生物化学甘油三酯计算方法

❶ 甘油三酯的测定方法

血清甘油三酯/三酰甘油（TG）是一项重要的临床血脂常规测定指标，特别是随着对其致动脉粥样硬化（AS）作用研究的深入，TG作为冠心病的一项独立的危险因素日益受到重视。但是血清TG测定及其临床应用尚存在很多问题，如生物学变异、游离甘油对测定的影响、测定的标准化系统不完善等等。本文仅对TG的生物化学、测定方法与标准化、临床意义等方面的近况作一简述。 血清TG测定方法一般可分为化学法、酶法和色谱法3大类。早期测定方法是以总脂质与胆固醇和磷脂之差估算。化学法用有机溶剂抽提标本中的TG，去除抽提液中磷脂等干扰物后，用碱水解（皂化）TG，以过碘酸氧化甘油生成甲醛，然后用显色反应测甲醛。比较准确的是二氯甲烷-硅酸-变色酸法（Van Handel-Caslson法），此法抽提完全、能去除磷脂及甘油干扰、变色酸显色灵敏度高、显色稳定，至今还是美国疾病控制与预防中心（CDC）的内部参考方法。但因操作步骤繁多、技术要求高而不适于常规工作应用。核素稀释/气相色谱/质谱技术（ID/GC/MS）主要用作参考系统中决定性方法的建立及参考物质的制备与定值，此法费用昂贵，样品处理复杂，难以推广应用。
所有的临床实验室都用酶法检测血清TG水平，虽然方法各异，但一般都包括3个基本步骤[3,5～7]：用最合适的LPL水解TG生成甘油和FFA；接着是转化，该步骤一般只用一种酶，例如甘油激酶，将甘油磷酸化以进行下一步反应，或者生成中间待测物；最后是有色染料（常为醌亚胺等）或者紫外吸收物质的形成，再通过分光光度法计算相应的TG浓度。如脂蛋白脂肪酶-甘油磷酸氧化酶- 过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法（GPO-PAP 法）等。此法具有简便快速、微量、精密度高的优点，且特异性强，易于达到终点，线性范围宽。用一步法测定的是血清总甘油酯（定义为TG和FG及少量甘油二酯、甘油一酯之和，习惯统称为TG）。为了消除FG的干扰，中华医学会检验分会曾推荐GPO-PAP 法的两步酶法作为血清TG常规测定方法[7]，该法不增加试剂成本和工作量，适合自动化分析，由于试剂分成两部分加入，对正确设置分析测定参数有较高要求。对此法能否去净游离甘油方面有人提出质疑。针对这一情况，中华医学会检验分会在《关于临床血脂测定的建议》文件中建议酶法如GPO-PAP 法作为临床实验室测定血清TG的常规方法。普通临床常规实验室可采用一步GPO-PAP法，有条件的实验室（如三级以上医院）应考虑开展游离甘油的测定。
血清FG对TG测定结果的影响一直是临床十分关注的问题。国外资料显示，正常人体血清FG含量为0.06～0.22mmol/L，约占总TG的6%～14%[3]。国内的研究结果与此相近，中国正常人血清FG 水平平均约为0.08mmol/L（0.02～ 0.33mmol/L），约占总TG7.19%（0.81% ～21.64%）。虽然临床标本中FG显着升高者很少见，但有些异常或病理情况下如应激反应（肾上腺素激活LPL促进体内脂肪水解），剧烈运动，服用含甘油的药物如硝酸甘油，静脉输入含甘油的营养液，肝素治疗，某些严重的糖尿病、肝病与肾病，取血器材或试管塞上带有甘油等时，可见血清FG显着升高，并给临床决策带来误导[3]。因此，可采取测定“真”TG的方法减少其影响：一种是同时测定总甘油和FG，两个结果的差值反应了真TG浓度（外空白法），另一种是用上文所述的两步酶法直接测定TG（内空白法）。前者国内外应用较少，后者国外（如日本）使用较多，已有许多临床实验室开展。
对于FG空白的设置建议采取如下措施：
⑴临床实验室应备有可以做FG空白的检测系统，在任何情况下都可以做FG空白；
⑵TG报告单中应标明是否为FG空白结果，实验室应告知临床医生FG空白的意义；
⑶临床及基础研究、参加CDC脂质标准化计划的实验室都要做FG空白；
⑷住院病人中内源性甘油过高群体的标本都应做FG空白；
⑸体检及门诊患者可以不做FG空白，但糖尿病或其他特殊门诊例外；
⑹FG>2.3mmol/L者最好做FG空白；
⑺对某些可疑情况，如TG高而血清不混浊应排除高FG的可能。
此外，一些物质如抗氧化物质（维生素C等）、黄疸、溶血、脂血等对酶法测定TG有干扰，可采用设置血清空白予以消除。
