分析染料直接性测试方法

㈠ 直接染料的直接性用什么衡量

直接染料的直接性用燃料的性质来衡量的，因为直接染料的性质就是能在中性和弱碱性介质中加热煮沸，不需媒染剂的帮助，即能染色。直接染料是凭借直接染料与棉纤维之间的氢键和范德华力结合而成，主要应用于纤维、丝绸、棉纺、皮革等行业，同时在造纸等行业也有应用。

㈡ 染料的现行标准

序号 标准号 中文标准名称
1 GB/T2396-2003 分散染料固色率的测定
2 GB/T2397-2003 分散染料提升力的测定
3 GB/T2402-2003 阳离子染料染腈纶时对其他各种织物污染的测定
4 GB/T2383-2003 染料筛分细度的测定
5 GB/T2398-2003 分散染料对棉沾污性能的测定
6 GB/T10663-2003 分散染料移染性的测定
7 GB/T2390-2003 水溶性染料pH值的测定
8 GB/T2399-2003 阳离子染料染色色光和强度的测定
9 GB/T4465-2003 碱性染料染色色光和强度的测定
10 GB/T1866-2003 中性染料染色色光和强度的测定
11 GB/T2375-2003 直接染料染色色光和强度的测定
12 GB/T2376-2003 硫化染料染色色光和强度的测定
13 GB/T2378-2003 酸性染料染色色光和强度的测定
14 GB/T2379-2003 酸性络合染料染色色光和强度的测定
15 GB/T2380-2003 媒介染料染色色光和强度的测定
16 GB/T17520-1998 在电解质存在下反应染料溶解度和溶液稳定性的测定
17 GB/T3671.1-1996 水溶性染料溶解度和溶液稳定性的测定
18 GB/T3671.2-1996 水溶性染料冷水溶解度的测定
19 GB19601-2004 染料产品中23种有害芳香胺的限量及测定
20 GB/T19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法
21 GB/T19942-2005 皮革和毛皮化学试验禁用偶氮染料的测定
22 GB/T6686-2006 染料分类
23 GB/T20383-2006 纺织品致敏性分散染料的测定
24 GB/T6687-2006 染料名词术语
25 GB/T20382-2006 纺织品致癌染料的测定
26 GB/T4841.3-2006 染料染色标准深度色卡2/1、1/3、1/6、1/12、1/25
27 GB/T17592-2006 纺织品禁用偶氮染料的测定
28 GB/T2392-2006 染料热稳定性的测定
29 GB/T2391-2006 反应染料固色率的测定
30 GB/T4841.2-2006 染料染色标准深度色卡藏青和黑色
31 GB/T2394-2006 分散染料色光和强度的测定
32 GB/T2381-2006 染料及染料中间体不溶物质含量的测定
33 GB/T2401-2006 阳离子染料染腈纶时纤维饱和值、染料饱和值及饱和因数的测定
34 GB/T4841.1-2006 染料染色标准深度色卡1/1
35 GB/T9339-2006 反应染料染料与纤维素纤维结合键耐酸耐碱性的测定
36 GB/T4469-2006 还原染料还原速率的测定汽蒸法
37 GB/T2389-2006 反应染料水解染料与标准样品相对含量的测定
38 GB/T1639-2006 可溶性还原染料溶解度的测定
39 GB/T1637-2006 可溶性还原染料色光和强度的测定
40 GB/T2387-2006 反应染料色光和强度的测定
41 GB/T2400-2006 阳离子染料染腈纶时配伍指数的测定
42 GB/T2403-2006 阳离子染料染腈纶时染浴pH 适应范围的测定
43 GB/T2386-2006 染料及染料中间体水分的测定
44 GB/T4467-2006 染料悬浮液分散稳定性的测定
45 GB/T2377-2006 还原染料色光和强度的测定
46 GB/T4464-2006 染料泳移性的测定
47 GB20814-2006 染料产品中10种重金属元素的限量及测定
48 GB/T3899.2-2007 纺织品用染料产品命名标准色卡
49 GB/T2374-2007 染料染色测定的一般条件规定
50 GB/T5540-2007 分散染料分散性能的测定双层滤纸过滤法
51 GB/T3899.1-2007 纺织品用染料产品命名原则
52 GB/T2385-2007 染料中间体结晶点的测定通用方法
53 GB/T5541-2007 分散染料高温分散稳定性的测定双层滤纸过滤法
54 GB/T5542-2007 染料大颗粒的测定单层滤布过滤法
55 GB/T2384-2007 染料中间体熔点范围测定通用方法
56 GB/T2382-2007 硫化染料游离硫磺含量的测定
57 GB/T12680-2008 醇溶染料一般性能的测定
58 GB/T21881-2008 酸性染料匀染性的测定
59 GB/T21876-2008 溶剂染料及染料中间体灰分的测定
60 GB/T21880-2008 酸性染料移染性的测定
61 GB/T9291-2008 表面活性剂高温条件下分散染料染聚酯织物时匀染剂的抑染作用测试法
62 GB/T21877-2008 染料及染料中间体堆积密度的测定
63 GB/T21882-2008 液体染料黏度的测定
64 GB/T21878-2008 水溶性硫化染料分光强度的测定
65 GB/T21879-2008 水溶性染料溶解度的测定点滤纸法
66 GB/T21875-2008 染料提升力的测定
67 GB/T6688-2008 染料相对强度和色差的测定仪器法
68 GB/T23345-2009 纺织品分散黄23和分散橙149染料的测定
69 GB/T23496-2009 食品中禁用物质的检测碱性橙染料高效液相色谱法
70 GB/T6693-2009 染料粉尘飞扬性的测定
71 GB/T9337-2009 分散染料高温染色上色率的测定
72 GB/T24164-2009 染料产品中多氯苯的测定
73 GB/T24165-2009 染料产品中多氯联苯的测定
74 GB/T23973-2009 染料产品中甲醛的测定
75 GB/T23975-2009 染料及颜料产品中四氯苯酐的测定
76 GB/T23977-2009 染料含盐量的测定电导率法
77 GB/T23978-2009 液体染料氯离子含量的测定离子色谱法
78 GB/T23980-2009 直接染料拔染性的测定
79 GB/T24101-2009 染料产品中4-氨基偶氮苯的限量及测定
80 GB/T24167-2009 染料产品中氯化甲苯的测定
81 GB/T2-2009 染料及染料中间体产品检验规则
82 GB/T24103-2009 染料中间体产品标志、标签、包装、运输、贮存通则
83 GB/T24166-2009 染料产品中含氯苯酚的测定
84 GB/T23974-2009 染料产品中邻苯基苯酚的测定
85 GB/T23976.2-2009 染料上染速率曲线的测定色深值测定法
86 GB/T23976.1-2009 染料上染速率曲线的测定上色率测定法
87 GB/T25248-2010 830nm数字制版材料用红外吸收菁染料含量的测定高效液相色谱法
88 GB/T25810-2010 染料产品标志、标签、包装、运输和贮存的基本规定
89 GB/T25811-2010 染料试验用标准漂白涤纶布
90 GB/T25812-2010 染料试验用标准漂白棉布
91 GB/T25813-2010 染料试验用标准漂白棉线
92 GB/T27594-2011 分散染料原染料相对强度的测定分光光度法
93 GB/T27596-2011 染料颗粒细度的测定显微镜法
94 GB/T27597-2011 染料扩散性能的测定
95 GB/T27592-2011 反应染料轧染固色率的测定
96 GB/T17592-2011 纺织品禁用偶氮染料的测定
97 GB/T9292-2012 104 GB/T9292-1988表面活性剂高温条件下分散染料染聚酯织物用匀染剂的移染性测试法
98 GB/T2398-2012 分散染料对棉沾色性能的测定
99 GB/T2397-2012 分散染料提升力的测定
100 GB/T4465-2012 碱性染料色光和强度的测定
101 GB/T2378-2012 酸性染料染色色光和强度的测定
102 GB/T2402-2012 阳离子染料染腈纶时对其他各种织物沾色的测定
103 GB/T1866-2012 中性染料染色色光和强度的测定

