疏水分析柱的清洗方法

⑴ 如何清洗气相柱中残留物清除

如果不是非常必要，可以通过截取柱子进样口前端半米后进行程序升温老化的方法来解决。

只有柱子的确受到污染，或柱效已经下降到影响正常分析时，再用清洗的方法来解决。

具体清洗方法及要求：毛细管GC色谱柱必须具有键合和交联的固定相才可以使用溶剂进行清洗。使用溶剂清洗非键合的固定相会严重损坏色谱柱。。溶剂清洗装置会连接到有压力的气源（N2或He），并把色谱柱插入到清洗装置中。把溶剂加入样品瓶中，然后使用气源对溶剂瓶加压。压力会强制溶剂流过色谱柱。残留物将溶解到溶剂中，并随溶剂反冲出色谱柱。然后将溶剂吹扫出色谱柱，并对色谱柱进行适当的老化。清洗色谱柱前，从色谱柱的前端将其切去半米（即靠近进样器的一端）。将色谱柱连接检测器的一端插入清洗装置中。通常使用多种溶剂来清洗色谱柱。后面继续使用的溶剂必须要与前一种溶剂互溶。一定不要使用高沸点溶剂，特别是不要用作最后使用的溶剂。溶解样品的溶剂通常是不错的选择。

建议使用甲醇、二氯甲烷和己烷，它们在大多数情况下效果不错。可使用丙酮替代二氯甲烷，以避免使用含氯溶剂，但是二氯甲烷是最好的清洗溶剂之一。如果注射的是水性样品（例如生理体液和组织），则请在使用甲醇以前先使用水来冲洗。某些自于水性样品残留物只能溶于水中而不溶于有机溶剂。应使用水和醇类（例如甲醇、乙醇和异丙醇）来清洗键合的聚乙二醇基固定相（例如DB-WAX、DB-WAXetr、DB-FFAP、HP-Innowax），但一般不建议采用该方法。

象安捷伦就提供了专门的清洗工具。见图片

⑵ 如何反向冲洗液相色谱柱

转载”《分析测试网络网》实用资料！色谱柱冲洗一点意见！！

主要针对的反向色谱柱而讲！

1.色谱柱简介

最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性添充剂，以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用，辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基硅烷键合相和氨基硅烷键合相等)也有使用,正相色谱系统使用极性填充剂，常用的填充剂有硅胶等。离子交换填充剂用于离子交换色谱;凝胶或高分子多孔微球等填充剂用于分子排阻色谱;手性键合填充剂用于对映异构体的拆分分析。

填充剂的性能(如载体的形状、粒径、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、含炭量和键合类型等)以及色谱柱的填充，直接影响待测物的保留行为和分离效果。孔径在15nm(1nm=10埃)以下的填料适合于分析分子量小于 2000的化合物，分子量大于2000的化合物则应选择孔径在30nm以上的填料。以硅胶为载体的一般键合固定相填充剂适用PH2~8的流动相。当PH大于8时，可使载体硅胶溶解;当PH小于2时，与硅胶相连的化学键合相易水解脱落。当色谱系统中需使用PH大于8的流动相时，应选用耐碱的填充剂，如采用高纯硅胶为载体并具有高表面覆盖度的键合硅胶、包裹聚合物填充剂、有机-无机杂化填充剂或非硅胶填充剂等;当需使用PH小于2的流动相时，应选用耐酸的填充剂，如具有大体积侧链能产生空间位阻保护作用的二异丙基或二异丁基取代十八烷基硅烷键合硅胶、有机-无机杂化填充剂等。

2.色谱柱的冲洗体积确定

一般情况都是冲洗色谱柱10-20倍柱体积，具体可以这样计算，根据柱内径和柱长算出色谱柱内体积。短柱一般时间就是30分钟、长柱一般冲洗60分钟就可以了。举例：内经为4.6mm、长250mm，其柱内体积=3.14*4.6*4.6/4*250=4.153毫升，流速是1.0毫升每分钟，折中取15被柱内体积，则冲洗时间就出来了。

3.色谱柱冲洗

冲洗色谱柱最好在分析结束后，用流动相冲洗到基线平稳，然后用10%左右的有机溶剂冲洗色谱柱，主要是冲洗干净流动相中的缓冲盐。然后用100有机溶剂冲洗。最好是梯度变化冲洗。分析物可能为一些能溶解在水中，有些需要用纯溶剂才能完全去除。如果分析时间紧迫一定要把盐分冲洗干净，一般情况不要用纯水冲洗色谱柱，特别是反向柱的填料的键合集团容易折断，对色谱柱造成损伤。色谱柱被使用在某种程度上就是开始被污染了，所以色谱柱的寿命和我们使用的情况有很大的关系。虽然被污染但是对我们分析目标物没有造成影响我们也就是认为还能用。