在应用自动生化分析仪进行临床常规TG测定时，还要特别注意交叉污染和基质效应。最易对TG测定产生交叉污染的是总蛋白和铁试剂，因其还原物质浓度可影响Trinder反应。如果接着TG测定直接胆红素，也会因表面活性剂的导入产生误差。铁测定对TG的影响与亚铁氰化钾的量有关。此外，还要注意常规酶法测定TG对制备物的基质效应。Halani等用24份新鲜血清为对照，对5份CAP制备的冻干血清及9份CDC冰冻混合血清进行了评价。以3种商品TG酶试剂测定，以CDC参考方法为对比方法，校正游离甘油后，2种商品试剂对CAP及CDC血清均无基质效应，另一种商品试剂对4份CAP血清有基质效应。也有资料表明，各种质控血清中FG占TG的12%～85%。我们的研究也发现，临床使用的各种TG检测试剂盒、不同的测定/校准系统、质控血清之间存在明显的基质效应，因此对于不同方法/试剂的选择，如选用两步酶法试剂和质控物时要注意其反应的通用性与适用性。 TG测定的结果受取样时个体生物学变异（CVb）和分析不精密度（CVa）的影响[3]。一般情况下，CVa相对较小（约为3%），而CVb占总变异的90%多[6]。即使严格按美国胆固醇教育计划（NCEP）要求控制的个体，在2周内2次所测的TG结果差异百分比约为胆固醇的5倍，75%以上的个体在两周内的变异大于10%。李健斋等[9]研究发现，中国人群血清TG个体间变异为28%，居所有血脂项目之首。国外资料表明，空腹2.5月的人群TG变异约25%，非空腹状态的变异更大，日间约为6.3%～65%，月内为12.9%～34.8%，一年为12.9% ～39.9%，以上数据均为正常个体稳定饮食状态的结果，某些病理状态下的波动会更大。
为减少上述变异对TG测定的影响，NCEP建议受试者在两月内分次测定，两次间至少间隔一周，测定结果取均值。但当血脂水平远离医学决定水平时，则无需多次取样。标本采集要求受检者在前三周内不改变饮食习惯，采血前至少12h不进食，72h不饮酒。抽血后应尽快检测，某些含有高活性LPL的标本，如用肝素治疗的病人标本，TG常会过度水解。标本最好放在冰浴中，2h内分离血清。室温放置1天TG下降达34%。Eberly等研究发现非空腹高TG血症的发生明显多于空腹，而两种状态高TG血症所致冠心病的危险基本相同，因此测非空腹TG更有利于冠心病危险预测。
临床上常见到肉眼脂血标本，这常与一些潜在的错误有关。其中之一是LPL水解TG时产生的“清除效应”。在用血清而非试剂作空白时，大颗粒TRL散射引起假性高基线吸收。随着反应的进行，TG被水解，脂蛋白颗粒变小，浊度也减小，总的效应是在吸光度上升（产生NADH）的反应中，结果轻微偏低。这种误差所占比率较小，且只发生于高浓度TG标本中，其误差通常是可接受的。另外，肉眼脂血标本特别是CM含量过高者，由于CM漂到样品杯上层使标本成为多相。因此对于肉眼脂血标本，应充分混匀且尽快检测。TG水解产生大量脂肪酸，特别是脂血标本，由于其浊度和产物的抑制作用，对分析也有影响。在反应的缓冲液中加入牛血清白蛋白或α-环式糊精可以避免上述情况。 美国的TG测定的参考系统较为完善，其推荐的决定性方法是由美国国家标准与技术研究所（NIST）建立的ID/GC/MS法，以13C3甘油三软脂酸酯为内标，可测总甘油酯和“净”TG，一级参考物质为NIST的SRM1595（三软脂酸甘油酯）；参考方法为CDC的二氯甲烷-硅酸-变色酸法，一直被用作美国CDC-NHLBI血脂标准化计划中的参考方法，该法用Supelco的三油酸酯和NIST的三软脂酸甘油酯标准物质SRM 1595的2：1混合物作标准，测定值不仅是TG，还包括（或部分包括）甘油二酯和甘油一酯。二级参考物质有NIST的SRM1951a、CAP RM026及CDC的多种冰冻血清。此法此参考方法步骤繁琐，实验室间进行方法学转移比较困难，CDC拟对其进行改进，以期在胆固醇参考方法实验室网络（CRMLN）建立一个结合提取、水解步骤的酶法作为“指定参考方法”。
国内陈文祥等建立了高效液相色谱（HPLC）测定总甘油和游离甘油的方法，测定总甘油酯的相对不精密度小于2%，游离甘油小于4%，总甘油平均回收率100.0%，游离甘油99.7%，与ID/GC/MS法相对偏差不大于±2%。此法拟推荐为中国TG测定的参考方法。
血脂测定标准化并非要求统一测定方法，而是要求实验室测定结果达到所制定的技术目标。对于TG测定，国内外要求不精密度（用CV表示）应不大于5%，不准确度（用偏差表示）应不大于±5%，总误差应不大于15%。总误差=偏差%+1.96CV（与参考血清的靶值比较）。特别值得一提的是卫生部北京老年医学研究所血脂实验室已于2002年3月被接纳CDC的CRMLN成员（全球共12家），在血脂测定的标准化方面积累了丰富的经验，中国TG测定的参考系统正在建立之中。

