿主引起不同的损害和复杂的免疫病理反应。由于各期致病因子的不同，宿主受累的组织、器官和机体反应性也有所不同，引起的病变和临床表现亦具有相应的特点和阶段性。根据病因的免疫病理学性质，有人主张将血吸虫病归入免疫性疾病范畴内。据研究，在1973年湖南长沙马王堆出土的汉墓女尸和1975年湖北江陵纪南凤凰山出土的西汉墓男尸中，均发现直肠和肝组织内有典型的日本血吸虫卵，这证实2000多年前，长江流域已有日本血吸虫病的流行
1．尾蚴及童虫所致损害
尾蚴穿过皮肤可引起皮炎，局部出现丘疹和瘙痒，是一种速发型和迟发型变态反应。病理变化为毛细血管扩张充血，伴有出血、水肿，周围有中性粒细胞和单核细胞浸润。实验证明，感染小鼠的血清和淋巴细胞被动转移到正常小鼠，再用尾蚴接种（初次接触尾蚴），也可产生尾蚴性皮炎。说明这种免疫应答在早期是抗体介导的。 童虫在宿主体内移行时，所经过的器官（特别是肺）出现血管炎，毛细血管栓塞、破裂，产生局部细胞浸润和点状出血。当大量童虫在人体移行时，患者可出现发热、咳嗽、痰中带血、嗜酸性粒细胞增多，这可能是局部炎症及虫体代谢产物引起的变态反应。
2．成虫所致损害
成虫一般无明显致病作用，少数可引起轻微的机械性损害，如静脉内膜炎等。可是，它的代谢产物、虫体分泌物、排泄物、虫体外皮层更新脱落的表质膜等，在机体内可形成免疫复合物，对宿主产生损害。
3．虫卵所致的损害
血吸虫病的病变主要由虫卵引起。虫卵主要是沉着在宿主的肝及结肠肠壁等组织，所引起的肉芽肿和纤维化是血吸虫病的主要病变。 肉芽肿形成和发展的病理过程与虫卵的发育有密切关系。虫卵尚未成熟时，其周围的宿主组织无反应或轻微的反应。当虫卵内毛蚴成熟后，其分泌的酶、蛋白质及糖等物质称可溶性虫卵抗原（soluble egg antigen，sea），可诱发肉芽肿反应。sea透过卵壳微孔缓慢释放，致敏t细胞，当再次遇到相同抗原后，刺激致敏的t细胞产生各种淋巴因子。研究结果表明：巨噬细胞吞噬sea，然后将处理过的抗原呈递给辅助性t细胞（th），同时分泌白细胞介素1（il－1），激活th，使产生各种淋巴因子，其中白细胞介素2（il－2）促进t细胞各亚群的增生； γ－干扰素增进巨噬细胞的吞噬功能。除上述释放的淋巴因子外，还有嗜酸性粒细胞刺激素（esp）、成纤维细胞刺激因子（fsf）、巨噬细胞移动抑制因子（mif）等吸引巨噬细胞、嗜酸性粒细胞及成纤维细胞等汇集到虫卵周围，形成肉芽肿，又称虫卵结节。 日本血吸虫产出虫卵常成簇沉积于组织内，所以虫卵肉芽肿的体积大，其细胞成分中，嗜酸性粒细胞数量多，并有浆细胞。肉芽肿常出现中心坏死，称嗜酸性脓肿。在虫卵周围常常可见到抗原抗体复合物反应，称何博礼现象（hoeppli phenomen )。用苏木素伊红染色的肝切片标本中，在虫卵周围有红色放射状物质。日本血吸虫虫卵肉芽肿的形成机制在动物研究的结果表明，是t细胞介导的ⅳ型变态反应。 随着病程发展，卵内毛蚴死亡，其毒素作用逐渐消失，坏死物质被吸收，虫卵破裂或钙化，其周围绕以类上皮细胞、淋巴细胞、异物巨细胞，最后类上皮细胞变为成纤维细胞，并产生胶原纤维，肉芽肿逐渐发生纤维化，形成疤痕组织。 虫卵肉芽肿的形成是宿主对致病因子的一种免疫应答。一方面通过肉芽肿反应将虫卵破坏清除，并能隔离和清除虫卵释放的抗原，减少血液循环中抗原抗体复合物的形成和对机体的损害；另一方面，肉芽肿反应破坏了宿主正常组织，不断生成的虫卵肉芽肿形成相互连接的疤痕，导致干线型肝硬变及肠壁纤维化等一系列病变。 血吸虫虫卵肉芽肿在组织血管内形成，堵塞血管，破坏血管结构，导致组织纤维化，这类病变主要见于虫卵沉积较多的器官，如肝和结肠。在肝内，虫卵肉芽肿位于门脉分支终端，窦前静脉，故肝的结构和功能一般不受影响。在重度感染患者，门脉周围出现广泛的纤维化，肝切面上，围绕在门静脉周围长而白色的纤维束从不同角度插入肝内，称干线型纤维化（pipestem fibrosis），是晚期血吸虫病特征性病变。由于窦前静脉的广泛阻塞，导致门静脉高压，出现肝、脾肿大，侧支循环，腹壁、食管及胃底静脉曲张，以及上消化道出血与腹水等症状，称为肝脾性血吸虫病（hepatosplenic schistosomiasis）。所以日本血吸虫病晚期产生因门脉血流障碍所致的连锁性病理生理变化。
