一、阴道分泌物显微镜
阴道分泌物显微镜是一种临床工具，用于检查宫颈、阴道和外阴组织是否有异常变化。它由显微镜、套管、显微镜台及置物架构成。这种设备的优势在于能提高活检的准确性，提高阳性率。
二、阴道分泌物检查方法
1、阴道滴虫检查
（1）悬滴法：使用棉签从阴道后穹窿取少量分泌物，加入生理盐水试管中立即送检。也可在玻片上滴1～2滴生理盐水，直接放置少量白带，摇匀后立即在显微镜下观察。滴虫在显微镜下呈现梨形，颜色较绿，体积是白细胞的2～3倍，常在原位活动。在高倍镜下还能观察到顶端的鞭毛。采集样本时避免使用化学试剂或肥皂水，以防滴虫死亡导致误诊。
（2）涂片法：采用上述方法取白带直接涂片，使用瑞氏或姬姆萨染色后在显微镜下检查滴虫。
2、阴道真菌检查
取阴道分泌物或阴道白膜涂片，滴10%氢氧化钾溶液1滴，盖上玻片后在显微镜下寻找菌丝及其中的芽孢。也可不盖玻片直接观察。涂片还可以使用革兰染色法，必要时送培养。
3、阴道清洁度检查
根据涂片中杂菌和白细胞的数量来划分等级。取阴道后穹窿分泌物涂片，干燥后染色或直接在显微镜下观察。I度：无杂菌和白细胞，视野非常干净；Ⅱ度：少量白细胞和杂菌，阴道杆菌和上皮细胞中等量，常见于经产妇，属于正常阴道液；Ⅲ度：较多杂菌和白细胞，少量阴道杆菌和上皮细胞，表明存在炎症；Ⅳ度：无上皮细胞和阴道杆菌，仅见白细胞和杂菌。
在简单的妇科检查中，阴道镜可以替代显微镜进行常规检查。
㈡ 血液检验标本采集方法
血液检验标本采集方法
血液检验标本分为全血、血浆、血清等。全血标本主要用于临床血液学检查,例如血细胞计数和分类、形态学检查等;血浆标本适合内分泌激素、血栓和止血检测血清标本多适合于临床化学和免疫学的检测。按照血标本采集部位的不同，分为静脉血、动脉血和毛细血管血三种。绝大多数检查采用静脉血,少数检查如血气分析、乳酸和丙酮酸测定等需要采集动脉血，毛细血管血主要用于各种微量法检查或大规模普查。下面是我为大家带来的血液检验标本采集方法，欢迎阅读。
一、静脉血采集方法、注意事项和采集样品所用材料的安全处置
1、止血带或压脉器：采集静脉血时，止血带压迫静脉时间不宜过长,以不超过40秒为宜，否则容易引起淤血、静脉扩张，并且影响某些指标的检查结果,如乳酸升高、pH值降低、K+、Ca2+、肌酸激酶升高等。
2、采血时间与部位：大多数化验检查要求清晨、空腹、采集静脉血应尽可能避免在输液同时取血,输液不仅使血液稀释，而且对实验室检查结果发生严重干扰，特别是血糖和电解质。
3、避免溶血、杂质污染：采血器具必须无菌、干燥、洁净.避免特别用力抽吸和推注、避免化学污染和细菌污染引起的溶血。因为红细胞的某些成分与血清(浆)不同，样本溶血可使红细胞某些成分释放,影响实验室检查结果。
4、血样的采集：血样要求在每一天的同一时间采集，理想的时间是早晨7：00到8：00，尤其是监测为目的时，更要保证标本采集时间的统一。最后一次食物和液体摄入应在前一天下午6：00到7：00(急诊检验例外)。血样采集应在不服药期间，如在早晨服前。血样采集时，患者应仰卧位，采血点应在同一静脉区，通常为手臂静脉。
5、标本采集后须立即送检，放置过久影响检验结果。当取血不顺利时,切忌在同一处反复穿刺，易导致标本溶血或有小凝块，影响检测结果。
6、采集血培养标本时应先注射厌氧瓶，尽量减少接触空气时间。
7、微量元素测定采集标本的注射器和容器不能含游离金属。
8、采集样品所用材料的安全处置：使用后的采血针、注射器针头等锐器物应当直接放入不能刺穿的利器盒内或毁型器内进行安全处置，禁止对使用后的一次性针头复帽，禁止用手直接接触使用过的针头、刀片等锐器物;注射器针筒、棉签等其他医疗废物放入黄色医疗废物袋中，医疗废物和生活垃圾分类收集存放。消毒毁形后的医疗废物必须交给指定的医疗废物处理厂，不得擅自废弃。
二、临床化学/免疫检验标本
临床化学/免疫检验多用非抗凝血标本,最好使用真空负压采血管。
标本采集主要注意事项有：
1、化学项目大多数需要空腹采静脉血，多个单项化学检测项目组合检验时一般可采管血;
2、采血量视检查项目多少不同而异，通常为4.0～5.0ml;
3、多个组合检测项目同时采血时应按下列顺序采血：
血培养——无添加剂管凝血管——有添加剂管。
有添加剂管的顺序为：橼酸盐管——肝素管——EDTA管——草酸盐/氟化钠管。
4、不论是抗凝血还是非抗凝血，为了缩短血清或血浆与血细胞的接触时间，血液标本收集后，须尽可能早地将血清或血浆从全血中分离出来，避免由此而影响检验结果的准确性。从血液标本采集开始，必须在2h内将全血处理为血清或血浆。
1)血清(非抗凝血)：采血后标本于22～25℃(室温)15～30min后可自行(自发)完全凝固，禁用木棍和玻棒等剥离凝块;冷藏标本凝集较慢，加促凝剂者凝集加快。
2)血浆(抗凝血)：应采用抗凝管采血,采血后立即颠倒混合5～10次，采血后数分钟内可离心分离血浆。
3)冷藏标本：用于稳定血液中温度依赖性成分(抑制细胞代谢)的检测项目，标本于2～8℃冷藏(标本采集后立即置于冰箱中，冷藏必须充分);标本需冷藏的测定项目有：儿茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH/血气、NH3、乳酸、丙酮酸等。全血标本一般不冷藏，血钾测定标本冷藏不得>2h。全血标本切忌冷冻。
4)代谢抑制剂和防腐剂的应用：用于抑制细胞代谢。血标本中加入氟化钠后，血细胞未分离情况下血标本中Glu，22～25℃稳定24h.2～8℃稳定48h;氟化钠不适用于新生儿及儿童的Glu测定(因儿童PCV高，细胞糖酵解难以控制);氟化钠一麝香草酚混合剂不适合酶学检测(因氟化钠一麝香草酚混合剂抑制酶活性));甲醛草酸钾抗凝保存剂不适用于血糖测定。
三、红细胞沉降率(血沉，ESR)检测标本
静脉采集枸橼酸钠(109mmol/L，即32.06g/L)抗凝血(枸橼酸钠抗凝管采血)，黑帽管。
采血注意事项：
1、单独采1管血，准备采血至2ml刻度线(抗凝剂：全血=1：4);
2、采血后立即上下颠倒混合5~10次;
3、采血后应尽快送检(必须2h内检测)。
四、血常规(全血细胞分析)检验标本
一般用EDTA1.5～2.2mg/ml抗凝(EDTA抗凝采血管-紫帽管)。
采血注意事项：
1、采血后立即上下颠倒混匀，5～10次.不可用力震荡;
2、应按抗凝管刻度采血至2ml，可不用空腹;
3、采血后应尽快送检(需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定，因为超过2小时WBC形态会发生改变);
