⑴ 请给一些测定葡萄糖含量办法,越多越好!
1.向葡萄糖溶液中加入过量新制氢氧化铜加热,使之充分反应,过滤后加入过量稀硫酸,洗涤干燥后,称量剩余固体(铜)计算出葡萄糖,再除以总体积,就算出葡萄糖的含量。方程式如下:
1)CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2---加热→CH2OH(CHOH)4COOH+Cu2O↓+2H2O
2) Cu2O+H2SO4=CuSO4+Cu+H2O
2.把新制氢氧化铜换成银氨溶液步骤如上,方程式如下:
1)CH2OH-(CHOH)4-CHO+2[Ag(NH3)2]++2OH-==CH2OH-(CHOH)4-COONH4+2Ag↓+H2O+3NH3
不过,这里的固体是银
3.条件好可以用专业仪器直接帮你测定葡萄糖含量
4.右旋糖酐40葡萄糖注射液—葡萄糖的测定—氧化还原滴定法
方法原理: 供试品精密加碘滴定液后,边振摇边滴加氢氧化钠滴定液,在暗处放置30分钟,加稀硫酸,用硫代硫酸钠滴定液滴定,至近终点时,加淀粉指示液继续滴定至蓝色消失,并将滴定结果用右旋糖酐40作空白试验校正,根据滴定液使用量,计算葡萄糖的含量。 试剂: 1. 碘化钾 2. 碘滴定液(0.05mol/L) 3. 盐酸 4. 氢氧化钠滴定液(0.1mol/L) 5. 甲基橙指示液 6. 硫酸滴定液(0.5mol/L) 7. 硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L) 8. 稀硫酸 9. 碳酸氢钠 10. 淀粉指示液 11. 酚酞指示液 12. 甲基红-溴甲酚绿混合指示液 13. 基准三氧化二砷 14. 基准邻苯二甲酸氢钾 15. 基准无水碳酸钠 1.6 基准重铬酸钾 试样制备: 1.)碘滴定液(0.05mol/L) 配制:取碘13.0g,加碘化钾36g与水50mL溶解后,加盐酸3滴与水适量使成1000mL,摇匀,用垂熔玻璃滤器滤过。 标定:取在105℃干燥至恒重的基准三氧化二砷约0.15g,精密称定,加氢氧化钠滴定液(1mol/L)10mL,微热使溶解,加水20mL与甲基橙指示液1滴,加硫酸滴定液(0.5mol/L)适量使黄色转变为粉红色,再加碳酸氢钠2g、水50mL与淀粉指示液2mL,用本液滴定至溶液显浅蓝紫色。每1mL碘滴定液(0.05mol/L)相当于4.946mg的三氧化二砷。根据本液的消耗量与三氧化二砷的取用量,算出本液的浓度。 2.)氢氧化钠滴定液(0.1mol/L) 配制:取氢氧化钠适量,加水振摇使溶解成饱和溶液,冷却后,置聚乙烯塑料瓶中,静置数日,澄清后备用。取澄清的氢氧化钠饱和溶液5.6mL,加新沸过的冷水使成1000mL,摇匀。 标定:取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.6g,精密称定,加新沸过的冷水50mL,振摇,使其尽量溶解,加酚酞指示液2滴,用本液滴定,在接近终点时,应使邻苯二甲酸氢钾完全溶解,滴定至溶液显粉红色。每1mL氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量,算出本液的浓度。 贮藏:置聚乙烯塑料瓶中,密封保存;塞中有2孔,孔内各插入玻璃管1支,1管与钠石灰管相连,1管供吸出本液使用。 3). 甲基橙指示液 取甲基橙0.1g,加水100mL使溶解。 4.) 硫酸滴定液(0.5mol/L) 配制:取硫酸30mL,缓缓注入适量水中,冷却至室温,加水稀释至1000mL,摇匀。 标定:取在270~300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约1.5g,精密称定,加水50mL使溶解,加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴,用本液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时,煮沸2分钟,冷却至室温,继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。每1mL硫酸滴定液(0.5mol/L)相当于53.00mg的无水碳酸钠。根据本液的消耗量与无水碳酸钠的取用量,算出本液的浓度。 5). 硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L) 配制:取硫代硫酸钠26g与无水碳酸钠0.20g,加新沸过的冷水适量使溶解成1000mL,摇匀,放置1个月后滤过。 