㈢ 片段比较短用染料法pcr怎么检测

• 总的说来，荧光检测技术可大致分为两大类：通用型的荧光染料检测法和高特异性的荧光探针法。

• 前者主要是利用荧光染料(如SYBR Green I)与双链DNA分子结合发光的特性来指示扩增产物的增加，优点是：无需另外设计荧光探针 ，无需特别优化条件，简便易行，成本较低，能适用于任何一款定量 PCR 仪，缺点是专一性不如探针法；

• 而后者则利用荧光标记的特异性探针或者引物来识别模版，优点是特异性更高，适用于扩增序列专一检测(见下表)，不过增加了荧光探针的成本。

• 除了以上这些，还有双探针系统(bi-probe system)、BODIPY FL标记探针、Light- up探针、iFRET(inced fluorescence resonance energy transfer) 技术、Qzyme 探针和Magiprobe等等。

• 这么多种荧光标记方法，在选择的时候当然要根据各人实验设备、实验目的以及实验要求，还有经费来判断了。

• 荧光染料

• 对于专一性要求不高的实验，或者是大规模高通量的实验，使用方便、花费较小的荧光染料可以作为你初步的选择对象。老实说，荧光染料法实质上无非就是常规的PCR反应中添加了荧光染料，借助染料和双链DNA的结合所发出的荧光实时监控反应的进程。由于不需要设计序列特异性探针和优化反应条件，价格低廉，通用性强，而且荧光染料法可用于任何一种型号的定量PCR仪，因而同样得到广泛采用。荧光染料法的专一性和PCR没有本质的区别---但是作为“失之毫厘，谬之千里”高度精确的实验，你依然可以选择更好的荧光染料、更严谨专一的PCR酶、更好的缓冲体系来提高反应的可靠程度。

• 在荧光染料法的定量PCR反应试剂中，最常用的是SYBR Green I，这种高灵敏度，较低毒性的核酸染料最大激发波长497nm，最大发射波长是520nm，在结合双链DNA分子后荧光增强800-1000倍，灵敏度较EB更高，毒性较EB低，可避免EB对于小分子量DNA灵敏度较低，而在监测大分子量DNA区域可能会出现背景色等等弱点，因此经过时间的筛选渐渐成为了定量PCR荧光染料的“当家花旦”。

• 在PCR反应体系中，加入过量SYBR Green I荧光染料，SYBR荧光染料掺入DNA双链后荧光信号显着增强；当DNA变性时SYBR Green I染料释放出来，荧光急剧减少；随后在聚合延伸过程中引物退火并形成PCR产物，SYBR Green染料与双链产物结合，经检测获得荧光的净增量。荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。

