⑴ 询问利用酶比色法及酶联法测定苹果酸浓度的具体方法步骤
作为测定果蔬生活力状况的化学指标，必须对克雷布斯(Krebs)循环中的中间产物进行调查，特别是柠檬酸和苹果酸。关于果实中这两种酸已经有了不少的文献，可以用不同的分析方法测定，我们选择了酶光谱分析法，因为这种分法快而且明确。我们又发展了一种在不利条件下(例如，运输式抽测)，可用来测定苹果酸的酶比色分析法。我们用这种分析法检验了若干种农产品，特别检验了葡萄。根据莫勃林反应和还原型烟酿胺线嘿吟二核贰酸(NAD)的氧化作用，我们发展了分析苹果酸的比色测定方法。这种氧化作用是和氯化碘硝四陛(INT)发生的。还原型烟酰胺线膘吟二核贰酸(NAD)变为红色的甲潜，在有心肌黄酶的时候，它的吸收光可在492毫微米下测定。当苹果酸的量增加，这种吸收也增加。样品溶液的最后体积为2．33毫升，并包括下列数据：o．6毫升的缓冲溶液，pH8．6，其中包含磷酸钾o．05克分子，三乙醇脓0．2克分子，每一毫升缓冲溶液中有(Trzton×100)0．02毫升，谷氨酸0．1克分子，重蒸馏水l毫升；0．2毫升的溶液，其中包括氧化型烟酰胺线嗓吟二核贰酸(NAD)6．7毫克分子和心肌黄酶12个单位(1毫克／毫升)；2．0毫升氯化碘硝四陛(1N了)溶液1．2毫升分子；o．2毫升样品提取物；0．02毫升谷氨酸草醋酸氨基移转酶(GOT)溶液(·2毫克／毫升(和0．0l毫升L——苹果酸盐脱氢酶(MDH)溶液(5毫克／毫升)。在再度蒸馏中，兑入等量的IJ——苹果酸盐脱氢酶(MDH)溶液。苹果酸的数字可用校准图用分光光度分析法测定。文字识别可能有误，最好看一下原文。见文献：书名: 《第十五届国际制冷大会论文译丛 下册》 ，作者: 《制冷学报》编辑部编 ，第25页：受冷害引起生理病害的水果内的有机酸
⑵ 果酸的果酸浓度
果酸的浓度差异
极低浓度的果酸，只有保湿效果。浓度稍微提高时，才有去角质的作用，可以破坏角质层细胞间的连结，促进皮肤的新陈代谢。在更高浓度下，它的破坏力就比较大，效果达到真皮组织，可用来做化学换肤。一般而言，浓度越高效果越明显，但是发生副作用的机会也相对增大。
不同浓度果酸的作用
1、低浓度果酸（小于10%）：果酸能降低表皮角质细胞间的凝结力，可以去除老化角质，改善粗糙、暗沉、调理肤质。
2、中浓度果酸（10%－30%）：果酸效果可以到达真皮组织，对于青春痘、淡化黑斑、抚平皱纹的效果良好。
3、高浓度果酸（大于30%）：具有相当强的渗透力，可将老化角质一次剥落，加速去斑除皱的效果。但是高浓度果酸属换肤性质，最好寻求专业的医生进行治疗。
⑶ 果酸换肤的浓度怎样把握
自己不要随意使用果酸，浓度把握不好容易毁坏皮肤。要在医生的指导下使用。
⑷ 用层析法测定苹果酸乳酸含量时层析液用什么
答案：层析液采用（能够充分溶解苹果酸乳酸的溶液）
我记得高中没有硬性要求溶液具体名称，也可能我没学好，具体可以向老师请教
⑸ 怎么查护肤品果酸浓度
所有在中国出售的产品都必须使用简体中文标注成分表，并且是按含量、浓度由高到低，依次降序排列，可以在成分表中查看护肤品中果酸的浓度。
⑹ 果酸的使用方法
果酸的使用方法
1、从低浓度(1-4%)开始尝试。
2、如果你的肌肤受损严重，如晒伤或者过敏等，需要给肌肤一个修复过程，可以持续使用三天的舒缓保湿面膜，将肌肤调整至较为健康状态。