❷ 生物化学，甘油三酯分子中脂肪酸平均含碳原子数目，最后一步R基所含碳原子数公式是什么意思呢

根据题意，图中的脂肪分子中的脂肪酸是完全相同的而且是饱和的，所以图中的R基都是亚甲基CH₂连接而成的长链，碳链的末端则是一个甲基。因此在计算R基中的碳原子数时，-1是除掉甲基中的一个氢原子，这样R基中就只有亚甲基了，除以14是因为每个亚甲基的相对分子质量都是14。

❸ WS/T 463—2015 血清低密度脂蛋白胆固醇检测简介

目录

• 1 拼音
• 2 英文参考
• 3 前言
• 4 1范围
• 5 2术语和定义
• 6 3 LDLC的生物学特性和临床意义
• 7 4分析原理
• 7.1 4.1概述
• 7.2 4.2匀相法
• 7.3 4.3间接法
• 8 5样品采集与处理
• 8.1 5.1采用血清进行LDLC分析。
• 9 5.3样品处理与存放应满足以下要求：
• 10 6分析系统
• 10.1 6.1分析系统选择
• 10.2 6.2分析系统使用
• 10.3 6.3分析系统性能指标
• 10.4 6.4分析系统性能验证
• 11 7质量控制和保证
• 12 8结果报告
• 13 附录A（资料性附录）LDLC参考体系
• 13.1 A.1参考方法
• 13.2 A.2参考物质
• 13.3 A.3参考系统的应用方式及应用范围
• 14 附录B（资料性附录）LDLC分析系统性能验证
• 14.1 B.1特异性、精密度和测量范围评价
• 14.1.1 B.1.1概述
• 14.1.2 B.1.2样品
• 14.1.3 B.1.3对比方法
• 14.1.4 B.1.4实验过程
• 14.1.5 B.1.5计算
• 14.1.6 B.1.6性能判断
• 14.2 B.2正确度评价
• 15 参考文献