4.色谱柱维护冲洗

常见故障筛板阻塞，解决办法是：a、过滤流动相;b、过滤样品;c、运用在线过滤或保护柱。

柱头塌陷解决方法是：：a、避免使用PH>8的流动相(针对大部分硅胶的柱子);b、使用保护柱 ;c、使用预柱(饱和色谱柱)。

前面谈到的不管用什么溶剂一定要加入一定比例的用机溶剂，主要是考虑到一些疏水基团在有机溶剂里面容易伸展利于冲洗其包藏的杂质等。当我们的色谱柱在压力和柱效下降时，我可以拆开泵近端柱头的螺丝取出筛板，清洗筛板以及观察里面的填料，如填料污染严重，就要进行挖取一部分被污染的填料然后用其他废弃的柱子相同填料来填补，用新的筛板或清洗好的筛板拧好螺丝。然后冲洗观察柱压变化和测试柱效等。

5.特殊冲洗
强保留物质和大分子化合物在色谱柱中累积，对样品中的化合物产生额外的保留行为，不仅引起峰形变宽、拖尾，使柱效下降，同时也会引起保留时间的变化，累积到一定程度时还会导致柱压升高。由于强保留物质和大分子化合物对色谱分离的影响是一个累积效应，需要一定的时间才会体现出来，但对许多样品特别是复杂样品而言，很难判断其是否含有强保留物质，因此要防止强保留物质的累积，需要在每天的日常维护中用纯甲醇或乙腈清洗色谱柱。

清洗方法：

1.未使用缓冲盐：每天分析完成后，用纯甲醇或纯乙腈反向冲洗色谱柱60min。

2. 使用过缓冲盐：分析完成后，先用上述方法除去缓冲盐，然后再用纯甲醇或乙腈反向冲洗色谱柱 60min。

3.补救方法：

水——乙腈——氯仿(或异丙醇)——乙腈——水

每一步以 1.0ml/min 流速反向冲洗色谱柱 60min。

希望大家提出更好的建议和办法。

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⑶ 色谱柱筛板如何清洗

色谱柱筛板用甲醇超声清洗，拧紧色谱柱，用甲醇低流速冲洗（20倍柱体积），就可以清洗的很干净。

对于色谱柱塌陷部分，找一根废弃的C18柱在出口处拧开，将靠近筛板的填料挖去一部分，再取干净的填料。再将要填修复的色谱柱入口拧开，除去污染的填料，将干净的填料用适宜的工具小心填充到色谱柱头，最好突出一部分），将过滤后的甲醇用微量进样针将填料湿润。

下面我们来了解一下色谱柱的保存方法：

1. 短时间内色谱柱的保存。

如果使用时间间隔不超过四天，则色谱柱无需特别的维护，只需根据最后一次测试使用的流动相或样品的性质，在使用后用纯甲醇、纯水或甲醇与水的混合溶液进行淋洗，直至基线走平约半小时即可。

2. 长时间色谱柱的保存

如色谱柱长时间不用，则最好将其从HPLC仪中取下保存，取下前用合适的溶剂淋洗，洗去不适与保存色谱柱的洗脱液，如C18反相柱可以用纯甲醇或乙腈作为保存的介质，然后用塑料塞头将其塞紧，以免色谱柱内完全干燥。

⑷ 安捷伦高效液相色谱柱的洗柱方法

1、色谱柱清洗要看你的色谱柱是孔径是多少微米，适合的流速是多少。
2、以4.6微米的为例，先用纯水清洗2小时，再用甲醇清洗1小时。用的时候直接换上流动相。

3、高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。

⑸ DIKMA色谱柱 Inertsil ODS-3怎么冲洗才能冲干净

Inertsil ODS-3 不是dikma的色谱柱，而是岛津的色谱柱，冲洗方法和普通C18色谱柱无异，建议你上“色谱世界”网站看看，这个网站在色谱方面非常专业，对你会有很大的帮助。

