测胆固醇一般用什么方法

1. 血清胆固醇试验(mmol/l)采取什么医学检验方法

用无水乙醇提取血清中的胆固醇，同时沉淀蛋白质，向提取液中加入硫磷铁显色剂，胆固醇与浓硫酸及三价铁作用，生成稳定的紫红色化合物。与同样处理的标准样进行比色，求得其含量。

2. 血清总胆固醇测定用什么实验方法

总胆固醇的测定方法目前已超过200种，可分为化学试剂比色法、酶分析法、荧光法、气相和高效液相色谱法等五大类。由于气相和高效液相色谱法条件高，临床实验室最常用的是化学试剂法和酶法。 化学试剂法一般包括抽提、皂化、纯化、显色比色四个阶段。化学法测定总胆固醇的比色原理主要分三类：①与醋酐-硫酸试剂产生蓝绿色。胆固醇酯和胆固醇在与醋酐-硫酸反应时呈色深浅不同，因此用这种方法测定结果偏高。②与高铁-硫酸试剂产生紫红色。高铁-硫酸比色法灵敏度高，显色稳定，测定精密度好，是临床检验胆固醇推荐方法。但干扰因素多。③胆固醇与邻苯二甲醛-硫酸试剂产生稳定的紫红色。邻苯二甲醛-硫酸比色法不需要对胆固醇进行抽提而直接进行测定。 生物帮上面有这方面的详细介绍， http://www.bio.com/ 生物问答