1 拼音

WS/T 463—2015 xuè qīng dī mì dù zhī dàn bái dǎn gù chún jiǎn cè

2 英文参考

Measurement of serum low density lipoprotein cholesterol

ICS 11.100 C 50

中华人民共和国卫生行业标准 WS/T 463—2015《血清低密度脂蛋白胆固醇检测》（Measurement of serum low density lipoprotein cholesterol）由中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会于2015年06月23日发布，自2015年12月31日起实施。

3 前言

本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。

本标准主要起草单位：武汉大学中南医院、北京医院老年医学研究所、北京医院。本标准起草人：周新、郑芳、陈永梅、陈文祥、王抒、董军。

血清低密度脂蛋白胆固醇检测

4 1范围

本标准规定了血清低密度脂蛋白胆固醇测定及其质量保证的基本原则。

本标准适用于实配吵乱验室的血清低密度脂蛋白胆固醇测定，也供有关体外诊断厂商参照使用。

5 2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

分析系统 *** ytical system

适合对某检验项目在规定浓度范围内给出分析结果的一组按规定条件使用的仪器和装置，包括试剂和物品。

注1：对于临床生培档物化学检验，分析系统主要由按规定条件使用的仪器、试剂和校准物组成。

注2：其他标准（如GB/T 22576—2008）中的类似概念为“检验程序”，但检验程序包括更广泛内容，对于本文件，分析系统相当于检验碰瞎程序的分析部分。

注3：改写ISO/IEC导则99：2007，定义3.2。

2.2

验证verification

提供客观证据，考虑任何测定不确定度，说明给定事物满足规定要求。

[ISO/IEC导则99：2007，定义2.44]

注1：本标准主要是指分析系统的验证，即某分析系统在本实验室的性能是否与规定性能指标或厂商提供的性能指标一致。

注2：有关概念是“确认”（validation），即“规定要求”满足指定用途的验证，本标准的验证包含确认的含义。

2.3

低密度脂蛋白胆固醇Low density lipoprotein cholesterol; LDLC

应用经典的分离和定义脂蛋白的超速离心法，按密度从低到高将脂蛋白分为乳糜微粒（CM）、极低密度脂蛋白（VLDL）、中间密度脂蛋白（IDL）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）等。血清LDL是指密度1.019 kg/L～1.063 kg/L的脂蛋白，以LDL中的胆固醇（LDLC）物质的量浓度（mmol/L）表示。血清LDLC浓度的传统单位是mg/dL，mg/dL换算为mmol/L的换算系数为0.0259（1 mmol/L1 mg/dL×0.0259）。

6 3 LDLC的生物学特性和临床意义

我国人群血清LDLC第5百分位数和95百分位数分别约1.5 mmol/L和4.3 mmol/L。LDLC个体内生物学变异约8%，个体间生物学变异约26%。

LDLC主要用于动脉粥样硬化性心血管病危险分析。LDLC升高是心血管病危险因素。国内外成人血脂异常防治指南都以降LDLC作为心血管病患者降脂治疗的第一目标。划分LDLC采用固定切点，LDLC<3.37mmol/L为合适水平，LDLC 3.37mmol/L～4.12mmol/L为边缘升高，LDLC≥4.14 mmol/L为升高。

7 4分析原理

7.1 4.1概述

LDLC分析原理有多种，包括超速离心法、电泳法、色谱法，匀相法（直接法）、沉淀法、间接法（Friedewald公式计算法）等。LDLC常规检验目前主要采用匀相法和间接法。

注1：我国LDLC常规检验日前推荐采用匀相法。

注2：本文件针对匀相法等实验方法，间接法适用范围见4.3。

7.2 4.2匀相法

匀相法又称直接法，有多种方法，常见的有选择性遮蔽法、清除法等。选择性遮蔽法采用硫酸α环糊精和镁离子等遮蔽CM和VLDL，用聚氧乙烯聚氧丙烯多聚醚遮蔽HDL，胆固醇酶试剂只作用于LDLC产生显色物质。清除法先用一种表面活性剂使胆固醇酶试剂只作用于CM、VLDL、HDL的胆固醇，但不显色，随后用另一种表面活性剂使胆固醇酶试剂作用于LDLC产生显色物质而被检测。

