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请简述革兰氏染色的方法和步骤

发布时间:2023-08-16 21:35:50

‘壹’ 革兰氏染色的步骤和原理

革兰氏染色的步骤和原理如下:

步骤:

1、首先在载玻片上滴一小滴蒸馏水,用滚如灼烧过的接种针挑取少量细菌,置载玻片的水滴中与水混合并涂抹开,注意涂抹要均匀平坦,涂抹后直径约为1 cm的薄层。

2、固定。将载玻片在火焰上方固定。

3、染色。加路哥式碘液大概一滴,作用1 min后用水冲洗,注意流水不要直接往薄层上冲,用过滤纸吸干。

4、脱色。用95%乙醇脱色,一般脱色时间大概为30 s。

5、观察。

干燥后,用油镜镜检观察,并做好记录。

原理:染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴大宏启定。

‘贰’ 简述革兰氏染色的步骤和结果

涂片固定,草酸铵结晶紫染1分钟,蒸馏水冲洗,加碘液覆盖涂面染约1分钟,水洗,用吸水纸吸去水分,加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分,蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏水冲洗。干燥,镜检。

染色结果:革兰氏阳性菌呈蓝紫色,革兰氏阴性菌呈红色。

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临床意义

其重要的临床意义在于:

1、鉴别细菌;

2、选择药物;

3、与致病性有关:革兰氏阳性菌能产生外毒素,革兰氏阴性菌能产生内毒素;而内毒素主要是指革兰氏阴性菌胞壁成分中的脂多糖,两者的致病作用不同。

可能误差

在实验中经常会出现假阳性和假阴性的结果,假阳性主要是由于脱色不完全,可能是由于涂片过厚,或者是结晶紫染色过度,导致脱色不完全。

假阴性可能是因为细胞固定过度,造成细胞壁通透性的改变,而出现假阴性结果;另外,细胞培养时间太长,可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶,也导致细胞壁通透性的改变而出现假阴性结果。

‘叁’ 简述革兰氏染色的操作步骤

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:

1)涂片固定。

2)草酸铵结晶紫染1分钟。

3)蒸馏水冲洗。

4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。

5)水洗,用吸水纸吸去水分。

6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。

7)蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏水冲洗。干燥,镜检。

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革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌,把众多的细菌分为两大类,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

在治疗上,大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感(结核杆菌对青霉素不敏感):大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌,它们能产生外毒素使人致病,可以选择青霉素族,头孢曲松钠等。

革兰氏阴性菌,大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌,它们产生内毒素,靠内毒素使人致病。而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感,可以选择氟喹诺酮类药物如诺氟沙星,左氧氟沙星等,也可以选择大环内酯类比如克拉霉素、罗红霉素等。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌,在选择抗生素方面意义重大。

‘肆’ “革兰氏染色”的操作步骤是什么

革兰氏染色法具体操作步骤:

  1. 涂片固定。

  2. 草酸铵结晶紫染1分钟。

  3. 纯化水冲洗。

  4. 加碘液覆盖涂面染1分钟。

  5. 水洗,用吸水纸吸去水分。

  6. 加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,30秒后水洗,吸去水分。

  7. 番红染色液(稀)染10秒钟后,纯化水冲洗。干燥,镜检。

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