• 荧光染料可以在反应末尾对扩增产物进行溶解，称为溶解曲线分析。在溶解曲线分析过程中，随着温度从低于产物溶解点缓慢升到高于产物溶解点，定量PCR仪连续监测每个样品的荧光值。基于产物长度和G/C含量的不同，扩增产物会在不同的温度点解链。随着产物的解链就可以看到荧光值的降低并被仪器所测量。对溶解曲线进行微分可以计算出溶解峰。溶解峰可以反映反应中扩增到的产物，因此用溶解曲线数据就可以进行定量监督了。

• SYBR的主要优势：

• 安全性：SYBR染料的致突变性远低于EB数倍甚至数十倍(取决于不同受检物种或株系)

• 超高灵敏度：具有1000倍以上的荧光增强效果和0.6的量子产量；与此相比，EB只有大约30倍的荧光增强效果和0.15的量子产量。因此，SYBR Gold检测核酸的灵敏度是EB的十倍以上。(这主要是因为SYBRGreen是和DNA小沟结合，而EB则是嵌入到碱基之间)

• 使用电泳后染色程序可提高灵敏度，而渗透入凝胶的速度极快。

• 通用性：可在各种类型的凝胶如高浓度琼脂糖、乙二醛琼脂糖、甲酰胺琼脂糖、聚丙烯酰胺和尿素-聚丙烯酰胺凝胶中检测双链DNA。

• 简便易用：只须将凝胶在染色液中保温10-40分钟(取决于凝胶的厚度和浓度)，无须脱色，背景极低。

• 与其他分子生物学技术兼容：对酶切、连接和PCR反应都没有影响。

• 与常规仪器兼容：可用300-495nm的任何类型的光源激发。

• 适合高通量大规模的定量PCR检测。

• 使用浓度对荧光PCR结果的影响：

• SYBR Green I 的使用浓度是影响实验成功与否的关键因素，如果SYBR Green I的浓度不饱和会使荧光信号不能反应产物量的变化。而过高浓度则会抑制PCR反应，降低PCR反应效率。通常试剂盒会有比较现成的方案。提高镁离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时， 镁离子浓度要比无SYBR Green I 的普通 PCR 反应要高(0.5-2mM)。

• 缺点：

• 然而虽然SYBR Green荧光染料可以用来监测各种双链DNA序列的扩增，灵活性高是它的优点，但是正如一个硬币有两面，通用性高就意味着专一性低，由于荧光染料可以和任何双链DNA结合，因此DNA引物二聚体(primer-dimers)或其它非特异扩增产物(spurious PCR)可以对定量结果产生干扰(导致低Ct值)，同时也降低了反应的专一性和可重复性---而这一点对于定量PCR分析十分重要。

• 舍不得SYBR Green I的方便、通用、便宜的优点，又希望提高其专一性。

• 许多人做了不少尝试：比如仔细的设计引物和纯化模板、比如使用能分析产物熔解曲线的软件可以解决引物二聚体的问题选择，还有就是采用严格热启动的扩增酶减少非特异扩增、采用特定的缓冲系统减少引物二聚体和错配形成、采用修饰碱基减少二级结构或者改变稳定性、在Tm值以上进行荧光测定减少引物二聚体的影响等等。

• 提高PCR的特异性已经是老大难问题了，对于贪图方便、便宜的实验新手来说不一定能考虑周全，这也就是为什么许多希望能通过在普通PCR基础上摸索条件，自己完成定量PCR检测的研究人员发现结果不理想的主要原因之一。

• 因此，不少生物技术公司针对荧光染料特异性缺点使出了各家的法宝，提出了有建设性和有新意的解决方案也让这个荧光检测技术继续焕发光彩。

• 染料法引物设计

• 最后，师兄（师兄微信号：shixiongcoming）再跟大家简单聊下染料法的引物设计。

• 首先，有人会问：“探针法和染料法的引物能不能通用啊 ”，师兄想说的是，一般探针和染料法的引物设计原则上还是有差异的。

• 探针法的引物设计对于引物二聚体的要求没有染料法严格。我曾经自己是试过，用我探针的引物去做染料法的，但是条件必须要优化才能避免二聚体的生成。不过优化后的结果还是不错的。

• 但是，如果你拿染料法的引物，去做探针就会有问题了，第一是扩增长度会出现问题，第二是否在探针所在的区间等等，所以建议单独设计。

• 
  

㈣ 染料需要测试些什么

1、染料质量标准中一般规定有：
外观、强度、色光、水不溶物、细度。部分染料还有日晒牢度、分散性等。
2、在现实生产、贸易和使用时一般只检验强度和色光。
3、不同染料有不同的检验标准，如：GB/T2374;染料染色一般条件规定。GB/T2375;直接染料染色色光和强度的测定方法。GB/T2383染料筛分细度的测定方法。等等。
QQ:849276162

㈤ 染料的直接性和亲和力有什么区别

染料的直接性是指在一定条件下,染料被纤维吸附的能力。一般以平衡上染率表示。直接性不是热力学参数,它随染料浓度、浴比、温度、压力、电解质和助剂等因素而变化,只能相对地表示在一定条件下染料被纤维吸附的能力。 亲和力表示染料从染液(或其他介质)中被纤维吸附能力的热力学参数。标准染色亲和力等于纤维素纤维上染料标准化学位和染浴中染料标准化学位之差的负值。亲和力高,表示达到染色平衡后,染料在纤维与染浴间的分配率高,它取决于染料和纤维的性质,而与染料浓度、浴比等因素无关。亲和力的单位是J/mol。

㈥ 根据被测叁数获得方式的不同，直接测量有哪几种方法

维生素C不同的测定方法

目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法如荧光法、2，6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果.

