紫外分析方法

㈠ 紫外吸收光谱分析法的定性和定量分析的依据是什么

物质吸收波长范围在200～760nm区间的电磁辐射能而产生的分子吸收光谱称为该物质的紫外可见吸收光谱，利用紫外可见吸收光谱进行物质的定性、定量分析的方法称为紫外可见分光光度法。其光谱是由于分子之中价电子的跃进而产生的，因此这种吸收光谱决定于分子中价电子的分布和结合情况。

其在饲料加工分析领域应用相当广泛，特别是在测定饲料中的铅、铁、铅、铜、锌等离子的含量中的应用。荧光分析也是近年来发展迅速的痕量分析方法，该方法操作简单、快速、灵敏度高、精密度和准确度好，并且线形范围宽，检出限低。

(1)紫外分析方法扩展阅读

紫外光谱

准确测定有机化合物的分子结构，对从分子水平去认识物质世界，推动近代有机化学的发展是十分重要的。采用现代仪器分析方法，可以快速、准确地测定有机化合物的分子结构。在有机化学中应用最广泛的测定分子结构的方法是四大光谱法：紫外光谱、红外光谱、核磁共振和质谱。紫外和可见光谱，简写为UV。

㈡ 紫外分析的原理

1、基础：药物中的双键（尤其是共轭双键），苯环对紫外光具有响应；
2、原理：比尔-兰博定律；
3、仪器；紫外分光光度计；
4、参考书：《分析化学手册.分光光度法分册》、《药物波谱分析》。

㈢ 紫外可见分光光度计定量分析的原理和方法是怎样的

分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射下，产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合比色原理——比耳定律

㈣ 紫外吸收光谱定量分析的依据是

分析的依据是：根据物质对不同波长的紫外线吸收程度不同而对物质组成进行分析的方法。此法所用仪器为紫外吸收分光光度计或紫外-可见吸收分光光度计。

光源发出的紫外光经光栅或棱镜分光后，分别通过样品溶液及参比溶液，再投射到光电倍增管上，经光电转换并放大后，由绘制的紫外吸收光谱可对物质进行定性分析。

由于紫外线能量较高，故紫外吸收光谱法灵敏度较高；同时，本法对不饱和烯烃、芳烃、多环及杂环化合物具有较好的选择性，故一般用于这些类别化合物的分析及相关污染物的监测。

如，水和废水统一检测分析法中，紫外分光光度法测定矿物油、硝酸盐氮；以可变波长紫外检测器作为检测器的高压液相色谱法测多环芳烃等。

(4)紫外分析方法扩展阅读

紫外可见吸收光谱应用广泛，不仅可进行定量分析，还可利用吸收峰的特性进行定性分析和简单的结构分析，测定一些平衡常数、配合物配位比等；也可用于无机化合物和有机化合物的分析，对于常量、微量、多组分都可测定。

物质的紫外吸收光谱基本上是其分子中生色团及助色团的特征，而不是整个分子的特征。如果物质组成的变化不影响生色团和助色团，就不会显着地影响其吸收光谱。

如甲苯和乙苯具有相同的紫外吸收光谱。另外，外界因素如溶剂的改变也会影响吸收光谱，在极性溶剂中某些化合物吸收光谱的精细结构会消失，成为一个宽带。

所以，只根据紫外光谱是不能完全确定物质的分子结构，还必须与红外吸收光谱、核磁共振波谱、质谱以及其他化学、物理方法共同配合才能得出可靠的结论。

㈤ 紫外—可见吸收光谱分析方法

4.3.1.1 定性分析

无机元素的定性分析应用紫外—可见分光光度法比较少，主要采用原子发射光谱法或化学分析法。在有机化合物的定性分析鉴定及结构分析方面，由于紫外-可见吸收光谱较为简单，光谱信息少，特征性不强，并且不少简单官能团在近紫外光区及可见光区没有吸收或吸收很弱，在应用时也有较大的局限性。但是，这种方法可适用于不饱和有机化合物，尤其是共轭体系的鉴定，以此推断未知物的骨架结构。此外，还可配合红外光谱法、核磁共振波谱法和质谱法等常用的结构分析法进行定性鉴定和结构分析，不失为一种有利的辅助方法。