4．循环抗原及免疫复合物
血吸虫寄生在宿主静脉内，童虫、成虫和虫卵的代谢产物、分泌物和排泄物，以及虫体表皮更新的脱落物排入到血液中，并随血液循环至各组织，成为循环抗原。在血吸虫感染宿主血内可检出主要的循环抗原有：肠相关抗原（associated antigens，gaa）、表膜相关抗原（membrane associated antigens，maa）和可溶性虫卵抗原（soluble egg antigens，sea）。迄今，研究得最多的是肠相关抗原。血吸虫gaa的两个主要成分，即循环阳极抗原（circulating anodie antigens，caa），为肠相关血吸虫蛋白多糖抗原和循环阴极抗原（circulating anodie antigens，caa ），为不均一的糖蛋白抗原。应用间接荧光抗体技术证明，caa和cca均来源于成虫肠道衬细胞，随虫体吐出物排到宿主血流中。宿主对这些循环抗原产生相应的抗体，抗原抗体结合，形成免疫复合物。通常免疫复合物可被单核细胞或巨噬细胞吞噬、清除。当免疫复合物形成过多，或不能被有效清除时，则可在组织（血管、关节等）内沉积，引起损伤组织的炎症反应。即 ⅲ型变态反应。 免疫复合物沉积血管内可激活补体，补体中的c3a和c5a具有促使肥大细胞和嗜碱性粒细胞释放组织胺等血管活性物质的作用，以致血管通诱性增加。另外，c5a的化学趋向性作用，可吸引中性粒细胞集聚于复合物沉积的血管，中性粒细胞吞噬复合物，并释放蛋白溶解酶，损伤包括血管在内的局部组织。血吸虫病人合并肾损害时，常出现蛋白尿，水肿及肾功能减退。实验研究认为血吸虫病的肾小球病变与免疫复合物的沉积有关。
5．临床表现
根据患者的感染度、免疫状态、营养状况、治疗是否及时等因素不同而异。日本血吸虫病可分为急性、慢性和晚期三期。当尾蚴侵入皮肤后，部分患者局部出现丘疹或荨麻疹，称尾蚴性皮炎。当雌虫开始大量产卵时，少数患者出现以发热为主的急性变态反应性症状，常在接触疫水后1～2月出现，除发热外，伴有腹痛、腹泻、肝脾肿大及嗜酸性粒细胞增多，粪便检查血吸虫卵或毛蚴孵化结果阳性，称急性血吸虫病。然后病情逐步转向慢性期，在流行区，90％的血吸虫病人为慢性血吸虫病，此时，多数患者无明显症状和不适，也可能不定期处于亚临床状态，表现腹泻、粪中带有粘液及脓血、肝脾肿大、贫血和消瘦等。一般在感染后5年左右，部分重感染患者开始发生晚期病变。根据主要临床表现，晚期血吸虫病可分为巨脾、腹水及侏儒三型。一个病人可兼有两种或两种以上表现。在临床上常见是以肝脾肿大、腹水、门脉高压，以及因侧支循环形成所致的食管下端及胃底静脉曲张为主的综合征。晚期病人可并发上消化道出血，肝性昏迷等严重症状而致死。儿童和青少年如感染严重，使垂体前叶功能减退，及其他因素可影响生长发育和生殖而致侏儒症。因肝纤维化病变在晚期常是不可逆的，并且对治疗反应甚差，从而导致临床上难治的晚期血吸虫病。
6．异位寄生与异位损害
日本血吸虫成虫在门脉系统以外的静脉内寄生称异位寄生，而见于门脉系统以外的器官或组织的血吸虫虫卵肉芽肿则称异位损害（ectopic lesion）或异位血吸虫病。人体常见的异位损害在脑和肺。血吸虫卵进入脑和脊髓产生异位损害，可致严重的神经系统并发症；经侧支循环进入肺的虫卵可引起肺动脉炎，甚至肺源性心脏病；罕见的异位损害可见于皮肤、甲状腺、心包、肾等处。 异位寄生与损害多发生在大量尾蚴感染的急性期，而慢性期及晚期患者也可出现。经动物试验结果初步分析，急性血吸虫病患者合并脑或肺的异位损害可能由于感染大量尾蚴，虫数过多，发生异位寄生和损害。晚期因肝纤维化，发生侧支循环，门腔系统吻合支扩大，肠系膜静脉的虫卵可被血流带到肺、脑或其他组织引起病变。

