1. 请问紫杉醇的检测,一般用什么色谱柱
紫杉醇及其注射液是2010版药典的新增品种，规定在鉴别、相关物质、含量测定等项下均需采用液相色谱法。药典规定的检测方法：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱，检测波长为227nm。
下图为赛分科技的BR-C18 4.6×150mm色谱柱对紫杉醇提取物的分离图谱，从图中可以看出杂质与目标产物紫杉醇得到良好的分离。(无法提供，抱歉）
2. 红豆杉树怎样提取紫杉醇
一、紫杉醇确实是一种对抑制癌症有效果的药物，但是并不是什么灵丹妙药，目前它只能对癌症起到控制的作用，并不能治愈癌症。一般紫杉醇制剂都是配合化疗使用。
二、你家附近有红豆杉，但是那都是野生的，归国家所有。红豆杉属于国家二级保护植物，私自采伐属于违法行为，是要罚款的，严重的还要负刑事责任。如果有研究机构想要研究红豆杉，也是需要向政府部门申请的，并不是你说能提供就提供的。
3. 从红豆杉中提取紫杉醇有哪些方法
当前，人类获得紫杉醇的方法有：1.天然提取. 2.人工合成. 3.半人工合成. 4.生物发酵. 后三种方法大都停留在实验室阶段。
（1） 紫杉醇的生物合成：
紫杉醇的分子式为：C47H51NO14是萜类环状结构的天然次生代谢物。主要由紫杉烷环和侧链组成。研究其生物合成，对于人为定向的提高合成效率及克隆组合，形成关键的酶的基因，提高紫杉醇的产量意义重大。目前的关键是能否找到一两个关键酶的发现，并使得其基因纯化和基因克隆。克隆红豆杉基因能否突破还有待于观察，不过人们已经找到的假想途径，目前这些技术还处在实验室阶段。
（2）.紫杉醇的化学合成
根据研究及报道：从红豆杉植物中分离得到的10---去乙酰浆果赤霉素Ⅲ （巴卡亭Ⅲ），显然活性低于紫杉醇，但可以从红豆杉针叶中提取。该物质经过四步化学过程可合成紫杉醇。为解决紫杉醇新来源途径，取得重大进展。以NICOLAOU博士为首的美国研究小组在1994年报道通过化学方法全合成紫杉醇的结果。但化学合成从实质意义上说还没有取得彻底的突破，目前还不具备应用价值。
（2） 紫杉醇的微生物合成
STTERLE等从短叶红豆杉韧皮部分， 分离得到一种寄生真菌（taxo myces an dreanae）.可以在特定的培养基中产生紫杉醇及相关烃合物，但由于目前产量极低，所以还不能在生产中得到应用。重组DNA技术可望提高紫杉醇的产量。
通过研究还发现：根是除树皮外紫杉醇含量最高的器官。人们利用发根农杆菌（agrobac terium rhizogenes ）浸然红豆杉植物外植体诱导生根。这一办法不需外援激素，发根生长迅速，遗传性状稳定而受到重视。如能把寻找合成紫杉醇或其类似衍生物，从微生物合成途径中，定向得到关键酶和克隆红豆杉相关基因结合起来，可使这一方法得到突破
具第五界北京生物医药发展论坛介绍，从植物中提取紫杉醇的发展过程大体情况是：
从60年代起，抗癌新药的发现主要是从原始植物的代谢产物中寻找，就是目前正在使用的几种抗癌化疗试剂，也不是从高等植物中提取的化合物。
比如：从长春花中分离出的“长春花类生物碱”
从盾叶鬼臼中分离得到的“表鬼臼毒素”类衍生物。
从喜树中分离得到的“喜树碱类衍生物”
以至到现在的从红豆杉中分离得到的“紫杉二帖类”成份等。
提取紫杉醇所需的相关技术和设备：
1. 用红豆杉提取紫杉醇的关健技术及相关资料.
2. 紫杉醇含量的精度测定方法及质量标准及相关资料.
3. 去杂超净设备.