吸收光谱的形状、吸收峰的数目和位置及相应的摩尔吸光系数，是定性分析的光谱依据，而最大吸收波长λ_max及相应的ε_max是定性分析的最主要参数。比较法有标准物质比较法和标准谱图比较法两种。利用标准物质比较，在相同的测量条件下，测定和比较未知物与已知标准物的吸收光谱曲线，如果两者的光谱完全一致，则可以初步认为它们是同一类化合物；利用标准谱图或光谱数据比较，对于没有标准物质或标准物质难于得到的物质，此方法适用。

4.3.1.2 结构分析

紫外—可见分光光度法可以进行化合物某些基团的判别，共轭体系及构型、构象的判断。

(1)某些特征基团的判别

有机物的不少基团(生色团)，如羰基、苯环、硝基、共轭体系等，都有其特征的紫外或可见光吸收带，紫外-可见分光光度法在判别这些基团时，有时是十分有用的。如在270～300nm处有弱的吸收带，且随溶剂极性增大而发生蓝移，就是羰基产生吸收带的有力证据；在184nm附近有强吸收带、204nm附近有中强吸收带、260nm附近有弱吸收带且有精细结构，则是苯环的特征吸收，等等。

(2)共轭体系的判断

共轭体系会产生很强的K吸收带，通过绘制吸收光谱，可以判断化合物是否存在共轭体系或共轭的程度。如果一化合物在210nm以上无强吸收带，可以认定该化合物不存在共轭体系；若215～250nm区域有强吸收带，则该化合物可能有两至三个双键的共轭体系，如1，3-丁二烯，λ_max为217nm，ε_max为21000；若260～350nm区域有很强的吸收带，则可能有三至五个双键的共轭体系，如癸五烯有五个共轭双键，λ_max为335nm，ε_max为118000。

(3)异构体的判断

包括顺反异构及互变异构两种情况的判断。

顺反异构体的判断：生色团和助色团处于同一平面时，会产生最大的共轭效应。由于反式异构体的空间位阻效应小，分子的平面性较好，共轭效应强，因此λ_max及ε_max都大于顺式异构体。

互变异构体的判断：某些有机化合物在溶液中可能有两种以上的互变异构体处于动态平衡中，这种异构体的互变过程常伴随有双键的移动及共轭体系的变化，因此会产生吸收光谱的变化。最常见的是某些含氧化合物的酮式与烯醇式异构体之间的互变。例如，乙酰乙酸乙酯就是酮式和烯醇式两种互变异构体，它们的吸收特性不同，酮式异构体在近紫外光区时λ_max为272nm(ε_max为16000)；烯醇式异构体的λ_max则为243nm(ε_max为16000)。两种异构体的互变平衡与溶剂有密切关系，在像水这样的极性溶剂中，由于羰基可能与H₂O形成氢键以降低能量达到稳定状态，所以酮式异构体占优势；而在像乙烷这样的非极性溶剂中，则形成分子内的氢键且形成共轭体系，以使能量降低达到稳定状态，所以烯醇式异构体比率上升。

此外，紫外—可见分光光度法还可以判断某些化合物的构象(如取代基是平伏键还是直立键)及旋光异构体等。

4.3.1.3 定量分析

紫外—可见分光光度法定量分析的常见方法有以下几种。

(1)单组分的定量分析

如果在一个试样中只要测定一种组分，且在选定的测量波长下，试样中其他组分对该组分不干扰，那么进行单组分的定量分析较为简单。一般有标准对照法和标准曲线法两种。

标准对照法：在相同条件下，平行测定试样溶液和某一浓度c_S(应与试液浓度接近)的标准溶液的吸光度A_x和A_S，则由c_S可计算出试样溶液中被测物质的浓度c_x。

