丹参酮测定方法研究

㈠ tovc检测是什么

tovc检测：由于苯和苯系物是TVOC的重要组成，所以有些人只检测TVOC，而不检测苯，以及苯系物。

然而，也有只检测总苯，而不检测TVOC，还有一些单位则两者都检测。这主要是取决于要求和条件。

检测TVOC的技术设备要求较高，通常都采用气相色谱法，但也有采用傅里叶变换红外光谱法、荧光光谱法、离子色谱法和反射干涉光谱法等。

要想精确检测室内TVOC含量，需要由专业人员使用专业仪器，而且由于TVOC是挥发性有机物的总体构成，检测费用相对较高。如果不需要精确检测，只是想知道家里TVOC大致的含量，可以到网上或家居市场去购买家庭用的TVOC自测盒来检测。

(1)丹参酮测定方法研究扩展阅读：

tovc检测指标：苯、甲苯、乙酸丁酯、乙苯、二甲苯、苯乙烯、正十一烷。

色谱柱：TVOC专用色谱柱 50m

柱温：初温50℃ 初时10min，5℃/min，终温250℃，终时2min

载气：氮气0.05Mpa

汽化：220℃

检测器：FID 250℃

去除tovc的方法：

防止TVOC的伤害，主要从源头抓起，杜绝非环保建材；其次，常通风换气，甚至加热烘烤，使TVOC释放加快；第三，放置活性炭，但活性炭的效果不明显。第四，室内适当的养殖一些吊兰等绿色植物，达到净化室内空气的效果。

植物源空气净化萜类化合物具有广泛生物活性，但依赖植物体的传统生产方式是推广应用的瓶颈之一。采用合成生物学策略，创制微生物“细胞工厂”，有望为植物源萜类化合物低成本、可持续供给提供先进技术。

丹参酮为我国传统中药丹参的主要脂溶性活性成分，属于松香烷类去甲二萜化合物。该研究组与中医科学院中药资源中心黄璐琦研究员课题组合作，前期构建了高产丹参酮合成前体次丹参酮二烯的酵母工程菌株(J. Am. Chem. Soc.,2012, 134(6): 3234)。

㈡ 最简单的测试甲醛方法有哪些

可以去装潢商店买个甲醛测试盒或者甲醛检测仪。但依旧建议找专业人士测试，毕竟这样较为准确。

甲醛检测盒是一种能检测甲醛含量的测试工具，用于消费者对生活环境可能受到的甲醛进行快速半定量体验，可对甲醛污染程度进行判定。选择甲醛检测盒的时候一定要仔细对比。首先要选择机器灌装，避免手工作坊灌装人为因素过多，检测试剂用量不准确。直接造成检测结果不准确。第二选择加入了抗干扰剂的检测盒，这样可减少了乙醛、丙醛及二氧化硫对检测结果的影响。

㈢ 用HPLC测口服液中丹参酮的ⅡA的含量，标准品和对照品怎么配啊！万分感谢！

先指出一个概念性的问题：
使用生化方法测定的叫标准品，目前国家规定的标准品共有15种，是大观酶素、庆大霉素、太乐菌素、卡那霉素、红霉素、绒促性素、吉他酶素、杆菌肽锌、盐酶素、合成缩宫素、林可酶素、链霉素、安普酶素、渡毛化苷G、新霉素。
使用化学方法测定的叫对照品，也就是一般上仪器的都叫对照品，国家规定的有107种，太多了不好打，例如有什么吗啡啊、阿莫西林、地塞米松、地西泮、土霉素，太多了不打了，总之就是按上面的原则分的：生化方法使用的叫标准品，化学方法的叫对照品！

所以这里应该配制的是丹参酮的ⅡA的对照品溶液。
先配制一定浓度的储备液，如1 mg/ml，即10mg对照品溶解在10ml甲醇中。然后把此储备液稀释至系列浓度，如1/2 1/4 1/8 1/16,然后分别测定其峰面积，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标拟合线性方程，记得标准曲线。然后测定你的样品，把测定的峰面积代入标准曲线，算出浓度，就是你样品溶液中丹参酮的ⅡA的浓度。

㈣ 丹参酮IIA是我国传统中药丹参的主要化学成分之．对肺癌细胞的增殖有抑制和诱导凋亡的作用．为了探究丹参

（1）①用胰蛋白酶处理将小鼠肺癌组织分散成单个细胞，加入癌细胞培养液配制成单细胞悬浮液．
②实验设计时要遵循对照原则和单一变量原则，无关变量相同且适宜．故第5组则加入等量的生理盐水作为对照．
④取样检测各组存活的细胞数，最后取平均值，可以减少偶然因素引起实验的误差．
（2）以时间为横坐标，以细胞存活率为纵坐标，绘制成曲线如图所示．
故答案为：
（1）①胰蛋白酶
②等量的生理盐水
④平均
（2）

㈤ 丹参酮是什么

Hebi0211
你好:
丹参药材根条细长，直径小于1cm，表皮红棕色，木质部黄白色，丹参酮ⅡA含量能达到或高出药典要求。相反，根条粗壮，直径1.0～2.0cm，表面颜色浅棕红色或棕褐色，断面平整，呈角质样，木质部黄白色或紫褐色，丹参酮ⅡA含量低于药典要求。

丹参酮ⅡA为脂溶性成分，呈桔红色结晶，其它的脂溶性成分亦大多为红色系列〔1〕。外皮颜色代表了丹参酮ⅡA含量的高低，颜色鲜红者比棕褐色者含量高。因丹参酮ⅡA集中于表皮〔2〕，直径越粗，表面积相对越少，而根条细小者表皮所占比例较大，因此相同颜色，根条细小者含量相对较高。通过多个样品多次高效液相法的反复测定也证实了这一结果。把这一结果应用于购买验收中，具有指导意义。

以前已有的丹参研究资料，大多为不同品种、不同产地或不同采收期含量的探讨，从一个品种外形上比较丹参酮含量高低的未见报道。本文从符合药典收载品种的丹参药材外观性状上进行了研究，用于丹参药材的现场验收，简便、快捷。

