体内蛋白质代谢的测量的主要方法

‘壹’ 测定蛋白质含量的方法有哪些，其原理各是什么

Bradford法测定蛋白质浓度：实验原理。

双缩脲法（Biuret法）和Folin—酚试剂法（Lowry法）的明显缺点和许多限制,促使科学家们去寻找更好的蛋。

取6支试管分别标号，前5支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，不加标准蛋白溶液，每支试管液体总量通过加入蒸馏水补足而保持一致。

将液体混合均匀，在室温下放置30分钟，以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照，于650nm波长处测定各管中溶液的吸光度值。

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紫外吸收法：

大多数蛋白质在280nm波长处有特征的最大吸收，这是由于蛋白质中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在，可用于测定0.1～0.5mg/mL含量的蛋白质溶液。

取9支试管分别标号，前8支试管分别加入不同浓度的标准蛋白溶液，1号试管不加标准蛋白溶液，最后一支试管加待测蛋白质溶液，而不加标准蛋白溶液，每支试管液体总量通过加入蒸馏水补足而保持一致，将液体混合均匀，在280nm波长处进行比色，记录吸光度值。

‘贰’ 简述营养状态评定的方法。

营养状态评定的方法是：
(1)人体测量：体重低于标准体重的15％，提示存在营养不良。三头肌皮皱厚度是测定体脂贮备的指标，上臂周径测定可反映全身肌肉及脂肪的状况。上述测定值若低于标准值的10％，则提示存在营养不良。
(2)三甲基组氨酸测定：三甲基组氨酸是肌纤蛋白和肌球蛋白的最终分解产物，不再被合成代谢所利用。尿中三甲基组氨酸排出量可反映机体蛋白质的分解量。
(3)内脏蛋白测定：包括血清白蛋白、转铁蛋白及前白蛋白浓度测定。是营养评定的重要指标。营养不良时该测定值均有不同程度的下降。
(4)淋巴细胞计数：周围血淋巴细胞计数可反映机体免疫状态。计数<1500常提示营养不良。吵洞
(5)氮平衡试验：在没有消化道及其他额外的体液丢失(如消化道瘘或大面积升橘枯烧伤等伍陵)的情况下，机体蛋白质分解后基本是以尿素形式从尿中排出。出氮量为24h尿液中尿素氮含量加常数2～3g(表示以非尿素氮形式排出的含氮物质和经粪便、皮肤排出的氮)。入氮量则是静脉输入的氨基酸液的含氮量。由此，可测得病人是处于正负氮平衡状态，指导营养支持治疗。

‘叁’ 测定蛋白质含量的方法有哪些

1、凯氏定氮法

凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1833年建立的，现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等，是分析有机化合物含氮量的常用方法。

凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右(12%~一19%)，因此，通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量(假设测定物质中的氮全来自蛋白质)，即: 蛋白质含量=含氮量/16%。

2、紫外吸收光谱法

紫外吸收光谱法又称紫外分光光度法，是根据物质对不同波长的紫外线吸收程度不同而对物质组成进行分析的方法。此法所用仪器为紫外吸收分光光度计或紫外-可见吸收分光光度计。

光源发出的紫外光经光栅或棱镜分光后，分别通过样品溶液及参比溶液，再投射到光电倍增管上，经光电转换并放大后，由绘制的紫外吸收光谱可对物质进行定性分析。

(3)体内蛋白质代谢的测量的主要方法扩展阅读

蛋白质含量测定的意义：

膳食蛋白质符合人的需要时，可维持正常代谢，生成抗体，抵抗感染，有病也易恢复。相反，蛋白质供给不足时，会减轻体重，易患贫血，容易感染疾病；创伤、骨折不易愈合；严重缺乏时，血浆蛋白降低，可引起浮肿。

此外癌症与蛋白质摄入量不足也有一定关系。但是，蛋白质摄入过多也可造成肾脏负担。食物蛋白质在体内代谢所生成的尿酸、氨、酮体等累积过多，可导致衰老；而氨还对机体有毒性，不仅会陡然增加肝脏负担，还会增加胃肠负荷，引起肝肾受累以及消化不良等症。所以，蛋白质的摄入量要适当。

‘肆’ 代谢研究的方法有哪些

代谢研究的方法有以下几种：

1. 实验室研究法

实验室研究法是代谢研究的基础方法。研究者可以通过控制实验条件，对特定的代谢过程进行细致的观察和分析。例如，通过改变实验对象的饮食、运动等条件，观察其生理变化，进而探究代谢的变化规律。此外，实验室研究还可以利用体外实验，对细胞或组织进行代谢研究，以揭示其内部的代谢机制和影响因素。

2. 体内测定法

体内测定法是通过测量人体或动物体内的代谢物质变化来研究代谢的方法。这种方法可以直接观察到生物体内的真实代谢情况，因此在代谢研究中具有重要价值。体内测定法通常包括呼吸测定法、血样分析法等。呼吸测定法可以测定生物体的氧气消耗量和二氧化碳产生量，从而了解代谢速率和能量消耗情况；血样分析法则是通过采集生物体的血液样本，分析其中的代谢物质含量变化，来探究代谢过程。

3. 影像学技术法

随着科技的发展，影像学技术在代谢研究中也得到了广泛应用。例如，核磁共振技术（NMR）可以用于检测生物体内的代谢物质种类和含量；正电子发射断层扫描（PET）和功能性磁共振成像（fMRI）等技术则可以通过观察生物体内部的代谢活动变化，来揭示其代谢机制和功能状态。这些技术为代谢研究提供了强有力的工具，有助于更深入地理解代谢过程的本质和机制。

4. 分子生物学法

分子生物学方法在代谢研究中也有着重要的地位。通过分子生物学技术，如基因测序、蛋白质分析等，可以深入研究代谢相关的基因和蛋白质，从而揭示代谢的分子机制和调控网络。此外，基因编辑技术如CRISPR-Cas9等工具的发展，也使得研究者能够更精确地操控代谢相关基因，为代谢研究开辟了新的途径。这些方法不仅有助于理解代谢的基本机制，还有助于揭示代谢性疾病的发病机制，为疾病治疗提供新的思路和方法。