A_S=Kc_S，A_x=Kc_x，c_x=c_SA_x/A_S

由于标准对照法仅使用单个标准，引起误差的偶然因素较多，故结果往往较不可靠。

标准曲线法：是实际分析工作中最常用的一种方法。配制一系列不同浓度的标准溶液，以不含被测组分的空白溶液作为参比，测定标准系列溶液的吸光度，绘制吸光度-浓度曲线，称为校准曲线(包括标准曲线或工作曲线)。在相同条件下测定试样溶液的吸光度，从校准曲线上找出与之对应的未知组分的浓度。

此外，有时还可以采用标准加入法(做法与原子吸收光谱法相同)。

(2)多组分的定量分析

根据吸光度具有加和性的特点，在同一试样中可以同时测定两种或两种以上的组分。假设要测定试样中的两种组分为A、B，如果分别绘制A、B两纯物质的吸收光谱，可能有三种情况，如图4.12所示。图4.12 a表明两组分互不干扰，可以用测定单组分的方法分别在λ₁、λ₂测定A、B两种组分；图4.12 b表明A组分对B组分的测定有干扰，而B组分对A组分的测定无干扰，则可以在λ₁处单独测量A组分，求得A组分的浓度c_A，然后在λ₂处测量溶液的吸光度及A、B纯物质的和，根据吸光度的加和性则可以求出c_B；图4.12c表明两组分彼此互相干扰，此时在λ₁、λ₂处分别测定溶液的吸光度

及

，而且同时测定A、B纯物质的

、

及

、

，然后列出联立方程，解得c_A、c_B。

现代岩矿分析实验教程

式中：M_r为衍生物的相对分子质量，扣除生色团的相对分子质量后得到该化合物的相对分子质量；l为吸收介质厚度(cm)。

(2)氢键强度的测定

溶剂效应对吸收光谱的影响表明，溶剂极性增大，会引起吸收带的蓝移和红移，主要是由于溶质分子与溶剂分子的相互作用而引起的，如果它们之间具有可形成氢键的基团，则是由于形成氢键所引起的，因而可以通过吸收波长的移动程度来测定氢键的强度。

(3)在电化学研究方面的应用

分光光度法与电化学结合，构成了一个崭新的研究领域——光谱电化学。光谱电化学技术包括透射技术、镜反射技术和内反射技术三种。以分光光度法为测量手段，研究某些无机物、有机物和生物物质在电极上的电化学行为，可以同时获得氧化还原体系的吸收光谱和氧化还原电位，以此研究所发生的电化学反应的历程及动力学；还可以测定发生电化学反应所转移的电子数、标准电位、摩尔吸光系数以及反应中间产物或最终产物的扩散系数等。光谱电化学发展很快，在研究无机、有机和生物化学氧化还原机理和均相反应动力学等方面将会发挥极大的作用。

㈥ 紫外可见分光光度法特点和适用范围

一、紫外可见分光光度法的特点

1、与其它光谱分析方法相比，紫外可见分光光度法事物仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快。

2、紫外可见分光光度法的灵敏度高。

3、紫外可见分光光度法的选择性好。

4、紫外可见分光光度法的精密度和准确度较高。

二、紫外可见分光光度法的适用范围

紫外可见分光光度法可适用于定性定量分析、纯度分析、结构分析。特别在定量分析和纯度检查方面，在许多领域更是必备的分析方法，例如食品等行业中的产品质量控制。

(6)紫外分析方法扩展阅读

紫外可见分光光度法的注意点：

1、准备操作仪器前，需要先查看一下指针仪器在断电的情况下，表面指针是否指向零刻度。如若不是，理应先调零然后才能连接电源。

2、在使用的过程中，操作员应该尽量避免对镜灯的触碰，放大器使用过后，一定需要把档位归置到零。

3、在操作紫外可见分光光度计时，操作人员需要留意一下机器的干燥剂。

4、紫外可见分光光度计在开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。

㈦ 紫外分光光度法和荧光分析法的区别和各自的优缺点

1、原理不同：

（1）紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。

（2）荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定。可根据不同的物质其组成与结构调整所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长。