4. 高压液相色谱仪及液相色谱分析拄等。
4. 紫杉醇提炼方法
色层分离提取紫杉醇紫杉醇呈白色结晶粉末，不溶于水，易溶于氯仿、丙酮等有机溶剂，是从红豆杉树中提
取的1种高效、低毒、广谱、作用机制独特的抗癌天然药物，能够治疗卵巢癌、乳腺癌，也可用于治疗肺癌、头颈部癌、食管癌、生殖细胞肿瘤、子宫内膜癌、淋巴瘤及膀胱癌等。
国内多采用硅胶正相层析法，国外多采用大孔吸附树脂或反相层析法。前者因负载纯化量小，纯化步骤多而使生产效率难以提高，且耗费大量溶剂；后者克服了前者的不足，但因大孔吸附树脂或反相填料介质价格昂贵，且易被杂质污染，导致使用寿命很短，再生十分困难，且耗费大量溶剂，很难在大规摸生产中重复使用。
而我国采用的技术利用特殊色层分离介质，不仅回收率提高，且可使得部分非紫杉醇结构物转化为紫杉醇。
该技术具以下优点：
1.分离纯化量大；
2.载体可反复使用，并且有良好的重复性；
3.综合成本降低40%以上；
4.整个生产纯化工序仅2－3步；
5.提高了紫杉醇与其类似物（尤其是三尖杉宁碱）的分离效率；
6.用同样规摸的设施可使紫杉醇的生产量比用其它方法高3－5倍之多。
还有：树皮>根>其他组织含量
1,单纯去杂超净设备
2,高压液相色谱仪及液相色谱分析拄
5. 什么植物中含有紫杉醇即如何提取
红豆杉树的树皮里含有微量的紫杉醇。
从紫杉植物中提取紫杉醇的简化方法
红豆杉Taxus又名紫杉，也称赤柏松，生于海拔1000～1200m处的山地，是世界上公认的濒临灭绝天然珍稀植物，从其根、皮、茎、叶中提取的紫杉醇taxol是目前世界上最有效的抗癌药物之一。全球每年大约需要1500～2500kg紫杉醇，而1 kg树皮仅能提取50～100mg。 10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ又称10-脱乙酰基浆果赤霉素Ⅲ，10-deacetylbaccatinⅢ，10-DABⅢ为有抑制肿瘤作用的紫杉烷二萜类化合物。Bissery等报道，可利用10-DABⅢ合成具有比紫杉醇更高抗癌活性的多烯他赛docetaxel。紫杉醇主要存在于树杆和树皮中，10-DABⅢ主要存在于树叶中，其含量大大高于紫杉醇的含量。 红豆杉是国家珍稀保护植物，生长缓慢，如果直接从红豆杉树皮中提取紫杉醇，不仅资源有限，而且不利于资源保护。以10-DABⅢ为原料采用酶催化半合成工艺方法来制备紫杉醇，可大大简化合成过程，使紫杉醇骨架修饰所需步骤更少，操作更简单，提高了紫杉醇合成的选择性和生产率，进而为在更大规模上进行紫杉醇生产提供了技术支持，最终使紫杉醇的化学合成半合成的产业化有了实现的可能。
目前文献报道从各种紫杉植物中提取紫杉醇的方法，均需经过繁冗的分离过程。本实验采用了一种适合于以各种紫杉植物树叶或树枝做原料，通过极性梯度溶剂萃取的方法逐步脱除大量不相干杂质，得到合成紫杉醇的前体10-DABⅢ的方法，然后通过反相层析柱加成，即可获得抗癌活性成分紫杉醇； 材料与方法 1 材料与仪器
南方红豆杉Taxus mairei枝叶取自浙江宁海红豆杉种植基地，8年树龄。10-DABⅢ对照品为Sigma公司产品，纯度98％；所用甲醇；乙醇、乙酸乙酯、乙酸丁酯、二氯甲烷、氯仿、正己烷、石油醚、乙腈等均为分析纯试剂。JJ一1精密增力电动搅拌仪，江苏金坛市江南仪器厂；SENCO R一201旋转蒸发仪，上海申顺生物科技有限公司；玻璃硅胶柱为2cm×40cm，杭州常盛科教器具厂；UV一2802PC／PCS型分光光度计，UNICO上海仪器有限公司；Sigma一3K18低温离心机4℃，转速18000rmin；LabAlliance高效液相色谱仪美国SSI公司。
2 实验方法
