❶ 求助:菌落总数检测怎么计算
因为第二个稀释度中的25不在30-300范围之内,所以可以只选择第一稀释度的结果来计算。具体就是250+260=510/2=255,255×10=2550,报告为2.55×10³
❷ 统计菌落数目的方法有哪些
统计菌落数目的方法有直接计数法 和间接计数法两种。
1. 直接计数法
直接计数法是将稀释的样品滴在计 数板上,盖上盖玻片,然后在显微镜下计 数4〜5个中格的细菌数,并求出每个小 格所含细菌的平均数,再按公式求出每 毫升样品中所含的细菌数。计算公式 为:每毫升原液所含细菌数=每小格平 均细菌数X400X1 000X稀释倍数。这 种方法的优点是所需设备比较简单,能 迅速得到结果,而且在计数的同时还可 以观察到所研究的微生物的形态特征; 缺点是不能区分死菌与活菌。
2. 间接计数法
在应用稀释涂布平板法计数时,首 先要将待测样品配制成均匀的系列稀释 液,尽量使微生物细胞分散开,再把稀释 液接种到平板上,进行培养观察。但值 得注意的是,统计的菌落数往往比活菌 的实际数目低,而且统计的结果一般用 菌落数而不用活菌数来表示。计算公式 为:每克样品中的菌落数= (C+V)X M,其中,C表示某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V表示涂布平板时所 用的稀释液的体积(mL),M代表稀释 倍数。
❸ 菌落计数有哪些的方法
测定微生物细胞数目方法有多介绍几种
1.血细胞计数法
稀释菌液样品滴血细胞计数板上显微镜下计算4~5格细菌数并求出每小格所含细菌平均数再此依据估算总菌数
①此法缺点能区分死菌和活菌
②对压小方格界线上细菌应当取平均值计数
③此法用于测定培养液酵母菌种群数量变化
2.稀释涂布平板法
原理:每活细菌适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落培养基表面生长菌落来源于样品稀释液活菌
①方法常用来统计样品活菌数目
②统计菌落数往往比活菌实际数目低原因当两活多细胞连起时平板上观察只菌落因此统计结般用菌落数而用活菌数来表示
③土壤、水、牛奶、食品和其材料所含细菌、酵母、芽孢与孢子等数量均用此法测定适于测定样品丝状体微生物例放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等营养体等
④此法若培养成菌落通过定量菌液均匀地涂布玻片上定面积上经固定染色显微镜下计数样又称涂片计数法染色用台盼蓝台盼蓝能使死细胞染成蓝色分别计数死细胞和活细胞
3.滤膜法
滤膜法当样品菌数低时定体积湖水、海水或饮用水灯样品通过膜过滤器滤膜干燥、染色并经处理使膜透明再显微镜下计算膜上(或定面积上)细菌数
此法也通过培养观察形成菌落数来推算样品菌数例测定饮用水大肠杆菌数目:已知体积水过滤滤膜放伊红美蓝培养基上培养该培养基上大肠杆菌菌落呈现黑色根据培养基上黑色菌落数目计算出水样大肠杆菌数目
此法也统计样品活菌数目
4.比浊法
原理定范围内菌悬液细胞浓度与混浊度成正比即与光密度成正比菌越多光密度越大因此借助与分光光度计定波长下测定菌悬液光密度光密度表示菌量实验测量时定要控制菌浓度与光密度成正比线性范围内否则准确
5.显微镜直接计数法
课本生物选修1生物技术实践P22除了上述活菌计数法外显微镜直接计数也测定微生物数量常用方法里说显微镜直接计数我认应该稀释涂布基础上培养成菌落而通过染色方法显微镜下直接计数再滤膜法也样有两种情况
另外微生物计数法发展迅速多种多样快速、简易、自动化仪器和装置等方法用来统计微生物数目。
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❹ 菌落总数怎么算
应该取均值在30-300之间的稀释度进行菌落计数,像你的例子就应该使用10倍稀释度的进行计算。平均值是43,那么样品如果是固体,那么结果就是430CFU/g,如果是液体就是430CFU/ml。
计数时应选取菌落数在30~300之间的平板(SN标准要求为25~250个菌落),若有二个稀释度均在30~300之间时,按国家标准方法要求应以二者比值决定,比值小于或等于2取平均数,比值大于2则其较小数字(有的规定不考虑其比值大小,均以平均数报告)。
在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数。