4、血型与血常规可采1管血。
五、75克葡萄糖耐量试验(OGTT)/胰岛素释放试验/C-肽释放试验
1、病人准备：试验前3日，每日进食碳水化合物量不低于250-300克，且维持正常活动，影响试验的药物(如：咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等)应在3日前停用，试验前病人应10～16小时不进食。
2、标本采集：临床上常用方法是清晨抽空腹血后，口服75克葡萄糖，再于给糖后0.5、1、2、3小时各采血2ml/1次(共5次)。
3、标本保存：采血后1小时内分离血清并及时冷藏送检或采用血糖专用抗凝管采血，于2～8℃保存。
4、注意事项：胰岛素测定受溶血影响较大，采血时应避免溶血。
六、高血压系列检验标本
1、高血压三项(肾素、血管紧张素I、II)
1)病人准备：β-阻断剂、血管扩张剂、利尿剂及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平，一般要在停药后2周测定肾素活性(PRA)，利血平等代谢慢的药物应在停药3周测定。不宜停药的.病人改服胍乙啶等影响PRA较小的降压药。钠摄入量影响机体PRA水平，故病人测定PRA前3天应适当减少食盐摄入量，最好同时测定取血前24小时尿钠含量，以供分析PRA结果时参考;
2)标本采集：静脉取血4～5ml，拔除针头后缓慢注入到专用抗凝管中,盖好管塞后上
下颠倒5次,混匀后2500转/分,离心5～10分钟,分离血浆,将血浆装入专用血浆管后低温送检。如不能立即送检,需尽快冰冻保存(-15℃)。溶血标本不能检测;
3)标本类型、标本量：专用抗凝管采血，分离血浆，取2ml送检;
4)标本保存：低温冰箱保存(-15℃以下)，可保存2个月;
5)注意事项：申请单上应注明抽血时的体位(卧位：病人在早上6-8时起床前，取静脉血;立位：病人起床后活动3小时，取静脉血。)和饮食情况(普食饮食、低钠饮食);标本未及时分离血浆、反复冻融、溶血、保存不当、使用过期抗凝管等均可使结果受到影响。
2、醛固酮
1)病人准备：留样前应停服利尿剂至少3周，停服抗高血压药物1周;
2)标本采集：血浆醛固酮测定应采用肝素抗凝，采集后立即分离血浆，置-20℃保存
待测;尿液标本则留取24小时尿量，用10～15mL浓盐酸防腐;
3)申请单上注明：抽血时的体位(卧位、立位)和饮食情况(普食饮食、低钠饮食);
尿液标本要准确记录24小时尿量。
七、皮质醇标本采集及注意事项
正常人皮质醇的分泌存在昼夜节律，一般为早上8点或下午4点采血，送检时请务必在申请单上注明采血时间。
八、流式细胞术检测项目的标本采集及注意事项
1、淋巴细胞亚群系列
标本要求：EDTA或肝素抗凝全血2ml(推荐EDTA抗凝)
注意事项：该系列项目在不同年龄段的细胞数参考值不尽相同，所以送检时请务必在申请单上注明病人年龄。
2、白血病免疫分型
标本要求：肝素抗凝骨髓或全血2ml
注意事项：请使用白血病免疫分型专用申请单
3、人类白细胞抗原B27检测(HLA-B27)/阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)检
测标本要求：EDTA或肝素抗凝全血2ml备注：保证新鲜标本，流式细胞术检测项目需要24小时内送检;
九、微量元素检测标本采集要求
1、所有采血人员要经过严格培训并熟悉采血过程，知晓操作技术对微量元素(尤其是铅和锌)检测质量的影响。
2、采血人员应戴乳胶或聚乙烯手套，若手套涂粉，需用静脉采血皮肤清洁法处理手套后进行操作。
3、血铅检测采血时按顺序用0.2%硝酸、纯水、碘酒、酒精清洁采血区皮肤，防止环境对血铅检测的污染。
4、橡皮塞对锌有污染，故普通采血管不可使用，请使用本中心提供的专用管。
5、采集方法：采集静脉血0.5-1.0mL，采集后马上轻轻颠倒混匀，粘上条形码，装入自封袋送检。
6、如不能及时送检，应放置2-8℃冰箱保存。
7、标本凝固或含凝块，不能检测。
十、遗传学检测标本采集要求
1、标本采集：外周血标本可使用中心配送的肝素抗凝管(遗传专用)和采血针进行采集，采集后立即将试管轻轻颠倒混匀，以免凝血;脐带血标本、骨髓标本可以在穿刺成功后，打开中心配送的肝素抗凝管盖，将脐带血或骨髓注入采集管中，立即将试管轻轻颠倒混匀，以免凝血，请注意无菌操作，不要污染管盖。请避免使用注射器采集标本后直接注入采集管的方式进行标本采集，以免引起溶血;请勿使用EDTA等抗凝管采集标本。
2、标本量：外周血、脐带血、骨髓各4ml;
3、标本送检：合格标本须于采血后当天送至遗传实验室，故请于标本采集后及时通知艾迪康工作人员接收标本;标本有溶血、凝血现象，也视为不合格标本。骨髓标本应尽快送至实验室。
4、标本保存：标本采集后置于18～25℃保存，不可冷冻，不可放置于高温环境中。
5、申请单填写：请完整填写申请单，尤其是标本采集时间、性别、病史、临床诊断等。
十一、基因检测标本采集要求
1、所有用于基因诊断的标本必须用无菌试管或容器留取，严禁使用肝素抗凝管，采集标本时注意无菌操作。
2、为避免污染，送检基因诊断标本项目需单人单项目单管。
3、采集方法：
1)血液标本
抽取病人静脉血，置无菌试管中室温自然凝固或2000转/分离心，取分离出的EDTA抗凝血浆/血清送检;
2)女性分泌物标本
(1)分泌物标本采样应在非月经期进行;采样前3天内不使用阴道内药物，不冲洗阴道;24小时内不应有性行为;
(2)采集时先用棉签将宫颈口或尿道口过多的分泌物轻轻擦去，更换棉拭子，将棉拭子伸入宫颈，通过上皮交界处，旋转3～5周，以保证取得较多的柱状上皮标本，对于怀疑HPV感染的患者，尽量采集病变部位标本，可提高HPV的检出率。将取样后的棉拭子放入配套的软管中，旋紧管盖;
(3)男性分泌物标本先清洁尿道口，将棉拭子伸入男性尿道1cm，旋转3～5次获得标本，将取样后的棉拭子放入配套的软管中，旋紧管盖;
(4)疱疹液或疣体标本：对于生殖器或肛周有疣状体增生，怀疑为尖锐湿疣者，宜直接采集疣体组织置于标本管中送检。备注：疣体标本时，需要在申请单上的标本类型栏处写上“疣体”。
4、标本保存：检测靶核酸为DNA的标本，可在2～8℃下保存3天;检测靶核酸为RNA
的标本，应保存在-20℃下。
十二、骨髓检查的要求和注意事项
1、涂片要求：二张血片，六张骨髓片，怀疑白血病则需八张骨髓片。骨髓血片注明“B”，骨髓片注明“M”，以示区别。