3. 鸡蛋蛋黄中胆固醇怎么测定 需要具体步骤 。

我在网上只是看到这么多。不知对你有没有帮助了。 近年来，随着人们生活水平的不断提高，人们对膳食组成中胆固醇的含量越来越引起重视。胆固醇可在胆道中沉积形成胆石，在血管中的沉积是动脉粥样硬化的重要原因之一。鉴于胆固醇对人体的影响，人们不断地采取各种各样的措施来减少食物中的胆固醇含量，这就要求分析工作者建立一种快速、简便而又重现性好的测定胆固醇的方法。鸡蛋是自然界中营养最为丰富的食品之一，但是蛋黄中的高胆固醇也引起人们的高度关注。目前胆固醇的测定一般都要求萃取总脂质、移去溶剂、在碱性介质中热皂化、萃取出非皂化物质、洗涤及浓缩等 ［1，2］ ，这些步骤费时、费力又费材料，并因其繁琐的操作预处理，大大增加了实验结果的可变性，本文采用2.0mol/L的KOH-乙醇溶液直接皂化，石油醚萃取，以乙腈-甲醇-异丙醇（10∶80∶10）作流动相、C 18 反相色谱柱分离，UV208nm检测，高效液相色谱法测定，简化了操作步骤，降低了操作强度，减少了试剂使用，并且大大节约了分析时间，整个分析过程仅需1.5h。本方法用于实际样品的测定，结果满意。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 Agilent1100高效液相色谱仪，紫外检测器G1314A，Agilent1100化学工作站，甲醇、乙腈、异丙醇（均为HPLC级），胆固醇（进口分装），石油醚（重蒸馏，30℃～60℃），无水乙醇、氢氧化钾、氯化钠（均为AR）。胆固醇标准溶液（1.0mg/ml）:准确称取胆固醇100mg于100ml容量瓶中，用少量甲醇溶解后，用甲醇稀至刻度。 1.2 色谱条件 分析柱为μBondapak C 18TM （30cm×3.9mm），流动相为乙腈-甲醇-异丙醇（10∶80∶10），流速为1.0ml/min，柱温为30℃，紫外检测波长208nm。 1.3 样品处理及测定 准确称取充分混匀的鸡蛋约0.20g于50ml具塞比色管中，加入2.0mol/L的KOH-乙醇液5.0ml，振荡混匀，置65℃水浴中皂化30min（每隔5min振摇1次）后取出，经流水冷却，加入饱和氯化钠溶液2.0ml后再加入石油醚20.0ml，旋涡混匀后离心分离，吸取上清液10.0ml于10ml刻度比色管中，通氮气吹干，再用1.0ml甲醇溶解残渣，过0.45μm滤膜后，吸取10.0μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件进行测定，外标法定量。 1.4 标准曲线绘制 用胆固醇标准贮备液配成0.050、0.010、0.200、0.400、0.600mg/ml的胆固醇标准使用液，分别取10.0μl进行色谱测定，以峰面积（A）为纵坐标，胆固醇浓度为横坐标（C，mg/ml）绘制标准曲线，得线性方程为A=556.13C+8.003，r=0.9993。 2 结果与讨论 2.1 皂化条件试验与萃取条件的选择 见马建明等报道 ［3］。 2.2 分析波长的选择 选择较高灵敏度的检测波长可以提高分析数据的精密度，同时也可以降低检出限。笔者对以流动相为溶剂的胆固醇标准液进行了扫描，结果发现胆固醇在205nm处具有最大吸收峰，考虑到紫外区的影响，本方法选用208nm为检测波长。 2.3 流动相的选择 本文试验了甲醇-水（95∶5） ［4］ 、乙腈-异丙醇（4∶1） ［5］ 及乙腈-甲醇-异丙醇（10∶80∶10，V/V） ［6］ 进行分离，结果发现使用甲醇-水（95∶5，V/V）进行分离，鸡蛋中有些杂质依然干扰测定，如果使用乙腈-异丙醇（4∶1）进行分离，胆固醇的保留时间过长，采用乙腈-甲醇-异丙醇（10∶80∶10，V/V）进行分离，干扰少，分离速度快，重复性、精密度好，色谱图见图1。本文选用乙腈-甲醇-异丙醇（10∶8.0∶10，V/V）为流动相。时间为7.806min 图1 样品色谱图 2.4 线性范围及方法的最低检出限 按分析步骤配制一系列胆固醇的标准溶液，在本实验条件下，胆固醇浓度从0～1.0mg/ml范围，标准曲线呈良好的线性关系。最低检出限为0.005mg/ml，若取样1.0g，鸡蛋中胆固醇的最低检出浓度为0.5mg/100g。 2.5 准确度与精密度试验 在0.20g鸡蛋样品中分别加入0.15、0.30、0.45mg的胆固醇标准，与样品处理方法相同操作，测得的回收率见表1。由表1可知，本方法的测定结果是可靠的，其平均回收率为92.1%，不同浓度的测定结果的相对标准偏差均小于5%。 表1 准确度试验 （略） 2.6 鸡蛋测定 对从市场上采购的10份不同产地的鸡蛋样品用本法进行了测定，结果胆固醇含量分别在（180～545）mg/100g之间。 参考文献
希望采纳

4. 食品中胆固醇如何测定

食物中胆固醇的测定方法主要有气相色谱法和比色法。色谱法必须具备气相色谱仪，此仪器价格昂贵，故在国内不易普及，因此选用经济、简便、实用的比色法进行食物中胆固醇的测定。

比色法

1.原理
固醇类化合物与酸试剂作用，可脱水，发生聚合反应并产生强的颜色反应。

2.适用范围
此方法适用于动物性食物中胆固醇的测定。

3.仪器
（1）实验室常用设备
（2）分光光度计
（3）电热恒温水浴

4.试剂
所有试剂，如未注明规格，均指分析纯，所有实验用水，均为蒸馏水。
（1）石油醚
（2）无水乙醇
（3）浓硫酸
（4）冰乙酸(优级纯）
（5）磷酸
（6）胆固醇标准（美国Sigma公司）
标准储备液：准确称取胆固醇100mg，（胆固醇标准开启后放在干燥器内）溶于冰乙酸中，并定溶至100ml。其浓度为1g/L。可保存2个月。
标准工作液：取标准储备液10ml，用冰乙酸定溶至100ml。其浓度为0.1g/L。此液用时临时配制。
（7）铁矾显色液：
储备液：溶解4.463克硫酸铁铵〔FeNH4（SO4）2·12H2O〕于100ml 85%磷酸中贮于干燥器内，此溶液在室温中稳定。
* 铁矾储备液须在实验前两周配制，因硫酸铁铵不易溶解，每天要进行短时间的振摇待溶质完全溶于磷酸后再定溶到体积。
工作液：吸取储备液10ml用浓硫酸稀释到100ml。贮于干燥器内。
（8）氢氧化钾50%溶液：溶解50g氢氧化钾于水中，定溶至100ml。
（9）氯化钠5%溶液：溶解5克氯化钠于水中，定溶至100ml。
（10）纯氮（99.99%）