3、在开始使用3-7天内，有些人会出现脱皮，出油严重等现象，不用担心，等肌肤适应后会使肌肤的储水能力更强。
4、使用果酸期间一定要加强注意防晒。
5、使用果酸护肤时，不宜再使用其他去角质产品，不能随意揉搓肌肤，还要避免使用A酸，水杨酸等酸性成分的化妆品。
6、洗脸，使用化妆水20分钟后，再使用果酸产品。
7、先擦T型区再延展至面部，从角质层厚的地方至薄的地方，眼部和唇周放在最后。
8、可以用乳液中和浓度过高的果酸产品。
9、根据需要每周使用一次，有严重过敏的皮肤和在接受皮肤科治疗的患者不宜使用。
10、冬季和夏季过后是使用果酸的最佳时期。
果酸使用的注意事项
1、果酸本身就可以去角质，不需要再使用去角质的产品，也不要蒸脸，不要过度按摩，以免皮肤受伤。洗脸动作尽量轻柔，避免刺激到皮肤。高浓度的果酸与a酸、维他命c都属于PH酸碱值较低的产品，不建议同时使用。
2、使用果酸时，皮肤因为角质层较薄，由可能对一些外来刺激较敏感，如日晒、风吹及一些含酒精、去角质成份的化妆保养品等。增加一些保护措施，如使用滋润保湿剂、修复药膏是必要的。虽然果酸不像a酸有光敏感性，早晚都可以使用，但是去角质后不擦防晒乳，反而容易晒黑晒伤。所以白天擦果酸时一定要注意防晒，尽量不要让皮肤受到日晒刺激。
3、皮肤如果出现刺痛、发红、发痒、脱皮等不适的症状，应该立刻停用果酸，可用冷水敷脸10-20分钟，加以镇静，并使用修复乳霜增加滋润保养，严重时可以到医院让医生用修护药膏处理。再次使用时，还是要从低浓度用起，再慢慢增加浓度及使用次数，通过一段时间后会因为耐受性增加而逐渐适应。
4、皮肤敏感者使用前可以先做贴布试验，或是涂抹在手臂内侧，无刺激反应再考虑使用。使用时应该避开黏膜及眼睛周围，口唇附近因为皮肤薄弱，使用时也应该减量。
在用果酸护肤的同时，对于一些不明白的事项，可以请教专业的美容师，这样才更有利于我们使用好果酸来护肤。
⑺ 怎样制作果酸
大致了解了一下，果酸有很多种，然后天然的果酸提取，与其它的酸性物质大致不一样，但也可以用来增加它的幅度；
根据我对柠檬的初步了解，我发现，对于酸类物质的提取，一定要优先在工具上得到保障，不然提取出来的都会因为工具的化学中和反应，造成提取的东西有毒或者出现另类的杂质。
以下就以柠檬酸为例子：
我没有做过，就先以我的个人设想来……。
用塑料或者玻璃杯；
挤压器，同样用纯塑料或者其它物质，总之不能被柠檬酸发生任何反应才行；
过滤；
瓶装；
因为它是一种可以直接使用的酸类，估计比较安全，但说实话，真的不建议实用，我发现这东西，没有中和物，食用好似会对人产生危害；
它的中和物，一般是糖，以及不会发生反应的塑料杯才行；
而且我看网上的美容用的果酸流程，应该都是错误的，会造成错误的后果，我再说明一下，柠檬这东西，真的是个危险的东西，不要随便食用，这是个人的见解；
⑻ 怎样测定饮料中的苹果酸
苹果酸的检验
2009-7-27 中国生物化工网 孙先生
http://www.laodafang.net/shtmlnewsfiles/ecomnews/521/2009/200972709371052568.shtml
定性检验
1.三氯化钛法