2、申请单注意事项：
1)病例摘要:应填写全面，尤其是肝、脾、淋巴结、出血状况等与血液病相关的症状以及药物的应用等均应填写清楚;
2)化验结果：血常规结果一定不能缺，如果可能，MCV、MCH、MCHC及分类也一并填上;
3)采取骨髓部位也应填上，如果采取骨髓时不顺，应重抽，以免耽误病人;
4)写上主治医生联系方式，如科室电话、手机号码等(以便与临床密切联系)。
如何让血液健康干净？
鱼肉
鱼肉尤其是深海鱼类，其含有Ω-3脂肪酸，可以降低血管内胆固醇和甘油三脂的含量，能够降低血脂并预防高血脂引起的其他疾病。高脂血会引起高血压、动脉硬化、动脉粥样化、冠心病、心肌梗死、猝死、脂肪肝等疾病。鱼肉除了能降低血脂，还富含多种维生素和矿物质、蛋白质，营养又不容易引起肥胖。
芹菜
从中医角度来看，芹菜性味甘凉，具有清热解毒、利尿消肿的作用，可以调理肝火旺盛、积食、头痛、失眠头痛和心烦。
从芹菜所含有的成分来看，其含有的维生素P属于黄酮类化合物，可帮助血管恢复弹性，舒张血管，降血压。防治高血压引起的脑溢血，对皮肤上的紫癜也有作用。同时含有大量的膳食纤维可以延缓血糖的升高和降低胆固醇。
荞麦
荞麦含有的膳食纤维是精制大米的10倍，食用之后能够降血压、血糖和血脂。同时，其中含有大量的B族维生素，可以促进人体脂肪和碳水化合物的代谢。从中医角度来看荞麦还助消化、止泻、解酒、健脾胃。
猕猴桃
猕猴桃又被称为水果之王，含有的大量的维生素C可以提高血管的韧性，预防动脉硬化的发生。同时维生素C可以促进胶原的合成、免疫力的提高、铁的吸收、清除自由基、抗癌和抗衰老。还对重金属起到解毒作用。
大蒜
大蒜可以防止血液中的血脂沉淀形成的血栓，并且促进身体内部的脂肪代谢，降低胆固醇和抑制血小板的凝聚。让血管舒张，促进血液循环，降低血液粘度，抑制血栓的形成。
另外，大蒜还可以预防感冒、防癌、抗衰老、护肝、健脾胃。
黑木耳
黑木耳中含有多糖类物质，可以抑制血栓形成、抗凝血、降低胆固醇、疏通血管和提高免疫力，是不折不扣的血管“清道夫。
另外，木耳中的胶质物还可以吸附肠道中毒素，促进肠道和血液健康。在《本草纲目》中提到食用木耳可以健脾润肤，消除黑斑。
红薯
红薯中的膳食纤维可以增加粪便体积，促进肠道内毒素的排出，从而抑制毒素被肠道二次吸收，进入血液。另外，肠道干净，可以抑制毒素被肝脏吸收，肝主藏血，肝脏好自然血液干净。
葵花籽油
葵花籽油中90%是不饱和脂肪酸，其中66%是亚油酸，亚油酸可以促进新陈代谢，软化血管、降低血脂和血压，并且促进血液循环，预防脑中风、动脉硬化和冠心病等。
同时，葵花籽油含有的维生素E是油类中最高的，可以抗氧化，抑制黄褐斑和黑色素的形成。
绿茶
绿茶含有茶多酚、儿茶素、咖啡碱和氨基酸等物质，这些物质可以帮助人体防癌、抗衰老。同时，起到降脂和减肥的作用，早在唐代的《本草拾遗》中就已经提到多喝绿茶可以“令人瘦。
另外，多喝茶可以稀释血液，降低血液粘度，促进血液循环，减少血栓的形成，预防高血压、血管堵塞、冠心病和心肌梗死等。
所以，想要美丽，想要健康长寿，血液必须干净，了解这么多能清理血液的食物，今天就吃起来!
;㈢ 微生物生长的常用检测方法
一、生长量测定法
1.1体积测量法：又称测菌丝浓度法。
通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。
1.2称干重法：
可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10-20%。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1-5次，进行干燥。干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80℃或40℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（activitydryyeast,ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
1.3比浊法：
微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。如我所使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600nm处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控E.Coli的生长及诱导时间。
1.4菌丝长度测量法：
对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度，或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管，到入合适
的培养基，卧放，在开口的一端接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡量丝状微生物的生长
二、微生物计数法
2.1血球计数板法:
血球计数板是一种有特别结构刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，中央有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的表面高0.1mm，每个平台上刻有不同规格的格网，中央0.1mm2面积上刻有400个小方格。通过油镜观察，统计一定大格内微生物的数量，即可算出1毫升菌液中所含的菌体数。这种方法简便，直观，快捷，但只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子进行计数，并且所得结果是包括死细胞在内的总菌数。
2.2染色计数法：
为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数，而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足，人们发明了染色计数法。借助不同的染料对菌体进行适当的染色，可以更方便的在显微镜下进行活菌计数。如酵母活细胞计数可用美蓝染色液，染色后在显微镜下观察，活细胞为无色，而死细胞为蓝色。
2.3比例计数法：