㈥ 血参的现代研究

丹参 根主含脂溶性的二萜类成分和水溶性的酚酸成分，还含黄酮类，三萜类， 甾醇等其他成分。脂溶性成分中，属醌、酮型结构的有：丹参酮（tanshinone）Ⅰ、ⅡA、ⅡB[1，2]、Ⅴ、Ⅵ[2]，隐丹参酮（cryptotanshinone)[1]，异丹参酮（isotanshinone）Ⅰ、Ⅱ[3]、ⅡB[4]，异隐丹参酮（isocryptotanshi-none)[3]，羟基丹参酮（hydroxytanshinone）ⅡA，丹参酸甲酸（methyl tanshinonate)[1]，丹参新醌（dan-shexinkum)A、B、C[1]、D[6]，二氢异丹参酮（dihydroi-sotanshinone）Ⅰ[7]，新隐丹参酮（neocryptotanshinone)[4]，去羟新隐丹参酮（deoxyneocryptotanshinone)[8]，代号为Ro-090680的2-异丙基-8-甲基菲-3，4-二酮（2-isopropyl-8-methylphenanthrene-3,4-dione)[9]，去甲丹参酮（nortanshinone），丹参二醇（tanshindiol)A、B、C[10]，丹参新酮（miltirone）[11]，1-氢丹参新酮（1-dehy-dromiltirone），1-氢丹参酮（1-dehydrotanshinone）ⅡA[12]，1-氢代异隐丹参酮（1-detoisocryptotanshinone)[13]，3α-羟基丹参酮（3α-hy-droxytanshinone）ⅡA[10]，1，2-二氢丹参醌（1,2-dihydrotan-shinqiunone)[14]，醛基丹参酮（formyltanshinenone），亚甲二氢丹参酮（methylenedihydrotanshinone），7β-羟基-8，13-松香二烯-11，12-二酮（7β-hydroxy-8-13-abietadiene-11，12-dione），1，2，5，6-四氢丹参酮（1,2,5,6-teTCMLIBahydrotanshinone）Ⅰ，4-亚甲丹参新酮（4-methylenemiltirone)[15]，丹参内酯（tanshinlactone)[17]，二氢丹参内酯（dihydrotanshinlactone)[18]，丹参螺缩酮内酯（danshen-spiroketallactone），表丹参螺缩酮内酯（epidanshenspiroketallac-tone)[19]，丹参螺缩酮内酯Ⅱ[18]，就是丹参隐螺内酯（cryptoac-etalide)[20]，鼠尾草酮（miltiodiol)[22]。丹参环庚三烯酚酮（miltipolone）[23]等；属其他类型结构的有：降鼠尾草氧化物（nor-salvioxide)[22]，弥罗松酚（ferruginol)[12]，鼠尾草酚（salviol)[14]，柳杉酚（sugiol)[15]等。水溶性的酚性酸化合物有：丹参酸（sal-vianic acid)A、B、C，丹参酸A又称丹参素，其结构为D（+）-β-（3，4-二羟基苯基）乳酸[D（+）-β-（3，4-dihydroxyphenyl)lactic acid]，丹参酸B是由3分子的丹参素和1分子的咖啡酸（caffeic acid）缩合形成的，就是 丹参酚酸B；丹参酸C是2分子丹参素的缩合物[24，25]；丹参酚酸（salvianolic acid)A、B、C、D、E、G[26-29]；迷迭香酸（rosmarinic acid），迷迭香酸甲酯（methyl rosmarinate)[27]，紫草酸单甲酯（monomethyl lithospermater），紫草酸二甲酯（dimethyl lithospermate），紫草酸乙酯（ethy lithospermate)[30]，紫草酸（lithospermic acid)B[31]，原儿茶醛（protocaterchualdehyde），咖啡酸[27]，异阿魏酸（isoferulic acid)[30]等。还含黄苓甙（calin)[32]，异欧前胡内酯（isomperatorin)[13]，熊果酸（ursolic acid），β-谷甾醇（β-stiosterol），胡萝卜甙（daucosterol)[35]，5-（3-羟丙基）-7-甲氧基-2-（3-甲氧基-4-羟苯基）-3-苯并呋喃甲醛[5（3-hydroxypropyl)-7-methoxy-2-（3-methoxy-4-hydroxyphe-nyl)-3-benzofurancarbaldehyde][33]，替靠皂甙元（tigo-genin)[1]，豆甾醇（stigmasterol)[7]等。根茎中分得丹参酮ⅠⅡA，ⅡB，隐丹参酮，丹参新醌B，二氢丹参酮Ⅰ，亚甲基丹参醌[34]。
从丹参注射液中得丹参酮Ⅰ，隐丹参酮，异阿魏酸，原儿茶酸，琥珀酸（succinic acid），迷迭香酸，丹参酚酸A[35]。
2.甘西鼠尾草 根含丹参酮Ⅰ、ⅡA[36]，ⅡB[37]，隐丹参酮，羟基丹参酮，丹参酸甲酯[36]，紫丹参酯（prgewaqiunone)A、B，亚甲基丹参醌，1，2-二氢丹参酯[38]，齐墩果酸（oleanolic acid），紫丹参萜酸（przewanoic acid)A、B[39]，丹参新酯B，丹参内酯，去甲丹参酮，二氢丹参酮Ⅰ[40]，紫丹参萜醚（przewalskin）[37]，紫丹参呋然酸（przewalskenic acid)A[41]，紫丹参蒽醌（przewalskinone），1，5-羟基-3-甲基蒽醌（ziganien)[42]，β-谷甾醇[36]。此外，同属植物①白花丹参根含有：丹参酮Ⅰ、ⅡA，二氢丹参酮Ⅰ，二氢异丹参酮Ⅰ，陷丹参酮，羟基丹参酮ⅡA，亚甲基丹参醌，丹参酸甲酯，丹参醌B，丹参新酮，去甲丹参酮，Ro-099680，1，2，15，16-四氢丹参醌（1，2，15，16-teTCMLIBahydrotanshi-quinone），丹参醛（tanshinaldehyde)[43]。