① 小鼠如何灌胃
小鼠的捉拿方法是对的,用食指和拇指捏住小鼠的颈部皮肤,把小鼠的尾巴压在无名指下,捏紧就行。
1-2ml注射器和16号兽用针头,针尖磨钝,针头长4-5cm
从鼠口角进入,紧贴上颚进入食管,进针 深度在体外测量,一般小鼠2-3cm
注意手法上有个技巧,灌胃针送到咽喉处手腕要大鼠的后脑方向压一下,切记不可使用暴力。
② 小鼠的基本实验操作
一、实验目的: 通过实际操作,掌握小鼠的一般操作方法,包括小鼠的抓拿、标记、给药(灌胃、腹腔注射、皮下、肌肉、尾静脉注射)、取血(眶后静脉丛,摘眼球)、脊椎脱臼法处死、大体解剖。
二、实验动物: 昆明小鼠2只(1雌1雄)
三、实验步骤
1、抓取和固定,标记
2、去毛
3、给药:消化道、腹腔往射、尾静脉注射
4、取血:眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法
5、麻醉:氯胺酮腹腔麻醉
6、处死:脊椎脱臼法
7、解剖:
雄性:睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺(在膀胱下方,胶质状,透明)
雌性:双角子宫、卵巢
肾上腺、胆囊、甲状腺、胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏、甲状腺
四、实验结果
1、抓取和固定标记:
抓取:抓小鼠的尾根部
固定:抓住小鼠的尾根部,让小鼠在粗糙平面上爬行,后拉尾跟部,右手的拇指和食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤,小指和无名指将尾巴固定在手掌面。
2、灌胃法:左手抓取小鼠固定后,右手持特制灌胃针,沿一侧口角进针,紧贴咽后壁,头后仰以便伸直消化道,进针2/3后灌生理盐水0.5ml
3、注射给药:
腹腔注射:
从下腹部的两侧进针,进针时针与腹部成45°。进针后稍微晃动针,如无粘滞感则可注射药物。
尾静脉注射:一人固定小鼠,另一人用左手中指和拇指将尾拉直,食指托住尾部在尾动脉位置进针注射0.5ml生理盐水。注射完毕拔出针头,用无菌棉球压迫止血。
4、采血
从眼角内侧0.5cm处进针
眼球摘除法:左手抓取用固定小鼠,右手持弯头镊在眼球根部将眼球摘除,头朝下,眼眶内血迅速流出。
5、麻醉:
0.5%氯胺酮腹腔麻醉:本小鼠重22g,按100mg/kg的药量给药,2分钟麻醉成功
6、处死:
脊椎脱臼法:按住头部,将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死
7、解剖:
雄性:寻找到睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺
雌性:双角子宫、卵巢3.7.2肾上腺:米粒大小
胰腺:位于胃下方,类似于脂肪组织,浑浊状3.7.4, 胆囊:芝麻大小,浅绿色,半透明,甲状腺:紧贴环状软骨,另可解剖出胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏。
五、实验讨论
1、小鼠抓取的感受:
小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。
2、小鼠尾静脉注射感受:
首先,注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟,有利于注射;其次,先远后尽,不要一开始就从尾根部,那样失败了不好办;再次,进血管后注意保持稳定,针尖很容易刺穿血管的。尾静脉就在尾巴的正左右两边,先用酒精用力擦,可以去掉部分角质,然后按住近心端让充血,就很容易看到了。进针大概1~2厘米是最合适的。
尾静脉注射时,可用45~50度的温水浸润半分钟或用酒精擦拭,可使血管扩张,同时也可软化表皮角质。以左手拇指和食指夹住鼠尾,使静脉充盈,中指帮助无名指和小指捏住鼠尾末梢,右手持注射器(连5号细针头),针头与静脉夹角一般小于30度,从距尾尖2 - 3厘米处进针,此处皮薄易进入,先抽回血,见到血后再缓慢注入少量药液,如无阻力,表示针头已进入静脉,可继续往入。一般推注速度为0.05 - 0.10m秒,一次注入量为0.05 - 0.25ml/10g体重。如反复注入,应尽可能从尾末端开始,以后向尾根部方向移动注射。