将已知颗粒（如霉菌孢子或红细胞）浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按一定比例均匀混合，在显微镜视野中数出各自的数目，即可得未知菌液的'细胞浓度。这种计数方法比较粗放。并且需要配制已知颗粒浓度的悬液做标准。
2.4液体稀释法：
对未知菌样做连续十倍系列稀释，根据估计数，从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5毫升试样，接种1毫升到3组共15只装培养液的试管中，经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查最大或然数表MPN（mostprobablynumber）得出菌样的含菌数，根据样品稀释倍数计算出活菌含量。该法常用于食品中微生物的检测，例如饮用水和牛奶的微生物限量检查。
2.5平板菌落计数法：
这是一种最常用的活菌计数法。将待测菌液进行梯度稀释，取一定体积的稀释菌液与合适的固体培养基在凝固前均匀混合，或将菌液涂布于已凝固的固体培养基平板上。保温培养后，用平板上出现的菌落数乘以菌液稀释度，即可算出原菌液的含菌数。一般以直径9cm的平板上出现50-500个菌落为宜。但方法比较麻烦，操作者需有熟练的技术。平板菌落计数法不仅可以得出菌液中活菌的含菌数，而且同时将菌液中的细菌进行了一次分离培养，获得了单克隆。
2.6试剂纸法：
在平板计数法的基础上，发展了小型商品化产品以供快速计数用。形式有小型厚滤纸片，琼脂片等。在滤纸和琼脂片中吸有合适的培养基，其中加入活性指示剂2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC，无色）待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培养。短期培养后在滤纸上出现一定密度的玫瑰色微小菌落与标准纸色板上图谱比较即可估算出样品的含菌量。试剂纸法计数快捷准确，相比而言避免了平板计数法的人为操作误差。
2.7膜过滤法：
用特殊的滤膜过滤一定体积的含菌样品，经丫叮橙染色，在紫外显微镜下观察细胞的荧光，活细胞会发橙色荧光，而死细胞则发绿色荧光。
2.8生理指标法：
微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化，例如酸碱度，发酵液中的含氮量，含糖量，产气量等，与生长量相平行的生理指标很多，它们可作为生长测定的相对值。
2.9测定含氮量：
大多数细菌的含氮量为干重的12.5%，酵母为7.5%，霉菌为6.0%。根据含氮量×6.25，即可测定粗蛋白的含量。含氮量的测定方法有很多，如用硫酸，过氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas测N2气法。Dumas测N2气法是将样品与CuO混合，在CO2气流中加热后产生氮气，收集在呼吸计中，用KOH吸去CO2后即可测出N2的量。
2.10测定含碳量：
将少量（干重0.2-2.0mg）生物材料混入1毫升水或无机缓冲液中，用2毫升2%的K2Cr2O7溶液在1000C下加热30分钟后冷却。加水稀释至5毫升，在580nm的波长下读取吸光光度值，即可推算出生长量。需用试剂做空白对照，用标准样品做标准曲线。
2.11还原糖测定法：
还原糖通常是指单糖或寡糖，可以被微生物直接利用，通过还原糖的测定可间接反映微生物的生长状况，常用于大规模工业发酵生产上微生物生长的常规监测。方法是，离心发酵液，取上清液，加入斐林试剂，沸水浴煮沸3分钟，取出加少许盐酸酸化，加入Na2S2O3临近终点时加入淀粉溶液，继续加Na2S2O3至终点，查表读出还原糖的含量。
2.12氨基氮的测定：
方法是，离心发酵液，取上清液，加入甲基红和盐酸作指示剂，加入0.02N的NaOH调色至颜色刚刚褪去，加入底物18%的中性甲醛，反应数刻，加入0.02N的使之变色，根据NaOH的用量折算出氨基氮的含量。根据培养液中氨基氮的含量，可间接反映微生物的生长状况。
2.13其他生理物质的测定：
P，DNA，RNA，ATP，NAM（乙酰胞壁酸）等含量以及产酸，产气，产CO2（用标记葡萄糖做基质），耗氧，黏度，产热等指标，都可用于生长量的测定。也可以根据反应前后的基质浓度变化，最终产气量，微生物活性三方面的测定反映微生物的生长。如我所在BMP-2的发酵生产上，随时监测溶氧量的变化和酸碱度的变化，判断细菌的长势。
拓展：微生物的现代定义
肉眼难以看清，需要借助光学显微镜或电子显微镜才能观察到的一切微小生物的总称。微生物包括细菌、病毒、真菌和少数藻类等。（但有些微生物是肉眼可以看见的，像属于真菌的蘑菇、灵芝等。）病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的“非细胞生物”，但是它的生存必须依赖于活细胞。根据存在的不同环境分为空间微生物、海洋微生物等，按照细胞结构分类分为原核微生物和真核微生物。
微生物的主要特征
体小面大
一个体积恒定的物体，被切割的越小，其相对表面积越大。微生物体积很小，如一个典型的球菌，其体积约1mm，可是其表面积却很大。这个特征也是赋予微生物其他如代谢快等特性的基础。
吸多转快
微生物通常具有极其高效的生物化学转化能力。据研究，乳糖菌在1个小时之内能够分解其自身重量1000-10000倍的乳糖，产朊假丝酵母菌的蛋白合成能力是大豆蛋白合成能力的100倍。
生长繁殖快
相比于大型动物，微生物具有极高的生长繁殖速度。大肠杆菌能够在12.5-20分钟内繁殖1次。不妨计算一下，1个大肠杆菌假设20分钟分裂1次，1小时3次，1昼夜24小时分裂24×3=72次，大概可产生4722366500万亿个（2的72次方），这是非常巨大的数字。但事实上，由于各种条件的限制，如营养缺失、竞争加剧、生存环境恶化等原因，微生物无法完全达到这种指数级增长。 已知大多数微生物生长的最佳pH范围为7.0 (6.6~7.5)附近，部分则低于4.0。
微生物的这一特性使其在工业上有广泛的应用，如发酵、单细胞蛋白等。微生物是人类不可或缺的好朋友。
适应强 易变异
分布广 种类多
微生物对我们生活的影响
