正反向遗传学的研究方法

㈠ 正向遗传学和反向遗传学各指什么 举些例子

正向遗传学是指从一个突变体的表型入手,寻找是哪个基因控制这个突变.
反向遗传学是从一个基因入手,研究它的功能

㈡ 正反向遗传学的研究技术及优缺点

正向遗传学是指，通过生物个体或细胞的基因组的自发突变或人工诱变，寻找相关的表型或性状改变，然后从这些特定性状变化的个体或细胞中找到对应的突变基因，并揭示其功能。例如遗传病基因的克隆。
反向遗传学的原理正好相反，人们首先是改变某个特定的基因或蛋白质，然后再去寻找有关的表型变化。例如基因剔除技术或转基因研究。
简单地说，正向遗传学是从表型变化研究基因变化，反向遗传学则是从基因变化研究表型变化。

㈢ 杨金波的研究方向

主要研究方向为肿瘤相关的信号转导与分子机制，重点研究 JAK-STATs 、NFkB等信号转导关键分子到调控机制及其与肿瘤形成的关系、肿瘤耐药性关键分子的发现与分子机制、STATs、NFkB、IRFs 等转录因子的生物学功能、翻译后加工修饰与基因表达调控的分子机制。
与 Case Western Reserve University、Lerner Research Institute、甘肃省计算中心、中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所合作建立了高通量药物筛选平台和重大疾病分子诊断技术平台，项目得到甘肃省科技厅及科技部国际合作项目的连续支持。
目前已经建立了基于 NFkB、STAT3 、p53 与 PPARs 等信号通路为靶点的抗肿瘤、抗动脉粥样硬化药物筛选平台，并将该项技术应用于化学小分子库和中药有效成分的高通量筛选中，用以筛选机理清晰、靶点明确、特异性高的抗肿瘤与动脉粥样硬化的先导化合物与药物。 用插入突变的方法鉴定免疫反应、细胞生长、肿瘤发生及肿瘤耐药性相关的基因与关键分子
研究细胞信号机制的遗传学方法主要分为正向遗传学和反向遗传。正向遗传学方法在细胞中诱导随即突变，而反向遗传学方法通常针对已知基因进行研究，这两种方法在哺乳动物信号转导途径的研究中都起了非常重要的作用。
我们利用已建立的以慢病毒为基础的“插入突变及功能鉴定”载体系统（VBIM, validation-based insertional mutagenesis），用来寻找与筛选与免疫反应、细胞生长、肿瘤发生及肿瘤耐药性相关突变表型的蛋白分子。应用VBIM系统可以用正向遗传学方法筛选并鉴定上述提到表型中的一些重要遗传学变化。VBIM系统可以产生高滴度病毒插入的突变体，这种突变体可以通过Cre重组酶删除插入的启动子序列而发生表型逆转。这样通过插入位点的克隆和测序，把突变表型和插入的特定基因联系起来。
抗免疫异常反应，抗肿瘤及抗动脉粥样硬化药物的高通量筛选
高通量药物筛选 (HTS) 在生物化学相关的药物筛选中非常有效。 如肿瘤，可以被认为是一种遗传疾病，重要基因的突变以及控制体细胞生长的信号的改变通常是肿瘤发生的内因。这些关键基因在细胞将要发生分裂和生长时传递到细胞。NFkB、STAT3 与 p53是其中几个研究得比较清楚的肿瘤相关基因及信号通路。我们通过构建药物筛选系统，比如受NFkB、STAT3或 p53 信号分子控制的萤光素酶或beta-半乳糖苷酶基因的表达，在该信号分子基因组成型激活或失活的细胞中，筛选针对活化的STAT3、NFkB的抑制剂或 p53 的激活剂。同时我们将引入计算机虚拟筛选技术用于辅助设计和优化先导化合物和药物。通过基于计算机的虚拟筛选和基于细胞的实时筛选，从化合物小分子库以及传统中草药中筛选出先导化合物，最终优化和开发成药物。
蛋白质翻译后加工修饰对基因表达调控的影响及分子机制
组蛋白和转录因子的甲基化和乙酰化是常见的翻译后共价修饰。研究表明一些重要的信号转导分子如p53、NFkB和 STAT3 也可以发生类似的翻译后修饰。我们通过液相色谱-质谱 (LC-MS) 联用的方法发现STAT3的140位赖氨酸发生了由组蛋白修饰蛋白SET9介导的甲基化，而且STAT3与该修饰蛋白的作用是信号依赖的。甲基化抑制了STAT3基因转录功能，而K140A 或 K140R位点突变阻止甲基化，极大地增强了STAT3在IL-6应答中对一系列基因的诱导。将来的工作将主要集中在p53、NFkB和 STAT3等转录因子被修饰的位置和时间、被修饰后的功能以及该修饰过程中参与的蛋白因子和辅助因子发现等。