⑹ 安捷伦高效液相色谱c18柱的洗柱方法

第一、安捷伦的色谱柱有很多种，所以要分清类型去冲洗。
第二、作为普通C18柱，尤其是硅胶基质的普通C18柱，对酸碱盐以及水，都是造成柱子的损坏的流动相构成。水不能过多（除了带AQ的纯水柱，一般各家品牌都有这款防水柱）我个人认为只要超过80%的水的流动相，都会造成C18的寿命缩短。所以做高水相的流动相分析时请注意选合适的柱子。酸对柱子的损伤是不可逆的，一定要控制PH，我个人认为PH在2以下的都要做好费柱子的准备。碱性条件是对于硅胶基质的C18的弱项，一般的硅胶基质的C18碱性条件都不太耐用，但现在也有碱性PH11的柱子，但比较贵。盐对色谱柱的影响主要是盐析造成的，而且是致命。
第三冲洗方法的问题。冲洗方法根据使用的流动相和样品的不同冲洗方法要加以区分。一般不加酸碱盐，水相也不高的情况（如甲醇水60:40），无需太过冲洗，冲洗的目的就是为了把样品的杂质冲出即可。保存流动相保存即可。酸和碱的条件下，原则上是将酸碱冲出色谱柱，保存在甲醇水即可（如60:40比例可根据要使用的流动相，只要水相不高即可）。盐的条件比较麻烦，处理不好，不仅仅色谱柱出问题而且仪器也比较麻烦。常用的就是高水相流动相甲醇-水（10：90）将盐冲出（注意压力），然后用纯甲醇冲洗（这一步是恢复高水相对色谱柱的损伤），最后保存在一般的甲醇水体系即可。
第四点，冲洗的时候注意是压力，最好是从小流速开始慢慢提升流速到压力许可的范围。冲洗的时间，准确的是流量一般色谱柱的冲洗都要达到10-20倍的柱体积。

⑺ 高效液相色谱柱第一次使用时应如何清洗

用水/有机相（10/90～5/95），以0.3-0.6ml/min流速冲洗2h以上，再用100%有机溶剂，以0.3-0.6 ml/min流速冲洗1h以上，最后用100%有机溶剂，以1.0 ml/min流速冲洗1h以上。

⑻ 液相色谱柱应该怎样清洗

1．高效液相色谱柱柱子的清洗

即使样品和流动相已做过前处理，也仍难以完成避免柱子受到污染，因此必须对柱子行清洗。清洗应定期进行，如果在短期内分析许多样品，则以每日清洗一次为宜，至少也应一周一次，防止有太多的杂质在柱上堆积。

反相柱的常规洗涤办法是：分别取甲醇、三氯甲烷、甲醇-水各20倍柱体积（既对于一根4.6mmX25cm的柱来说，通常是50-60ml，而对于9.4mm内经X50cm的柱来说，通常是500-600ml） ，使之通过柱子。然后用流动相平衡（通常仍用20倍柱体积），柱一般将恢复正常。如果选择性仍和以前不一样，则表明还有其他杂质留在柱子里，这时应考虑更加严格的清洗：先用20倍柱体积的水，再用相同体积0.05mol/L硫酸，最后用流动相溶剂。酸洗常能洗下有机溶剂所不能洗下的剩余杂质。在低pH值下做长期（一天或更长）清洗是不适宜的，但50ml洗液以2ml/min的速度清洗25min，一般对健合相没有损害。注意，强碱不能用来清洗任何微粒硅胶柱（不论是健合相还是非健合相），因为硅胶骨架会溶解。对于严重污染的反相柱，只能采用再生的方法。


2．高效液相色谱柱柱头空隙的处理

拆下不锈钢烧结过滤器后，检查柱床，常可见柱头塌陷，此时先剔掉无规则床层和带色填料，使柱床呈白色并完全水平，再使甲醇作糊状填料匀浆液，将填料匀浆液滴在柱上靠重力从匀浆液中排出甲醇液，重复数次，直到水平，完成了柱的再生。此时，如果柱头孔隙深度小于1cm，可以采用下述局部重装的办法，否则，柱应当完全重装或更换。

⑼ 每次使用之后的高效液相色谱柱都要清洗吗，如何冲洗

这个是不是需要清洗的问题，需要看你的流动相是什么。
一般反相色谱，经常会用到缓冲盐。而盐对于色谱柱伤害比较大。如果盐堵在色谱柱里面那柱子就废了。所以需要把它冲掉。最好是每次都冲掉。
如果你的柱子流动相里面没有盐，那就没必要冲洗了。

冲洗方法：反相柱子最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面，但是盐不溶于纯有机相。所以中间过渡甲醇水或者乙腈水。
究竟用什么，要看你的流动相。
比如，我用的是磷酸盐缓冲液-乙腈（70：30）的流动相，那么冲洗的时候最好选用10%-15%乙腈水，冲洗1.0ml/min，至少30min，最好40min。

如果第二天接着使用的话可以不必用纯甲醇或者纯乙腈封存了。如果第二天不用，最好用纯的有机相封上柱子，同样是1.0ml/min流速冲洗30min。

另，也不是说不清洗就会坏。我们研发有的时候为了赶项目，来不及冲洗色谱柱。柱子不会怎么样。就是寿命会短一点而已。