标定:取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾0.15g,精密称定,置碘瓶中,加水50mL使溶解,加碘化钾2.0g,轻轻振摇使溶解,加稀硫酸40mL,摇匀,密塞,在暗处放置10分钟后,加水250mL稀释,用本液滴定至近终点时,加淀粉指示液3mL,继续滴定至蓝色消失而显亮绿色,并将滴定结果用空白试验校正。每1mL硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于4.903mg的重铬酸钾。根据本液的消耗量与重铬酸钾的取用量,算出本液的浓度。 室温在25℃以上时,应将反应液及稀释用水降温至约20℃。 6).稀硫酸 取硫酸57mL,加水稀释至1000mL。 7. )淀粉指示液 取可溶性淀粉0.5g,加水5mL搅匀后,缓缓倾入100mL沸水中,随加随搅拌,继续煮沸2分钟,放冷,倾取上层清液,即得,本液应临用新制。 8.) 酚酞指示液 取酚酞1g,加乙醇100mL使溶解。 9.)甲基红-溴甲酚绿混合指示液 取0.1%甲基红的乙醇溶液20mL,加0.2%溴甲酚绿的乙醇溶液30mL,摇匀。 操作步骤: 精密量取供试品2mL,置具塞锥形瓶中,精密加碘滴定液(0.05mol/L)25mL,边振摇边滴加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)50mL,在暗处放置30分钟,加稀硫酸5mL,用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定,至近终点时,加淀粉指示液2mL,继续滴定至蓝色消失,并将滴定结果用0.12g(6%规格)或0.20g(10%规格)的右旋糖酐40作用白试验校正。每1mL碘滴定液(0.05mol/L)相当于9.909mg的C6H12O6·H2O。
⑵ 怎么利用吸光度算多糖提取率
怎么利用吸光度算多糖提取率?首先做一个葡萄糖标准曲线,把回归方程用excel做出来,网上网络有做回归方程的步骤,将你测出来的多糖吸光度代入回归方程,注意吸光度是y值,求出x值就是你想要的多糖含量,一定不要把单位搞混,做后再换算成你所用香菇总量中的含糖量。多糖提取实验设计流程
食用菌多糖的提取方法有水提法、碱提法和酶提法等,其中酶提法是利用酶对细胞结构的破坏作用,使存在于细胞内部的多糖释放出来,从而提高了多糖的得率。
本次实验采用纤维素酶和果胶酶对紫蘑菇进行水解,研究香菇多糖的最佳提取工艺,并探讨蘑菇粒度、蘑菇溶解方法以及酶法提取中多糖提取效果的评价方法。
可以同步做三组对比试验:⑴采用水提,不加酶;⑵采用酶法提取;⑶采用酶空白(只加酶,不加蘑菇粉)。
由于酶中也含有少量的糖类成分,其存在将会对蘑菇多糖的提取产生影响。因此,在计算酶法提取多糖的效果时,要减去酶本身所引入的糖。在确定最佳酶浓度时更要考虑。
一、实验流程:蘑菇干燥→粉碎过筛→加水浸泡0.5h→调PH→加入纤维素酶→提取→离心过滤→测多糖提取率
式中: n一提取液稀释倍数;
C一提取液中多糖的浓度(mg/mL);
V一提取液体积(mL);
m一蘑菇的质量(mg) 。
测定时取三个平行样,结果数据为平行样的平均数值。
二、具体实验步骤:
1、多糖标准曲线的绘制
精密称取105℃干燥恒重的葡萄糖标准品100mg,置于100 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8 mL分别置于50 mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。精密吸取上述各种溶液2.0 mL,分别加入5%苯酚溶液1.0 mL,摇匀,迅速加入5.0 mL浓硫酸,振摇5min,置沸水浴上加热15 min,然后置冷水浴中冷却30 min,随行空白,在490 nm波长处测定吸光度。以标准溶液浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线,并计算其标准曲线回归方程。
(1)精密度试验:精密吸取1.0 ml供试液按“标准曲线的制备”项下操作,分别测定吸光度,求得RSD。
(2)重现性及多糖含量测定:精密称取巴西蘑菇多糖0.1000g,按“供试液的配制”和“标准曲线的制备”项下操作,分别测定吸光度,求得多糖的平均含量,及RSD值