为了解国内VC含量测定方法及其应用方面的现状及发展态势.方法以"维生素C或抗坏血酸和测定"为检索词对1994～2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)中的理工A、B和医卫生专辑进行篇名检索,对所得有关维生素C含量测定的文献数据分别以年代、作者区域、载刊等级、样品类型、测定方法等进行计量分析.结果核心期刊载刊文献占文献总量的45.06％,其中光度法占65.69％,电化法占18.63％,色谱法占12.75％;复杂被测样品文献占文献总量的45.06％,其中光度法占60.92％,色谱法占19.54％,电化法占10.34％.结论目前国内维生素C含量测定仍以光度法为主流,但近年来色谱法,特别是HPLC法上升趋势尤为明显.

一．荧光法

1．原理

样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。

脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022 g/ml。

2．适用范围

本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定

3. 注意事项

3.1 大多数植物组织内含有一种能破坏抗坏血酸的氧化酶，因此，抗坏血酸的测定应采用新鲜样品并尽快用偏磷酸-醋酸提取液将样品制成匀浆以保存维生C。

3.2 某些果胶含量高的样品不易过滤，可采用抽滤的方法，也可先离心，再取上清液过滤。

3.3活性炭可将抗坏血酸氧化为脱氢抗坏血酸，但它也有吸附抗坏血酸的作用，故活性炭用量应适当与准确，所以，应用天平称量。我们的实验结果证明，用2g活性炭能使测定样品中还原型抗坏血酸完全氧化为脱氢型，其吸附影响不明显。

二、2，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC）

1、原理：

还原型抗坏血酸还原染料2，6-二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。本法用于测定还原型抗坏血酸，总抗坏血酸的量常用2，4-二硝基苯肼法和荧光分光光度法测定。

2、注意事项

⑴ 所有试剂的配制最好都用重蒸馏水；

⑵ 滴定时，可同时吸二个样品。一个滴定，另一个作为观察颜色变化的参考；

⑶ 样品进入实验室后，应浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，损失维生素C；

⑷ 贮存过久的罐头食品，可能含有大量的低铁离子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。这时如用草酸，低铁离子可以还原2，6-二氯靛酚，使测定数字增高，使用醋酸可以避免这种情况的发生；

⑸ 整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化；

⑹ 在处理各种样品时，如遇有泡沫产生，可加入数滴辛醇消除；

⑺ 测定样液时，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。

3优点：它具有简便、快速、比较准确等优点，适用于许多不同类型样品的分析。缺点是不能直接测定样品中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸的含量，易受其他还原物质的干扰。如果样品中含有色素类物质，将给滴定终点的观察造成困难。在酸性环境中，抗坏血酸（还原型）能将染料2,6—DCIP还原成无色的还原型2,6—DCIP，而抗坏血酸则被氧化成脱氢抗坏血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或碱性溶液中呈蓝色，但在酸性溶液中则呈粉红色。因此，当用2,6—DICP滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，在抗坏血酸未被全部氧化前，滴下的2,6—DCIP 立即被还原成无色，一旦溶液中的抗坏血酸全部被氧化时，则滴下微量过剩的2,6—DCIP 便立即使溶液显示淡粉红色或微红色，此时即为滴定终点，表示溶液中的抗坏血酸刚刚全部被氧化。依据滴定时2,6—DCIP 标准溶液的消耗量 (ml)，可以计算出被测样品中抗坏血酸的含量。氧化型2,6—DCIP与还原型抗坏血酸常在稀草酸或偏磷酸溶液中进行反应。即先将样品溶于一定浓度的酸性溶液中或经抽提后，再用2,6—DCIP标准溶液滴定至终点。

食物和生物材料中常含有其他还原物质，其中有些还原物质可使2,6—DCIP还原脱色。为了消除这些还原物质对定量测定的干扰，可用抗坏血酸氧化酶处理，破坏样品中还原型抗坏血酸后，再用2,6—DCIP 滴定样品中其他还原物质。然后从滴定未经酶处理样品时2,6—DCIP标准溶液的总消耗量中，减去滴定非抗坏血酸还原物质2,6—DCIP 标准溶液的消耗量，即为滴定抗坏血酸实际所消耗的2,6—DCIP标准溶液的体积，由此可以计算出样品中抗坏血酸的含量。另外，还可利用抗坏血酸和其他还原物质与2,6—DCIP反应速度的差别，并通过控制样品溶液在pH1 — 3 范围内，进行快速滴定，可以消除或减少其他还原物质的作用，一般在这样的条件下，干扰物质与2,6—DCIP的反应是很慢的或受到抑制。生物体液（如血液、尿等）中的抗坏血酸的测定比较困难，因为这些样品中抗坏血酸的含量很低，并且存在许多还原物质的干扰，同时还必须预先进行脱蛋白处理。在生物体液中含有巯其、亚硫酸盐及硫代硫酸盐等物质，它们都能与DCIP反应，但反应速度比抗坏血酸慢得多。样品中巯基物质对定量测定的干扰，通常可以藉加入对—氯汞苯甲酸(简称PCMB)而得到消除。

