曲霉菌用什么方法观察

1. 曲霉菌感染用什么检测

GM抗原的检测目前最主流的方法是经典的一步法酶联免疫试验，目前国内外广泛认可的检测产品是由美国Bio-Rad公司提供的曲霉菌抗原检测试剂盒(PlateliaTMAspergillusAg)，可快速、灵敏的发现血液循环中的GM抗原，帮助临床实现早期发现曲霉菌感染。

GM抗原是曲霉菌半乳甘露聚糖(galactomannan，GM)抗原的简称，是曲霉菌胞壁的组成成分，在菌丝生长过程中可释放人血液，检测患者血清中GM抗原水平有助于侵袭性曲霉菌病(Invasive Aspergillosis, IA)的早期诊断。推荐首次检测时间点一般为当临床怀疑患者发生IA时，或者需要对免疫妥协患者进行常规筛查时。1另外，对于开始进行抗真菌治疗的患者，推荐进行每周两次的GM水平监测，以帮助判断临床疗效及患者预后。2
由于血清学试验为间接检测手段，除外检测试剂盒的选择，感染曲霉菌类型、宿主本身、以及使用的诊断标准和方法等，都可能影响检测结果。所以在检测过程中，需要注意各种影响的因素，以尽可能获得准确的结果，避免出现假阳性或假阴性而干扰了最终的临床诊断，延误患者诊治。在不考虑检测者本身操作原因及试验环境污染等因素的前提下，我们来了解下哪些因素可能会影响试验结果：3
生物学因素：
· 感染部位(比如鼻窦，肺部，还是播散性)
· 感染部位的微环境(比如营养，氧含量，PH值)
· 曲霉菌种类
· 是否使用抗真菌药物
· 释放的GM抗原分子结构
· 患者免疫抑制的程度
· 肾脏清除率，肝代谢情况
· 患者体内是否存在GM抗体
· 样本的保存条件及时间
· 患者检测前的治疗情况
流行病学因素：
· 患者所属人群
· 当地感染流行率
· 样本采集手段
· Cut-off值的设定
· 感染患者的界定标准
· 实验室检测经验
由于对结果的影响因素众多，为了确保最终结果的准确性，选择高质量的检测试剂盒就显得至关重要，即便选择了值得信赖的检测产品，操作者在分析GM抗原检测结果时，还是需要结合各种客观的影响因素，为临床提供最为准确可性的报告。

2. 如何观察到大米中有超标的黄曲霉素

黄曲霉是一种常见的腐生真菌，大多出现在发霉的粮食、粮食制品以及其他的有机物上，黄曲霉的部分菌株可能会分泌出剧毒物质，也就是黄曲霉素，误食后会对人体健康造成严重的不良影响。那么如何判断食物长黄曲霉呢?

如何判断食物长黄曲霉
1.是否存在霉变

黄曲霉素主要存在于霉变的坚果、豆类、大米等富含油脂与碳水化合物的食品中，如果食物表面出现霉变、皱缩、长毛、发绿、发黄等异常改变时，就提示该食物有可能存在黄曲霉感染的情况。黄曲霉感染后，食物表面可能带有致癌性极强的毒性物质黄曲霉素，并且难以通过高温将其杀死、消除，因此，出现霉变的食物应当及时丢弃，不宜再进行食用。

2.是否出现异味

如果食物出现了苦涩、腥臭、陈旧等异味，也有可能是黄曲霉感染引起的。比如味道发苦的坚果、腥臭的木耳、陈旧的大米等，都有可能是黄曲霉繁殖的温床。黄曲霉大量感染的食物属于强致癌物，长期少量食用后有可能导致肝功能受损，甚至引起肝癌。突然大量摄入黄曲霉素，还有可能导致患者出现食物中毒的症状，比如腹痛、腹泻、恶心、呕吐等，继而引起肝硬化、肝炎等疾患，对人们的身体健康及生命安全造成严重危害。

3.进行检测分析

判断食物中是否含有黄曲霉素的最准确方法是抽样进行检测分析，常用的检测方法包括薄层层析法和高效液相色谱法、微柱法、酶联免疫吸附法、超光谱法等，不同检测方法的检测速度和检测精度不同，适用于黄曲霉素不同的检测目的和检测要求。