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③ 小鼠灌胃怎么弄呢
小鼠专用灌胃针由注射器和喂管组成,喂管长约1nm,喂管尖端焊有一金属小圆球,金属球中空,用途是防止喂管插入时造成损伤。金属球弯成20度角,以适应口腔与食道之间弯曲。将喂管插头紧紧连接在注射器的接口上,吸入定量的药液;左手捉住小鼠,右手拿起准备好的注射器。将喂管针头尖端防放进小鼠口咽部,顺咽后壁轻轻往下推,喂管会顺着食管滑入小鼠的胃,插入深度约3cm。用中指与拇指捏住针筒,食指按着针竿的头慢慢往下压,即可将注射器忠的药液灌入小鼠的胃中。在插入过程中如遇到阻力或可看见1/3的针管,则江喂管取出重新插入,因为这时灌胃并没有插入胃中。
尾静脉注射比较困难,很难把握。建议采用其他注射方式
④ 小鼠灌胃有什么诀窍吗
灌胃最重要的是要老鼠要固定好,手法比较重要。灌苦的中药或者其他西药,会挣扎,所以一定要保证食道是直线的状态。 沿着嘴角进针,在口腔中间找到咽喉,使小鼠仰头,然后贴着咽喉后壁插入,如果正确会十分顺利的整根没入。 垂直体位,深度3cm。
⑤ 小鼠灌胃 处死 解剖
目的:观察“酒花素油剂”小鼠口服和大鼠皮肤用药的毒性反应。方法:小鼠灌胃给予不同浓度的“酒花素油剂”(各剂量间比值为0.85),观察死亡情况,用Bliss法计算LD 50 。大鼠背部脱毛,涂以不同浓度的“酒花素油剂”,涂药面积约占体表面积的10%,破损皮肤组用针尖划破表皮。给药后观察大鼠的体重及中毒反应。结果:小鼠口服“酒花素油剂”后的LD 50 为557.06 mg/kg,中毒表现主要为肢体抽搐和呼吸困难。大鼠完整皮肤对浓度为临床用浓度10倍的“酒花素油剂”能较好耐受,破损皮肤对7倍于临床用浓度的“酒花素油剂”亦能较好耐受。结论:“酒花素油剂”口服为低毒性物质,完整皮肤和破损皮肤用药均较为安全。
“酒花素油剂”为上海华光啤酒厂生产的,用于促进慢性疮疡及烧伤创口等愈合的外用制剂。为了考察“酒花素油剂”的安全性,本文拟观察“酒花素油剂”一次给予小鼠口服后所产生的毒性反应及死亡情况,并观察完整皮肤及破损皮肤的大鼠在短期内接触“酒花素油剂”后所产生的毒性反应。
1 材料
1.1 动物:昆明种小鼠,体重18~22 g,雌雄各半;SD大鼠,体重170~230 g,雌雄各半,由第二军医大学实验动物中心提供。
1.2 药品:“酒花素”及中性植物油(溶剂)由华光啤酒厂提供。根据实验要求,将“酒花素”溶于中性植物油中,配制成不同浓度的“酒花素油剂”。
2 实验方法
2.1 小鼠口服LD50〔1〕
根据预试结果,在药物剂量为366~970 mg/kg的范围内,将小鼠按体重均匀分为7组,每组10只(�♀各5只),各剂量间距为0.85,灌胃给药体积为每10 g体重0.1 ml。另设一溶剂对照组,仅给中性植物油0.8 ml/只。
小鼠禁食12小时后灌胃给药,给药后即开始观察动物的毒性反应情况,及时记录死亡数。死亡动物立即进行解剖,观察内脏器官的病变情况。未死动物连续观察9天,9天后处死,解剖,观察脏器变化。
用Bliss法计算LD 50 ,采用计算机“NDST程序”进行运算。
2.2 大鼠皮肤急性毒性实验〔2〕
实验动物分为完整皮肤和破损皮肤两部分,每个部分又分为大、中、小三个剂量组,剂量间距为0.7,每组10只大鼠。另设溶剂对照组,每组6只大鼠。
大鼠在氯胺酮(90 mg/kg ip)麻醉下,进行背部脱毛(用剃刀仔细剪去背部的毛),脱毛范围约为4.5 cm×7 cm(约占体表面的10%左右)。在此脱毛区内均匀涂以不同浓度的“酒花素油剂”及溶剂,约0.6 ml/只,涂完后用无毒塑料薄膜覆盖,绷带包扎。破损皮肤组大鼠在背部脱毛区用针尖划破表皮,以渗血为度,然后再涂以不同浓度的“酒花素油剂”。给药后即开始观察动物的全身毒性反应,死亡动物立即进行尸体解剖,肉眼观察各脏器的病变情况,10天后处死大鼠,大体解剖,肉眼观察全身各器官的变化情况。
3 结果
3.1 小鼠口服LD 50