2、应用范围不同：

（1）紫外分光光度计主要用于实验室。例如：鉴定物质：根据吸收光谱图上的一些特征吸收，特别是最大吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。与标准物及标准图谱对照等。

（2）荧光分光光度法的灵敏度通常比分光光度法高2〜3个数量级。在卫生检验、环境及食品分析、药物分析、生化和临床检测等方面有着广泛的应用。

3、所用灯不同：

（1）紫外光区通常用氢灯或氘灯。

（2）荧光分光光度法通常用钨灯或卤钨灯。

4、优缺点：

（1）紫外分光光度计高自动化程度，维护方便、操作简便、效率高。

（2）荧光分光光度法具有检测灵敏度高、专属性较强和使用简便等特点，常用于微量甚至痕量毒物的定量分析。

(7)紫外分析方法扩展阅读

紫外-可见分光光度计的结构与功能：

由光源、单色器、吸收池、检测器和信号显示系统五大部分组成。

（1）光源：是提供符合要求的入射光的装置，有热辐射光源和气体放电光源两类。热辐射光源用于可见光区，一般为钨灯和卤钨灯，波长范围是350~1000nm；气体放电光源用于紫外光区，一般为氢灯和氘灯，连续波长范围是180~360nm。

（2）单色器：功能是将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束，它是分光光度计的心脏部分。

（3）吸收池：又称比色皿，供盛放试液进行吸光度测量之用，其底及两侧为毛玻璃，另两面为光学透光面，为减少光的反射损失，吸收池的光学面必须完全垂直于光束方向。根据材质可分为玻璃池和石英池两种，前者用于可见光光区测定，后者用于紫外光区。