三、2，4-二硝基苯肼法

1．原理

总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。

2．适用范围

本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。

这是脎比色法，单独评价是因为目前它作为Vc测定的国标法之一，是一种全量测定法，它跟以前的苯肼法原理相近。首先将样品中的还原型V氧化为脱氢型V，然后与2，4—二硝基苯肼作用，生成红色的脎，将脎溶于硫酸后进行比色。最近国标中该法强调空白，每个样品及标准系列均需作对应空白，这样消除色泽、背景不一的误差。在实际杨梅汁Vc测定中，操作时间长，操作要求较严格，试剂较多，就一般实验室而言是目前可以采用的方法。

四 碘量法

1、维生素C的原理

维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种。当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子。随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。

2、注意事项

（1）看到红棕色出现时要放慢滴定的速度。

（2）以显蓝色在30s内不褪色为滴定终点。

五L-抗坏血酸(维生素C)测定试剂盒（酶学方法）

1. 应用于食品，饮料及生物制品检测

2.比色方法

此方法用于检测水果和蔬菜（如马铃薯），水果和蔬菜产品（如西红柿酱、泡菜、果酱、果汁），婴儿食品，啤酒，饮料，流食，粉状和烘烤剂，肉产品，奶制品，葡萄酒，还有动物饲料，医品（如维生素配制、阵痛、退烧）和生物样品中的L-抗坏血酸(维生素C)，

3.分析物

L-抗坏血酸不定量的分布于动物和植物中。人类不能自身生产L-抗坏血酸，因此必须由外源(vitamin C)提供。一般情况下来源于水果和蔬菜中，出于技术原因，L-抗坏血酸曾被用于食品工业中的抗氧化剂。它是一种相对敏感的物质，L-抗坏血酸的检测非常适用于从原始水果和蔬菜中加工食品的质量评定。

L-抗坏血酸用于医品生产中的组成部分，如维生素产品和阵痛，另外，它还用于动物饲料添加剂中。

4.原理

L-抗坏血酸 (x-H2) + MTT+ PMS—> dehydroascorbate (x) + MTT-formazan + H+X

L-抗坏血酸 + ? O2 AAO——> dehydroascorbate + H2OX

5.特异性

在给定的条件下，此方法特别针对于L-抗坏血酸。合成的D-阿拉伯抗坏血酸/阿拉伯糖型抗坏血酸能作为抗氧化剂，也能反应，但反应速度较慢。

6.灵敏度

测定灵敏度为0.005个吸光度单位，样品体积为1.600ml，此相当于0.1mg/l样品溶液中的L-抗坏血酸浓度。0.015个吸光度单位的差异能造成0.3 mg/l检测限，样品最大体积为1.600 ml.。

7.线性

测定的线性范围为0.5 ugL-抗坏血酸（0.3mgL-抗坏血酸/l样品溶液体积为1.600ml）到20 ugL-抗坏血酸（0.2gL-抗坏血酸/l样品溶液体积为0.100ml）

8.精密度

在用一个样品做重复实验时，可能会产生0.005-0.010个吸光度单位的差异。标准的相对偏差（变异系数）大约为1-3%。当分析检测数据时，要考虑到L-抗坏血酸的水溶液稳定性较差，尤其是重金属离子或氧存在时。

9.干扰及错误来源

粮食的成分不经常干扰实验。高浓度的酒精和D-山梨酸醇能降低反应速度，大量的亚硫酸盐必须通过添加甲醛来去除。醋酸抑制酶AAO。金属和 亚硫酸盐离子可以导致L-抗坏血酸的自发分解。

10.试剂盒包括内容

1. 磷酸盐/柠檬酸缓冲液 ———— pH值大约3.5；MTT

2.AAO（坑坏血酸-氧化酶）—— 每板约17 U AAO

3. PMS 溶液

六．磷钼蓝分光光度法测定维生素C

基于在一定的反应条件下，维生素C可以定量地将磷钼酸锭还原成磷钼蓝，提出了一种新的测定维生素C的分光光度法。该方法很方便、快速地测定生物、物等试样中的维生素C，准确度和重复性均达到令人满意的程度。

1 适用范围

本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁、二价锡、一价铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐),不适用于深色样品。

2 测定原理

染料2,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性,一是取决于其氧化还原状态,氧化态为深蓝色,还原态变为无色;二是受其介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在酸性介质中呈浅红色。

用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素 C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。

七.二甲苯－二氯靛酚比色法

1 适用范围

测定深色样品中还原型抗坏血酸。

2 测定原理

用定量的 2,6－二氯靛酚染料与试样中的维生素 C进行氧化还原反应,多余的染料在酸性环境中呈红色,用二甲苯萃取后比色,在一定范围内,吸光度与染料浓度呈线性相关,收剩余染料浓度用差减法计算维生素 C含量。

八.近红外漫反射光谱分析法(NIRDRSA)