②拟丹参根含二萜化合物：拟丹参醛（tanshinaldehyde)[44]，三萜化合物：2α。3β，24-三羟基乌苏-12-烯-28-羧酸（2α，3β，24-terhydroxy urs-12-en-oic acid），2α，3α，24-三羟基乌苏-12-烯-28-羧酸（2α，3α，24-TCMLIBihydroxy urs-12-en-28-oic acid），2α，3α-二羟基乌苏烯-28-羧酸（2α，3α-dihydroxy urs-12-en-28-oic acid），2α，3β-二羟基乌苏-12-烯-28-羟酸（2α，3β-dihydroxy urs-12-en-28-oic acid），2α，3α，19-三羟基乌苏类羟酸（2α，3α，19-TCMLIBihydroxy urs-12-en-28-oic acid），2α，3β，19-三闳基乌苏-12-烯-28-羧酸（2α-3β，19-TCMLIBihydroxy urs-12-en-28-oic acid），3-O-乙酰基齐墩果酸（3-O-acetyloleanolic acid)[45]. 【化学成分】
根主含二萜醌类色素，丹参酮（tanshinone）Ⅰ，ⅡA，ⅡB，隐丹参酮（cryptotanshinone），异丹参酮（isotanshinones）Ⅰ，Ⅱ，异隐丹参酮（1socryptotanshinone），丹参新酮（miltirone），丹参酸甲酯（methyl tanshinonate），羟基丹参酮ⅡA（hydroxytanshinone），二氢丹参酮Ⅰ（dihydrotanshinone I），丹参新醌甲、乙、丙，次甲丹参醌（methylenetanshinquinone）和鼠尾草酚（salviol）．另报道合铁锈醇（ferruginol）、Δl-丹参新酮（Δl-dehydromiltirone）、Δl-丹参酮ⅡA（Δl-dehydrotanshinone IIA）、丹参新醌丁（danshenxinkun D）和1，⒉二氢丹参醌等．除二萜醌类化合物外，尚合原儿茶醛（protocatechuic aldehyde）、β-谷甾醇和D（+）β-（3，4一二羟基苯基）乳酸（即丹参素，丹参酸甲），以及缩羧酸化合物（salvianolic acids）A,E等．【理化鉴别】
（1）取该品粉末5g，加水50ml，煎煮15～20分钟，放冷，滤过，滤液置水浴上浓缩至黏稠状，放冷后，加乙醇3～5ml使溶解，滤过，取滤液数滴，点于滤纸条上，干后，置紫外光灯（365nm）下观察，显亮蓝灰色荧光．将滤纸条悬挂在浓氨溶液瓶中（不接触液面），20分钟后取出，置紫外光灯（365nm）下观察，显淡亮蓝绿色荧光。
（2）取上述滤液0.5ml，加三氯化铁试液1～2滴，显污绿色。
（3）薄层层析：
样 品 液： 取粉末1 g，加乙醚5ml置具塞试管，振摇放置1小时，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解。
对照品液： 取丹参酮ⅡA、隐丹参酮加醋酸乙酯制成2mg/ml的溶液。
展开： 硅胶预制板，点样5ml．以苯－醋酸乙酯（19：1）为展开剂。
显色： 在日光下检视，可见丹参酮ⅡA紫红色与隐丹参酮橙红色斑点。
【含量测定】
照高效液相色谱法测定．色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水（15：5）为流动相；检测波长为270nm．理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备：精密称取丹参酮ⅡA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀,即得（每1ml中含丹参酮ⅡA16mg）。
供试品溶液的制备：取该品粉末（过三号筛）0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加人中醇 50ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5ml，注人液相色谱仪，测定，即得．该品含丹参酮ΠA（C19H18O3）不得少于0.20%。 心血管系统的作用
① 强心加强心肌收缩力、改善心脏功能，不增加心肌耗氧量 ② 对血管作用扩张冠脉，增加心肌血流量；扩张外周血管，血流增加；脑血流量下降。
③ 抗血栓形成提高纤溶酶活性；延长出、凝血时间；抑制血小板聚集（提高血小板内cAMP水平抑制TXA2合成）；改善血液流变学特性（血粘度降低、红细胞电泳时间缩短）。
④ 改善微循环
促进组织的修复与再生作用。
① 促进组织的修复与再生丹参制剂治疗：坏死心肌清除快；纤维母细胞分化、胶原纤维形成较明显；肉芽形成比较成熟。局部淤血减轻、血液循环改善，愈合时间缩短。
② 抑制过度增生对过度增生的纤维母细胞有抑制作用。
保肝
改善肝微循环。
抗菌
丹参制剂中含有隐丹参酮、二氢丹参酮，对体外的葡萄球菌、大肠杆菌、变性杆菌有抑制作用。
降血脂作用
丹参能使主动脉粥样斑块形成面积明显减少，血清总胆固醇、甘油三酯、均有一定程度的降低。丹参可抑制高脂膳食家兔的血脂上升。通过研究发现丹参素还能抑制细胞内源性胆固醇的合成。 丹参煎剂给小鼠腹腔注射43g/kg，48小时l次腹腔注射内未见动物死亡，而64g/kg组10只动物死亡2只。丹参水提醇溶部分，小鼠1次腹腔注射的半数致死量为80.5±3.1g生药/kg，丹参或复方丹参注射液，小鼠腹腔注射的半数致死量分别为136.7±3.8g/kg和61.5g±5.3g/1g。（以生药含量计）；家兔每日腹腔注射丹参注射液2.4g/kg或复方丹参注射液3g/kg，连续14日，未见中毒性反应，动物血象、肝肾功能和体重等均无异常改变，实质性脏器除明显充血外，未见特殊变化。另外，小鼠每日灌胃2%丹参酮混悬溶液0.5ml，连续14日，大鼠每日灌胃2.5ml，连续10日，亦未见毒性。