5.操作步骤

5.1样品脂肪的提取与测定：根据食物种类分别用索氏提取法、研磨法和罗高氏法提取脂肪，并计算出每100克食物中脂肪含量。

5.2样品胆固醇的测定：准确称取提取的油脂3-4滴（约含胆固醇300-500μg） 取样量可按样品中胆固醇的浓度增减。置于25ml试管内，加入4ml无水乙醇，0.5ml50%氢氧化钾，在65℃恒温水浴中皂化1小时。皂化时每隔20-30分钟振摇一次使皂化完全。皂化完毕，取出试管，冷却。加入3ml 5%氯化钠、10ml石油醚，盖紧玻璃塞，振摇2分钟，静置分层（一般需1小时以上）。

取上层石油醚2ml，置于10ml具玻璃塞的试管内，在65℃恒温水浴中用氮气吹干，加入4ml冰乙酸，2ml铁矾显色液，混匀，放置15分钟后560-575nm下比色。
5.3标准曲线：准确吸取胆固醇工作液0；0.5；1.0；1.5；2.0ml分别置于10ml试管内，在各管内加入冰乙酸，使总体积达4ml。沿管壁加2ml铁矾显色液，混匀，在15-90分钟内，560-575nm下比色。

6.分析结果
样品中胆固醇含量（mg/100g）=C×V/V'×1/W×F/1000
式中
C=测得的光密度值在胆固醇标准曲线上显示的胆固醇量（μg）
V=石油醚总体积（ml）
V'=取出的石油醚体积（ml）
W=称取油脂重量（g）
F=样品的脂肪含量（g/100g）
1/1000=折算成每100克食物中胆固醇的毫克数。

7.注意事项
同一实验室同时或连续两次测定结果之差不得超过平均值的10%。

5. 测定血清胆固醇的决定性方法是

正确答案:A
解析：考查胆固醇的测定方法，测定血清胆固醇的决定性方法是ID-MS法
。

6. 总胆固醇的计算方法

公式的具体内容为：低密度脂蛋白胆固醇（mg/dl）=总胆固醇-高密度脂蛋白胆固醇-甘油三酯/5，其中“甘油三酯/5”指的是极低密度脂蛋白胆固醇的含量。

由于直接测量低密度脂蛋白胆固醇的含量的成本过高，而总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯这三者的检测更为经济实惠、简便可行，所以该公式是根据总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯的水平推算低密度脂蛋白胆固醇的水平，其中默认甘油三酯和极低密度脂蛋白胆固醇的比例固定为5:1。

但临床实践证实，该方法在低密度脂蛋白胆固醇水平较低或是甘油三酯水平较高时容易产生较大误差，检测结果不够准确，常常低于真实水平。并且由于进食会影响极低密度脂蛋白胆固醇的代谢过程，代谢相关的酶的活性会发生变化，因此为了提高结果的准确性，要根据Friedewald公式法估算低密度脂蛋白胆固醇水平应要求在患者在空腹的情况下抽血。

(6)测胆固醇一般用什么方法扩展阅读：

总胆固醇的测定在常规的检查中主要是以生化检查为主，生化检查内部包括血脂的测定，也包括总胆固醇的测定，建议患者可以在清晨空腹的状态下体检，一般是抽静脉血来检查就可以了。