（4）检测器：是将光信号转变为电信号的装置，测量吸光度时，并非直接测量透过吸收池的光强度，而是将光强度转换为电流信号进行测试，这种光电转换器件称为检测器。

（5）信号显示系统：是将检测器输出的信号放大，并显示出来的装置。

㈧ 紫外分光光度法

在实际测量中，采用在另一等同的吸收池中放入溶剂与被分析溶液的透射强度进行比较，即：A = lg( I溶剂/ I溶液) ≈ lg ( I 0/ I )吸光度具有加和性：A总λ= A1λ+ A2λ+ …Anλ比尔定律应用的局限性：只适用于稀溶液、化学偏离、仪器偏离
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4.2 紫外一可见分光光度计
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1. 光源功能：提供能量激发被测物质分子，使之产生电子光谱谱带（提供宽带辐射）。连续光源：广泛应用在吸收和荧光光谱中(气体放电光源) 氘灯、氢灯紫外可见氩灯真空紫外氙灯真空紫外、紫外、可见(热辐射光源) 钨丝灯、卤钨灯可见光区
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2. 单色器功能：从光源辐射的复合光中分出单色光。3. 吸收池功能：盛放分析试样（一般是液体）
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4. 检测器功能：检测光信号，测量单色光透过溶液后光强度变化的一种装置。5. 信号显示系统
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6. 紫外一可见分光光度计的类型(1) 单波长单光束分光光度计缺点：测量结果受电源波动的影响较大，误差较大。
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(2) 单波长双光束分光光度计优点：除了能自动扫描吸收光谱外，还可自动消除电源电压波动的影响，减小放大器增益的漂移。
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(3) 双波长分光光度计优点：在有背景干扰或共存组分的吸收干扰的情况下，可以对某组分进行定量测定。还可以获得微分光谱和进行系数倍率法测定。
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(4) 多道分光光度计具有快速扫描的特点
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4.3 化合物电子光谱的产生4.3.1 有机化合物的紫外一可见吸收光谱（一） 跃迁类型在紫外可见光区范围内，有机化合物的吸收带主要由σ→σ*、n→σ*、π→π*和n→π*跃迁产生，其相对能量大小次序为：σ→σ*>n→σ*>π→π*>n→π*。
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σ∗π∗nπσσ σ∗σ π∗π σ∗n σ∗π π∗n π∗有机化合物分子中电子跃迁的能量
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σ→σ*跃迁：分子中的成键σ电子跃迁到σ*反键轨道上去，这是一切饱和有机化合物都可能产生的电子跃迁类型。n→σ*跃迁：分子中未成键的n电子激发到σ*轨道上去，所有含有杂原子的饱和烃衍生物都可发生这种跃迁。含有σ→σ*、n→σ*跃迁的化合物，如：饱和烷烃、卤代烷烃、醇、醚等是紫外可见吸收光谱测定时的良好溶剂。
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•π→π*跃迁：可以发生在任何具有不饱和键的有机化合物分子中，其最大摩尔吸光系数εmax很大。•n→π*跃迁：发生在含有杂原子的不饱和化合物中，其最大摩尔吸光系数εmax比较小。•电荷迁移跃迁：当外来辐射照射某些化合物时，电子从体系具有给予体特性的部分转移到该体系具有电子接受体特性的部分所发生的跃迁。其谱带较宽，吸收强度大，εmax> 104。
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NR1R2NR1R2+-hυ电子接受体电子给予体CC+hυ电子接受体电子给予体OROR-
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（二）常用术语1. 生色团：分子中可以吸收光子而产生电子跃迁的原子基团。（含有π键的不饱和基团）2. 助色团：有些基团本身没有生色作用，但却能增强生色团的生色能力，即它们与生色团相连时，会使其吸收带是最大吸收波长发生红移，并且增加其强度。通常是带有非键电子对的基团。3. 红移和紫移：吸收带的最大吸收波长发生移动，向长波方向移动称为红移，向短波方向移动称为紫移。
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（三）有机化合物的紫外、可见光谱1. 饱和烃及其取代衍生物σ→σ*、n→σ*2. 不饱和烃及共轭烯烃σ→σ*、π→π*3. 羰基化合物n→σ*、π→π*和n→π*4. 苯及其衍生物 E1带、 E2带、 B带5. 稠环和杂环
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4.3.2 无机化合物的紫外一可见吸收光谱（一）电荷迁移跃迁某些分子同时具有电子给体特性的部分和电子受体特性的部分。当电子从给体外展轨道向受体跃迁时就会产生较强的吸收，这样产生的光谱称为电荷迁移光谱。如在金属络合物中配位体具有电子给体的性质，金属离子为电子受体。电子从配位体轨道跃迁到中心原子的外层轨道，就可以产生电荷迁移光谱。