按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃培养48h,能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数,所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。
因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。
(4)效果的监测方法中细菌菌落数总数计算方法为扩展阅读:
菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每克(或每ml)原始样品中所含细菌菌落总数。
国内外菌落总数测定方法基本一致,从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同,只是在某些具体要求方面稍有差别,如有的国家在样品稀释和倾注培养进,对吸管内液体的流速,稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。
菌落主要作为判定食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌对食品被污染程序的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据
❺ 空气细菌培养数是如何计算出来的
1 空气细菌培养的采样方法
检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法。此法简便,目前大部分医疗单位采用。在消毒处理后,操作前进行,室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点,内外点布位距墙壁1m处,室内面积>30m2设4角及中央5点,4角的布点部位距墙壁1m处。
基本原理是:空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降,在室内各采样点处放好营养琼脂平板,采样高度距地面0.8~1.5m,采样时,将平板盖打开,暴露5min或10min,盖好平板。将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。
2 细菌数的计算方法细菌总数(cfu/m3=4500N/A×T)
式中A=平板面积(cm2) T——平板暴露时间(min) N——平均菌落数(cfu)
这个计算公式是根据在面积100cm3的培养基表面,5min内能落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。
3 空气消毒效果和污染状况的评价空气消毒效果的比较
应在消毒前后取样进行培养,如消毒后空气中细菌数明显下降,说明消毒效果好,下面规定适用GB15982——1995规定:Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3,并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格;Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格。
Ⅰ类环境包括层流洁净手术室和层流洁净病房只能采用层流通风才能空气中的微生物减到此标准以下。Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房、采用循环风紫外线空气消毒器或静电吸附式空气消毒器,这类均为有人房间,必须采用对人无毒无害且可连续消毒才能使空气中的微生物减到此标准以下。Ⅲ类环境包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病房室和房间,采用紫外线消毒,化学消毒剂熏蒸或喷雾消毒。
❻ 手卫生效果的监测方法中细菌菌落数总数计算方法是什么
手细菌菌落总数=平板上平均菌落数×稀释倍数/30×2
❼ 微生物检验菌落总数计算方法是什么