胆固醇的正常指数是在3.5至6.1mmol/l之间，最为完美的指数是5.2mmol/l左右，甘油三酯则是最好在1.7mmol/l左右。如果是检查发现体内总胆固醇水平升高了，要建议在生活中尽可能地减少胆固醇含量高的食物的摄入，比如说鸡蛋黄，动物内脏等等。

7. 测胆固醇的实验题1.举例说明胆固醇测定的其它方法。 2.实验中样品皂化的作用是什么

一、胆固醇测定的方法包括：直接皂化比色法、氧化酶法、气相色谱法、高效液相色谱法。本实验使用的是直接皂化比色法。
1.直接皂化比色法：当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。因此可先对食品样品进行皂化和提取，用硫磷铁试剂作为显色剂，测定食品中胆固醇的含量。步骤：①抽提；②皂化；③毛地黄皂苷沉淀纯化；④显色比色四个阶段。
2.氧化酶法：血清中的胆固醇酯(CE)被胆固醇酯水解酶(CEH)水解成游离胆固醇(Chol)，后者被胆固醇氧化酶(CHOD)氧化成△4—胆甾烯酮，并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化4—氨基安替比林与酚(三者合称PAP)，生成红色醌亚胺色素(Trinder反应)。醌亚胺的最大吸收在500nm左右，吸光度与标本中总胆固醇呈正比。步骤：在样品的冰乙酸提取液中加磷硫铁试剂，胆固醇与试剂反应产生紫红色化合物，颜色的深浅与胆固醇的量成正比，可用分光光度计在波长560nm•处测定。
 3.气相色谱法：取样时，由于气相色谱仪进样少，应严格控制样品质量。由于内标物5-α-胆甾烷不被皂化，可先加入与样品混匀。利用皂化反应RCOOR′+NaOH→RCOONa+ROH的原理，使样品中的主要成分油脂通过遇苛性碱水解成用来制造肥皂脂肪酸钠或钾和甘油，而非皂化物胆固醇和内标物仍稳定存在。利用皂化的水解产物（脂肪酸钠或钾和甘油）易溶于水而胆固醇和内标物不溶于水的特点进行萃取，得到溶有胆固醇和内标物的石油醚溶液。弃去的的水相经两次石油醚提取后基本回收残留在水相中的胆固醇和内标物。得到的石油醚溶液进行吹干后可取1μL进行气相色谱法检测。
4.高效液相色谱法：提要样品中胆甾醇用适当有机溶剂提取，得到胆甾醇和脂类物质的混合物，经皂化后除去脂类干扰物，再用适当的有机溶剂提取胆甾醇，以高效液相色谱仪测定 。
二、实验中样品皂化的作用是：
利用皂化反应RCOOR′+NaOH→RCOONa+ROH的原理，使样品中的主要成分油脂通过遇苛性碱水解成用来制造肥皂脂肪酸钠或钾和甘油，而非皂化物胆固醇和内标物仍稳定存在。利用皂化的水解产物（脂肪酸钠或钾和甘油）易溶于水而胆固醇和内标物不溶于水的特点进行萃取，从而去除其他脂类干扰物，减少干扰，提高测试精度。

8. 胆固醇测定及游离胆固醇测定方法

（一）胆固醇概况

1.存在形式：血浆胆固醇包括胆固醇酯和游离胆固醇两种，前者约占70%，后者占30%。

2.来源：食物、体内合成。（提供内源性胆固醇的90%）

肝脏是合成胆固醇的主要器官，合成的原料是乙酰CoA,合成的关键酶是HMGCoA还原酶，临床治疗所用的他汀类药物主要是抑制该关键酶。

血浆和组织中所含胆固醇经常处于交换状态，其交换率因不同组织而异，由于医学.育网收集整理胆固醇不断进、出血液，所以血浆胆固醇不仅反映胆固醇摄取与合成的情况，还反映携带胆固醇的各种脂蛋白的合成速度，以及影响脂蛋白代谢的受体的情况。