7.3 4.3间接法

间接法又称为Friedewald公式计算法，Friedewald公式以VLDL组成恒定[VLDL的胆固醇（VLDLC）除以甘油三酯（TG）0.2]的假设为前提，计算公式为：LDLC总胆固醇（TC）高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）TG/5（TG/5为按mg/dL计，以mmol/L计则为TG/2.2）。应用Friedewald公式计算法的条件是：

a）空腹血清不含乳糜微粒；

b） TG浓度在4.52 mmol/L以下；

c）无Ⅲ型高脂血症。

Friedewald公式计算法在TG低于250 mg/dl。（2.82 mmol/L）的情况下有一定的可靠性，但TG高于250 mg/dl。（2.82 mmol/L）时可靠性下降，TG高于400 mg/dl。（4.52mmol/L）时失去可靠性。此外由于CM含TG的比例较VLDL高，所以CM的存在也会造成LDLC的测定偏差。此法最大的优点是低成本、简便，但不能用于TG>400 mg/dL（4.52 mmol/L）或某些异常脂蛋白血症的标本。显然，用此公式计算LDLC的可靠性受TC、TG、HDLC三项指标测定质量的影响。

8 5样品采集与处理

8.1 5.1采用血清进行LDLC分析。

5.2患者准备和血液样品采集应满足以下要求：

a）患者在采集样品前应处于稳定代谢状态；

b）患者在采集样品前至少2周内保持通常饮食习惯，保持体重稳定；

c）患者在采集样品前24 h内不进行剧烈体育运动；

d）患者在采集样品前禁食约12 h；

e）患者在采集样品前坐位休息至少5 min；

f）静脉穿刺过程中止血带使用不超过1 min。

9 5.3样品处理与存放应满足以下要求：

a）血液样品保持密封，样品管处垂直状态，封口朝上；

b）血液样品管轻取轻放，避免剧烈震荡，防止引起溶血；

c）血液样品在采血后1 h～2 h内离心，分离血清，含促凝剂采血管可在更短时间内离心（参照采血管说明书）；

d）分离的血清样品在分析前保持密封；

e）血清在室温下的存放时间不大于4h，若需贮存4 h～48 h，应存于4℃环境，若需更长时间贮存，应置于70℃以下环境；血清不可反复冻融。

10 6分析系统

10.1 6.1分析系统选择

6.1.1根据实验室实际情况选择适宜类型分析系统，主要包括仪器、试剂和校准物，若采用半自动仪器，还包括适宜的移液设备和温育设备等。

注1：仪器主要分白动和半自动仪器，日前多数实验室采用自动生化分析仪，小型实验室可能采用半自动分析仪。

注2：可见下列类型分析系统：

——封闭系统，仪器、试剂和校准物来自同一厂商，供配套使用，见于部分使用白动分析仪的情况；

——开放系统，试剂和校准物来自同一厂商，供配套使用，仪器另选，见于部分使用自动分析仪的情况和使用半自动分析仪的情况；

——组合系统，仪器、试剂和校准物来自不同厂商或机构，由实验室自己组合，见于部分使用自动和半自动分析仪的情况。

6.1.2宜尽量选用封闭系统或开放系统，必要时，可使用组合系统。

注：使用组合系统的理由，可能是有证据表明配套校准物缺乏可靠性，也可能是其他合理原因。

6.1.3宜尽量选用分析结果可溯源至公认参考系统（参见附录A）的分析系统。

注1：美国疾病控制预防中心（CDC）胆固醇参考方法实验室网络（CRMLN）运行LDLC分析系统溯源认证计划，该计划用多份（>40）患者血清将常规方法直接与参考测定程序或指定比对方法对比。CDC在其网站保持有效期内的通过认证的分析系统列表。

注2：还可以有其他溯源方式，GB/T 21415—2008对临床检验量值溯源原理及要求做出说明。

10.2 6.2分析系统使用

封闭系统和开放系统，应按厂商说明使用；使用组合系统，或对分析系统做其他改变（如各种分析参数、条件或方式等），需有充足理由，并需对分析系统性能进行充分验证（见6.4）。