微生物对人类最重要的影响之一是导致传染病的流行。在人类疾病中有50%是由病毒引起。微生物导致人类疾病的历史，也就是人类与之不断斗争的历史。在疾病的预防和治疗方面，人类取得了长足的进展，但是新现和再现的微生物感染还是不断发生，像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治疗药物。一些疾病的致病机制并不清楚。大量的广谱抗生素的滥用造成了强大的选择压力，使许多菌株发生变异，导致耐药性的产生，人类健康受到新的威胁。一些分节段的病毒之间可以通过重组或重配发生变异，最典型的例子就是流行性感冒病毒。每次流感大流行流感病毒都与前次导致感染的株型发生了变异，这种快速的变异给疫苗的设计和治疗造成了很大的障碍。而耐药性结核杆菌的出现使原本已近控制住的结核感染又在世界范围内猖獗起来。
微生物千姿百态，有些是腐败性的，即引起食品气味和组织结构发生不良变化。当然有些微生物是有益的，它们可用来生产如奶酪，面包，泡菜，啤酒和葡萄酒。微生物非常小，必须通过显微镜放大约1000 倍才能看到。比如中等大小的细菌，1000个叠加在一起只有句号那么大。
微生物能够致病，能够造成食品、布匹、皮革等发霉腐烂，但微生物也有有益的一面。最早是弗莱明从青霉菌抑制其它细菌的生长中发现了青霉素，这对医药界来讲是一个划时代的发现。后来大量的抗生素从放线菌等的代谢产物中筛选出来。抗生素的使用在第二次世界大战中挽救了无数人的生命。一些微生物被广泛应用于工业发酵，生产乙醇、食品及各种酶制剂等；一部分微生物能够降解塑料、处理废水废气等等，并且可再生资源的潜力极大，称为环保微生物；还有一些能在极端环境中生存的微生物，例如：高温、低温、高盐、高碱以及高辐射等普通生命体不能生存的环境，依然存在着一部分微生物等等。看上去，我们发现的微生物已经很多，但实际上由于培养方式等技术手段的限制，人类现今发现的微生物还只占自然界中存在的微生物的很少一部分。
微生物间的相互作用机制也相当奥妙。例如健康人肠道中即有大量细菌存在，称为正常菌群，其中包含的细菌种类高达上百种。在肠道环境中这些细菌相互依存，互惠共生。食物、有毒物质甚至药物的分解与吸收，菌群在这些过程中发挥的作用，以及细菌之间的相互作用机制还不明了。一旦菌群失调，就会引起腹泻。
随着医学研究进入分子水平，人们对基因、遗传物质等专业术语也日渐熟悉。人们认识到，是遗传信息决定了生物体具有的生命特征，包括外部形态以及从事的生命活动等等，而生物体的基因组正是这些遗传信息的携带者。因此阐明生物体基因组携带的遗传信息，将大大有助于揭示生命的起源和奥秘。
工业微生物涉及食品、制药、冶金、采矿、石油、皮革、轻化工等多种行业。通过微生物发酵途径生产抗生素、丁醇、维生素C以及一些风味食品的制备等；某些特殊微生物酶参与皮革脱毛、冶金、采油采矿等生产过程，甚至直接作为洗衣粉等的添加剂；另外还有一些微生物的代谢产物可以作为天然的微生物杀虫剂广泛应用于农业生产。通过对枯草芽孢杆菌的基因组研究，发现了一系列与抗生素及重要工业用酶的产生相关的基因。乳酸杆菌作为一种重要的微生态调节剂参与食品发酵过程，对其进行的基因组学研究将有利于找到关键的功能基因，然后对菌株加以改造，使其更适于工业化的生产过程。国内维生素C两步发酵法生产过程中的关键菌株氧化葡萄糖酸杆菌的基因组研究，将在基因组测序完成的前提下找到与维生素C生产相关的重要代谢功能基因，经基因工程改造，实现新的工程菌株的构建，简化生产步骤，降低生产成本，继而实现经济效益的大幅度提升。对工业微生物开展的基因组研究，不断发现新的特殊酶基因及重要代谢过程和代谢产物生成相关的功能基因，并将其应用于生产以及传统工业、工艺的改造，同时推动现代生物技术的迅速发展。
经济作物柑橘的致病菌是国际上第一个发表了全序列的植物致病微生物。还有一些在分类学、生理学和经济价值上非常重要的农业微生物，例如：胡萝卜欧文氏菌、植物致病性假单胞菌以及中国正在开展的黄单胞菌的研究等正在进行之中。日前植物固氮根瘤菌的全序列也刚刚测定完成。借鉴已经较为成熟的从人类病原微生物的基因组学信息筛选治疗性药物的方案，可以尝试性地应用到植物病原体上。特别像柑橘的致病菌这种需要昆虫媒介才能完成生活周期的种类，除了杀虫剂能阻断其生活周期以外，只能通过遗传学研究找到毒力相关因子，寻找抗性靶位以发展更有效的控制对策。固氮菌全部遗传信息的解析对于开发利用其固氮关键基因提高农作物的产量和质量也具有重要的意义。[10]
在极端环境下能够生长的微生物称为极端微生物，又称嗜极菌。嗜极菌对极端环境具有很强的适应性，极端微生物基因组的研究有助于从分子水平研究极限条件下微生物的适应性，加深对生命本质的认识。
㈣ 常规生化检查有哪些
生殖器官的检查包括对阴茎、尿道、睾丸、附睾、精索、前列腺等器官的视诊、触诊等。查看阴茎是否为严重包茎，有无硬结炎症、肿瘤、发育异常等。尿道排尿困难、瘘孔、下裂、硬结及狭窄。对前列腺检查其大小，有无肥大、硬结、肿物，取前列腺液送实验室检查。测量睾丸的大小、硬度，有无硬结、压痛、鞘膜积液、肿物，是否为隐睾。输精管的硬度，有无结节、压痛以及有无精索静脉曲张等。
睾丸体积的检查常用以下方法：
（1）卡尺测量法。此法所测结果较准确，但比较繁琐。方法为用卡尺分别测量睾丸的长径、宽径、厚径；然后用各种公式计算出睾丸体积。
（2）测量子比较法。睾丸体积测量子为不同体积的状如睾丸的椭圆形硬物，依其大小标为1～25号。测量时将被测睾丸拉起，绷紧阴囊皮肤，将测量子于睾丸旁逐一与之比较，与睾丸大小最相近的测量子体积，即可视为睾丸体积。
正常男子睾丸体积的个体变异很大，左右两侧的两个睾丸亦有一定差异，因而所测结果只能作为参考。对睾丸发育状况以及生殖能力的估计须经多方面检查加以综合分析，才能得出结论。
据调查，正常成年男子的睾丸体积（包括阴囊皮肤在内）大多相当于15至25号测量子的体积。
精液检查是男性不育的必查项目。检查包括精液量、颜色、粘稠度、酸碱度：液化情况、精子密度、活力、形态等。
（1）颜色。正常人精液颜色是灰白色，禁欲时间长精液呈浅黄色。若精液呈乳白色或略带黄绿色，常是由于生殖道或副性腺感染，精液中含有白细胞之故，精液发红或夹有血丝血凝块，称血性精液。
（2）精液量。正常健康男子，每次性交射出的精液量为15～6毫升，精液体积异常一是过少，少于1毫升；二是过多，超过8毫升。精浆是精子的营养来源，其中含有稳定精液酸碱度的缓冲物，能保护精子在酸性阴道分泌物内的存活。精子只占精液量的1％，精液体积异常一般是精浆成分出现变化。如果精液量过少，精浆不能稀释精子，精子往往失去活力，从而造成不育；精液过多时，精子密度降低，精液过稀，易于从阴道内流失，不利于受孕。
排精量不足1毫升或只有二三滴时，称之为精液量过少。性交次数过于频繁时，精液可以显着减少，可禁欲5～7天重新测定。如果取精不得当，使精液失去，也可能造成精液量过少。造成精液量过少的原因还有：