小白鼠腹腔注射半数致死量：丹参注射液36.7±3.8g/kg，复方丹参注射液61.5±5.26g/kg。麻醉动物静脉注射此二剂达临床应用量40-80倍亦无毒性反应；每天给家兔静脉注射临床用量的20-30倍连续14天，也未观察到毒性反应，而且对于血象，肝、肾功能，体重亦无不良影响，实质性脏器除明显充血外，来见特殊变化。 丹参对喜树碱、环磷酰胺的抗癌活性有增效作用．丹参对肉瘤180 细胞有细胞毒作用．从丹参中分离出的有明显抗肿瘤活性成分紫丹参甲素，对小鼠Lewis肺癌、黑色素瘤1316和肉瘤180 有不同程度的抑制作用．丹参对肿瘤的作用，有两种不同的报告： 有实验发现，丹参有促进癌转移的作用．单独应用丹参对 Lewis 肺癌小鼠自发肺转移有明显促进作用；单独应用复方丹参注射液（含丹参和降香）对大鼠 Walker256 癌细胞血行扩散有促进作用．亦有实验表明： 丹参等组成的活血化淤方在临床上并未促进食道癌和鼻咽癌病人癌瘤的远部位转移；丹参等组成的活血化淤复方也不促进食道癌大出血与穿孔．丹参注射液可使部分病人的胆固醇下降．在实验性动脉粥样硬化的大鼠，口服丹参煎剂未见有降低血脂的作用，对主动脉病变亦无保护作用．但对动脉粥样硬化家兔，可降低血和肝中的甘油三酯．复方丹参对高血脂家兔模型血清胆固醇、中性脂肪、β-脂蛋白亦有明显的降低作用．丹参及白花丹参能抑制家兔实验性冠状动脉大分支粥样斑块的形成．
丹参有促进创伤愈合的作用．对人工骨折的家兔，能减轻局部淤血，改善局部循环，促进骨折愈合．其促进骨折愈合的作用，与其提高血清锌含量、加强骨折断端邻近骨组织中锌的动员以及通过提高骨痂中锌含量、锌/铜比值来加速骨痂组织生长和钙化过程有关．
丹参可改善诱导性肾功能衰竭大鼠的尿毒症症状．能明显降低尿素氮、肌酐、甲基胍、胍基丁二酸的血清浓度，既改善高磷酸血症，又改变了血中游离氨基酸的晶型，能促进肾功能恢复．
此外，丹参煎剂给家兔肌注，有降血糖作用．丹参酮有温和的雌激素样活性，并有抗雄性激素的作用．丹参对兔肾近曲小管上皮细胞有保护作用．丹参制剂对结缔组织病变可抑制胶原的合成，促进分解，可用于治疗硬皮病及瘢痕性疾病． 1.隐丹参酮的吸收、分布、排泄和代谢：
以薄层分离和双波长薄层色谱扫描仪分离及测定生物样品中隐丹参酮的含量。将29只小鼠（雄性，体重22-25g，以下同），分成6组，每组3-6只动物，禁食8小时后，每鼠以隐丹参酮2mg灌胃，给药后不同时间处死，取全胃肠道及其内容物研成匀浆，提取测定药物含量。在半对数纸上以药物回收率作纵坐标，时间为横坐标作图，求得隐丹参酮在胃肠道的半量消失时间为31/3小时。另外，将药物放入小鼠离体胃肠道内在生理盐水中温孵（37℃）12小时，测定药物回收率为98%，因此上述药物自整体胃肠道消失的情况，基本上反映口服后药物的吸收，另取8只小鼠禁食8小时后，灌胃隐丹参酮400mg/kg，2小时后处死，取各组织（2只动物为一个样品）研成匀浆提取测定药物含量，结果表明，口服后肝及肺含量较高，肺、心其次，脾、血浆及肾依次递减。另将6只小鼠。静脉注射隐丹参酮（以少量吐温80及二甲基亚砜助溶）40mg/kg，5分钟后处死，测得药物在组织的含量，以脑、肺、心较高、肝、血浆、肾及脾依次递减。8只大鼠（雄性，体重120-150g，以下同），禁食2小时后，每鼠灌胃隐丹参酮350mg/kg，给药后分段收集尿液，测定药物含量。给药后，原形药物自大鼠尿中排出很少，服药24小时仅排出给药量的0.21%，48小时共排出0.34%，另取5只大鼠禁食12小时后灌胃隐丹参酮150mg/kg，在乙醚麻醉下插胆管，并分段收集胆汁，测定药物含量。给药后6、12及20小时内，原形药自胆汁排出为给药量的0.17%、0.48%及0.80%。说明药物自肠道吸收后大部分在体内。大鼠口服隐丹参酮后，尿、胆汁及肠道内容物经提取及薄层层离后，可得7个斑点，纯化后得7个红色或橙黄色结晶。测定其理化性质，其中代谢物6号为未改变的隐丹参酮，7号为丹参酮ⅡA,1号极性最大，根据高分辨质谱测定，代谢物2、3、5及6号体外抑菌试验均为阳性，但仍以原形药（6号）活性最强，因此在动物体内发挥药理作用可能仍以原形药为主。将隐丹参酮放入离体大鼠小肠内温孵（37℃）5小时后，肠内容物经提取及薄层层离后，除有原形药外，尚有少量丹参酮ⅡA。大鼠口服隐丹参酮后3小时内胆汁中首先出现的代谢产物除原形药外。也是丹参酮ⅡA，说明肠道内或肝脏的脱氢酶可能使隐丹参酮转化成丹参酮ⅡA。1、2、3、4及5号比隐丹参酮极性大的代谢物在大鼠口服药物6小时以后才陆续在胆汁中出现，说明药物经过反复的肝肠循环，在肝脏由肝微粒体药酶催化，逐渐转化成相应的代谢产物。例如羟基丹参酮ⅡA可能由羟基化酶所催化，丹参酮ⅡA与谷氨酸的缩合物则可能由酰基辅酶A和谷氨酸2-N酰基转移酶参与转化。因此设想，隐丹参酮在动物体内的生物转化可能有下列途径。
2.丹参酮的胆汁排泄与肝内转化：
2.1.试验动物为大鼠，雄性、体重350-400g，10%乌拉坦1g/kg腹腔麻醉，以小儿头皮针插入总胆管，固定后先收集1小时的胆汁作为空白对照。药物先溶入少量二甲基甲酰胺。然后以1%羧甲基纤维素钠水溶液稀释至10mg/ml。由十二指肠给药，而后按时定量收集胆汁，胆汁贮于冰箱过夜，以氯仿提取两次，合并氯仿液，水浴蒸于，贮于干燥器，测试前以50ml氯仿定量稀释，进行高效液相分离并定量；丹参酮在肝匀浆内的转化，用体重160g雄性大鼠乙醚麻醉后，取肝脏，称重后以0.15M氯化钾、0.24M烟酰胺制备均浆，双层纱布过滤，滤液再以上述溶液稀释至每10ml相当于肝组织6g。于100ml锥形瓶中加入PH7·4的磷酸缓冲液4ml，肝匀浆液2ml，丹参酮样 品1mg溶于95%乙醇0.2ml中，对照组加0.2ml不含丹参酮的95%乙醇液。37℃保温2小时，终止反应后用氯仿12ml分二次萃取。合并萃取液。水浴蒸干。测试前以氯仿100ml溶解样品，应用薄层分离并定量、（硅胶一CMC薄层，展开剂为苯-丙酮（95：5）：肝内抑菌活性成分检出，试验采用小鼠，给丹参酮Ⅱ-A后，经不同间隔时间，取肝组织，无水硫酸钠制成脱水肝粉，进行硅胶干柱层析，分离出相应色带，参比物丹参酮ⅡA，切下该段色带后以丙酮洗脱，回收丙酮后作抑菌试验。