取南方红豆杉枝叶研磨成细粉，于燥保存。称取100g红豆杉细粉，45℃烘干，石油醚预处理，5L甲醇冷浸，辅以搅拌，超声40min，反复2次。浸渍液过滤，减压浓缩至100mL。加入75 mL正己烷萃取分液，重复操作2～3次。弃去正己烷层，萃余液旋干溶剂，制成浸膏。加入氯仿与水的混合液1：1反复提取。氯仿层减压浓缩至10～15mL上柱，用硅胶正相色谱柱分离。分段收集洗脱液，紫外监测，收集有效段合并浓缩，在甲醇／水中重结晶。 3 分析测试方法
采用反相高效液相色谱RP―HPLC方法检测。分析柱为Kromasil C18柱250mm×4.6 mm，5μm，流动相为乙腈-水30：70，流速为2.0 mLmin，每次进样体积为10μl，进样间隙用纯乙腈对柱子进行梯度冲洗。紫杉醇最大吸收波长为227nm，检测器测定波长为232nm，温度30℃，相关数据计算均采用峰面积归一化法。
结 果 1 预处理
由于红豆杉枝叶中含有大量蜡质、植物色素诸如叶绿素等低极性杂质，故在提取前应首先加入低极性溶剂如正己烷、石油醚浸泡脱脂，以除去大量存在的此类非极性杂质，简化后续操作。该法可除去红豆杉枝叶中多达72％的极性比10-DABⅢ小且可溶于正己烷的杂质。
2 有机溶剂粗提
目前用于紫杉烷类物质提取的最普通的初级萃取剂是乙醇甲醇和水，Xu等采用的是体积比95：5的甲醇和二氯甲烷的混合物，萃取时间为35~60min；而Hoke等和Powell等都选择的是纯甲醇，所需萃取时间为16～48h。将南方红豆杉枝叶的细粉在45℃烘干，甲醇浸渍，搅拌过夜。在搅拌的不同时间内其提取出的10-DABⅢ的含量。可以看出，有机溶剂粗提时的浸渍搅拌时间应以12h左右为佳。
3 初级萃取
将甲醇萃取液减压旋蒸至干，得浸膏。用10倍体积以甲醇浸膏的量为基准的纯净水分几次全部溶解，因目标产物10-DABⅢ不溶于水，故而形成悬浮液。用石油醚或正己烷反复萃取，因目标产物不溶于非极性溶剂正己烷中，经此可基本去除极性比10-DABⅢ小的杂质。
在大多数情况下，还须对甲醇粗提物进行萃取操作。一般是在初级萃取物中加入二氯甲烷和水的混合物，即液液萃取，该方法可有效除去萃取液中50％质量比的非紫杉烷类物质。但实验发现要严格掌握好甲醇、二氯甲烷、水三者的比例，否则会出现提取不彻底，在两相中均含有目标产物，且还会有乳化现象发生。
本实验中是采用加入氯仿／水的混合溶液 1：1将浸膏完全溶解然后进行液液萃取。操作中 应按照每次向水相中加入4～5倍体积的氯仿来进行，并轻轻振荡分页漏斗，以避免出现严重的乳化现象。因实验中发现二氯甲烷在用碱液和水洗时不可避免严重乳化，造成目标产物损失难以回收，而氯仿因与目标产物极性相匹，对10-DABⅢ的溶解性更高，与水相分层界面明显，可在更大程度上实现目标产物10-DABⅢ与极性水溶性杂质的分离。
4 重结晶
将已检测确认的洗脱液收集，浓缩，制成浸膏。在少量乙腈中重结晶。滤出的残渣再用甲醇／水洗涤2～3次，即可得到10-DABⅢ的晶体，烘干，称重，共计79.16mg。10-DABⅢ纯度达到91％，该步收率可达72％。
由于单一萜类化合物在植物中含量低，需要较多分离步骤才能纯化出来。因此，采用有效的提取方法和缩短分离步骤提高每步的收率是成功的关键。本研究利用萃取和层析方法相结合，使繁琐的分离步骤大为缩减，工艺路线为：红豆杉枝叶采集、粉碎，45℃烘于，石油醚预处理后用甲醇浸渍，同时辅以搅拌、超声。然后过滤，滤液旋蒸以缩小体积，浓缩液用正己烷反复萃取之后再蒸干制成浸膏。浸膏用氯仿／水反复抽提，萃取分液，得到氯仿的抽提物再上柱细分。收集含有10-DABⅢ的洗脱段，旋蒸去除溶剂，适量乙腈溶解，进行重结晶，再用乙醇／水反复洗涤晶体，得到10-DABⅢ的纯品。
本工艺中采用的南方红豆杉树叶中10-DABⅢ的含量经测定为在1‰，得到的紫杉醇合成的前体物10-DABⅢ纯度大于90％，总收率达到7.9％，与文献相比较说明实验采用的原料及分离和纯化工艺都是可行的。但由于本实验目前还处于实验室研究阶段，在重结晶操作环节中尚存在一些问题，如怎样去除残留溶剂对重结晶的影响及晶形的改善等还都需要进一步的研究。