在试管中加入约5ml待试溶液，滴入3滴15%TiC13溶液，在几分钟内出现白色沉淀，表明有苹果酸存在。如果气温太低，可将试管握在手中温热，但不能在灯焰上加热，因为煮沸时柠檬酸溶液也有类似反应，生成白色沉淀。这种方法也可以定性草酸，因为草酸溶液在这种情况下显示典型的黄色。
这种方法苹果酸的最低检出浓度为0.5g/1。在有其他有机酸、无机酸或糖存在时，最低检出浓度有所变化，见表1——27。
表1——27 各种酸存在时TiC13法苹果酸最低检出浓度
酸种类
最低检出浓度（g/1）
酸种类
最低检出浓度（g/1）
水
0.5
丙酮酸
1
琥珀酸
0.5
柠檬酸
2
马来酸
0.5
草酸
2
酒石酸
0.4
硫酸
2
富马酸
0.8
葡萄糖酸
1.6
α-酮戊二酸
0.8
注：硫酸浓度为0.05mol/1,其他物质浓度为1g/1。
2.美国药典法。
取样约5g，溶解于1ml 1mol/1硫酸中，加1ml 0.003%de 2-萘酚硫酸溶液，混匀。溶液具有蓝色荧光，透射光呈淡黄色。
3．纸层析法
取新华5号层析滤纸，裁成15×20cm。点样线距底边2cm，点样间距2cm，点样量2μl。
展开剂：正丁醇：85%甲酸：水=5：5：1。展开剂在钟罩内平衡3h,然后放人点好样的滤纸，按上行法展开，展开时间约需3h。
显色剂：0.2%溴甲酚绿喷雾，有机酸显黄色斑点。也可以用混合显色剂（0.2%溴加酚绿：0.05%甲基红：0.5mol/1NaOH=1：1：0.15）喷雾显色，有机酸呈桔红色斑点，很明显。各种酸的Rf值见表1——28。
表1——28 有机酸纸层析的Rf值
苹果酸 0.697
富马酸 0.927
草酸 0.753
马来酸 0.871
柠檬酸 0.607
酒石酸 0.551
琥珀酸 0.860
葡萄糖酸 0.466
控制纸层析斑点圆正度的关键除了正确选择滤纸和展开剂之外，还要控制展开剂的平衡时间。采用本方法时，平衡时间以3h为宜。时间过短斑点横向扩散，过长则纵向扩散，甚至拖尾，展开剂配制好后存放8～10h以上已经出现分层现象，不再能使用。
苹果酸
斑点性状 扁椭圆形 圆形 竖椭圆形 竖长椭圆形
平衡时间（h） ＜1 3 6 ＞8
展开剂平衡时间对斑点圆正度的影响
展开剂组成：正戊醇：85%甲酸：水=5：5：1
定量检验
1.酸碱滴定法
取约2g苹果酸，精密称定。在一只三角瓶中溶于40ml新沸过的冷水中，加入酚酞指示剂，用1mol/1NaOH滴定至开始出现粉红色（持续时间不低于30s）。1ml 1mol/1NaOH溶液相当于67.04mg C4H6O5。
美国药典采用此法。
2.紫外分光光度法
试剂：（1）硫酸96%，分析纯，不含硝酸盐。
（2）2，7-萘二酚溶液：1g2，7-萘二酚溶于100ml96%硫酸中。
操作：取1ml样品溶液（苹果酸浓度控制在0.05～0.8mg/1）加入6ml试剂（1）中，加入0.1ml试剂（2），在100℃下水浴加热15～20min，冷至接近室温后，在385nm紫外光下比色测定。同时以空白水样同法处理，作仪器调零之用。
用纸层定性后的样品，将显色斑点剪下，用1ml水洗脱，也可采用此法测定。
根据上述在385nm下测得的吸光度值，可以从标准曲线上查得苹果酸含量。
3.荧光分光光度法
试剂：（1）80%硫酸
（2）地衣酚溶液：称取0.250g地衣酚，加少许95%硫酸溶解后，转到50ml溶量瓶中，并用硫酸定容至刻度。