10.3 6.3分析系统性能指标

分析系统应达到下列性能指标：

a）所测的分析物与LDLC定义（见2.3）一致，一般情况下不受其他血清成分的明显干扰（特异性）；

b）分析结果的总变异系数小于4%（精密度）；

c）分析结果的偏倚在±4%范围内（正确度）；

d）测定范围1.2 mmol/L～9.0 mmol/L。

10.4 6.4分析系统性能验证

任何新选用的分析系统，在用于患者样品检验前，应进行性能验证。可采用的验证程序参见附录B。

下列情况应验证6.3所列全部性能：

a）采用封闭系统或开放系统，厂商未给出6.3所列之性能指标；

b）采用封闭系统或开放系统，厂商给出的性能指标不满足6.3之要求；

c）采用组合系统或做过改变的分析系统；

d）采用封闭系统或开放系统，厂商给出6.3所列之性能指标且符合要求时，可仅验证正确度。

11 7质量控制和保证

7.1应根据工作经验、行业交流、科学文献等选用性能可靠的分析系统（主要是试剂和校准物品牌）。应尽量保持使用同种分析系统，不宜随意、经常更换分析系统。

7.2应进行内部质量控制。质控品应适宜用于脂蛋白分析，足够均匀、稳定，浓度在医学决定水平附近，至少两个水平；应尽量长期保持使用同种质控品，不宜经常更换质控品；每批检验至少分析一次质控品。

注：有些商品生化质控品由于来源、组成、性质等原因，可能不适宜用作LDLC质控品。白制、足量、70℃以下温度保存的新鲜冰冻血清是LDLC的良好质控品。

7.3应参加经卫生行政管理部门认定的室间质量评价机构组织的临床检验室间质量评价。

12 8结果报告

应以我国法定计量单位mmol/L报告LDLC测定结果，需要时，另外给出传统单位mg/dL结果。以mmol/L为单位的结果保留小数点后2位有效数字。检验报告应注明医学决定水平，需要时，另外注明参考区间。LDLC升高的判断，需考虑分析变异、个体内生物学变异及检验次数等因素。

13 附录A（资料性附录）LDLC参考体系

13.1 A.1参考方法

LDLC尚无国际公认的参考方法。国际影响较大的LDLC参考方法是美国疾病控制与预防中心（CDC）的超速离心／肝素锰沉淀/AK胆固醇测定法（β定量法）。此法用5 mL血清在1.006 kg/L的密度下超速离心[离心条件：40000 r/min（离心力105000g），4℃，18.5 h]，切割中部离心管，去除血清中密度小于1.006 kg/L的组分（顶部组分，主要为极低密度脂蛋白VLDL和乳糜微粒CM），将底部组分（主要为HDL和LDL，简称LHDL）完全转移到5 mL容量瓶中，定容。准确吸取2 mL底部组分到试管中，用80μL肝素（5000 U/mL）和100μL氯化锰（1.0 mol/L）选择性沉淀LHDL中的LDL，离心分离上清中的HDL。用CDC的胆固醇参考方法AK法测定LHDL和HDL中的胆固醇（LHDLC和HDLC），白LHDLC中减去HDLC得LDLC。

13.2 A.2参考物质

LDLC没有国际公认的参考物质。美国国家标准与技术研究所（NIST）的参考物质1951b有LDLC的参考定值，定值方法为美国CDC的β定量法。我国有国家质量监督检验检疫总局批准的3种冰冻人血清LDLC国家一级标准物质（GBW 09178，GBW 09179，GBW 09180）。