实验结果表明，大鼠十二指肠给药后一般在1小时左右即可测得胆汁中有微量的丹参酮排出，其排出高峰在给药后3小时左右。给总丹参酮制剂组，剂量24mg其中含丹参酮ⅡA3.09mg，隐丹参酮0.6mg。该组动物排出的胆汁中含丹参酮ⅡA量较丹参酮ⅡA组高5-10倍以上。提示制剂组中的隐丹参酮有部分在肝内可转化为丹参酮ⅡA，此外总酮制剂组的肠吸收较单体丹参酮ⅡA的吸收为多，也可能是其中因素之一。十二指肠给予隐丹参酮后胆汁中不仅有隐丹参酮，尚出现丹参酮ⅡA的色谱峰。给丹参酮Ⅰ后胆汁中所排出的丹参酮Ⅰ较丹参酮ⅡA较丹参酮ⅡA及隐丹参酮略有增多，说明不同结构的丹参酮其在肝内的排出速度是不相等的。大鼠十二指肠给隐丹参酮后，胆汁中出现丹参酮ⅡA，提示隐丹参酮在肝内可经脱氢反应转化为丹参酮ⅡA。为此，采用大鼠正常肝的习浆液与隐丹参酮在37℃保温2小时，终止反应后以氯仿提取匀浆液，蒸于氯仿后，用50ml氯仿溶解样品，然后在硅胶-CMC薄层上精确滴加10ml样品，展层后图谱上可见匀浆液中除隐丹参酮外，还形成另一产物，其Rf值为0.42，与浓硫酸反应显绿色。其紫外吸收与已知品丹参酮ⅡA完全一致。从而证明隐丹参酮在肝匀浆内经脱氢反应转化为丹参酮ⅡA。此外亦发现在以二氢丹参酮Ⅰ与肝匀浆保温后，在匀浆液中形成另一产物与浓硫酸反应呈兰紫色，其Rf值与丹参酮Ⅰ相同，但生成率较低。
为了解服用丹参酮后肝内有无抑菌活性成分，除直接由胆汁中测定其含量外，还参照前文观察了肝胆及尿液中的抑菌活性成分，应用分枝杆菌607为指示菌。药物制剂分别为丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ及隐丹参酮，药物均配制成油剂，剂量为2mg/只。实验动物用体重20-25g的雄性小鼠，每组12只。于给药后的2、4、16、30小时分别处死3只，在无菌条件下用皮肤钻孔器切下直径6mm的肝组织，同时收集血、尿与胆汁，分别置入事先准备好的含有分枝杆菌607的琼脂平板上，在37℃温箱经36-48小时，以抑菌圈达10mm以上为正反应，结果表明：给药后的第2小时各组动物的肝、胆、血、尿中很少出现抑菌物质出现，其抑菌圈分别为隐丹参酮组26mm（2/3）。丹参酮ⅡA10-20mm（3/3）、丹参酮Ⅰ11mm（1/3）。且该抑菌物质在肝内停留时间较长于小时30肝内仍可检出。（分母为试验样品数，分子代表具有抑菌活性数）。
2.2.丹参酮ⅡA磺酸钠：
实验所用标记丹参酮ⅡA磺酸钠比活性为8.4uci/mg。小鼠体重20-22g，一次静脉注射3uci/只。分别于给药后1.6和24小时杀死小鼠，取出心、肝、胆囊、肺、肾、胃、肠和胃肠内容物。称取一定量组织（一般在20mg）左右，尿和血液吸取量不超过0.1ml过氧化氢，置于70-80℃水浴中消化30分钟左右，然后用FJ-353双道液体闪烁仪测定放射活性。所用闪烁液含有0.03%PPO和0.4%POPOP的二乙醇甲醚和二甲苯闪烁液。以14C正十六烷作内标准淬灭校正。各组织中的放射活性以每分钟脉冲数（cpm）100mg湿重计算。结果表明，小鼠1次静脉注射后l小时，组织中以肝、肺和肠为高；肾、脾、心、胃次之；脑最低。在6和24小时均趋于减少。肠内容物的放射活性在3个不同时间均占首位，分别为注入量的8.1，52.O和32.7%。胆囊及内容物的放射活性按每只胆囊重量计算在6和24小时，分别为注入量的12.7和1.2%。小鼠1次静脉注射35S-丹参酮ⅡA后连续收集24，48和72小时的尿和粪，按上述方法消化，测定放射活性。停止饲食的3日内每天灌胃50%葡萄糖溶液1ml。
在给药后24小时内尿中排泄率为10.2%，24-48小时和48-72小时内分别为4.5%和1.8%，72小时内总排泄率为16.5%。第1日内粪中排泄率为32%。第2日和第3日内分别为24.1%和19.6%。3日内总排泄率为75.7%。3日内尿和粪的总排泄率为92.2%。从上述结果可以认为35S-丹参酮ⅡA的排泄途径主要是由胆道排至肠内，由粪中排出。小鼠静脉注射35S-丹参酮Ⅱ3uci/只后2，5，10，20，30，60，90，120和240分钟从眼后静脉丛取血O.01ml，测定全血的放射活性，结果给药后2分钟血中平均放射活性为75843cpm/0.1ml血，90分钟已降至3758cpm/0.1ml血。至240分钟仍在低水平。小鼠静脉注射一定量35S-丹参酮ⅡA磺酸钠后收集24小时的尿，浓缩分离后经薄层鉴定，表明一个是原形药，另一个为代谢产物。
2.3.丹参素在生物样品中的药代动力学：
以醋酸乙酯为溶剂，分别扫描激发光谱与荧光发谢光谱，峰波长各为?EX285nm，?EX314nm。丹参素浓度在1.0-9.0xl0(-6）g/ml范围内，与荧光强度呈线性关系。相关系数r=0.9996，回归方程C=1.0168x10-7F-1.815x1O(-7）。丹参素的醋酸乙酯提取稳定，于3小时内测得的荧光强度数据恒定。于血浆中，按上列丹参素浓度线性范围的荧光强度数据表明，其直线相关关系亦属良好，r=0.9997；回归方程C=1.497×10(-7）F-1.470×10(-7）。分别吸取丹参素纯品水溶液（0.03mg/ml）0.15-1.35ml，水稀释至1.50ml，各加入家兔空白血浆1.0ml，稀H2SO40.5ml，用醋酸乙酯提取（3x1.5ml），于?EX285nm加血浆，稀释至2.5ml，同法操作，作为标准，测得回收率结果平均为76.47±2.427%，变异系数CV：3.174%（n=20）。
取家兔5只，经快速耳静脉注射丹参素（针剂30mg/kg）后，于5、15、30、60、90、120扩150分钟定时抽血、取血浆，如前操作，测定血药浓度，用空白血浆作对照。由实验数据的均值，以丹参素浓度的对数与时间作图，为一直线。显示丹参素的药素的药代动力学为单室模型，其参数消除速率常数和生物半衰期各为：Kel=0.0456±0.0141分钟：t1/2=16.58±5.768分钟。

