① 求涂片免疫组化的具体步骤
112. 取0.13ml骨髓，使用涂有蛋白甘油的硅化玻片制作涂片，每片涂5-7张。同时，用EDTA抗凝的试管抽取2ml静脉血进行流式细胞术(FCM)检查。
113. 免疫组化试剂来源：采用福州迈新公司提供的即用型第二代免疫组化ElivisionTMplus广谱试剂盒。
114. 免疫组化步骤：
① 石蜡涂片经过脱蜡和水化处理后，用PBS（pH7.14）冲洗3次，每次3分钟。
② 根据不同抗体的要求，对组织抗原进行相应的修复。
③ 每张涂片加入50μl 3%过氧化氢溶液，室温下孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶的活性。随后用PBS冲洗3次，每次3分钟。
④ 每张涂片根据需要加入50μl第一抗体（例如CD20、CD3、CD45RO、CD45RB、TdT、MPO、CD5、CD79、CD56、CD79a、CD43、CD5、CD10），室温下孵育60分钟。
⑤ 除去PBS液，每张涂片加入50μl聚合物（Polymer Enhancer），室温下孵育20分钟。之后用PBS冲洗3次，每次3分钟。
⑥ 除去PBS液，每张涂片加入50μl酶标抗鼠/兔聚合物（Polymerized HRP-Anti Ms/Rb IgG），室温下孵育30分钟。再用PBS冲洗3次，每次3分钟。
⑦ 除去PBS液，每张涂片加入50μl新鲜配制的DAB或AEC溶液，在显微镜下观察3-10分钟。
⑧ 用自来水冲洗，进行苏木紫复染，用0.11%盐酸分化，然后用自来水冲洗，并用PBS返蓝。
⑨ 涂片经过梯度酒精脱水干燥后，用DAE显色，再用中性树胶封固。