结语：如何判断食物长黄曲霉?主要是通过观察食物是否存在霉变、是否出现异味等方面来进行初步的判断，一旦存在严重的霉变和异味，就不宜再进行食用。还可以将食物送到专业机构进行检测分析，根据检验结果可以得到更为准确的判断。

3. 区别青霉和曲霉 “最”可靠的方法是观察其什么

霉与曲霉分生孢子梗的区别，青霉孢子便顶端无膨大，曲霉分生孢子梗顶端膨大成为球状。

4. 曲霉菌和放线菌的总结与体会

摘要 体会：

5. GM试验是特异性的曲霉菌检测方法吗

GM试验是检测曲霉菌感染的经典血清学方法之一，其主要检测物质是半乳甘露聚糖（Galactomannan，简写GM）抗原。半乳甘露聚糖是曲霉菌特有的细胞壁多糖成份，当机体感染曲霉菌后，随着菌丝生长，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放出来，是最早释放的抗原，被认为是一种可靠的侵袭性曲霉菌感染早期诊断的生物标记物。
半乳甘露聚糖抗原具有热稳定性和可溶性，通常可在血清，脑脊液和肺泡灌洗液中检测。GM的释放量通常与感染的菌量成正相关，可反映机体感染的程度。每周两次使用GM试验对高危患者的病情和治疗效果进行监测和评估。
临床中的高危人群是免疫功能缺陷和高剂量服用激素患者，如：恶性血液肿瘤，实体器官移植，移植物抗宿主疾病患者等，所以GM的应用科室通常分布在血液科，移植科（中心），肿瘤科，呼吸科，ICU，皮肤科和儿科。GM试验的开展除了在公立医院实验室辅助临床医生诊断侵袭性曲霉菌病外，还可在大型私立实验室和一些制药公司做新抗真菌药物的药效评估。
GM抗原检测是EORTC/MSG推荐的侵袭性曲霉菌病的真菌学检测标准之一，美国Bio-Rad公司研发的用于检测血清中GM抗原的曲霉菌抗原检测试剂盒（PlateliaTM Aspergillus Ag）已在2014年初获得CFDA批准。是目前曲霉菌感染检测最好的方法，该试剂盒的上市为临床带来空前的利好价值，并受到众多国内专家的高度关注与评价。

6. 区别青霉和曲霉的可靠方法是观察其（）A．菌丝形状B．孢子的颜色C．营养方式D．孢子的着生结

青霉属于多细胞真菌，营养菌丝体无色、淡色或具鲜明颜色．菌丝有横隔，顶端不形成膨大的顶囊，其分生孢子梗经过多次分枝，产生几轮对称或不对称的小梗，形如扫帚，称为帚状体．分生孢子球形、椭圆形或短柱形，光滑或粗糙，大部分生长时呈蓝绿色．
曲霉菌丝有隔膜，为多细胞霉菌．在幼小而活力旺盛时，菌丝体产生大量的分生孢子梗．分生孢子梗顶端膨大成为顶囊，一般呈球形．顶囊表面长满一层或两层辐射状小梗（初生小梗与次生小梗）．最上层小梗瓶状，顶端着生成串的球形分生孢子．孢子呈绿、黄、橙、褐、黑等颜色．这些都是菌种鉴定的依据．
故选：D

7. 花生黄曲霉菌怎样辨别

首先，要将外观呈黄绿色的花生剔除，然后用流动的水浸泡、漂洗，再用水煮熟食用。黄曲霉菌毒素很耐热，即使加温到200℃也不能被破坏。而黄曲霉菌毒素可溶于水，经过漂洗、水煮，能被去除大部分。从这一点来讲，吃煮熟的花生相对来说较为安全。