（3）苹果酸标准溶液：称取苹果酸标准样0.1028g，用去离子水溶解后转入100ml容量瓶中，并用水定容至刻度。
操作：在25ml干燥的带塞比色管中，加入1ml试剂（2），并加入待试溶液10μL(浓度不超过3g/1)。同时用水和20μL试剂30min显色。取出放冷，再用冰浴冷却后，用80%硫酸稀释至刻度，摇匀。在最大激活光波长（369nm）和吸收光波长（445nm）下测定荧光强度。测定时以水样调零，以标准试剂调在45±0.5荧光强度。根据荧光强度，可以标准曲线上查得苹果酸含量。
富马酸和马来酸含量测定
美国药典规定，苹果酸除了用滴定法测定酸含量以外，还需测定富马酸和马来酸含量，因为化学合成法或发酵法生产的苹果酸中，都可能有这两种酸存在。测定采用极普法，方法如下。
1.试剂
（1）电解质溶液：74.5gKCl溶于1000ml容量瓶的500ml水中，加100ml盐酸，再加水至刻度，摇匀。
（2）缓冲溶液：溶解130.5Gk2HPO4于1000ml水中，再用KH2PO4调至PH7.0.
（3）明胶溶液：在磁力搅拌下，溶解1g明胶于65ml沸水中，冷后添加35ml乙醇作保护剂，混匀。
（4）标准液制备：取约20g苹果酸，100mg药典级富马酸和10mg药典级马来酸，分别精密称定，加到500ml容量瓶中，并加300ml 1mol/1 NaOH，混匀。加入酚酞试液，继续用同样NaOH溶液中和至淡粉红色，但此颜色持续不超过30s。用水稀释至刻度，混匀。
（5）试样制备：取约4g试样，精密称定，溶于100ml容量瓶中的25ml水中，加入酚酞试液，用1mol/1NaOH中和到显粉红色，但持续不超过30s,用水稀释至刻度，混匀。
2.操作
取2份25.0ml试样，分别移入100ml容量瓶中（记为试样A和试样B）。用电解质溶液稀释A至刻度，混匀。试样B中加入50ml缓冲液，用水稀释至刻度，混匀。
用一部分试样A洗涤极谱仪样品槽后，在槽中加入适量的样品A，将样品槽浸在25.0±0.5℃的水浴中，加入两滴明胶溶液，往试样溶液中通入氮气5Min以上，以驱除空气。插入一支适用于极谱仪的滴汞电极（负电极），调节电流灵敏度至适当水平，用一只饱和甘汞电极作为参比电极，以每分钟0.2伏的变化速率，记录-0.1～-0.8伏区间的极谱图。
取25.0ml标准样品入100ml容量瓶中，用电解质溶液稀释至刻度，混匀。测定这种标准样品A的极谱，方法与上述试样A测定相同。
每份极谱图中，测出靠近-0.56V（半波电压）处的波高。试样A的波高记为iu，标准样A的波高记为is。
除了以0.1v/min的电压变化速率和记录-1.05～-1.7v区间的极谱图外，试样B和标准样B的测定方法与上述方法相同。在每份极谱图中，测出马来酸在半波电压（靠近-1.33v）处的波高。对于试样B，这个波高记为iu，对于标准样B记为is。用下试计算混在苹果酸中的马来酸和富马酸含量（mg）:
500c iu(is-iu)
式中，c是标准样中混入的马来酸和富马酸浓度（g/1）。类似地可用下式计算混在苹果酸中的马来酸含量（mg）:
500cˊiu(is-iu)
式中cˊ代表标准样中混入的马来酸浓度（g/1）。上述两个值之差是混入的富马酸含量（mg）.
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