自1965年首次应用于复杂农业样品分析后，因其具 有样品处理简单、分析速度快等优点，逐渐受到分析界的重视。此法已广泛应用于石油、纺 织、农业、食品、物分析等领域[1，2]。在物分析中，NIRDRSA可以进行定性 鉴别、定量分析等工作。

维生素C是一种不稳定的二烯醇化合物，其典[3]含量测定方法为碘量法。我 们采用近红外漫反射光谱技术直接测定维生素C含量，样品无需预处理，方法简便，结果可 靠。

这是因为，近红外谱区光的频率与有机分子中C-H，O-H，N-H等振动的合频与各级倍频的 频率一致，因此通过有机物的近红外光谱可以取得分子中C-H，O-H，N-H的特征振动信息 。由于近红外光谱的谱带较宽，谱图重叠严重，不能用特征峰等简单方法分析，需要运用计 算机技术与化学计量学方法。本实验应用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，首先利用 定标集建立预测模型，然后将预测集作为未知样本，根据预测模型进行预测。

对所选择的谱区范围，采用对反射吸光度的MSC(散射校正)预处理，对25个样品进行交叉 验证，即选择一个样品，从校正集中除去该样品对应的光谱和浓度数据，并设光谱主成分数 为1，循环迭代样品数和主成分数，计算预测残差平方和,确定所需主成分数。若主成分选择 过小，会丢失样品信息，过大会造成过度拟合。当主因子为2时，预测残差平方和值最小， 为2.029，故选择主因子数为2，建立最佳PLS校正数学模型。

九 电位滴定法

1. 原理：根据滴定过程中电池电动势的变化来确定反应终点.

Pt为指示电极，甘汞作参比电极

E池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/I-+k(常数)

2.原理(具体来说:)

随着滴定剂的加入，由于发生化学反应，待测离子浓度将不断变化；从而指示电极电位发生相应变化；导致电池电动势发生相应变化；计量点附近离子浓度发生突变；引起电位的突变，因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点。

3.计算式：(与碘量法相同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100%

4.优点：

解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题

用线性电位滴定法分析抗坏血酸,抗坏血酸回收率为99.80％～101.5％,相对标准偏差为0.61％;分析维生素C片中的抗坏血酸,相当标示量为98.90％～100.5％,相对标准偏差不大于0.48％,说明线性电位滴定法分析维生素C片中的抗坏血酸含量是可行的.

十 .分光光度法

1. 原理：

维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸，pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古洛糖酸。脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎

脎在500nm波长有最大吸收

根据样品溶液吸光度，由工作曲线查出VC的浓度，即可求出VC的含量

十一 库仑滴定法

1. 原理：库仑滴定法属于恒电流库仑分析。

是在特定的电解液中，以电极反应产物为滴定剂（电生滴定剂，相当于化学滴定中的标准浓液）与待测物质定量作用，借助指示剂或电位法确定滴定终点。

2.基本依据－－法拉第电解定律：电解时，电极上发身化学反应的物质质量与通过电解池的电量Q成正比

即： m=MQ/zF = MI t /zF

3..化学反应：阴极反应： 2H+2e-=H2 阳极反应： 2I-=I2+2e-

4.终点指示：多种方法

(1)化学指示剂－－I2

(2)电位法

(3)双铂极电流指示法

5.计算式：Wvc=MvcQ/zFm样式中： F--- 法拉第常数（96487C）

Z---电极反应中转移的电子数注意：使电解效率100％

6.优点：

1）无需标准化的试剂溶液，免去了大量的标准物质的准备工作（配制，标定）

2）只需要一个高质量的供电器，计时器，小铂丝电极，且易于实现自动化控制

3）若电流维持一个定值，可大大缩短了电解时间

4）电量容易控制及准确测量；方法灵敏度，准确度较高

5）滴定剂来自电解时的电极产物，可实现容量分析中不易实现的滴定过程，如Cu＋,Br2,Cl2产生后立即与待测物反应。

7.缺点(难点)：

要求电解过程没有副反应和漏电现象，即使电解电极上只进行生成滴定剂的反应，且电流的效率是100％

8.注：电流效率＝i样÷i总＝ i样÷（ i样＋ i容＋i杂）

因为：实际电解过程中存在影响电流效率的因素，如，杂质，溶剂，电极自身在电极上的反应等

十二 紫外快速测定法

原理

维生素C的2，6—二氯酚靛酚容量法，操作步骤较繁琐，而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响。紫外快速测定法，是根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中维生素C的含量。

十三 光电比浊法的原理

原理

在酸性介质中,抗坏铁酸与亚硒酸(H2SeO3)能定量地进行氧化还原反应.1mol的抗铁酸能将2mol的亚硒酸还原成硒.在一定条件下,生成的元素硒在溶液中形成稳定的悬浊液.当抗铁酸的浓度在0-4mg/25-50ml的范围内,该溶液生成的浊度与抗坏铁酸的含量成正比.将试液置分光光度计上测其浊度可以定量地测定抗坏铁酸.