8. 黄曲霉菌的检验

黄曲霉菌菌落生长较快，10～14天直径3～4或6—7cm。菌落正面色泽也随其生长由白色变为黄色及黄绿色，呈半绒毛状。孢子成熟后颜色变为褐色。表面平坦或有放射状沟纹，反面无色或带褐色。
在低倍显微镜下观察可见分生孢子头呈疏松放射状，继而为疏松柱状。
制片镜检观察，可见分生孢子梗很粗糙。顶囊呈烧瓶形或近球形。
分生孢子在小梗上呈链状着生，分生孢子的周围有小突起、球形、粗糙。 可归纳为化学方法、生物学方法和免疫学方法三大类。
1、生物学方法
1）抑菌试验
黄曲霉菌有抑制某些微生物生长的作用，故用其抑菌作用来测定黄曲霉菌的存在和含量。已经发现巨大芽胞杆菌和短芽胞杆菌对AFT最敏感。通过平皿中抑菌圈大小来衡量黄曲霉菌含量。
2 ）荧光测定法
根据黄曲霉菌在紫外光照射下可发出荧光的原理，将待检菌株接种于培养基中，28—30~C培养48～72小时，产生的毒素便浸入培养基中，在紫外灯光下照射培养基会呈现出特异的荧光。此法操作简便。对AFT最低检出量为5pg/ml。·
3）大白鼠试验法
黄曲霉菌对大白鼠毒性最早出现损害的是肝脏，其受损范围广，而幼鼠最敏感，雄性幼鼠比雌性幼鼠敏感性更高，用100－150g大白鼠作急性中毒试验，一般3—4天死亡。
4）鸡胚试验
5）鸭雏试验
鸭雏对黄曲霉菌非常敏感，致死性强，一般用一次剂量后72小时内死亡。
6）斑点试验
本法用于检测真菌毒素致突变试验的一种有意义的方法。主要利用沙门氏菌/微粒体突变性来检测某些样品种AFT的存在与含量。
A先将鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型变种的菌悬液，与一定量肝组织匀浆混合作倾注平板。
B待凝固后，再将一定量被检物(含AFT)加在平板中央待黄曲霉菌往外围琼脂中扩散时，围绕中心点将出现密布的回复突变的菌落。
本法作为一种生物学检验法广泛应用于开发安全、有用的化学物质和检测食品或农产品中黄曲霉菌。
2．免疫学方法
黄曲霉菌是分子量为312～346的二氢呋喃香豆素的衍生物，无免疫原性，不能引起抗体的产生，故必须与大分子化学基团或蛋白质偶联，成为完全抗原，方能引起免疫动物的抗体形成，然后利用血清学方法检测AFT。
由于黄曲霉菌的量一般都较低，因此，检测方法主要是敏感性较高的放射免疫测定法(RIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)。近几年来，国外已成功制备了测定B1的酶联免疫测定盒及检测乳中Ml含量的RIA检测盒。这两种检测盒都十分方便，而且快速准确。

9. 鸽曲霉菌病有何临床症状，如何诊断和防治

鸽曲霉菌病是由烟曲霉菌等致病性霉菌引起的一种常见真菌病。多种家禽都能感染，以雏鸽多发，是当前危害鸽的一种重要的传染病。发病率较高，有可能造成大批死亡。 本病潜伏期3～10天。病鸽的主要症状是呼吸困难。雏鸽开始减食甚至废食，精神委顿，羽毛松乱，翅下垂，闭目缩颈，呆立一隅，嗜睡，对外界反应淡漠；有时口腔与鼻孔内流出浆液性分泌物；体温升高；呼吸困难，呼吸次数增加，喘气，不时发出摩擦音或沙哑的水泡声响。病程的后期，病鸽出现严重的呼吸困难，张口呼吸，鼻瘤暗紫，吞咽困难，下痢，迅速消瘦，最后伏地不起，呈腹式呼吸，因衰竭而死亡。病程一般在1周左右。如不采取措施或发病严重时，死亡率可达50%以上。 慢性病例症状往往不明显，主要是呈现阵发性喘气，食欲不佳、下痢，迅速消瘦直至死亡。部分鸽出现扭头神经症状。产蛋鸽表现产蛋率下降，蛋品质下降，砂壳蛋、畸形蛋增多，受精率下降，孵化率下降，死胚增加。 根据临床症状和病理变化可作出初步诊断，确诊须取新鲜的病变组织或结节于载玻片上，加1～2滴20%氢氧化钠溶液，镜检发现霉菌菌丝和孢子；也可取霉菌性结节接种于马铃薯培养基、沙堡劳氏培养基进行真菌分离培养，挑选培养的菌落在显微镜下观察菌丝、分生孢子和顶囊，鉴定霉菌种类。 本病可通过加强饲养管理来预防，不使用发霉垫料，不喂发霉饲料，是预防本病的主要措施。垫料经常翻晒，发现有霉变时，应更换，轻微霉变的，也可用福尔马林熏蒸消毒。保持良好通风，特别在梅雨季节注意防止垫料和饲料发霉。对水源加强管理，保持清洁，防止污染。加强孵化设备及鸽巢的清洁、消毒工作，育雏室被污染后，必须彻底清扫，及时更换垫料并进行消毒，可以选用5%石炭酸等常规的或杀菌能力较强的消毒剂，然后再铺上干燥、洁净的垫料。 对该病无特效疗法，发病后立即清除鸽舍内发霉的垫草，停喂发霉的饲料，改喂新鲜的饲料，选择无刺激性和副作用的消毒剂进行带鸽消毒，对尽快控制住该病具有一定的效果。治疗可试用以下几种方法，制霉菌素：每只雏鸽日用量5 000～8 000单位，拌料口服，用3天，停药2天，再用3天，为1个疗程，可连续连续用1～2个疗程；成年鸽每千克体重2万～4万单位，有一定的效果。碘化钾每升饮水中加入碘化钾5克，或每升水中加入碘片1克、碘化钾1.5克，给鸽灌服。硫酸铜按0.05%的稀释，连饮3～5天。另外，选用高锰酸钾饮水，口服灰黄霉素，以及两性霉素B 和克霉唑等都有一定的疗效。

