⑴ 分离各种细胞器的方法有哪些
把细胞研磨成浆,注意是在低温下,使酶的活性降低,从而不会使溶酶体中的酶使细胞器分解,同时不损坏酶,然后离心,根据理性的速度不同,析出的物质也不同,速度由高到低,将质量由高到低的细胞结构分离出。
⑵ 运用差速离心法分离细胞器 得到细胞器的顺序是
运用差速离心法分离细胞器,细胞器沉降由上到下的顺序依次为:核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体。
差速离心法是交替使用低速和高速离心,用不同强度的离心力使具有不同质量的物质分级分离的方法,此法适用于混合样品中各沉降系数差别较大组分的分离。
因为细胞内不同的细胞器结构和功能不同,密度也不同,可以用旋转离心的方法利用不同的转速将不同的细胞器沉淀,密度大的在下边,密度小的在上边,由于核糖体的质量最小,所以需要的转速最快,处在离心管最上方。
(2)用什么方法分离出细胞器扩展阅读:
分离细胞器的方法:
一、差速离心法
在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心,用于分离不同大小的细胞和细胞器。由于各种细胞器在大小和密度上相互重叠,而且某些慢沉降颗粒常常被快沉降颗粒裹到沉淀块中,一般重复2~3次效果会好一些。
差速离心只用于分离大小悬殊的细胞,更多用于分离细胞器。通过差速离心可将细胞器初步分离,常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。
二、密度梯度离心法
用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种。密度梯度离心常用的介质为氯化铯,蔗糖和多聚蔗糖。
分离活细胞的介质要求是能产生密度梯度,且密度高时,粘度不高;PH中性或易调为中性;浓度大时渗透压不大;对细胞无毒。
⑶ 分离细胞器的方法是什么
细胞器的分离,一般采用差速离心法,此法是利用细胞各组分质量大小不同,在离心管不同区域沉降的原理,分离出所需组分,分离得到的细胞器,其纯度可采用电子显微镜法、免疫学法或测定标志酶活力法进行鉴定.
⑷ 在科学实验中 分离各种细胞器常用的方法是什么
分离各种细胞器常用的方法是差速离心法。
在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心,用于分离不同大小的细胞和细胞器。
在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为:核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体。
由于各种细胞器在大小和密度上相互重叠,而且某些慢沉降颗粒常常被快沉降颗粒裹到沉淀块中,一般重复2~3次效果会好一些。
差速离心只用于分离大小悬殊的细胞,更多用于分离细胞器。通过差速离心可将细胞器初步分离,常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。
⑸ 如何分离各种各样的细胞器
细胞器的分离主要用到的是离心技术。主要用到:
(一)、差速离心
在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心,用于分离不同大小的细胞和细胞器。
在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为:核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体。
由于各种细胞器在大小和密度上相互重叠,而且某些慢沉降颗粒常常被快沉降颗粒裹到沉淀块中,一般重复2~3次效果会好一些。
差速离心只用于分离大小悬殊的细胞,更多用于分离细胞器。通过差速离心可将细胞器初步分离,常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。
(二)、密度梯度离心
用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种(图2-23)。密度梯度离心常用的介质为氯化铯,蔗糖和多聚蔗糖。分离活细胞的介质要求:1)能产生密度梯度,且密度高时,粘度不高;2)PH中性或易调为中性;3)浓度大时渗透压不大;4)对细胞无毒。
⑹ 分离各种细胞器,常用的方法是()A.健那绿染色B.同位素标记法C.模型方法D.差速离心
A、健那绿染色一般用来染色线粒体,进而观察线粒体的分布情况,A错误;
B、同位素标记法一般用来追踪物质合成的转移途径,B错误;
C、模型方法可以构建不同细胞器的亚显微结构,但是不能分离细胞器,C错误;
D、由于不同细胞器的比重不同,因此一般采用差速离心的方法分离各种细胞器,D正确.
故选:D.
⑺ 科学家是怎样进行研究分离出各种细胞器的呢
细胞器的分离主要用到的是离心技术。主要用到:
(一)、差速离心(differential centrifugation)
在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心,用于分离不同大小的细胞和细胞器。
在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为:核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体。
由于各种细胞器在大小和密度上相互重叠,而且某些慢沉降颗粒常常被快沉降颗粒裹到沉淀块中,一般重复2~3次效果会好一些。
差速离心只用于分离大小悬殊的细胞,更多用于分离细胞器。通过差速离心可将细胞器初步分离,常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。
(二)、密度梯度离心(density gradient centrifugation)
用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种(图2-23)。密度梯度离心常用的介质为氯化铯,蔗糖和多聚蔗糖。分离活细胞的介质要求:1)能产生密度梯度,且密度高时,粘度不高;2)PH中性或易调为中性;3)浓度大时渗透压不大;4)对细胞无毒。
⑻ 分离细胞器的方法高中生物
1、分离细胞器的方法为差速离心或密度梯度离心.