十四荧光分析法的原理

原理

用酸洗活性炭将抗坏铁酸氧化为顺式脱氢抗坏铁酸,然后与邻苯二胺缩合成一种荧光性化合物.样品中其它荧光杂质的干扰可以通过向氧化后的样品中加入硼酸,使脱氢抗坏铁酸形成 硼酸脱氢抗坏铁酸的络合物,它不与邻二苯胺生成荧光化合物.这样可以测定其它荧光杂质的空白荧光强度而加以校正

十五 原子吸收间接测定法

原理

这是最近报导的一种Vc测定法，其原理是在酸性介质中还原型Vc可将Cu2+定量地还原为Cu+并与SCN—反应生成CuSCN沉淀，在高速离心机下有效地分离出沉淀，小心洗涤后再经浓硝酸溶解，用原子吸收法测定铜含量，即可推知样品中维生素C的含量。该法实验仪器较昂贵，主要问题是操作过程中反应完全与否，沉淀物洗涤、离心反复多次，极容易带来误差。该法优点是能不受果蔬自身颜色的干扰，有一定的发展前景。根据试验，发现此法结果偏低，还有待于进一步优化改善。

十六．金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法

本发明公开了一种用金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法。于5mL比色管中，依次加入0．1－2．0mL浓度为95．64μg／mL的HAuCl↓［4］溶液，0．02－0．50mL浓度为1％的柠檬酸三钠溶液，再加入0．001－2．0mL浓度为0．38mg／mL的维生素C溶液，混匀，加二次蒸馏水定容至刻度，再充分混匀，在分光光度计上，于520nm处测定吸收值，同时作空白试验。本发明测定方法简单、快捷，所用仪器价廉，试剂易得

十七 L-半胱氨酸修饰电极测定维生素C的方法

研究了L-半胱氨酸修饰电极的制备方法和其电化学行为，并用于维生素C的测定，发现该电极对VC有明显的电催化作用，在pH=10.0的NH4Cl-NH3·H2O缓冲溶液中，VC在L-半胱氨酸修饰电极上产生一灵敏的氧化峰，峰电流与VC的浓度在1.0×10-3~1.0×10-6mol/L的范围内呈良好的线形关系，相关系数为0.9962，其最低检测限可达1.0×10-6mol/L，与紫外光谱法测定的结果一致。

测定维生素C有多种方法，包括采用I2或二氯靛酚（DPI）进行氧化还原滴定。一般来说，滴定法是一种快速、简便、准确的技术，它通过滴定剂和被滴定物质的等当量反应，精确测定被测物质的含量。DPI对于维生素C具有良好的选择性，是一种理想的氧化剂。

十八 梅特勒-托利多仪器法

传统的滴定法是手工滴定，根据指示剂颜色的变化确定终点，通过测量滴定剂的消耗量，计算被测物质的含量。手工滴定有很多不足：手工控制误差较大，计算复杂，针对不同的反应需要特殊指示剂。梅特勒-托利多的自动电位滴定仪解决了这一问题，通过测量滴定反应中电位的变化确定终点，全自动操作、计算，测量快速，结果准确。梅特勒-托利多的滴定仪配有记忆卡包，存储有成熟滴定方法，可方便快速解决实际应用问题，并且稍作改动就能作为新的测定的实验方法。

除此之外，还有双光束剩余染料差减比色法，2_6_二氯靛酚钠动力学分光光度法、聚中性红修饰电极方法、示波溴量法、流动化学发光抑制法、磷钼钨杂多酸作显色剂快速检测方法、溶氧测定装置测定水果蔬菜中抗坏血酸含量的方法等。在此不做介绍。

㈦ 通过分光光度计可以对染料进行哪些方面的测试与分析

大多数染料属于有机物，其中含有一些官能团会对紫外光产生吸收，因此可以使用紫外分光光度计可以对染料进行分析。
（1）定性分析
对染料类型进行大致判断，通过官能团特定波长下紫外吸收峰判断染料含有什么基团，从而确定属于哪一类。
（2）定量分析
物质不同浓度，特定位置吸收峰强度不同，在一定浓度范围内浓度与吸光度成线性关系（即朗伯比尔定律），因此可以测定已知浓度染料得到吸光度，再测量未知浓度同种染料，对比两者吸光度得出染料含量。
（3）动力学分析
测量染料浓度在特定波长下，吸光度随时间变化曲线，再求出反应速率，转化为动力学问题。比如可以用来研究染料的稳定性（一定条件下分解速率）。

㈧ 直接染料的染色原理和方法

直接染料具有磺酸基(-s仇H)或致基(-COON)等水溶性基团分子结构排列成直线型，芳环结构处于同一平面，因此直接染料对纤维素纤维具有较大的亲和力，在中性介质中直接染色，只要把染料溶解干水，便可进行染色。
染料在溶液中被纤维吸附到表面，然后不断向纤维的无定形区扩散，与纤维大分子形成氢键和范德华力的结合。
其派生的染料有直接耐晒染料和直接铜盐染料。