6. 紫杉醇是什么
你好；紫杉醇是由短叶紫杉树皮或者红豆杉树皮提取的抗癌药物，对卵巢癌和乳腺癌有独特的疗效。对肺癌、食道癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌也有不错的疗效，相比于氮芥类和顺铂类而言，其不良反应相对较少。
7. 紫杉醇最新的合成方法
多烯紫杉醇的合成方法。包括如下步骤：将结构通式 (B)所示的化合物与结构通式(C)所示的化合物在溶剂中，在碱的作用下反应，得到带保护基的多烯紫杉醇(D)；(2)在步骤(1)的产物中，加入脱保护剂，脱保护，收集目标产物。本发明的方法，操作过程简便，选择性和收率高，得到的产物中(2’R，3’S)与(2’S，3’R)比例大于90∶1。具有很大的应用价值。
多烯紫杉醇(docetaxel)的合成方法，该方法是以保护的10-去乙酰基浆果赤霉素10-DAB和合成的手性的C-13侧链进行缩合制备而成。该方法简单，反应条件温和，适合于工业化生产。
紫杉醇（Paclitaxel，Taxol）是一种有效的抗肿瘤药物，此药目前是由红豆杉植物的树皮树叶提取的，但含量极低。紫杉醇分子母核四环双萜10－脱乙酰巴卡亭III很容易从常见植物马尾松或粗榧中提取，也可以从紫杉醇提取过程中的副产品中得到。本发明是以10－脱乙酰巴卡亭III为起始材料半合成紫杉醇。即采用合成的侧链前体顺－1－苯基－3－（1－乙氧乙氧基）－4－苯基氮杂环丁－2－酮与10－脱乙酰巴卡亭III衍生物进行缩合制备紫杉醇。所得紫杉醇与来源于红豆杉是紫杉醇化学结构完全一致。
以助人为快乐之本。
8. 紫杉醇是什么
紫杉醇是红豆杉属植物中的一种复杂的次生代谢产物, 也是目前所了解的惟一一种可以促进微管聚合和稳定已聚合微管的药物。同位素示踪表明， 紫杉醇只结合到聚合的微管上， 不与未聚合的微管蛋白二聚体反应。细胞接触紫杉醇后会在细胞内积累大量的微管，这些微管的积累干扰了细胞的各种功能，特别是使细胞分裂停止于有丝分裂期，阻断了细胞的正常分裂。 通过Ⅱ-Ⅲ临床研究，紫杉醇主要适用于卵巢癌和乳腺癌，对肺癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤、脑瘤也都有一定疗效
9. 紫杉醇是从红豆杉属植物中提取的最有效的抗癌制剂之一，目前生产紫杉醇的主要原料是天然生长的红豆杉树皮
（1）形成重组质粒时需要限制酶和DNA连接酶．由于导入目的基因时将氨苄青霉素抗性基因破坏，没有破坏四环素抗性基因，因此培养基中需添加四环素，以便于筛选出导入了目的基因的顶芽细胞，这种培养基为选择性培养基．
（2）利用植物组织培养技术将导入目的基因的红豆衫顶芽离体细胞培养发育为幼苗，其原理为植物细胞的全能性．形成愈伤组织后，由于遗传信息的执行情况不同，经再分化可形成各种组织细胞．
（3）配制的MS培养基在接种前需采用高压蒸汽灭菌进行灭菌处理，避免杂菌在上面迅速生长消耗营养，且有些杂菌会危害培养物的生长．生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，该培养基中还需添加这两种植物激素，添加激素时还需控制好两种激素的浓度和使用顺序及用量比例．
（4）将红豆杉顶芽切段分离成单个的顶芽离体细胞时，常用方法是酶解法，所需酶为果胶酶．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶 四环素 筛选导入了目的基因的顶芽细胞 选择
（2）全能 遗传信息的执行情况不同
（3）高压蒸汽灭菌 生长素和细胞分裂素 浓度和使用顺序及用量比例
