tcid50的计算方法

‘壹’ 怎样计算病毒数量

你平时要注意一下面几点：

先进行抗病毒，然后在保肝。

1：营养。 （吃煮鸡蛋，炖鲤鱼等）
2：保肝。（蜂蜜，螺旋藻）切忌不要服用（保肝药） 。
蜂蜜，螺旋藻都是食品，并非药物，而且蜂蜜和螺旋藻都有保肝和改善肝功能的功效。 （如果不相信可以去本地“大药房去咨询”）
3：戒烟戒酒。
4：不要熬夜，不要过于劳累。
5：晚饭后多走动走动，不要吃完晚饭就睡觉或者看电视之类的。

俗话说：三分治疗，七分养。

服用方法：早晨起来空腹用温水（切忌不要用开水）服用1勺蜂蜜。提高身体免疫力和保肝改善肝功能。

以上是我的建议，希望您能满意

‘贰’ 病毒滴度测定中的pfu 与TCID50之间有什么联系和区别

病毒滴度测定中的pfu 与TCID50之间的联系是：1个TCID50 约等于0.7个PFU，即：1 TCID50 ≈ 0.7 PFU。例如：某病毒的滴度为105TCID50/ml，那么它换算成PFU为：105TCID50/ml 7*104PFU/ml。

区别是二者单位不统一，使用时需要换算，PFU代表的单位更大，代表的数量更多，相反TCID50代表的单位更小，代表的数量更少。

(2)tcid50的计算方法扩展阅读

某一结果所需标准试剂的为当量浓度的二十分之一。在制碱与制碳酸氢铵中用以表示氨水的浓度。在免疫学中，通过血清学方法能显示一定反应的抗体或抗血清的最高稀释倍数；如终点稀释度为100，则血清的效价（每1ml的血清中抗体效价）为100抗体单位。

.在病毒学中，用噬菌斑方法测得的噬菌体浓度。 噬菌体的效价（滴度）就是一毫升培养液中所含活噬菌体的数量。

氨水滴度

滴度（Titer,缩写tt或Ti），是在氮肥企业里，表示溶液中的常用名词，是以物质的量浓度（mol/L)的1/20为单位来表示的浓度，即1mol/L相当于20tt。

氨水滴度换算：1滴度=1/20当量浓度=1/20×17克氨/升=0.85克氨/升

参考资料来源：网络—滴度

参考资料来源：网络—病毒滴度

参考资料来源：网络—PFU

‘叁’ TCID50和PFU有什么数量关系

常见的变化有细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等.50%组织细胞感染量(TCID50)测定法是测定病毒能使50%的组织培养细胞发生感染的最小量。一般是将病毒悬液作10倍的系列稀释，分别接种细胞，经一定时间后观察CPE、血细胞吸附等指标，以最高稀释度能感染50%细胞的量为终点。最后用统计方法计算出50%组织细胞感染量（50%tissuecultureinfectiousdose,TCID50)。蚀斑测定是一种检查和准确滴定病毒感染性的方法。将稀释的病毒悬液加入单层细胞培养瓶中。病毒吸附后，再覆盖一层融化的半固体营养琼脂，使病毒在单层细胞培养中有限扩散。结果是每一个有感染性的病毒在单层细胞中可产生一个局限性的感染灶。用活性染料(如中性红)染色，则活细胞着色，受病毒感染而破坏的细胞不着色，形成肉眼可见的蚀斑(plaque)。每个蚀斑是由一个感染性病毒颗粒形成的，称作蚀斑形成单位(plaqueformingunit,PFU)。病毒悬液中的感染性病毒量的滴度可用PFU／ml表示。Answer:,,,gunits(PFUs)asTCID50.chwouldinfect50%.Insomeinstances,,.Mathematically,-halftheTCID50,..WhereP(o)olume(PFU/ml),P(o)=e(-m).ForanytiterexpressedasaTCID50,P(o)=0.5.Thuse(-m)=0.5andm=-ln0.5whichis~0.7.Therefore,(perml)by0.7topredictthemeannumberofPFU/ml.,.Thusasaworkingestimate,/mlwillproce0.7x105PFUs/ml.

‘肆’ 病毒tcid5010-7.5怎么稀释成200个tcid50

Reed-Muench法
观察CPE,
找出能引起半数细胞瓶或管感染的病毒稀释倍数，按计算出该病毒液的TCID50
由表看出，能使50%细胞管出现病变的病毒稀释度在10-4~10-5之间，其中间距离比例按Reed和Muench公式计算：
TCID50＝高于50%病变的病毒最高稀释度。