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（二）配位场跃迁1. f-f跃迁镧系和铜系元素的离子对紫外和可见光的吸收是基于内层f电子跃迁而产生的，其吸收光谱是由一些狭窄的特征吸收峰组成，且这些吸收峰不易受金属离子所处的配位环境的影响。2. d-d跃迁过渡金属离子的d轨道在受到配位体场的作用时产生分裂。d电子在能级不同的d轨道间跃迁，吸收紫外或可见光产生吸收光谱。这种光谱的吸收带比较宽，吸收峰强烈地受配位环境的影响。
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4.3.3 影响吸收谱带的因素1. 分子结构的变化：（1）饱和化合物中引入生色团和助色团（2）配位体场的改变：八面体、四面体、正方平面等等
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（3）共轭效应和超共轭效应由于共轭后的电子的运动范围增大，跃迁所需的能量变小，所以由共轭作用产生的吸收峰波长值较大，同时吸收强度增大。共轭的不饱和健越多，红移现象就越显着。1,3—丁二烯在己烷中的λmax= 217nm，εmax = 21,000；1,3,5—己三烯在异辛烷中的λmax= 268nm，εmax = 43,000；1,3,5,7,9—癸五烯在异辛烷中的λmax= 334nm，εmax = 121,000。
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（4）空间位阻CH3CH3CH3H3C（a）（b）λmax(b) > λmax(a) 通常情况下，反式异构空间位阻小于顺式异构，其共轭体系共平面性比顺式结构好，跃迁能量较低，λmax较大。
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2. 溶剂效应溶剂的极性由非极性改变到极性时，精细结构消失，吸收带变向平滑。
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改变溶剂的极性还会使最大吸收波长发生变化：当溶剂极性增大时，由n→π*跃迁产生的吸收带发生紫移，而由π→π*跃迁产生的吸收带发生红移。
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3. 温度温度增高，分子碰撞频率增加，谱带变宽，谱带精细结构消失(热变色效应)。
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4.4 分析方法及其应用4.4.1 定性分析吸收光谱比较简单，特征性不强，并且大多数简单官能团在近紫外光区只有微弱吸收或无吸收，所以应用有一定局限性。但可用于鉴定共轭生色团，以此推断未知物的结构骨架，在配合其它结构分析方法时，是有用的辅助方法。
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（一）定性方法1. 比较吸收光谱曲线：形状、峰数、λmax位置与相应的εmax。2. 用经验规则计算λmax，然后与实测值比较。
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（二）经验规则Woodward规则：计算共轭二烯、多烯烃、共轭烯酮类化合物π→π*跃迁最大波长。
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Oαβδδ+1γδ+2母体环己酮215nm 同环二烯39nm 增加两个共轭双键60nm 一个β烷基 12nm一个环外双键5nm 三个γ+烷基54nm共计385nm
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AcOABCR母体同环二烯253nm增加两个共轭双键60nm三个环外双键15nm五个取代烷基25nm共计353nm
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4.4.2 定量分析（一）单组分定量方法1．校正曲线法2．标准对比法AS= k CSb AX= k CXb CX = CS AX/ AS
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（二）多组分定量方法A1A+ B= ε1Abc1A+ ε1Bb c2BA2A+ B= ε2Ab c1A+ ε2Bbc2B
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【例】以分光光度法测定合金钢中的锰和铬。称取1.000g钢样，溶解后稀释至50.00mL，将其中的Cr氧化成Cr2O72-，Mn氧化成MnO4-，然后在440nm和545nm用1.0cm吸收池测得吸光度值分别为0.204和0.860。已知ε440Mn= 95.0 L.mol-1cm-1，ε440Cr= 369.0 L.mol-1cm-1，ε545Mn= 2.35×103L.mol-1cm-1， ε545Cr= 11.0 L.mol-1cm-1。求此合金钢中Mn，Cr的质量分数。(MMn=54.94 g.mol-1MCr=52.00 g.mol-1)
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【解】 根据吸光度的加合性列出联立方程：A440 = A440Mn+ A440Cr=ε440Mnb cMn+ ε440Crb cCrA545= A545Mn+ A545Cr=ε545Mnb cMn+ ε545Crb cCr即0.204 = 95.0 × 1 × cMn+ 369.0 × 1 × cCr0.860 = 2.35×103 × 1 ×cMn+ 11.0 × 1 ×cCr解得cMn= 3.64×10-4 mol.L-1cCr= 4.59×10-4mol.L-10.10%100%1.00054.941050103.64(Mn)－3－4=×××××=ϖ0.24%100%1.000252.001050104.59(Cr)－3－4=××××××=ϖ