（4）果胶酶
10. 紫杉醇的理化性质，特别是化学结构是什么
Taxol (紫杉醇)
紫杉醇系美国布迈施贵宝公司（BMS）从太平洋紫杉树皮中提取分离并开发的一种天然抗肿瘤新药。其作用机制是在细胞分裂时能与细胞微管蛋白结合，使细胞内形成稳定的微管束，以干扰细胞周期的G－2有丝分裂，从而抑制肿瘤细胞的生长。美国1992年来将该药开始应用于卵巢癌的治疗后，又应用于乳腺癌的治疗，收到良好的效果。故有人认为紫杉醇的第一适应症是转移性卵巢癌，而第二适应症是难治性的转移性乳腺癌。
我国是由中国医学科学院药物研究所首先从云南红豆杉树的枝叶中提取分离得到了紫杉醇，经Ⅱ期临床试验证实，国产紫杉醇不但对乳腺癌、卵巢癌有良好的疗效，对其它恶性肿瘤也有一定的效果。本组治疗的9例恶性肿瘤，病人所用紫杉醇均为国产，其中有4例转移性乳腺癌，1例转移性卵巢癌和1例复发的小细胞肺癌，经2－3周期的单药或联合化疗，疗效均PR，显示出该药对转移性乳腺癌等恶性肿瘤的抗肿瘤活性。1994年5月在达拉斯召开的第三十届美国临床肿瘤学会和1994年10月在北京召开的泰素（紫杉醇）化疗中的新进展研讨会，也充分证实了紫杉醇对乳腺癌的治疗作用。会上有作者报告采用135 mg/m2和175 mg/m2两种不同剂量3小时静滴单药治疗乳腺癌，结果前者有效率20％，后者为29％。同时经24小时持续静滴同等剂量紫杉醇对比，发现疗效相似。也有作者报告以200－250 mg/m2剂量持续24小时给药时疗效明显提高，达56％。本组病例1、2、4、5均为乳腺癌术后复发，广泛转移，经予紫素用量在135－150 mg/m2，有单药或联合化疗的，疗效均PR，全部有效，生存期得到明显延长，生存质量得以提高，说明紫素是治疗复发转移性乳腺癌最有效的药物之一。但本组中无一例CR，考虑与复治有关。
紫杉醇与阿霉素或顺铂联合用药，可明显提高疗效已被证实。有作者在紫杉醇3小时滴注联合阿霉素治疗初治的转移性乳腺癌的最佳剂量和最好耐受给药顺序的研究中证实，紫杉醇的最大剂量200 mg/m2静脉注射3小时与固定剂量的阿霉素（60mg/m2）联合使用，有效率达95％，并证明对所有转移部位者有效〔3〕。也有人报告紫杉醇90 mg/m2，顺铂60 mg/m2治疗转移性乳腺癌，16例病人，CR4例，PR11例，有效率94％。本文有4例联合用药，其中一例应用阿霉素（mg/m2），另3例联合PDD（60－80 mg/m2），疗效均达PR，证实联合化疗有效，并减少了紫素的用量，在一定程度上可减轻其毒副反应，并可减轻病人的经济负担。 紫杉醇单药治疗非小细胞肺癌，有效率一般为20－25％，联合用药疗效进一步提高，高者可达56％〔3〕。本组4例肺癌患者中，除1例小细胞肺癌术后复发患者，经紫素联合顺铂化疗有效外，余3例非小细胞肺癌，虽经紫杉醇单药化疗2周期，均无效。其中病例8化疗后病灶增大24％，例9化疗后病灶无变化，仅病例7肺腺癌，骨转移剧痛难忍，化疗后第2天疼痛基本消失，原肺不张不全复张，但缓解期短，待第2周期化疗前，很快重新出现肺叶的完全不张，待第2周期结束，再无复张。但因病例少，尚不能说明紫素对肺癌的治疗效果。
一般认为紫杉醇的剂量限制毒性主要为神经毒性和骨髓抑制，本组中有6例出现肌肉、关节痛或皮肤的麻木感，其关节痛主要表现在下肢，经口服B族维生素和对症处理，约在一周内消失，未见任何后遗效应：本组9例，有7例出现不同程度的骨髓抑制，主要为Ⅱ°抑制，并伴有轻微的心脏毒性（传导阻滞），这与文献报导相符合〔4〕。另外紫杉醇与其它抗肿瘤药相比，较少出现胃肠道反应，我们所治9例病人，仅3例出现Ⅰ°胃肠道反应，而其中2例为联合应用PDD病例，进一步证实紫素所致胃肠道反应较轻。
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