13.3 A.3参考系统的应用方式及应用范围

参考系统的应用方式包括应用参考物质或应用参考测定程序。LDLC参考系统主要应用于以下方面：

a）分析系统的溯源和质量评价；

b）试剂的制备及质量评价；

c）校准物质的制备、定值及质量评价；

d）新常规方法的发展及评价；

e）室间质评计划中的靶值确定；

f）协作研究中血脂分析的质量保证。

14 附录B（资料性附录）LDLC分析系统性能验证

14.1 B.1特异性、精密度和测量范围评价

14.1.1 B.1.1概述

采用分割样品对比评价特异性、精密度和测量范围，收集合适样品，用待验证分析系统和另一分析方法（对比方法）同时分析样品，比较分析结果。

14.1.2 B.1.2样品

收集至少10份病人血清样品，浓度在测量范围内基本均匀分布，每份血清分装3份，形成3套样品，密封70℃保存。

14.1.3 B.1.3对比方法

首选参考方法或指定比对方法，不可行时，可选用另种常规方法，最好是不同原理的方法，且有证据证明是性能可靠的方法，如经CRMLN认证的方法。

14.1.4 B.1.4实验过程

上述3套样品，分3次独立实验，用待验证方法和对比方法分析LDLC。

14.1.5 B.1.5计算

B.1.5.1计算每份病人样品待验证方法3次分析结果的变异系数（CV），计算所有病人血清结果的平均CV。

B.1.5.2计算每份病人样品两种方法3次分析结果的平均值，计算每份病人血清待验证方法结果的偏倚和绝对偏倚，计算所有病人血清结果的平均偏倚和平均绝对偏倚。

14.1.6 B.1.6性能判断

若平均CV小于4%，平均偏倚在±4%内，则分析系统精密度、特异性和测量范围符合要求。

14.2 B.2正确度评价

B.2.1若B.1实验中的对比方法为参考方法或指定比对方法，B.1.6结果同时说明正确度符合要求。

B.2.2若B.1实验中的对比方法是常规方法，用待验证方法分析有证参考物质或其他符合要求的参考物质至少3次，计算分析结果平均值与参考物质定值的差值（偏倚），若在±4%内，正确度符合要求。

15 参考文献

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[2]GB/T 22576—2008医学实验室质量和能力的专用要求

[3]GB/T 21415—2008体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性

[4]Bachorik PS,Ross JW.National Cholesterol Ecation Program remendations for meas urement of lowdensity lipoprotein cholesterol:executive summary. Clin Chem,1995,41 （10）:14141420

[5]National Cholesterol Ecation Program Expert Panel. Executive summary of the third report of the National Cholesterol Ecation Program （NCEP）expert Panel on detection,evaluation, and treatment of high blood cholesterol in *** s （Alt Treatment PanelⅢ）.JAMA,2001,285:24862497

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[7]《中国成人血脂异常防治指南》制订联合委员会，中国成人血脂异常防治指南．1版．北京：人民卫生出版社，2007年

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❹ 总胆固醇的计算方法

公式的具体内容为：低密度脂蛋白胆固醇（mg/dl）=总胆固醇-高密度脂蛋白胆固醇-甘油三酯/5，其中“甘油三酯/5”指的是极低密度脂蛋白胆固醇的含量。

由于直接测量低密度脂蛋白胆固醇的含量的成本过高，而总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯这三者的检测更为经济实惠、简便可行，所以该公式是根据总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯的水平推算低密度脂蛋白胆固醇的水平，其中默认甘油三酯和极低密度脂蛋白胆固醇的比例固定为5:1。

但临床实践证实，该方法在低密度脂蛋白胆固醇水平较低或是甘油三酯水平较高时容易产生较大误差，检测结果不够准确，常常低于真实水平。并且由于进食会影响极低密度脂蛋白胆固醇的代谢过程，代谢相关的酶的活性会发生变化，因此为了提高结果的准确性，要根据Friedewald公式法估算低密度脂蛋白胆固醇水平应要求在患者在空腹的情况下抽血。

(4)生物化学甘油三酯计算方法扩展阅读：

总胆固醇的测定在常规的检查中主要是以生化检查为主，生化检查内部包括血脂的测定，也包括总胆固醇的测定，建议患者可以在清晨空腹的状态下体检，一般是抽静脉血来检查就可以了。

胆固醇的正常指数是在3.5至6.1mmol/l之间，最为完美的指数是5.2mmol/l左右，甘油三酯则是最好在1.7mmol/l左右。如果是检查发现体内总胆固醇水平升高了，要建议在生活中尽可能地减少胆固醇含量高的食物的摄入，比如说鸡蛋黄，动物内脏等等。