①附性腺因素：包括睾丸功能障碍；附性腺出现感染或其他病变时。
②射精管梗阻：可因尿道狭窄、尿道憩室引起，也可能因感染水肿造成。
③膀胱括约肌功能紊乱，或局部神经支配失调时，可出现部分性逆行射精。
精液量过多可见于精囊炎，当炎症分泌物过多时，精囊液显着增加。大多数原因不明的少精子症患者，可采用分段射精和离心分离精子的方法取精，将精液离心浓缩精子后进行人工授精。
如果患者睾丸发育不良、射精管道完全阻塞、不射精、逆行射精时则根本无精液排出。
（3）酸碱度。正常酸碱度为pH72～80。过高或过低都可影响精子的活动和代谢。若超过85，常说明精囊有炎症，或精液放得时间过久。若低于7，则是射精管阻塞，也可能是精液被尿污染。
（4）液化。精液刚射出时是粘稠的液体，但因受精囊分泌的凝固酶的作用很差，或畸形精子超过30％，常可造成不育。
（5）精液理化性状异常。正常精液射出后很快凝成胶冻状，在以后的15～30分钟内又全部液化。如果精液射出后不凝固，或液化不全，过稠或脓性分泌物使精子活力下降，造成生育能力低下。生殖道感染也可引起不育。精液中致病菌大于103个／毫升，非致病菌大于103个／毫升，均可引起不育。
生精障碍（1）性染色体异常可使睾丸等性器官分化不良，造成真假两性畸形以及生精障碍；常染色体异常可导致性腺及生精细胞代谢紊乱。造成不育。
（2）隐睾症或双侧睾丸发育不全者无生精能力。单侧睾丸功能正常者，仍可生育。
快凝结成胶冻状，继而在15～30分钟内又因前列腺分泌的液化酶而恢复成液状。这种过程称为精液液化。若超过30分钟还不液化，即为不正常。精液不液化，精子不能自由活动，当然也就不会生育。精液不液化的原因，大多是由于前列腺的液化功能障碍所致。
精液粘度和液化时间是精液正常与异常的重要指标之一，主要取决于男性生殖腺中蛋白溶解酶的活性。无论精液粘稠度增高或降低，都可改变精子在精液中的活动能力。精液粘度和液化时间的异常与生殖道炎症、酒精中毒、酶原疾病等有关。
精液电描记图是测定精液粘度和液化时间的一种方法。把精液置于装有凝固描记仪的空气恒温器内检测，记录精液液化的电描记图，判断精液的粘度和液化时间。精液电描记图测定排除了主观因素和环境因素的影响，整个过程由电子描记显示图形，较为准确可靠，可用于诊断因精液物性质障碍有关的男性不育症和观察治疗效果。
（3）精子数量。精子的数量一是指每毫升精液中的精子数；二是指一次射出的精液中的总精子数。精子数量的个体差异很大，与其年龄、健康状况以及近日是否有过射精有关。检查前应禁欲3～10天。一般成人每毫升精液中精子数量为2000万～15亿／毫升。要反复检查多次。一般认为，如果多次检查精子数量均低于2000万／毫升，应视为精子过少。这类患者即使精子形态、活力等均正常，生育能力亦较常人低，甚至造成不育。大于25亿／毫升者称为精子过多症。
精子数量减少的原因，可因睾丸本身发育障碍、外界环境因素、内分泌疾病等原因所致。精子密度过高也会影响精子的活动，发生流产的机会也比较多。有些人虽然精子密度低于2000万／毫升，但精子活动力强，畸形率低，依然能生育；有些人尽管精子数量并不少。但活动精子百分率低，畸形精子多，结果也不能生育。一般认为，精子计数的最低限度，密度是1000万／毫升；每次排出精子总数是5000万。低于这个标准，基本上无生育力。
（4）精子活力：一般取已液化的精液一滴，在显微镜下观察，并计数，大约计算出活动与不活动精子的百分率。一般可将精子的活动力分为五级：
1级精子毫无活动，全部为死精子。
2级精子原地打转，动作迟钝。
3级精子能活动，但不活泼，缓慢向前游动，方向不呈直线。
4级精子以中等速度直线向前游动。
5级精子活泼，快速直线向前游动。
精子活力包括精子活率和精子活动力。
精子爬高试验是测定精子活动速度的一项试验，是判断男子生育力的一项指标。取塑料管灌满含有果糖的精液营养液，管的上端结扎。下端垂直插入含有少量精液的试管内。放入37℃恒温水浴箱中8小时，取出，将塑料管剪成1厘米长12段，依次把每段精液溶化后滴于计数盘上作精子计数，计算精子上升的高度及数字，以判断精子活力。
此法简单易行。对测定精子运动速度、判断生育能力有一定的价值。
（5）存活率。通常在射精后1小时内，能活动的精子至少占70％，若少于50％则为不正常。输精管道及附属性腺的炎症、精液标本放置在过热或过冷的环境中、盛放精液容器中的影响、长期禁欲、精子受免疫影响而导致精子凝集等原因可致精子活动能力及存活率减弱。
（6）精子形态。形态正常的精子不应少于85％以上。如畸形精子在10％以下时，对生育无显着影响；在20％以下时，仍有生育可能，若超过20％则可能造成不育。
精子分头、体、尾三部分，正常精子长约50～60微米，外形如蝌蚪状。头部正面为卵圆形，前面是扁平的，侧面是梨状的。前缘锐薄，尾部长而弯曲，能作摇摆状活动，于液体中以每秒25微米的速度向前移动。正常精子头部可以变异为大头、小头、圆头及尖头等不同形态。幼稚型精子可呈小头状，可见头部胞质残余及体部胞质残余等。衰老的精子在头部胞浆内可见深染颗粒、头部深染或不着色等。
①头部：精子头长35～50微米，宽20～30微米；精子头呈规则椭圆形。只要精子其他形态正常。精子头大小不是重要因素。精子头部异常包括：圆锥形（长宽分别小于5和2微米，或长超过5微米，宽小于3微米）、不规则形、双头和“梨形”。
②中段：中段长50～70微米，宽10微米。宽超过2微米多反映胞浆小滴未完全退化，如果胞浆小滴大于精子头的一半，意味着精子不成熟，属异常，若小于或等于头的一半应属正常。中段断裂也属异常。
③尾部：尾长45微米。尾部异常常见为断裂、双尾或卷曲。卷曲可能与锌元素含量有关。其他缺陷可能与无症状生殖系统感染有关。
一个精子可能有多种缺陷，可以按其主要缺陷统计。精子形态判断时应包括以下内容。
>60％的正常椭圆形精子头（包括半数左右的可疑者），若<30％不正常；<6％的圆锥形精子头，若超过10％不正常；<86％的不规则精子头。若超过50％不正常；<05％的不成熟精子，增多意味着精子生成或精子成熟过程出现障碍；20％尾部畸形，若超过25％不正常。
如果形态异常的精子超过70％，特别是妻子有习惯性流产时，男方很可能具有染色体异常。如果异常精子少于70％，也许是精索静脉曲张、职业或环境接触毒物、放射线、微波、服用药物、感染及应激等因素影响了睾丸生精过程。精子形态异常时，因为头过大或其他形态异常不利于穿透宫颈粘液所形成的微小通道。宫颈粘液中常可见到头特别小的精子，多数因为无顶体存在。如果畸形精子症找不出任何明确原因时则为原因不明的睾丸生精障碍，可以采用中医药治疗方法促进生精。