⑤ 如何运用幼虫巨大致死基因对血吸虫病的控制

科学家确定一种可能成为治疗血吸虫病新方法的化合物。

来自美国伊利诺斯州立大学和美国国立卫生研究院的科学家，通过高通量药物筛选的方法确定了一种能有效对付血吸虫酶TGR的化合物。这是一种比标准方法能更准确地在巨大化学物库里进行化合物分性的筛选办法。有关研究成果于3月16日在线发表于《自然—医学》（Nature Medicine）上。

科学家将化合物直接对TGR酶、带有血吸虫病的蠕虫及感染曼氏血吸虫的老鼠身上进行实验。实验表明，该化合物能最有效地杀死处于各个不同阶段的血吸虫，同时能有效应对人类感染的三种主要血吸虫病。

目前，血吸虫病的治疗主要依靠吡喹酮（PZQ）药物。

“由于吡喹酮非常廉价，同时也非常有效，这让研制新的、能与之媲美的药物面临巨大的挑战。”来自伊利诺斯州立大学生物学教授、论文作者之一David Williams说。

然而，Williams说，“在血吸虫病治疗上，对吡喹酮的广泛依赖将会加速抗药性寄生虫的出现，”这使得研发应对该寄生虫的药物变得更加有必要。

中国疾病预防控制中心寄生虫病防预控制所的肖树华教授对此项研究表示欢迎。他指出，“吡喹酮虽然是一个好药，但其不足处是它仅对血吸虫成虫有效，对血吸虫童虫则无效。因此，血吸虫病患者经吡喹酮治愈后，经过一个传播季节，接触疫水感染尾蚴后仍可重新感染。故重复感染是吡喹酮应用中的一个问题。”

如果将具有不同药理的新化合物与吡喹酮结合使用，那么将能更有效地防治血吸虫病，并且可以防止抗药性寄生虫的产生。

⑥ 谁知道用于检测血吸虫的dipstick法又叫什么方法

三．“试纸条”法（dipsticktest）

美国Illinois大学的YiLu研究组，研制出一种以金纳米粒子为信号指示剂，使用像“试纸条”一样方便的分析检测方法[6]。该方法的主要原理是，分散的金纳米粒子可以随溶液的毛细作用在试纸上迁移，而聚集的金纳米粒子由于质量、体积太大几乎不能迁移（如图2所示）。他们合成了适配子功能化的金纳米粒子聚集体。适配子前面简单介绍过，是一种能特异性结合目标分子的单链DNA片段。在这里适配子修饰的金纳米粒子是通过与适配子互补的DNA链进行“耦联”聚集在一起，被滴加在试纸条的底端。将试纸条底端浸泡于含有待检测物分子的溶液中约20秒，此时试纸条底端充分吸收了溶液，溶液通过毛细作用沿试纸条迁移。溶液中待检测物分子遇到金纳米粒子聚集体，会与其表面修饰的适配子结合，而使互补的DNA链脱离，导致金纳米粒子聚集体分散。此时，分散开的金纳米粒子便可以随溶液向试纸条另一端迁移。溶液中待检测物分子越多，金纳米粒子聚集体解离越多，能够迁移到试纸条另一端的金纳米粒子也就越多。如果溶液中没有待检测物分子，金纳米粒子聚集体不会解离，也就不能随着溶液迁移到试纸条另一端。

因此，根据迁移到试纸条另一端金纳米粒子的量，可以定量检测出待检测物分子的浓度。只要预先生产出“试纸条”，使用时几乎不用任何复杂操作，仅仅浸泡在溶液中几十秒取出，在几分钟内即可得到检测结果。而这种方法整合了“结合－分离－检测”步骤（binding，separationanddetection），在白色试纸条上很容易辨别出信号，完全没有背景干扰，灵敏度也较溶液相中比色法有了很大提高。这种利用金纳米粒子作为信号指示剂的“试纸条”法可以扩展到很多物质的检测，只要构建适当体系，使金纳米粒子在检测前后发生聚集和分散。