㈦ 丹参酮2B和丹酚酸B是同一种物质吗另外，丹参中的提取物在药品生产中有什么含量要求

丹酚酸B

【别 名】丹参酸B，丹参酚酸B，丹酚酸乙

【化 学 名】2-[(2R,3S)-4-[(E)-2-[(1R)-1-carboxy-2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethoxy]carbonylethenyl]-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-hydroxy-2,3-dihydrobenzofuran-3-carbonyl]oxy-3-(3,4-dihydroxyphenyl)propanoic acid

【C A S 号】115939-25-8

【来 源】为唇形科植物丹参Salvia Miltiorrhiza Bge.的根及根茎提取而得。其他来源[1] 卡拉巴丹参 Skarabachensis 根,[2]甘西鼠尾草(红秦艽) Salvia prezwalskii Maxim.。

【物理性质】本品为棕黄色干燥粉末，纯品为类白色粉末；味微苦、涩，具引湿性。。可溶于水，乙醇、甲醇。丹参酸B是由3分子的丹参素和1分子的咖啡酸缩合形成的，具有两个羧基，是以不同的盐的形式存在的（K+，Ca2+，Na+，NH4+等复合形式），在煎煮、浓缩过程中，少部分水解生成紫草酸和丹参素，一部分丹参素在酸性条件下变为迷迭香酸；丹酚酸A，C在溶液中可以互变等。

【分子式及相对分子量】C36H28O16，718.62

【规 格】＞5%，＞10%，＞50%，＞70%，＞98%

【提取工艺】丹参药材粉碎，置提取罐中，加8倍量0.01mol／L盐酸浸泡过夜后，以14倍量水渗漉。渗漉提取的溶液过AB-8型大孔树脂柱进行纯化，先用0.01mol／L盐酸洗脱除去不被吸附的杂质，再用25％乙醇洗脱除去极性较大的杂质，最后将40％乙醇洗脱液减压浓缩回收乙醇后冻干即得到纯度大于80％的丹参总酚酸。

【鉴 别】取本品1g，研细，加乙醇5ml，充分搅拌，滤过，取滤液数滴，点于滤纸条上，干后，置紫外光灯(365nm)下观察，显蓝灰色荧光，将滤纸悬挂在浓氨溶液瓶中(不接触液面)，20分钟后取出，置紫外灯(365nm)下观察，显亮蓝绿色荧光。

酸度 取澄清度项下的水溶液，pH值应为2.0～4.0(中国药典1977年版附录)。

【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录Ⅵ D)测定。

色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-乙腈-甲酸-水(30:10:1:59)为流动相；检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备 精密称取丹酚酸B对照品适量，加水制成每1ml含10μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备 取本品约0.2g，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇适量，超声处理20分钟，放冷，加水至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。 四川广汉市本草植化有限公司

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

【药理药效】丹酚酸B为三分子丹参素与一分子咖啡酸缩合而成，是目前研究较多的丹酚酸之一，对心、脑、肝、肾等器官均具有重要药理作用。

1 抗氧化作用

丹酚酸B具有很强的抗氧化作用，体内外实验证明，丹酚酸B能清除氧自由基、抑制脂质过氧化反应，其作用强度高于维生素C、维生素E、甘露醇，是目前已知的抗氧化作用最强的天然产物之一. 药理学研究表明，注射用丹参酚酸具有明显的抗氧化作用，抑制血小板聚集，及抑制血栓形成的作用，并能延长缺氧条件下动物的存活时间。试验表明，注射用丹参酚酸（60～15mg/kg）能明显改善脑缺血再灌损伤大鼠的神经功能缺陷，表现为改善行为障碍，明显缩小脑梗死面积，高、中剂量（60、30mg/kg）有统计学差异；注射用丹参酚酸在药后1、2、24hr明显改善FeCl3所致的大鼠脑缺血造成的动物神经功能损伤，表现为行为障碍的改善，并能缩小脑梗死面积；注射用丹参酚酸40mg/kg明显抑制ADP、花生四烯酸、胶原诱导的家兔血小板的聚集反应，抑制率分别为81.5％、76.7％、68.9％。注射用丹参酚酸60、30mg/kg明显抑制大鼠血栓的形成；注射用丹参酚酸60、30mg/kg明显延长小鼠在缺氧条件下的存活时间。