10. 黄曲霉素可以用紫外线灯检测吗

可以。

饲料是否被黄曲霉毒素污染可以用LEA-160L紫外线灯快速检测，取饲料放在LEA-160L紫外线灯下观察，若能看到黄绿色荧光，即为有毒，若看不到荧光，可将饲料压碎后再放到LEA-160L紫外线灯继续观察，若仍看不到荧光，说明不带黄曲霉毒素。

当饲料中黄曲霉毒素含量大于1ppm时，可使所饲喂的畜禽中毒死亡，黄曲霉毒素中毒症以猪、鸡多见，其次为鸭和牛。黄曲霉毒素是黄曲霉菌和寄生曲霉菌的一种代谢产物，它普遍存在于自然界中，黄曲霉毒素也是是目前世界上最知名和最被深入研究的霉菌毒素之一。

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黄曲霉素的去除措施：

1、碾磨搓洗

黄曲霉素在食品中分布极不均匀，在花生样品中以霉变、破损、长芽、皱皮及变色花生粒最为集中，只要将其拣除，毒素含量将大大降低，甚至低到无毒。碾磨加工可将大部分集中于米糠层和谷皮、胚层的黄曲霉素去除一大部分；搓洗可去除粮食表面的大量毒素。

2、吸附法

常用的吸附剂有沸石、活性白陶土、活性碳等。含有黄曲霉素的植物油可加活性白陶土或活性炭等吸附剂，毒素可被吸附而去毒，如广西用此法处理花生油，加入1.5%的白陶土，可使花生油中黄曲霉素由原来的100μg/kg降至10μg/kg。

3、辐射处理

黄曲霉素在紫外光照射下不稳定，可用紫外光照射去毒。该法去毒对植物油等液体食品效果较好，而对固体食品效果不明显。应用辐射法，必须注意照射的剂量和照射时间，以不影响食品的感官和理化性质为宜。

4、碱处理法

碱炼是油脂精炼的一种加工方法，在油脂中加入1%NaOH溶液，黄曲霉素内酯环即可破坏，形成香豆素钠盐。后者可溶于水，故加碱后再用水洗可将毒素去除。加碱水洗可使油中黄曲霉素降至标准以下，甚至不能检出。

5、有机溶剂萃取法

黄曲霉素为脂溶性毒素，易溶于有机溶剂，可用水合乙醇、异丙醇、丙酮、正己烷和水的混合物等进行提取分离、去毒。提取需反复3～5次，去毒效果可达90%以上，其中以丙酮和水（90∶ 100）混合液效果最好。处理后的粮油制品，必须将溶剂彻底挥干，方可食用。