rna加a尾是通过什么方法

❶ mRNA到成熟mRNA经过的加工是什么

RNA加工是指在原初RNA产物中删除一些核苷酸，添加一些基因没有编码的核苷酸并修饰的步骤，是转录产物转换成成熟RNA分子的过程。

将一个RNA原初的，加工包括从原初产物中删除一些核苷酸，添加一些基因没有编码的核苷酸和对那些碱基进行共价修饰。许多RNA都需要经过加工才能成为有功能的成熟的RNA分子。

不管在原核还是真核生物中，核糖体RNA基因和转运RNA基因转录后形成的初级转录产物都要经过转录加工才能释放出成熟的rRNA及tRNA分子。信使RNA的加工过程在原核生物中较少加工，甚至在转录的同时就可进行翻译过程，但真核的信使RNA的加工过程则非常复杂。

(1)rna加a尾是通过什么方法扩展阅读

真核细胞的rRNA基因属于一种被称为丰富基因族的DNA的序列，即染色体上一些相似或完全一样的纵列串联基因单位的重复。由不能转录的间隔区把这些单位分隔开。在这里，间隔区与内含子是不同的概念。在分类上，rDNA这种类型的序列被称为高度重复序列DNA。

在不同的种属生物中，rDNA的大小不一，重复单位由数百个至数千个以上。每个重复单位的可转录段从7kb至13kb不等，间隔区为数千bp。虽然有间隔区与重复单位的大小不同，但是真核生物最后转录出来的rRNA大小相同。

❷ mRNA前体的加工过程有哪些步骤

mRNA前体的加工过程有哪些步骤：
原核生物转录作用生成的mRNA属于多顺反子mRNA，即由操纵子机制控制生成的一条mRNA可编码几种不同的蛋白质。原核生物转录生成的初级转录本mRNA不需经过复杂的加工过程即可表现功能，惟一的加工过程是多顺反子mRNA在RnaseⅢ的催化下裂解为单个的顺反子。
真核生物转录生成的是单顺反子mRNA，其前体是非均一RNA(hnRNA)。hnRNA加工过程包括。

剪接
真核生物的基因是一种断裂基因，即其结构基因由若干编码序列和非编码序相间排列而成，其中为蛋白质编码的可转录序列称为外显子，不为蛋白质编码的可转录序列为内含子。转录合成的hnRNA需经过剪接、切掉内含子部分，然后再将外显子部分拼接起来。该过程有多种酶活性物质(包括snRNA)参与。
′末端加“帽”
真核细胞成熟mRNA的5′末端均有一个特殊的结构，即m7Gpp-pmnNp，称为“帽”。帽的生成是在细胞核内进行的，但胞浆中也有酶体系，动物病毒mRNA加帽过程就是在宿主细胞的胞浆内进行的。
′末端加“尾”
mRNA前体分子的3′末端有一段保守序列，由特异的核酸内切酶切去多余的核苷酸，然后在多聚A聚合酶的催化下，由ATP聚合生成多聚A尾。该反应在核内发生，在胞浆中也可继续进行。
碱基修饰
mRNA分子中有少量稀有碱基(如甲基化碱基)是在转录后经化学修饰(如甲基化)而形成的。
选择性加工
某些MRNA前体含有多个3‘剪切位点和多聚腺苷酸化位点，因此利用这些选择性位点可产生具有不同3'端非编码区或者具有不同编码能力的RNA产物。通过可变剪接途径可以挑先最保留在MRNA中的外显子，结果单个基因可以合成多种不同的蛋白质。
RNA编辑
在合成并经RNA编辑加工之后，MRNA分子的序列可以发生改变。个别核苷酸可以被置换，添加或者删除。编辑过的MRNA翻译产生了较短脱脂基蛋白B48，由于基缺少一个结合受体的蛋白结构域，因此功能受限。还有好多其他编辑的例子，阵锥虫线粒体MRNA发生RNA编辑，使得最终MRNA中一半以上的尿嘧啶都获自编辑过程。

❸ 有人做过用polya聚合酶给RNA加尾的反应么

你可以使用E.coli Poly(A)聚合酶进行加尾。加尾的protocol如下：
RNA 0.1umol
10XBuffer 2ul
10mM ATP 2ul
E.coli Poly(A) polymerase 10units
ddH2O to 20ul
37℃反应10min即可。
NEB的 E.coli Poly(A)聚合酶含有酶，Buffer和ATP，你可以放心使用。

❹ MicroRNA加A尾的反转录方法效果如何

加A尾反转的方法可以将所有的MicroRNA反转，但其后续的qPCR的假阳性会较高。茎环法反转录可以有效避免假阳性，但由于可能的空间位阻问题，一般推荐U6和一种茎环反转录引物同时反转录，如果是验证较多miRNA时需要较多的RNA（麒盟）。

❺ mRNA的多聚A尾是怎样形成的

真核生物的mRNA一般都会在其3’末端带上一段polyA的尾巴，而原核生物则一般没有(不绝对)。真核生物的mRNA刚在细胞核内合成的时候叫做hnRNA，其后还有一系列的成熟过程，包括5‘端的加帽、3’端加尾、内含子剪切、拼接等步骤，最终成为成熟的mRNA转到细胞核外。这一系列的过程都是由一大堆特定的酶来催化完成的。
http://ke..com/link?url=rU3VvoBt1g-Of-FCOw32V7DkuvsqHktVEFomU8_7TvoIyHVM3hmv-

❻ mRNA到成熟mRNA经过的加工是什么

首先，你这里指的RNA应该是真核生物的mRNA，因为原核生物的mRNA不需要这些加工。
步骤是剪切除去内含子，5’端加帽，3’加ployA尾巴。
场所是在细胞核内。
剪切除去内含子的原因是，可以通过不同的剪切方式表达出不同的蛋白，增加了表达蛋白的种类，意义重大。
5’端加帽的原因之一是保护mRNA分子不受降解，原因之二帽是出核的信号。
3’加ployA尾巴的原因是保护mRNA分子不受降解，增加其半衰期。

❼ 平末端DNA加A尾的一些问题~高手请进~(*^__^*)

1 一般不需要，你可以比对你用的高保真酶的buffer和Taq酶的buffer，要加也只能加差异的部分，如果直接加buffer里面离子浓度肯定都不对了；
2 都可以，不过我觉得还是应该在充分延伸后暂停或重新换程序；
3 TA克隆成功说明加A成功；如果要做阳性对照就用Taq酶直接PCR一管；
4 一定要纯化，不然里面全是A，你得到的就大部分是假阳性！