2 对心脏的保护作用

2．1 对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

急性心肌缺血后正常血液的再灌注可导致缺血心肌的进一步损害，其表现为再灌注后的早期可出现严重的细胞损害、顽固性心律失常和明显的心功能减退，成为急性心肌缺血再灌注损伤。心肌缺血再灌注时，大量自由基产生，细胞膜脂质过氧化反应增强，膜流动性和通透性发生变化，导致电生理活动异常，诱发和促进心律失常的产生；心肌细胞脂质过氧化反应增强，致使心肌缺血区的过氧化产物丙二醛(MDA) 含量增多、冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CPK)升高、心肌组织中超氧化物岐化酶 (SOD)减少。动物实验研究显示丹酚酸B能减 轻缺血再灌注损伤模型动物的心肌缺血程度，减小心肌梗死范围，减少LDH 、CPK从胞体的溢出、降低缺血心肌组织中MDA的含量，提高SOD的活力，对抗氧自由基对心肌细胞的毒害作用，保护心肌细胞.

2．2 对心脏微血管内皮细胞的延迟保护作用

心肌预先反复缺血后，可增强对后续较长时间缺血的耐受性，称为缺血预处理，是一种内源性保护机制，其心肌保护作用在预处理后即刻出现，持续2 ～ 4小时消失，24小时后重现，持续数日，后者称为延迟保护作用。心肌缺血预处理的发生机制主要是机 体内源性物质激活中间环节，引发终末效应物质的活化进而产生保护作用。

内皮细胞除在血管内外物质交换、维持凝血和抗凝血的平衡中起着重要作用外，并可产生和分泌多种生物活性物质，在调节血管舒缩运动及维持血细胞的 正常功能方面具有无可替代的生物学效应，冠状动脉内皮细胞还有调节心肌收缩力的作用.

肿瘤坏死因子a(TNF_a)是由激活的巨噬细胞分泌的一类具有多种生物学效应的细胞因子。病理状态下TNF-a可损伤心功能，诱导心肌细胞凋亡，而且TNF-a血清水平的变化与多种心脏疾病有关 。

心脏缺血缺氧时，心脏微血管内皮细胞首先和最易损伤。实验研究表明丹酚酸B预处理可抑制大鼠 心肌缺血再灌注损伤过程中的钙离子超载、减少内皮 素(ET)及肿瘤坏死因子a(TNF-a)的释放、改善血栓素／前列环素(TXA2／PGI2)系统的平衡状态、降低缺氧／复氧损伤后内皮细胞细胞间粘附分子的表达，起到保护内皮细胞的作用.

预处理保护心肌的过程涉及多种因素的参与，蛋白激酶C(PKC)作为一种细胞内信息传递的主要物质和媒介，在心脏预处理保护心肌过程中起着关键作用。PKC的激活可引发底物蛋白质磷酸化、细胞内钙稳态、离子通道、腺苷、缓激肽、受体的信息传递等一系列变化，调控着预处理过程。通过对大鼠缺氧／复氧的心脏微血管内皮细胞损伤模型，采用分子生物学方法，观察到丹酚酸B预处理能增强蛋白激酶 CmRNA、热休克蛋白70 mRNA的表达，具有与缺氧预适应相类似的细胞保护效应，可增强细胞对随后较长时间缺氧／复氧损伤的耐受性，这可能是丹酚酸B预处理的细胞保护机制。

2．3 对动脉粥样硬化的防治作用

低密度脂蛋白(LDL)氧化修饰是动脉粥样硬化发生的一个重要原因，氧化修饰的LDL(OX—LDL)具 有细胞毒性作用，易于被巨噬细胞识别并大量摄取形成泡沫细胞，影响单核细胞的迁移，从而促使动脉粥样硬化的发生发展。实验研究发现丹酚酸B能有效抑制Cu抖诱导的LDL氧化修饰，对防治动脉粥样硬化有重要意义，其作用机制可能与清除自由基、螯合Cu有关。

泡沫细胞是动脉粥样硬化斑块内出现的特征性病理细胞。血管内皮生长因子(VEGF)也称血管通透性因子(VPF)，是一种高度特异的、强烈的血管内皮促分裂因子和血管生成因子。体内的动脉粥样硬化斑块中VEGF表达显着升高，以斑块中泡沫细胞的表达最为明显。在体外培养的U937泡沫细胞模型中，丹酚酸B和银杏叶提取物一样可呈剂量依赖性的抑制泡沫细胞VEGF的表达，对动脉粥样硬化有预防和治疗作用.

溶血磷脂酰胆碱(LPC)是由OX-LDL或质膜的磷脂酰胆碱(PC)经磷脂酶A2(PLA2)水解或脂质氧化而来，是OX-LDL的主要活性成分，能模拟OXLDL 的主要作用，因此LPC与动脉粥样硬化的发生 密切相关。丹酚酸B能抑制LPC刺激内皮细胞产生基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、抑制内皮细胞表达血管内皮生长因子，防治动脉粥样硬化。另有研究显示丹酚酸B能减少动脉粥样硬化家兔血浆血栓 素(TXB2)、ET浓度，增加前列腺素Fla(6-keto- PGFI~)浓度，具有明确的内皮细胞保护效应.