7.1x0dx0a菌落总数的计算方法x0dx0a7.1.1x0dx0a若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个平板菌落数的平均值,再将平x0dx0a均值乘以相应稀释倍数,作为每 g(mL)样品中菌落总数结果。x0dx0a7.1.2x0dx0a若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按公式(1)计算:x0dx0a(1)x0dx0ax0dx0a式中:x0dx0aN——样品中菌落数;x0dx0a∑C——平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和;x0dx0an1——第一稀释度(低稀释倍数)平板个数;x0dx0an2——第二稀释度(高稀释倍数)平板个数;x0dx0a。x0dx0ad——稀释因子(第一稀释度)x0dx0a若所有稀释度的平板上菌落数均大于 300 CFU,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可x0dx0a7.1.3x0dx0a记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。x0dx0a若所有稀释度的平板菌落数均小于 30 CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计x0dx0a7.1.4x0dx0a算。x0dx0a7.1.5x0dx0a若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于 1 乘以最低稀释倍数计算。x0dx0a若所有稀释度的平板菌落数均不在 30 CFU~300 CFU 之间,x0dx0a其中一部分小于 30 CFU 或大于 300x0dx0a7.1.6x0dx0aCFU 时,则以最接近 30 CFU 或 300 CFU 的平均菌落数乘以稀释倍数计算。x0dx0a 这里有个例子参考一下以上是<食品安全国家标准食品微生物学检验 菌落总数测定>中的计算方法。
❽ 菌落总数标准,菌落总数计数方法
膨化食品的菌落总数不得超过10000cfu/g,大肠菌群不得超过90MPN/100g。固体饮料产品的菌落总数不得超过1000cfu/g,大肠菌群应不得超过90MPN/100g,霉菌不得超过50cfu/g。食醋中的菌落总数不得超过10000cfu/mL。
一、菌落总数标准
1、膨化食品:膨化食品的菌落总数不得超过10000cfu/g,大肠菌群不得超过90MPN/100g。
2、固体饮料:固体饮料产品的菌落总数不得超过1000cfu/g,大肠菌群应不得超过90MPN/100g,霉菌不得超过50cfu/g。
3、糕点、面包、月饼:月饼产品中菌落总数不得超过1500cfu/g,大肠菌群不得超过30MPN/100g,霉菌不得超过100cfu/g。蛋糕产品中的菌落总数不得超过10000cfu/g,大肠菌群不得超过300MPN/100g,霉菌不得超过150cfu/g。
4、食醋:食醋中的菌落总数不得超过10000cfu/mL 。
5、饼干:非夹心饼干的菌落总数不得超过750cfu/g,夹心饼干的菌落总数不得超过2000cfu/g,饼干产品的霉菌计数不得超过50cfu/g。
6、灭菌乳:灭菌乳菌落总数不得超过10cfu/g,大肠菌群不得超过3MPN/100g。
7、冷冻饮品:含淀粉或果类的冷冻饮品菌落总数不得超过3000cfu/g,大肠菌群不得超过100MPN/100g,含乳蛋的冷冻饮品的菌落总数不得超过25000cfu/g,大肠菌群不得超过450MPN/100g。
8、蜜饯:蜜饯食品中菌落总数不得超过1000cfu/g,霉菌不得超过50cfu/g。
9、调味品:鸡精调味料中大肠菌群不得超过90MPN/100g。
10、瓶装水:饮用纯净水的菌落总数不得超过20cfu/ml,大肠菌群不得超过3MPN/100ml。瓶(桶)装饮用水的菌落总数不得超过50cfu/ml,大肠菌群不得超过3MPN/100ml。天然矿泉水的菌落总数不得超过50cfu/ml,大肠菌群应为0。
11、酱腌菜:酱腌菜产品的大肠菌群不得超过30MPN/100g。
12、食糖:白砂糖、绵白糖的菌落总数不得超过100cfu/g。
13、肉干、肉脯:肉制品中大肠菌群不得超过30MPN/100g。
14、油炸小食品:油炸类炒货大肠菌群不得超过30MPN/100g。
15、果、蔬汁饮料:果(蔬)汁及果(蔬)汁饮料产品的菌落总数不得超过100cfu/mL,酵母不得超过20cfu/mL。
16、果冻:果冻中菌落总数不得超过100cfu/g,大肠菌群不得超过30MPN/100g。
17、黄酒:黄酒产品的菌落总数不得超过50cfu/ml。
18、芝麻酱:芝麻酱产品的大肠菌群不得超过90个/100g。
19、碳酸饮料:碳酸饮料产品的酵母不得超过10cfu/mL,菌落总数不得超过100cfu/mL,大肠菌群不得超过6MPN/100mL。
