1. 快速分辨活细胞和死细胞的技巧是什么谢谢
死活细胞的鉴定方法有很多种，常用的有染色法和仪器分析法。染色法是常用的细胞死活鉴定方法，简便，易于操作。但是通过直接的形态观察来鉴别细胞死活，实验结果很容易受操作者的主观因素的影响，存在一定的误差，所以，在实际操作中也常采用一些仪器来进行精确的批量检测。不同的死活细胞鉴定方法有各自不同具体的反应机理，但无论采用何种办法，都是利用了死活细胞在生理机能和性质上的差异。常用的方法包括染色法和仪器分析法。死活细胞在生理机能和性质上的差异主要包括：死活细胞细胞膜通透性的差异：活细胞的细胞膜是一种选择透性膜，对细胞起保护和屏障作用，只允许物质选择性的通过；而细胞死亡之后，细胞膜受损，通透性增加。常用的以台盼蓝鉴别细胞死活的方法就是利用了这一性质。台盼蓝，又称锥蓝，是一种阴离子型染料，不能透过完整的细胞膜。所以经台盼蓝染色后只能使死细胞着色，而活细胞不被着色。甲基蓝有类似的染色机理。死活细胞在代谢上的差异：是采用美蓝染料鉴定酵母细胞死活的依据。美蓝是一种无毒染料，氧化型为蓝色，还原型为无色。由于活细胞中新陈代谢的作用，使细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝从蓝色的氧化性变为无色的还原型，因此美蓝染色后活的酵母细胞无色；而死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们的无还原能力或还原能力极弱，使美蓝处于氧化态，从而被染成蓝色或淡蓝色。中性红是一种低毒性染料，为常用的活体染料之一，可以使活细胞液泡着红色，而细胞质和细胞核不被着色；死细胞的液泡不被着色或浅染，染料弥散于整个细胞中，细胞核和细胞质被染成红色。中性红是一种弱碱性 pH 指示剂，变色范围 pH6.4～8.0 之间（由红变黄）。在中性或微碱性环境中，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌，由于液泡在一般情况下呈酸性反应，因此，进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色，在这种情况下，原生质和细胞壁一般不着色；死细胞由于原生质变性凝固，细胞液不能维持在液泡内，因此，用中性红染色后，不产生液泡着色现象，相反，中性红的阳离子，却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合，而使原生质与细胞核染色。
用PI（碘化丙啶）染一下，然后用荧光显微镜检测（UV通道），如果细胞被PI染上，则说明细胞膜不完整，原理是PI是一种核酸结合染料，在UV激发下发射红色荧光，PI不能透过正常的完整细胞膜，当细胞膜破损时，PI进入胞浆继而与核DNA结合，继而可以被UV激发被检测到，所以PI是一种快速有效检测细胞膜完整性的方法
3. 请教检测细胞膜完整性的方法
流式分选细胞前标本的处理以及注意事项
流式检测的是单个细胞，所以你的样本要是单个细胞悬液。如果是来源于组织或者贴壁培养的，需要注意在分离细胞时避免破坏细胞。保持细胞膜表面的完整性。不要过度消化。
还有你处理的细胞要保持你所需要检测的本来面目。比如检测凋亡，贴壁细胞不宜用annexin方法，因为会导致大量的假阳性。还有，死细胞会非特异性吸附抗体，导致假阳性也要尽量减少死细胞，或者使用死细胞染料以排除在分析之外。