精液异常的原因有：
（1）睾丸疾患：
（1）有隐睾病史者，无精子症发生率显着升高，即使有精子，精液质量也异常。
②睾丸损伤，伴有阴囊血肿或血尿，无精子症或精液异常发生率显着增加。
③曾发生过睾丸扭转可有无精子症和少精子症。
④睾丸炎和附睾炎的病人，其精子密度和活动率显着降低。
（2）泌尿生殖道疾病：
（1）性传播疾病一般不影响精子密度。但精子活动率下降。
②泌尿生殖系统炎症常使异常精液质量，精子形态和活动率较低。
（3）其他系统疾病：
（1）青春期前后发生腮腺炎可引起无精子症，精液异常。
（2）支气管炎特别是支气管扩张无精子症发生率显着增高。气管炎患者的精'液分析异常率增高；③糖尿病与射精功能障碍相关，但不引起精液质量异常。
④6个月内曾发高烧的可使精液异常率明显升高。
（4）其他：
①长期服用对生育产生影响的药物。无精子率显着升高，如各种细胞毒及抗肿瘤药物、某些磺胺药等。
②高温工作中缺乏适当劳动保护条件，产棉区长期食用未经处理的棉籽油。常见到睾丸萎缩、少精子、死精子或无精子症患者。
3体外异种受精实验：常规精液分析的各项指标完全正常，有时也不一定能使精子具有受精能力。目前常用人精子穿透仓鼠卵子的异种受精实验。验证男性不育者的实际生育能力。
精子穿透仓鼠卵试验是根据仓鼠卵去除透明带后，几乎不再具有种属特异性的特点而设计的，用人精子穿入仓鼠卵的百分率来评价精子的受精能力。
一般从4～12周龄的雌性仓鼠获取卵子，经处理放入含有一定数量已获能精子，在370c温度中孵育3～5小时，然后吸出卵子在显微镜下观察。凡卵子卵浆内有肿大的精子、头并附有尾部者认为已受精，并且计数。
这种方法是诊断男性不育症一种很有实用价值的方法。
精子宫颈粘液穿透试验是：
（1）玻片法：使精子与宫颈粘液直接接触，试验不能真实地反映客观情况，并难以标准化及定量。
（2）毛细管法：将粘液放入一端封闭的毛细管中，另一端直立浸在粘液中，观察精子群的活动能力。
精子穿透宫颈粘液能力与精子活动力的大小有关。宫颈粘液有筛选形态异常精子的能力，不合格的精子不能穿透宫颈粘液。如果精子在试验中穿透能力正常，常提示不孕是由女方宫颈粘液异常所致。
前列腺液检查正常前列腺液为白色，呈微酸性，pH63～65。内含总脂286毫克％，其中磷脂占65％。白细胞数在10个以内，并可见到少许上皮细胞、淀粉样物体及精子。患前列腺炎时，镜检白细胞数增加，或见成堆的脓细胞，卵磷脂颗粒减少。
内分泌检查目前常用的方法有：血浆睾酮水平测定；人体绒毛膜促性腺激素刺激试验；促性腺激素释放激素刺激试验。
克罗米芬是合成的女性激素衍生物，此药可诱发排卵和产生精子，临床常用于治疗少精子症。应用克罗米芬以后能增强丘脑下部促性腺激素释放激素的分泌，睾丸分泌睾酮也因而增加。所以克罗米芬刺激试验，是检查丘脑下部功能的良好办法。
试验需时12天，在服克罗米芬之前，先查两天血浆和黄体生成素的基础水平。从第三天开始连续服克罗米芬10天，用量为200毫克／日，一次或分次口服。在服药后第九、十两天测定血浆睾酮和黄体生成索的浓度。正常用此药10天后与对照值相比较，黄体生成素的增长幅度为72％～245％，卵泡刺激素为45％～130％，睾酮为40％～220％。从增长幅度可以看出。卵泡刺激素增长幅度不如黄体生成素及睾酮明显，因此阳性指标是以黄体生成素及睾酮的增长幅度为主。青春期前儿童的刺激试验反应为阴性时，提示青春期尚未开始，但不能预示是否开始发育。16岁时一般呈阳性反应，若年龄超过17岁，兴奋反应不明显，则应进行垂体功能检查。在青春期少年或青春期后成年，若克罗米芬刺激试验是阴性，那么，一般来说，年龄越大，则垂体功能低下的可能性越大。成年男性病人患单纯垂体性幼稚症，可以本试验阴性作为诊断参考。至于原发性睾丸功能低下病人，一般是黄体生成素值偏高，用药兴奋后不再上升。原发性无精子或精子稀少的病人，本试验呈阳性。
人体绒毛膜促性腺激素刺激试验人体绒毛膜促性腺激素（HCG）是由胎盘分泌的激素。HCG能促进男性胎儿的睾丸分泌少量睾酮，对男性胎儿的副性器官发育有意义。虽然在妊娠终未HCG已降至很低水平，但已成熟的睾丸已能分泌睾酮，足以使睾丸正常下降。HCG也能促进女性卵巢分泌雌激素和排卵，临床上常用此药治疗不育症。为男病人进行HCG刺激试验，可检查体内的睾丸组织是否具有分泌功能。检查结果如为阳性，表明体内睾丸组织有分泌功能。如检查结果反应偏低，应考虑为隐睾症或原发性睾丸功能低下。如为阴性反应，也不能立即作出相反的诊断。女性病人检查HCG的变化，目的在于诊断早期妊娠、葡萄胎及绒毛膜上皮癌等疾病。
促性腺激素释放激素刺激试验。在下丘脑的神经分泌物中，含有促性腺激素释放素（GnRH）。若GnRH神经元损伤或垂体功能低下时，睾酮的分泌会有明显减少。GnRH刺激试验的目的，在于检查垂体的功能。
血浆睾酮水平测定血浆中睾酮的浓度个体差异很大。正常壮年期男性（20～50岁）的水平最高，平均约为570～7009微克％，50岁以后，其浓度逐渐减少。血浆睾酮的水平在昼夜间有差异，早晨8～10时最高，午夜2时最低。睾酮分泌过多，原因可为睾丸的良性问质细胞瘤，血浆睾酮比正常人多100倍，因而表现为肌肉和骨骼的生长过快，性器官过早发育和副性征过早出现。睾酮分泌不足，可见于因手术、感染、化学中毒、放射线损伤或发育不全等原因而致睾丸功能低下。也可能继发于垂体病变，因促性腺激素减少。以致睾丸间质细胞发育不良。目前测定血浆中睾酮含量的方法很多。如放射免疫法，由于血浆用量较少，误差也少，有一定优越性。
睾丸活组织检查男性能否生育首先检查睾丸组织是否受到过损害，生精功能是否正常。进行睾丸活组织检查，除诊断男性不育外，还可诊断睾丸其他疾病。睾丸活组织检查有两种方法。
（1）穿刺法。用针管及针头，抽吸少许睾丸组织。
（2）切开法。阴囊皮肤作2厘米左右的小切口，剪下一小块睾丸组织。
睾丸组织切片检查时可见，在正常情况下，青春期前曲细精管细小，无基底膜，仅有原始生殖细胞和支持细胞，间质细胞不明显。青春期后则表现为曲细精管直径加宽，有较薄的基底膜。上皮细胞能显示精子发育成熟的各个时期。精原细胞靠近基底膜，成熟的生殖细胞靠近白细胞管管腔，管腔内可有较多精子。睾丸的生殖病理变化，主要出现在曲细精管生精上皮和曲细精管基底膜。