20、熟肉制品:熟肉制品的菌落总数不得超过30000cfu/g。
21、豆制品、面筋:定型包装非发酵豆制品的菌落总数不得超过750cfu/g;定型包装发酵性豆制品的大肠菌群不得超过30MPN/100g。
22、方便面:方便面的面块+调料菌落总数不得超过50000cfu/g,大肠菌群不得超过150MPN/100g。
二、菌落总数计数方法
1、具体操作方法
(1)培养到一定时间后,计算每个平板上的菌落数。可用肉眼观察,必要时可以使用放大镜检查。记下各平板的菌落总数后,求出同稀释度的各平板平均菌落数,计算出原始样品中每克(或每毫升)中的菌落数。
(2)到达规定培养时间后,应当立即计数。如果不能立即计数,应将平板放置于0-4℃的环境下,且不得超过24小时。
2、菌落数选择
(1)当平板上面有链状菌落生长,如果呈链状生长的菌落之间没有任何明显界限,则应作为一个菌落计算;如存在有几条不同来源的链,则每条链均应按一个菌落计算,不能把链上生长的每一个菌落分开计数。
(2)当平板上面有片状菌落生长,该平板一般不宜采用,如果片状菌落不到平板的一半,而另一半又分布均匀,则可以使用半个平板的菌落数乘以2代表全平板的菌落数。
(3)当平板内的菌落数过多(即所有稀释度均大于300时),但分布很均匀的时候,可取平板的一半或四分之一计数,再乘以相应稀释倍数作为该平板的菌落数。
(4)不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比(同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近),即稀释倍数愈高菌落数愈少,稀释倍数愈低菌落数愈多。如果出现逆反现象,应视为检验中的差错,不作为检样计数报告的依据。
3、稀释度选择
(1)计数时应选取菌落数在30-300之间,无蔓延菌落生长的平板(SN标准要求为25-250个菌落),然后乘以稀释倍数进行报告。
(2)如果稀释度均大于300,则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告。
(3)如果稀释度均小于30,则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告。
(4)如果菌落数有的大于300,有的又小于30,但均不在30-300之间,则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告。
(5)如果所有稀释度均无菌落生长,则应按小于1乘以最低稀释倍数报告。
(6)如果2个稀释度均在30-300之间,按国家标准方法要求应以二者比值决定,比值小于或等于2时取平均数,比值大于2则选择较小数字。
(7)如果只有一个稀释度平板上的菌落数在30-300之间,应当计算两个平板菌落数的平均值,然后根据平均值乘以相应稀释倍数进行计算。
4、报告
(1)当菌落数在1-100以内时,按照实际数字进行报告。如果菌落数大于100时,报告前2位有效数字,第3位数四舍五入计算。
(2)固体检样以克为单位报告,液体检样以毫升为单位报告,表面涂擦则以平方厘米为单位报告。
❾ 细菌总数的计算方法
细菌总数计数的研究已有很多,目前国标规定的方法为平板计数法,其检验方法是:在玻璃平皿内,接种一毫升水样或稀释水样于加热液化的营养琼脂培养基中,冷却凝固后在37°C培养24小时,培养基上的菌落数或乘以水样的稀释倍数即为细菌总数。有的国家把培养温度定为35°C或其他温度,也有把培养时间定为48小时的。这种方法精度高,但耗时长,难以满足实际工作需要。为了简化检测程序、缩短检测时间,国内外学者进行了大量的快速检测方法的研究,提出了阻抗检测法、Simplate TM全平器计数法、微菌落技术、纸片法等检测方法,取得了一定的成果,但检测时间仍在4 h以上。
本研究在分析了已有研究成果的基础上,提出了在滤膜上染色后,直接计数的细菌总数检测方法,具体步骤为:用集菌仪进行细菌收集→在膜上进行染色→在油镜下计数→按公式计算出菌液浓度。实验结果表明,该方法与传统的平板培养法无显着性差异,检测时间约1 h,是一种快速的细菌总数检测方法。
❿ 细菌总菌落数的计算
菌落数与稀释倍数不一定成倍数关系,一般菌落数越大,倍数关系越差。上面数据的计算结果为:
(220+78)/(1+0.1)×10^3=2.7×10^5
测定菌落总数时应该取1ml,菌落总数也是指1ml中含有的菌落总数,如果是取的0.2ml,结果应该先乘以5再乘稀释倍数。