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（三）双波长法1. 等吸收波长法A1 = A1A+ A1BA2= A2A+ A2BΔA = A2 - A1= (A2A- A1A) + (A2B-A1B) 由于A2B= A1BΔA = A2A- A1A= (ε2A- ε1A) bc
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2. 系数倍率法该式表明，信号S只与被测组分的吸光度值有关。λλλλλλλλλλ−==−==−−+=−=λλ用差分放大器可获得混和试样在波长λ2和λ1处的差示信号S
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3. 测定浑浊试样在双波长法测定中，若将λ2设在试样的吸收峰上， λ1设在试样无特征吸收的波长上，此时， λ1和λ2的背景吸收应相等。用双波长法测得两处吸光度的差值即可消除背景吸收，进行定量分析。
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（四）导数分光光度法对吸收光谱曲线进行一阶或高阶求导，即可得到各种导数光谱曲线。优点：1. 能够分辨两个或两个以上完全重叠或以很小波长差重叠的吸收峰2. 能够分辨吸光度随波长急剧上升时所掩盖的弱吸收峰3. 能够确认宽阔吸收带的最大吸收波长，分辨率随导数阶数的增加而增加，信噪比随着导数阶数的增加而减小。
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定量分析：（可提高检测的灵敏度）Aλ= ελbc，对波长λ 进行n次求导，只有Aλ和ελ是波长λ的函数，于是有：可见n次求导后，吸光度值仍与吸收物的浓度成正比。bcdddAdnnnnλλλλε=
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4.4.3 紫外一可见吸收光谱的应用1. 相对分子质量的测定M = εmb/A m：样品重量在紫外、可见吸收光谱法中，只要化合物具有相同生色骨架，其吸收峰的λmax和εmax 几乎相同。因此，只要求出与待测物有相同生色骨架的已知化合物的ε值，就能求出欲测化合物的相对分子质量。
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2. 测定平衡常数例 用分光光度法测定以下反应的平衡常数ZnL22-的λmax为480nm，该处的εmax＝3.00×103 L.mol-1.cm-1， Zn2＋和L2－在480nm处无吸收。用1.00cm的吸收池测得含2.30×10－4mol L－1 Zn2＋和5.00×10-4mol L－1 L2－溶液的吸光度为0.540。试计算平衡常数。−−+⇔+22222ZnLLZn
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解[][ ][][ ][][][ ][ ]().11040.11000.51080.1K1040.11080.121000.521000.51080.11030.21080.100.11000.3540.022×=××××=⋅×=××−×=+=⋅×=×−×=−=⋅×=××=ε=−−−−+−−−−−−−−−−−−+−−−−+＝则平衡常数为
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3. 结构分析例如，乙酰丙酮存在酮式和烯醇式两种异构体在极性溶剂水中，以酮式异构体为主，形成分子间氢键，λmax为277nm；在非极性溶剂己烷中，以烯醇式异构体为主，形成分子内氢键，λmax为269nm。
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4. 氢键强度的测定[例] 丙酮 n→π* 的吸收带水（极性）265.4 nm 即452.96 kJ.mol-1己烷 (非极性) 279.0 nm 即429.40 kJ.mol-氢键强度452.96 - 429.40 = 23.56kJ.mol-1
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思考题1.简述紫外可见吸收光谱的产生。2.朗伯－比尔定律及其数学表达。3.光源的主要作用是什么？4.各种类型紫外可见分光光度计的特点。5.有机化合物的吸收带主要由哪几类跃迁产生？6.影响吸收谱带的因素有哪些？7.用Woodward规则计算计算共轭二烯、多烯烃、共轭烯酮类化合物π→π*跃迁最大波长。8.多组分定量方法以及双波长法，导数法的特点9.紫外可见吸收光谱法的应用

㈨ 紫外分光光度法的原理是什么

分光光度法是光谱法的重要组成部分，是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。

常用的技术包括紫外-可见分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法和原子吸收分光光度法等。紫外-可见分光光度法是在190～800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。

(9)紫外分析方法扩展阅读

物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。在一定条件下，物质的吸收系数是恒定的，且与入射光的强度、吸收池厚度及样品浓度无关。

当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后，可用同样条件将该供试品配成溶液，测定其吸光度，即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，很多物质本身并没有吸收，但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定。

参考资料来源：网络-紫外-可见分光光度法

㈩ 紫外分光光度法的分析方法有哪些

不知道你想问的是什么