男性不育症经睾丸活动组织检查，一般常见的病变如下：睾丸不成熟，其组织为青春期前的组织；精子发生低下，各时期精子都有，但数量减少；曲细精管变性，曲细精管透明变性或纤维化；克氏综合症，可见曲细精管细小，无生精细胞，唯有支持细胞的基底膜增厚，有时表现为透明；单纯支持细胞综合症，无各期生殖细胞，仅有支持细胞：成熟障碍或生精阻滞生精过程被阻止在初级精母细胞或精原细胞阶段；睾丸组织接近正常，不育的原因应考虑输精管道被阻塞。
总之，睾丸活组织检查，是确诊男性不育症的重要方法。
输精管、精囊造影常用于男性不育症的检查通过尿道或阴囊部注入造影响剂，使射精管、精囊、输精管及附睾显影，以了解各部输送通道梗阻、炎症、结核、先天性畸形及其临近组织的有关病变。
常用的输精管、精囊造影方法有下述两种。
（1）经输精管法。切开阴囊外上部，显露输精管，用注射针刺入输精管注入造影剂15～5毫升。
（2）经尿道逆行插管法。先用尿道镜或膀胱镜插入尿道后，在精阜两旁找到射精管开口，将细导管插入1～3厘米，然后注入造影剂2～5毫升。
输精管、精囊造影对于诊断男性不育的原因有着重要意义，可以发现精子运输通道的先天性畸形、炎症、肿瘤等疾病，另外对前列腺病变的诊断也有一定的帮助。
多普勒超声检查对可疑的精索静脉曲张及隐性精索静脉曲张患者，通过一般物理检查不易确诊时用多普勒超声仪检查能获得较为准确的结果。
免疫学检查目前最常用的抗精子抗体测定技术有精子凝集试验、毛细血管内凝集试验、胎盘内凝集试验、补体依赖性精子制动试验以及抗体标记荧光免疫技术等。
精子凝集试验的血清精子凝集抗体滴度取1∶32作为有临床意义的低限标准。低于1∶32者生育力稍有减低。1∶64～1∶512为中滴度，可以生育，但生育力较低，1∶512以上为高滴度，表明被检者无生育力。精浆中的抗精子抗体滴度与血清中的滴度也不完全一致。精浆的精子凝集抗体滴度1∶16，生育力显着降低。但并不是不能生育；滴度高于1∶32，可能不育。这些滴度数值只适用于精子计数每毫升2000万以上的男性不育患者。
汉光免疫法检测，不管其他方法检测抗精子抗体是否阳性，它总是约有30％的患者出现阳性反应。所以，临床上价值不大。
混合抗球蛋白反应试验，此法特异性较强。测定抗精子抗体的准确性超过90％。由于操作技术简单，可作为一种筛选试验。
染色体检查染色体异常者一般生育功能都受到影响。如果一个不育患者的睾丸体积小于12毫升，或者两性畸形都应该检查染色体，因其染色体异常的可能性很大。另外，妻子有习惯性流产或畸胎史时，夫妻双方应做染色体鉴定。
染色体异常有两种情况：一种是染色体的数目异常；另一种是染色体的结构畸变。
在男性不育中，性染色体数异常引起的病症常见的是先天性曲细精管发育不全综合症，其典型核型是47XXY，还有47XXY／46XY嵌合型。在女性不育中，性染色体异常的疾病有性腺发育不全。而染色体结构畸变中，染色体易位是引起不育症的一个主要的原因。如果夫妇有一方是染色体平衡易位携带者，虽然他本身并无异常表现，但可能给后代带来染色体异常的危险性。这样的胚胎在妊娠早期流产的可能性很大，幸存者可能是染色体病患者。因而在妊娠20周左右应做产前诊断，通过羊水细胞培养鉴定胎儿的染色体的结构和数目是否正常，异常时应及早做人工流产。
检查染色体一般是从患者静脉采血15毫升，鉴定核型和分辩染色体的数H和形态结构。染色体检查为遗传疾病以及某些其他疾病的病因、发病机制、诊断、预防以至预后等提供了科学依据。
交媾试验：交媾试验是检查精子是否能穿过宫颈的试验方法。
精子射进阴道后要穿过宫颈。宫颈粘液由宫颈腺体分泌。宫颈粘液的量和性质随月经周期中雌激素和孕激素水平出现周期性变化。在月经中期，宫颈粘液大且稀薄、拉丝长，使精子易穿过。如果精子活动能力差，或宫颈粘液少而粘稠，或存在抗精子抗体等，将会影响精子穿透宫颈粘液。
（1）试验的时间：在月经周期中，宫颈粘液能够允许精子穿透的时间的长度每个妇女不同。同一个妇女的每个周期也有差异。应因人而异确定出进行精子穿透试验的最佳时间。可采用B超监测排卵来判断排卵日期。试验应该尽可能靠近排卵期进行，可以根据基础体温、宫颈粘液的变化和阴道细胞学检查来确定排卵时间。
每对夫妇在进行试验前应该至少禁欲2天。在同房前24小时内禁止阴道内用药或冲洗。上床前把大小便排尽，避免同房后几小时内上厕所。性交后仰卧，屈膝，垫高臀部休息至少30分钟，防止精液流出。试验应在性交后6～8小时进行，18～24小时进行也是可以的。
（2）性交后试验技术：医生将没有涂抹滑润剂的阴道窥器插入阴道，用不带针头的注射器、吸管，分别吸取阴道后穹窿、宫颈外口和宫颈内口的宫颈粘液，高倍显微镜下观察精子情况。
①阴道后穹窿样本。由于阴道内酸性环境，精子在阴道内仅能存活2小时，检查阴道样本的目的在于证实精液确实进入阴道内。
②宫颈外口样本。宫颈外口精子数目随着性交后时间延长而减少。性交后2～3小时，在宫颈下段积聚大量的精子。在宫颈粘液中，根据精子移动情况可以分为4级：1迅速和直线向前运动；2缓慢直线或非直线运动；3非向前运动；4不活动精子。
一对正常夫妇性交后，在宫颈内样本通常用400倍视野可以观察到25个以I级和Ⅱ级活动精子，如果用高视野有10个以上I级活动精子，即可以认为是良好的；如果仅有5个活动精子，并且为迟钝缓慢或转圈运动形式，则说明精液中精子数目少和活动率差，或者宫颈粘液异常。
性交后4小时开始，宫颈外口的精子数目逐渐减少。所以在4小时以上间隔时间检查，从宫颈下段收集到的宫颈粘液中仅可发现很少的精子。
③宫颈内口样本。在射精后，少数精子迅速到达宫颈内口，而且数目逐渐增多。约在2～3小时后达到一个高峰。在24小时之内，精子数目相对稳定。
所以在性交后6～10小时，用高倍视野具有I和Ⅱ级活动度的精子数目大多为10个，即属于正常范围。在性交后10～24小时，可检测到的精子数目与6～10小时相似。
（3）试验结果：性交后试验的目的，不仅在于检查性交后数小时以后，在宫颈粘液中活动的精子数目，而且还要评价精子的活动状况。在性交后6～10小时宫颈内存在适当数量的活动精子，就可排除由宫颈因素引起的不育。
试验阴性不能轻易下结论，因为有可能选择的时间不当。有时由于性交后试验进行得太早或太晚，可以造成假阴性结果。如果不能利用准确可靠的时间来确定排卵时间，则有必要在一个周期中重复作几次性交后试验。
一旦证实性交后试验为阴性，可以进一步确定是精子质量问题，或是由于宫颈粘液的有害因素，并且可测定宫颈粘液中是否存在抗精子抗体。对于性交后试验阴性的不育夫妇，可以利用人工授精办法，帮助他们受孕。