㈣ 反向遗传学，不是很懂，能不能简单概括讲一下

反向遗传学是直接来的遗传学研究方法。反向遗传学则是在获得生物体 基因组全部序列的基础上,通过对靶基因进行必要的加工和修饰,如 定点突变、基因插入\缺失、 基因置换等,再按组成顺序构建含生物体必需元件的修饰基因组,让其装配出具有生命活性的个体,研究生物体基因组的结构与功能,以及这些修饰可能对生物体的表型、性状有何种影响等方面的内容。反向遗传学是相对于经典遗传学而言的。该技术的核心是首先构建RNA病毒的全长cDNA分子，并使之受控于RNA聚合酶启动子，通过体外转录过程再次得到病毒RNA,然后将该转录物RNA转染哺乳动物细胞可拯救到活病毒，由于这种拯救病毒是来自全长cDNA分子，因此可以在DNA水平上对病毒基因组进行各种修饰或改造，然后通过拯救病毒的表性变化来判断这些基因操作的效果，从而达到对病毒基因组表达调控机制,病毒致病的分子机理等进行研究的目的，甚至还可以得到减毒毒株，开发新型的疫苗。

㈤ 如何研究一个未知基因的功能

查查与其同源的基因在其它生物尤其是亲缘关系很近的生物体内有没有已经被证明功能的，或者猜想与什么功能有关的。

寻找突变体（该基因缺失的个体）或者设计序列沉默该基因，然后观察其表型和正常个体有什么差别。

寻找该基因过量表达的个体，观察表型和一般个体的差异，也可以作为一个参考。

这些知识给你的研究提供思路，最后你要克隆得到该基因，在一个该基因缺失的突变体（株）内表达该基因，如果你在该个体内检测到表达并且该个体和一般个体性状差异消失，那么证明该个体是控制此性状的基因（之一）。

㈥ 如何利用正向遗传学和反向遗传学鉴定一个信号通路的新组分

医学遗传学不仅与生物学、生物化学、微生物及免疫学、病理学、药理学、组织胚胎学、卫生学等基础医学密切有关，而且已经渗入各临床学科之中。研究临床各种遗传病的诊断、产前诊断、预防、遗传咨询和治疗的学科称为临床遗传学（clinicalgenetics）。2、研究方向遗传学的研究方向主要有：01人类和医学分子遗传学02微生物分子遗传学03发育遗传学04人类分子或群体遗传学05植物细胞分子遗传学06遗传工程学07基因载体与靶向给药系统08信号转导与基因表达调控(注：各大院校的研究方向有所不同，以复旦大学生命科学学院为例)3、培养目标遗传学的硕士学位获得着应掌握遗传学的基本理论、较系统的专业知识和与研究领域有关的现代技术。了解所研究领域的历史、现状和发展动态以及前沿领域，能灵活运用所掌握的知识从事本专业的科研研究和实际工作。能在研究中较熟练地使用计算机。比较熟练的掌握一门外国语，能阅读专业的外文文献资料。成为具有独立从事遗传学教学、研究和应用能力的高科技人才。

㈦ 如何用反向遗传学方法研究一个基因的功能

这题目够大的，够博士毕业论文了……传统遗传学有两个不同的角度，第一是正向遗传法，从表型入手，先找到与表型相关的基因，然后找它与表型之间的关系，第二种是反向遗传法，从基因入手，要么过量表达该基因看有无表型，要么下调该基因，观察表型以及生理指标，还有蛋白啦，转录，等等等等，晕了，自己想想都头晕了，但是过量表达一般表型不明显，因为很多重要基因在体内都是多拷贝存在的，一般的下调，又不知道下调多少，所以也不能说明问题，最好是“咔嚓”掉这个基因……但是这个有一定难度，也不知道是不是真就“咔嚓”了，哈哈，就是彻底失活了，所以，正向遗传法是比较被认可的了，然后反向做验证。在细胞中的……估计还要更……借个GFP看看定位，做个western看蛋白，做个realtime看转录……………………晕了，去看看N多文献吧是生化细胞所的…？…论述题要看基本功的……多看些文献，看看别人怎么做的，看下基础，有实际操作经验当然最好了。