Ⅰ 如何通过细胞实验计算动物实验的用药浓度
阳性药要看你的需要了，小鼠用药剂量应该按人鼠计量公式（人：70kg，临床用量1mg)小鼠（20g）=1×0.0026×50＝0.13mg／kg换算下就可以了！一般都是以人的临床最大剂量为实验动物的低剂量，然后按(1:2)以此类推确定中剂量、高剂量
Ⅱ 如何通过细胞实验计算动物实验的用药浓度
IC50是半抑制率，意思是抑制率50%的时候药物的浓度。把药品稀释成不同的浓度，然后计算各自的抑制率，以药品的浓度为横坐标，抑制率为纵坐标作图，然后得到50%抑制率时候的药品浓度，就是IC50。要点：药品2倍稀释，多做梯度，做点线图即可!
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Ⅲ 细胞加药的换算，请帮忙
2.389nmol/ml=2389nmol/l.根据原始浓度x原始药物体积＝目标浓度x目标体积
原始药物体积＝50x100/2389ml=2.093ml
如果药物溶解在有机溶液里， 加入细胞最好稀释一千倍以上以防溶液毒性。这就需要你浓缩原始药物。 如果药物溶解在水或水溶液里则没有此问题。
Ⅳ mtt和western blot加药浓度是以细胞量计算吗
mtt和western blot加药浓度是以细胞量计算
做western blot需要多少细胞并不是一个固定的值
这主要取决于蛋白的表达量，没有一个绝对的量
如果做细胞总蛋白的话，至少10的4次方细胞每微升蛋白裂解液。一般可以每泳道取10的5次方细胞每微升蛋白裂解液（即10微升上样）
根据这个数量级，结合western blot结果进行调整即可确认做western blot需要多少细胞
做western blot需要多少细胞并不是一个固定的值 这主要取决于蛋白的表达量，没有一个绝对的量 如果做细胞总蛋白的话，至少10的4次方细胞每微升蛋白裂解液。一般可以每泳道取10的5次方细胞每微升蛋白裂解液（即10微升上样） 根据这个数量级，结合western blot结果进行调整即可确认做western blot需要多少细胞
Ⅳ MTT实验前期细胞密度如何确定，怎么计算药物浓度
⒈选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样，才能保证MTT结晶形成数量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低，太少观察不到差异。
⒉药物浓度的设定。一定要多看文献，参考别人的结果再定个比较大的范围先初筛。根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记！否则，可能你用的时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。
⒊ 时间点的设定。在不同时间点的测定OD值，输入excel表，最后得到不同时间点的抑制率变化情况，画出变化的曲线，曲线什么时候变得平坦了（到了平台期）那个时间点应该就是最好的时间点（因为这个时候的细胞增殖抑制表现的最明显）。
⒋培养时间。200ul的培养液对于10的4～5次方的增殖期细胞来说，很难维持68h，如果营养不够的话，细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止，影响结果，我们是在48h换液的。
⒌MTT法只能测定细胞相对数和相对活力，不能测定细胞绝对数。做MTT时，尽量无菌操作，因为细菌也可以导致MTT比色OD值的升高。
⒍理论未必都是对的。要根据自己的实际情况调整。
⒎实验时应设置调零孔，对照孔，加药孔。调零孔加培养基、MTT、二甲基亚砜。对照孔和加药孔都要加细胞、培养液、MTT、二甲基亚砜，不同的是对照孔加溶解药物的介质，而加药组加入不同浓度的药物。
⒏避免血清干扰。用含15%胎牛血清培养液培养细胞时，高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加，会试验敏感性。因此，一般选小于10%胎牛血清的培养液进行。在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。 MTT 溶液的配制方法
通常，此法中的MTT 浓度为5mg/ml。因此，可以称取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液（PBS）或无酚红的培养基中，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。
需要注意的是，MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候，为了保证实验结果的线性，MTT 吸光度最好在0-0.7 范围内。
MTT一般最好现用现配，过滤后4℃避光保存两周内有效，或配制成5mg/ml保存在-20度长期保存，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分装在EP管里，用的时候现配，直接往培养板中加，没必要一下子配那么多，尤其当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用了。
MTT有致癌性，用的时候小心，有条件最好带那种透明的簿膜手套.配成的MTT需要无菌，MTT对菌很敏感；往96孔板加时不避光也没有关系，毕竟时间较短，或者你不放心的时候可以把操作台上的照明灯关掉.
配制MTT时用用PBS溶解，也有人用生理盐水配，60℃水浴助溶。
Ⅵ 细胞培养液里的细胞怎么计算细胞个数
实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作：
1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算：
细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104
说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：
1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3 而 1ml=1000mm3
（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液）
Ⅶ 细胞实验新手，请问细胞种板时怎么计算细胞浓度和要加
直径3.5厘米皿2ml培养基
6厘米3ml
10厘米6ml
6孔板每个孔2ml,12孔板1ml,往后依次减半
细胞浓度一般要看你细胞的增殖能力,一般细胞系的话传代按照1传4的比例种板就可以了,传同一大小的皿,不同大小的按比例推算
Ⅷ 怎么确定培养的细胞的给药计量和时间
每个细胞都不一样,一般是细胞长到80%的时候可以铺板你可以先做个生长曲线,确定最佳的铺板密度和生长时间,比如PC12就加药6小时就行,而Sao-2需要48小时,一般你可以试试培养12小时
Ⅸ 如何计算细胞50%生存率的药物浓度
药物体外实验浓度很难根据临床上用药的浓度换算，因为这和药物的吸收利用度，肝脏的代谢、药物与载体蛋白的结合等因素的影响有关。
如果有药代动力学的资料好一些，血药浓度对体外浓度有一些参考价值，根据临床用药量来推算体外浓度是不太可靠的。
有人总结了一个大概的公式：试验药物浓度（ug/ml)=60×临床用药剂量（/kg.d）×2×10的3次方÷5000
这只能做参考，还是要做一做MTT，算一下抑制率，再最后确定浓度。
Ⅹ 到底怎样计数细胞呢稀释倍数怎么算
一般来说，细胞的计数方法是：细胞数/mL=4个大格细胞总数/4×10000×稀释倍
数
操作步骤：
1.取10ul细胞悬液与10ul台盼兰混合均匀于1.5ml离心管中。
2.盖上盖玻片，取10ul混合液自血球计数盘上方加入，于10倍生物显微镜下观察，活细胞不染色，死细胞被染成蓝色。
3.分别计数四个大方格，得到细胞总数，再除以4，乘以稀释倍数（本实验为2），最后乘以104，即为每ml细胞悬液中细胞数。若细胞位于线上，只计上线与左线（计上不计下，计左不计右）。
注：
1.细胞数/ml＝4大格细胞总数×稀释倍数×104/4；每一大格的体积为＝0.1cm×0.1cm×0.01cm＝10-4ml
2.计数板计数时，最适细胞浓度为5～10×105个/ml，此范围外计数误差偏大。
3.高浓度细胞悬液，可取出部分作稀释或连续稀释后计数。
例
活细胞数/方格：55，62，49，59；死细胞数/方格：5，3，4，6；细胞总数＝243
平均细胞数/方格＝60.75；稀释倍数＝2；
细胞数/ml：60.75×104×2＝1.22×106；
细胞数/flask（10ml）：1.22×106×10ml＝12.2×106
存活率：225/243﹦92.6%