2、
线粒体:结构包括线粒体内膜、外膜(上分布有基粒)、线粒体基质.线粒体内膜和线粒体基质中含有氧.
叶绿体:结构包括叶绿体外被、类囊体和基质3部分组成,外被上分布着光合作用需要的色素,类囊体和基质上有光合作用需要的酶,含有少量的DNA和RNA.
内质网:功能是合成分泌蛋白质.
高尔基体:功能是将内质网合成的蛋白质进行加工、对比分类、与包装,然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外.
溶酶体:内部含有多种酸性水解酶,功能是溶解或消化,为细胞内的消化器官.
液泡:内有细胞液,其中含有糖类、无机盐、色素和蛋白质等物质.
核糖体:成分包括蛋白质和核糖体RNA(rRNA),功能是:核糖体是合成蛋白质的地方.
中心体:分布在动物细胞和某些低等植物细胞,由两个互相垂直的中心粒及周围物质组成,与细胞的有丝分裂有关.
⑼ 要研究细胞内各种细胞器的结构和功能,需要将这些细胞器分离出来。常用的方法是什么
答案是差速离心法
研究细胞内各种细胞器的组成成分和功能,需要将这些细胞器分离出来,常用的方法是差速离心法.差速离心法是将细胞膜破坏后,形成由各种细胞器和细胞中其他物质组成的匀浆;将匀浆放入离心管,用高速离心机在不同的转速下进行离心,利用不同的离心速度所产生的不同离心力,就能将各种细胞器分离开。
ps:密度离心法应用于dna半保留复制验证实验中轻链带(离心管上部),杂合链带(位置居中)和重链带(最靠近离心管底部)在氯化铯溶液中的位置定位.
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⑽ 如何提取细胞中的细胞器
主要有差速离心和密度梯度离心 :一般是先用差速离心初分离,再用密度梯度离心进一步分离。
以下详细:
细胞器的分离
细胞由细胞膜、细胞核和细胞质组成,细胞质中含有若干细胞器和细胞骨架等,这些也称作亚细胞组分。对于细胞的结构和功能的研究,是细胞生物学的基本课题,其重要的研究手段之一是分离纯的亚细胞组分,观察它们的结构或进行生化分析。分离亚细胞组分的方法主要有差速离心和密度梯度离心。
一、差速离心(differentialcentrifugation)
在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心,用于分离不同大小的细胞和细胞器。
速度逐渐提高,样品按大小先后沉淀
在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为:核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体。
由于各种细胞器在大小和密度上相互重叠,而且某些慢沉降颗粒常常被快沉降颗粒裹到沉淀块中,一般重复2~3次效果会好一些。
差速离心只用于分离密度和大小悬殊的细胞,更多用于分离细胞器。对于精细的分离,则是密度梯度离心效果更好。
密度梯度离心(densitygradientcentrifugation)
用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部,通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。
这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种。
A等速度沉降,B等密度沉降
二、密度梯度离心
速度沉降(velocitysedimentation)主要用于分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器。这种沉降方法所采用的介质密度较低,介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最小密度。生物颗粒(细胞或细胞器)在十分平缓的密度梯度介质中按各自的沉降系数以不同的速度沉降而达到分离。
等密度沉降(isopycnicsedimentation)适用于分离密度不等的颗粒。细胞或细胞器在连续梯度的介质中经足够大离心力和足够长时间则沉降或漂浮到与自身密度相等的介质处,并停留在那里达到平衡,从而将不同密度的细胞或细胞器分离。介质的最高密度应大于被分离组分的最大密度,而且介质的梯度要求较高的陡度,不能太平缓。这种方法适于分离细胞器,而不太适于分离和纯化细胞。
叶绿体的分离
实验方法
1.选取新鲜的嫩菠菜叶片,洗净擦干后去除叶梗和粗脉,撕成小碎块,称3g放于玻璃匀浆器中,加入10ml0.35MNaCl溶液,匀浆3~5min。
2.匀浆液用4层纱布过滤于50ml烧杯中。
3.将滤液平分到2个离心管中,天平配平,1000r/min下离心2min。弃去沉淀。
4.将上清液在3000r/min下离心5min。弃去上清,沉淀即为叶绿体。
5.将沉淀用0.35MNaCl溶液悬浮,取一滴叶绿体悬液滴于载片上,加盖片观察:
①在普通光镜下观察;②在荧光显微镜下观察。
实验结果
1.普通光镜下,可看到叶绿体为绿色橄榄型,在高倍镜下可看到叶绿体内部含有较深的绿色颗粒,即基粒。
2.荧光显微镜下,选用蓝色激发滤光片,叶绿体发出火红色荧光
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