直接染料含有-S03Na、一COONa等水溶性基团，溶解度随温度的升高而显着增大，对于溶解性差的直接染料可以加纯碱助溶。直接染料不耐硬水，大部分能与钙、镁离子结合生成不溶性沉淀，使染色织物产生色斑，因此直接染料必须用软水溶解。生产中染色用水如果硬度偏高，可加入纯碱或六偏磷酸钠，既有利于染料溶解，又有软化水的作用。
直接染料对纤维素纤维的直接性较其他染料高。这主要是由于直接染料的分子量较大，分子结构呈线型，对称性较好，共轭体系长，同平面性好，染料和纤维分子间的范德华力大。同时，直接染料分子中含有氨基、羟基、偶氮基等基团，能与纤维素纤维中的羟基，蛋白质纤维中的羟基、氨基等形成氢键，使染料的直捿[生进一步提高。
直接染料上染纤维素纤维时，盐起促染作用。其促染机理是，直接染料在溶液中离解成色素阴离子上染纤维素纤维，纤维素纤维在水中也带负电荷，染料和纤维之间存在电荷斥力，在染液中加入盐，可降低电荷斥力，提高上染速率和上染百分率。不同的直接染料盐的促染效果是不同的。分子中含磺酸基较多的盐效应直接染料，盐的促染作用显着，促染时盐应分批加入，以保证染料上染均匀。上染百分率低的直接染料需要多加盐，具体用量可根据染料品种和染色深度而定。匀染性要求高的浅色产品应适当减少盐的用量，以免造成局部上染不匀，出现色花等染疵．
温度对不同染料上染性能的影响是不同的。对于上染速率高、扩散性能好的直接染料，在60一70℃得色最深，90℃以上上染率反而下降。这类染料染色时，为缩短染色时间，染色温度采用80一90℃，染色一段时间后，染液温度逐渐降低，染液中的染料继续上染纤维，以提高染料的上染百分率。对于聚集程度高、上染速率慢、扩散性能差的直接染料，提高温度可以加快染料扩散，提高上染速率，并促使染液中的染料吸尽，提高上染百分率。在常规染色时间内，得到最高上染百分率的温度称为最高上染温度。根据最高上染温度的不同，生产上常把直接染料分成最高上染温度在70℃以下的低温染料，最高上染温度在70一80℃的中温染料和最高上染温度在90一100℃的高温染料。在生产实践中，棉和粘胶纤维针织物通常在95℃左右染色，真丝针织物的染色温度较低，因为过高的温度有损纤维光泽，其最佳染色温度为60一90℃。适当降低染色温度，延长染色时间对生产有利。

加点分好不？

㈨ 如何判断染料溶解的快慢，具体方法

染料的溶解化料方法 根据染料的性质不同，溶解的方法不同： 1、直接染料：染料的耐热稳定性相对较好，直接染料可加入纯碱软水助溶，化料时先用冷软水将染料调成浆状，再冲沸软水搅拌溶解，加热水稀释，冷却后加水至规定液量。 2、活性染料 ：该类染料不耐热，高温易水解，宜采用冷软水调成浆状，再根据不同染料的水解稳定性采用合适温度的软水溶解，加热软水稀释，冷却后加软水至规定液量。 低温型（X型）用冷水或30—35℃温水 高温型（K型）用70—80℃热水 中温型（KN、M型）用60—70℃热水 溶解度小的用90 ℃热水 3、还原染料 ：还原染料的溶解过程是一还原反应过程，溶解时，要根据所用还原剂的还原条件来确定溶解的温度。如还原染料常用的还原剂是保险粉，在溶液中的最佳使用温度为60℃，温度过高会导致保险粉大量的分解。 （1）全浴法：染料放入染杯，先后加红油和少量温软水调匀，然后加入规定量的烧碱和保险粉，再加软水至所需浴量，在55℃下还原。 （2）干缸法：染料放入染杯，先后加红油和少量温软水调匀，然后加烧碱和保险粉用量的三分之二，使染液量为总量的三分之一，要根据所用还原剂的还原条件来确定溶解的温度。将剩余的烧碱、保险粉加入染杯，并加软水至所需浴量。 4、硫化染料：准确称取所需量的染料于烧杯中，用冷软水调成浆状，然后加入事先已溶解好的硫化钠染液，沸煮10min。加热软水稀释，冷却后加软水至规定液量。 5、分散染料 ：温度过高分散染料易结晶析出。化料时宜先用冷软水调浆，再用40℃以下冷软水化料，加软水至规定液量。 6、酸性染料：染料的耐热稳定性相对较好，酸性染料化料时先用冷软水将染料调成浆状，再冲沸软水搅拌溶解，加热软水稀释，冷却后加软水至规定液量。 7、阳离子染料 ：染料的耐热稳定性相对较好，化料时先用浓醋酸（助溶）将染料调成浆状，再冲沸软水搅拌溶解，加热水稀释，冷却后加软水至规定液量。

㈩ 化学检测的方法有哪些

化学检测的方法有哪些
一般分有机颜料,如酞青绿等；无机颜料如氧化铁红、钛白；染料如还原桃红、分散橙等.聚烯烃、PVC色母粒采用的是颜料,一般说染料不可用于聚烯烃着色,否则会引起严重迁移.
二、分散剂主要对颜料表面进行润湿,有利于颜料进一步分散,并稳定在树脂中,同时必须与树脂相容性好,不影响着色产品品质.聚烯烃色母粒分散剂一般采用低分子量聚乙烯蜡或硬酯酸锌等.工程塑料色母粒分散剂一般采用有极性低分子量聚乙烯蜡、硬酯酸镁、硬酯酸钙等.三、载体树脂
使颜料均匀分布并使色母粒呈颗粒状.选择载体需考虑与被着色树脂的相容性,还要考虑母粒应有良好分散性,因此载体的流动性应大于被着色树脂,同时被着色后不影响产品质量.如选用熔体指数较大的同类高聚物,使母粒的熔体指数较高于被着高聚物,以保证最终制品的色泽一致.