‘伍’ 测病毒TCID50时，若以十倍的倍比稀释，公式中病毒液稀释因数是什么

操作步骤
(1) 准备细胞
取出一块细胞培养板，每个孔大约传8000～10000个细胞（一个T25瓶的细
胞消化后加10ml培养液正好传一块96孔板，要传匀）。每个孔的细胞铺成单层大约60％丰度即可接种病毒（下午传好板第二天早上就能用）。
细胞对照选取16个孔即可。滴定与对照可以在一块培养板上进行，操作中注意不要窜孔。也可以分别在不同的细胞培养板上进行，但要保证实验条件一致。
(2) 稀释待测病毒液。
A法为参考书上标准的操作方法
B法参照书将液体量减少后的结果
病毒稀释液根据是否需要胰酶来选择适合的液体，无论哪种都无血清。
A向每支试管中加入1.8ml病毒稀释液。向1号试管中加入0.2ml病毒，依次10倍系列稀释至适宜浓度，最后一支试管。
B在EP管中用无血清的孵育液10倍倍比稀释病毒原液(10-1，10-2…10-10等)，根据病毒大致的滴度确定稀释的倍数。首次滴定可以多稀释几个滴度。
根据接种的孔数稀释病毒，常规每个稀释度接种4孔，则每个稀释度配500µl，即10-1为50µl加入450µl的孵育液中；如每个稀释度接种8个孔，则各配制1ml，即10-1为100µl加入900µl孵育液中。若接种8个孔，则相应增加液体量。上述的配液并不是固定不变的，可以根据接种的量自行调整。
【！此步操作注意事项：
1）建议每个稀释度接种8个孔，若要统计分析则还要增加至16个孔。
2）病毒稀释过程中一定将病毒液与孵育液充分混匀。
2）此过程中需要使用加样器和tip头。使用前用75%乙醇擦拭加样器，并用紫外线照射20min，确保无菌。使用新高压的tip头，外包装一定在超净台（或安全柜中打开）。】
(3) 接种
取细胞培养板，用多道加样器（又称排枪）吸去96孔板中的培养液，吸取孵育液加在每孔中再轻轻吹打一次，然后吸出孵育液（此步目的是去除血清，因为血清能干扰病毒的吸附）。将稀释好的病毒液加到96孔板上，每孔100µl，根据观察的习惯，一般从右到左，从上到下，从高稀释度到低稀释度（10-1，10-2 ）到原液加样。【切记：设置正常的细胞对照。每次实验要重复4次，计算标准差。】
37℃CO2培养箱中孵育1h，取出培养板吸去病毒液（从低浓度向高浓度吸取可避免窜孔），加入维持液200µl继续在 CO2培养箱中培养。
(4) 培养
将培养板放置于CO2培养箱。培养温度37℃，培养5-7天。
(5) 测定结果
取出培养板，显微镜下观察细胞病变。
兽药典2005版
举例：
将病毒等悬液作10倍系列稀释，取适宜稀释度，定量接种实验动物、胚或细胞。由高稀释度开始接种，每个稀释度接种4～6只（枚、管、瓶、孔），观察记录实验、胚或细胞的死亡数或病变情况，计算各稀释度死亡或出现病变的实验动物（胚、细胞）的百分率。按Reed-Muench法计算半数致死（感染）量（LD50、ELD50、ID50、EID50、TCID50、PD50）。
计算公式为：
logTCID50=高于50%的病毒稀释度的对数＋距离比例×稀释系数的对数
试验示例（以TCID50为例，接种量为0.1ml）
病毒稀释度  观察结果  累计结果
  CPE数  无CPE数  CPE（%）  CPE数  无CPE数  CPE（%）
10-4  6  0  100  13  0  100
10-5  5  1  83  7  1  88
10-6  2  4  33  2  5  29
10-7  0  6  0  0  11  0
距离比例=
logTCID50=-5＋0.64×(-1)=-5.64
则：TCID50=10-5.64/0.1ml。
即：将病毒悬液作10-5.64稀释后，接种细胞0.1ml，可以使50%的细胞产生CPE。

‘陆’ 如何计算病毒的感染复数MOI

其公式为:P = 1- P(0) ,P(0) = e-m 或m = -InP(0)。

一般认为MOI是一个比值，没有单位，其实其隐含的单位是pfu number/cell。后来MOI被普遍用于病毒感染细胞的研究中，含义是感染时病毒与细胞数量的比值。

然而，由于病毒的数量单位有不同的表示方式，从而使MOI产生了不同的含义。能产生细胞裂解效应的病毒例如单纯疱疹病毒等习惯上仍用pfu表示病毒数量，因此其MOI的含义与传统的概念相同。

传统意义上的MOI的测定，其原理是基于病毒感染细胞是一种随机事件，遵循Poisson分布规律，可计算出感染一定比例的培养细胞所需的感染复数(MOI)。

(6)tcid50的计算方法扩展阅读：

感染的多样性，复数感染。传统的MOI概念起源于噬菌体感染细菌的研究。它表示噬菌体数量与感染期间细菌数量的比率，即每个感染细菌的平均噬菌体数量。

实际上，隐含单位是PFU编号/单元格后来，MOI被广泛用于病毒感染细胞的研究，这意味着感染时病毒与细胞数量的比例。

噬菌体的数量单位是pfu。通常认为MOI是比率且没有单位。

‘柒’ 病毒的tcid50 的幂次方到底是正的还是负的

PFU:plaque forming unit，空斑形成单位。感染性滴度的单位一般表示为PFU/ml。由于测定pfu往往重复性较差，因此近些年许多研究又开始采用TCID50方法来计算病毒的感染单位。因此建议也可使用TCID50法。
简单地说他们的关系是：1个TCID50 约等于0.7个PFU，即：

1 TCID50 ≈ 0.7 PFU
例如某病毒的滴度为105TCID50/ml，那么它换算成PFU为：

105TCID50/ml = 105TCID50/ml * 1 =105TCID50/ml * (0.7PFU/TCID50) = 7*104PFU/ml