‘壹’ 2微克RNA反转录后的cDNA浓度大约为多少
可以大概估算。考虑一下几个因素：
1. 大多数RNA是28s，16s ，5s等rRNA，mRNA其实占少数。他们都会反转录为cDNA.。你若估计mRNA反转为cDNA的量较难。
2、反转录和你添加的引物量有关。假设你加了1份引物，那就只能转录1分cDNA，按100%的反转效率计算，你能合成大概2ug cDNA。若你添加了2份引物，那就只能转录2份cDNA，按100%的反转效率计算，你能合成大概4ug cDNA。这些都是估算。
3.你问的是浓度，我上面大概估算了下量。折算为浓度时，须看你做上述反应，用的反应体系是多大？50ul？100ul？ 有估算量和反应体系，你大概就能算出cDNA的浓度啦。
4.尽管能基本估算出浓度，但是这样做，意义不大。
‘贰’ 反转录PCR和荧光定量PCR
反转录PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）又称为逆转录PCR。其原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级，使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于：分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。
荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品的初始模版。
原理是PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA任一一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
科学研究应用于：医学、农牧、生物相关分子生物学定量研究。
‘叁’ 知道RNA浓度，反转录时怎么计算加的模板量呢 ，RNA浓度单位是ng/ul 模板的加入量单位为ug，还有PCR也是ug
看你的结果，有几种原因：1，模版浓度太低；2，上样量太少；3，缓冲液有问题。你的RNA浓度是1749.91ng/ul ，也就是1.74ug/ul，因此加入1ul的RNA也就差不多是1ug的量。
‘肆’ 做逆转录实验中，配置25ul体系，需要Total RNA 1ug ，请问这1ug怎么换算成ul
这要通过分光光度计进行测定，算出总RNA的含量，取10ulRNA提取液，稀释300倍，以同体积的水作为对照，用UV-2401紫外分光光度计测RNA260nm处和280nm处的吸收值并计算纯度公式OD260/OD280。浓度公式=总浓度（ng/nl）=（OD260）*（稀释倍数n）*40
如要计算很麻烦，所以一般加2-5ul，量多不碍事。
自己的经验所得~~
‘伍’ PCR时，将RNA反转录成cDNA反应体系怎么算
pcr时，将rna反转录成cdna反应体系怎么算
再以cdna为模板进行pcr扩增，而获得目的基因或检测基因表达。rt-pcr使rna检测的灵敏性提高了几个数量级，使一些极为微量rna样品分析成为可能。该技术主要用于：分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cdna探针、构建rna高效转录系统。
rt-
pcr即逆转录pcr，是将rna的逆转录（rt）和cdna的聚合酶链式扩增反应（pcr）相结合的技术。rt-pcr技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞/组织中基因表达水平，细胞中rna病毒的含量和直接克隆特定基因的cdna序列等。