血浆胆固醇主要存在LDL中，其次为HDL和VLDL，CM中含量最少。

3.主要功能：

①是所有细胞膜和亚细胞器膜上的重要组成成分；

②是胆汁酸的唯一前体；

③是所有类固醇激素（性激素、肾上腺皮质激素）的前体等。

④是维生素D合成的前体。

（二）检测

1.方法：

化学法曾于很长一段时间用于常规检查，医学.育网收集整理一般包括：①抽提；②皂化；②毛地黄皂苷沉淀纯化；④显色比色四个阶段。其操作复杂，干扰因素多，现多已不用，代表性的方法是省去③步骤的Abell-Kendall法，现作为标准参考方法予以利用。现临床应用胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶及过氧化物酶的方法，快速准确，标本用量小，可完全在自动生化分析仪上操做，适于大批量标本的检查。

胆固醇酯首先在胆固醇酯酶的催化下水解成游离胆固醇，胆固醇在胆固醇氧化酶的催化下生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的催化下以Trinder反应显色测定。

2.参考值：

TC水平因生活条件（饮食、运动等）而异，随年龄上升。

中青年男性略高于女性，老年女性高于男性。

我国血脂异常防治建议：

以≤5.17mmol／L（200mg／dl）为合适水平；

5.20～5.66mmol／L（201mg／dl～219mg／dl）为临界范围（或边缘升高）；

≥5.69mmol／L（220mg／dl）为升高。

（三）临床意义：

1.胆固醇升高：

胆固醇是动脉粥样硬化的重要危险因素之一。

胆固醇升高容易引起动脉粥样硬化性心、脑血管疾病如冠心病、心肌梗死，脑卒中等。

胆固醇为一个诊断指标来说，它既不够特异，也不够敏感，所以不能作为诊断指标，只能作为评价动脉粥样硬化的危险因素，而最常用做动脉粥样硬化的预防、发病估计、治疗观察等的参考指标。

胆固醇升高可见于各种高脂蛋白血症、梗阻性黄疸、肾病综合征、甲状腺功能低下、慢性肾功能衰竭、糖尿病等时。

此外，吸烟、饮酒、紧张、血液浓缩等也都可使血液胆固醇升高。

妊娠末三个月时，可能明显升高，产后恢复原有水平。

2.胆固醇降低：

可见于各种脂蛋白缺陷状态、肝硬化、恶性肿瘤、营养吸收不良、巨细胞性贫血等。

女性月经期也可降低。

9. 从蛋黄中提取胆固醇有哪几种方法

胆固醇的
1 主题内容与适用范围
本标准规定了用分光光度计测定各类动物性食品中胆固醇的方法。
本标准适用于各类动物性食品中胆固醇的测定。
2 原理
当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚合反应，产生颜色物质。 因此可先
对食品样品进行提取和皂化，用硫酸铁铵试剂作为显色剂，测定食品胆固醇的含量。
3 试剂
全部试剂除注明外均为分析纯，试验用水为蒸馏水。
3.1 石油醚。
3.2 无水乙醇。

10. chodpap法是什么方法

chodpap法是血清总胆固醇测定方法。

胆固醇氧化酶法chodpap法已由中华医学会检验分会推荐为常规测定方法。chodpap法的测量原理是血清中的胆固醇约1/3为游离胆固醇，2/3为与脂肪酸结合的胆固醇酯。胆固醇酯被胆固醇酯水解酶水解成游离胆固醇，后者被胆固醇氧化酶氧化成胆甾烯酮并产生过氧化氢，再经过氧化物酶催化，使4-氨基安替比林与酚反应，生成红色醌亚胺色素。

chodpap法的注意事项：

用血量：指测量血脂所用的血量，一般在15微升左右，用血多少会影响病人的痛感，另外血也是很珍贵的。但是血量是保证检测准确的重要因素。

测量时间：从发生反应到得出结果所用的时间，一般在1min之间，测量快慢会影响检测的效率。

测量范围：胆固醇2.59-10.3mmol/L，甘油三酯：0.57-5.65 mmol/L。

血高密度胆固醇：0.65-2.20 mmol/L。

以上内容参考网络-血脂仪