2．4 对细胞凋亡的影响

在血管成形术的兔子模型中，丹酚酸B能诱导新血管内膜细胞凋亡，而凋亡在再狭窄中对细胞的数量起到稳定作用。 为考察抗氧化剂能否影响血管细胞的凋亡，Hung HH 等测定了动脉粥样硬化和胆固 醇喂养的兔子再狭窄损害模型中凋亡细胞死亡的频率。结果发现用丹酚酸B处理的一组兔子的凋亡细胞的百分率显着高于其他组。同时丹酚酸B能显 降低新血管内膜的厚度，这与凋亡细胞的数量一致。这些结果表明，丹酚酸B能诱导新血管内膜 细胞的凋亡，从而可以防止新血管内皮的增厚。

2．5预适应的心脏细胞保护作用。

3 对脑的保护作用

3．1 对脑缺血损伤的保护作用

血管内皮生长因子(VEGF)是内皮细胞特异性 的有丝分裂原，具有促进内皮细胞增殖，提高血管通透性等生物学特性。脑缺血后，低氧可激活VEGF 及其受体(VEGFR)系统，促使半影区VEGF表达， VEGF诱导大量新生血管形成，促进血管增生，增加受累组织的血流灌注和供氧量，减少神经元的凋亡和死亡，减轻脑损伤程度 。实验研究显示丹酚酸B 与冰片、三七等配伍可显着提高VEGFmRNA表达， 促进新生血管形成，并能较好地抑制VEGF诱导血管通透性增加的作用，这些作用对缺血性中风的治疗具有非常重要的积极意义。

丹酚酸可通过血脑屏障，具有改善脑血流量而无窃血，抗血小板聚集，抗血栓，抑制细胞内钙含量增高，清除自由基，促进脑血管生成等作用，可以认为丹参总酚酸是一个比较理想的有抗脑缺血作用的药物，

3．2 对学习记忆功能的影响

采用大鼠、小鼠等动物脑缺血实验模型研究证明，丹酚酸B静脉注射对大鼠、小鼠脑缺血和缺血再 灌注引起的脑损伤具有保护作用，可缩小缺血区面积，减少脑组织中MDA"含量，缓解由于脑缺血引起的行为学障碍，对由此引起的记忆功能障碍有明显的改善作用。作用机制可能与丹酚酸B的抗氧化作用有关。

4 抗肝脏纤维化作用

肝星状细胞(HSC)的激恬是肝纤维化形成的核心环节，转化生长因子-131(TGF-131)是最重要的促 HSC活化与肝纤维化形成的细胞因子。肝贮脂细胞 (FSC)是一种肝脏实质细胞，在病理条件下被激活后大量增殖，同时产生细胞外基质的能力增长数十倍， 因此，FSC在肝纤维化形成过程中也起到了重要作用。丹酚酸 B能抑制TGF-I的HSC胞内信号转导及 其受体蛋白的表达，从而拮抗TGF-B1的促HSC活化，并能抑制活化FSC增殖，抑制FSC生成细胞外基质而减少胶原纤维在肝内的沉积。另有研究表明，丹酚酸 B镁盐具有抗脂质过氧化抗肝损害的作用， 有减轻肝组织纤维化程度的功能，临床用于治疗慢性乙型肝炎肝纤维化取得满意效果.

肝纤维化是肝脏对各种慢性损伤的修复应答过程，HSC获得增殖能力并活化为肌成纤维细胞样细胞，被认为是肝纤维化形成的关键，丹酚酸的抗肝纤维化效果与γ干扰素的结果相似，体外研究发现它可抑制传一代培养的HSC的增殖，抑制转化生长因子-β1（TGF-β1）在HSC中的信号转导。

5 抗肿瘤作用

研究证明丹酚酸B不仅可以通过抗氧化作用保护神经细胞，而且可以通过减少NO 的释放，改善J3-淀粉样蛋白对神经元的毒性作用 ，并能增强老化红细胞提高T淋巴细胞分泌IL-238 ，具有抗衰老、抗肿瘤作用。

体内、体外实验表明丹酚酸B镁盐对多种肿瘤细胞株的生长具有较好的抑制作用。体外MTT实验中，丹酚酸B镁盐对人肾癌（786-0）、小鼠乳腺癌（C127）、人乳腺癌（MCF-7）、人肝癌（Hep G2）、小鼠黑色素瘤（B16）、人胃癌（SGC-7901，AGS）、人食管癌（Eca-109）等细胞株的最大抑制率皆达到40%以上，其中对肝癌细胞株HepG2的最大抑制率可达到90%以上。中空纤维实验进一步证实丹酚酸B镁盐对于裸鼠体内生长的Hep G2细胞也具有较好的抑制率，其最大抑制率可达到30.11%。

丹酚酸B（500μg/ml）具有抗前列腺肿瘤的作用，其作用从6h左右变得非常明显，台盼蓝拒染实验和MTT结果均显示细胞活力大大减少，P<0.01;流式细胞仪检测到丹酚酸B作用12、24h的BPH1-C5细胞的凋亡率分别高到46.23%和57.87%，在流式细胞图中形成明显的凋亡峰。据此推测，丹酚酸B可能通过诱导前列腺肿瘤细胞的凋亡起到抗肿瘤的作用。

6 其他作用

骨髓基质细胞是一类具有多向分化潜能的组织干细胞，体外培养的骨髓基质细胞已被广泛应用于组织损伤疾病的治疗。取大鼠股骨及胫骨骨干骨髓基质细胞培养，保留贴壁细胞进行传代纯化，一组加入诱导剂(5-氮胞苷)，一组在加入诱导剂基础上加入丹酚酸B，诱导骨髓基质细胞向心肌样细胞转化。结果显示加入丹酚酸B组与未诱导组及加入5-氮胞苷诱 导组比较，长方形及多角形细胞增多，细胞凋亡数量减少，证明丹酚酸B能促进体外诱导骨髓基质细胞向心肌样细胞转化，可作为细胞外科的一种良好细胞 来源，为细胞性心肌成形术探索一条新的途径。

影响钠钾ATP酶、H+、K+-ATP酶活性

此外，丹酚酸B镁盐还可用于预防或治疗肾炎、 肾衰竭、脉管炎、静脉栓塞、老年性痴呆疾病、抗衰老、影响钠钾ATP酶、H+、K+-ATP酶活性等 。

【临床应用】本品具有活血化瘀，通经活络之功效，主治因瘀血阻滞经络所致缺血性中风，症见半身肢体麻木，虚弱无力，拘挛疼痛，或运动不遂，口眼歪斜等。

【贮藏】 密闭，在阴凉干燥处保存。

【有效期】二年。

㈧ 丹参酮IIA(急讯)

我也做过这实验，从丹参里面提取丹参酮IIA，因为是醇溶性的，所以用乙醇回流1个小时就可以了，丹参最好磨粉，然后用索氏提取器，蛇型冷凝管，一定要叠滤纸筒哦，那样的话，提取效果还不错（我自认为），测定就用高效液相法好了~~