小鼠灌胃给药后,死亡动物约在0.5~2小时内出现呼吸急促、烦躁等表现,随后出现肢体抽搐,死亡前有明显的惊厥表现。死亡一般发生在给药后的1~6小时内,个别发生在12~48小是内。死后立即尸检可见,小鼠因死前的肌肉强直而表现为尸体僵硬,心脏停跳于收缩状态。内脏重要器官(心、肺、肝、脾、肾及消化道等)未见充血、水肿及明显的器质性变化。存活动物多数有一过性的呼吸急促表现,24小时内活动稍差,食欲减少。24小时(个别48小时)后逐渐恢复活动和摄食,一般情况良好,无其他不良反应的表现发生。连续观察9天后处死小鼠,大体解剖未见肉眼可见的病理变化。溶剂对照组10只小鼠给药后无明显的毒性反应出现,观察10天后处死,大体解剖亦无异常发现。
各剂量组的死亡情况见表1,死亡率无明显的性别差异。
用Bliss法计算得LD 50 =577.06 mg/kg,95%可信限范围为505.74~658.43 mg/kg。
3.2 大鼠皮肤急性毒性实验
各剂量组大鼠的死亡情况及给药前后的体重变化情况见表2。
表1 小鼠口服“酒花素油剂”后LD 50 计算(Bliss法)
剂量(mg/kg)
对数剂量(X)
动物数(只)
死亡动物数(只)
死亡率(%)
机率单位(Y)
970
2.987
10
10
100
6.75
824
2.916
10
8
80
6.20
701
2.846
10
7
70
5.66
596
2.775
10
6
60
5.11
506
2.704
10
4
40
4.56
430
2.633
10
2
20
4.01
366
2.563
10
0
0
3.46
表2 大鼠皮肤用“酒花素油剂”后的毒性反应
组
别
药物浓度(%)
动物数(只)
死亡动物数(只)
体重 (g,x±s)
用药前 用药后
完
整
皮
肤
A
53.67
10
0
206±19
210±24
B
37.57
10
0
207±21
220±20
D
溶剂
6
0
198±19
206±22
破
损
皮
肤
A
53.67
10
2
200±20
204±23
B
37.57
10
0
202±18
207±21
C
26.30
10
0
198±19
199±24
D
溶剂
6
0
206±22
208±20
在完整皮肤的大鼠中,两个用药组及溶剂对照组均无明显的毒性表现,用药后饮食、活动无明显变化。各组动物给药局部均未发现明显的红、肿等刺激反应,1周后脱毛区开始长毛。连续观察10天后处死大鼠,大体解剖未见明显的脏器异常变化。
破损皮肤大鼠用药后,大剂量组在4~24小时内有2只死亡,死前出现明显的呼吸困难及轻度肌肉抽搐,死后尸体解剖无明显的异常发现。另有两只大剂量组及1只中剂量组的大鼠在用药后8~12小时内出现一过性的呼吸困难。其余各用药组及溶剂对照组的大鼠均未见明显的毒性反应,仅少数动物在用药当天食欲稍差。连续观察10天,大鼠饮食、活动均无异常,体重变化亦不明显。大鼠皮肤破损区创口第二天开始结痂,无明显的红肿及溃烂表现,亦无感染发生。创口约1周左右愈合,无明显疤痕。观察10天,部分大鼠脱毛局部已开始长毛,10天后处死,大体解剖未发现肉眼可见的异常变化。
4 讨论
酒花素是从啤酒花中提取的有效成分,主要由蛇麻酮、草酮等组成。已有的研究资料表明,酒花素有一定的抗菌和促进肉芽组织增生的作用。本实验的结果显示,大鼠在用药面积占体表面积10%的情况下,破损皮肤对浓度为26.30%的“酒花素油剂”能较好耐受,对37.57%的浓度亦能耐受,且破损皮肤创口愈合较快,无感染发生。该两浓度分别为临床用药浓度的5倍和7倍(临床用药浓度为5%)。完整皮肤对于临床用药浓度10倍剂量的“酒花素油剂”亦能耐受,不出现明显的中毒反应。作为溶剂的中性植物油用在破损皮肤和完整皮肤上均无明显的毒性反应。小鼠口服该药的LD 50 为577.06 mg/kg,属低毒物质。以上结果提示,“酒花素油剂”临床应用较为安全。
⑥ 小鼠灌胃有没有好的方法
左右大拇指和食指抓住小鼠耳朵那里的皮,无名指和小拇指扣住后腿和尾巴。不要让小鼠四处蹭。右手灌胃时,个人体会是针顺着小鼠门牙旁边插进去,弯的一面对着自己,顺着针的曲线滑下去。中间老鼠挣扎不要把针取出来,可以停顿一下,观察老鼠的反应,看是否插到气管里面。一般进针3到5CM,就可以打药OVER了。一般注意2点就差不多了,抓老鼠要快,不然弄久了小鼠可以激怒,2是不要打药打进气管,假如是做亚慢性实验的话你会很惨,第二天跑过去一看老鼠死了。